Agilent260液相色譜系統(tǒng)操作規(guī)程

1、目的 測(cè)工作的順當(dāng)進(jìn)展。適用范圍Agilent 1260職責(zé)試驗(yàn)室分析人員負(fù)責(zé) Agilent 1260 系列高效液相色譜系統(tǒng)的日常使用和維護(hù)。系統(tǒng)組成Agilent 1260(G1311C)和脫氣機(jī)；可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器VWDG1314F；Chemstation A.01.04AT-550色譜柱；電腦、打印機(jī)等關(guān)心設(shè)備。無操作程序開機(jī)前的預(yù)備檢查儀器校驗(yàn)標(biāo)識(shí)，確認(rèn)儀器處于校驗(yàn)周期內(nèi)。檢查上次試驗(yàn)室儀器設(shè)備使用記錄表和儀器狀態(tài)，確認(rèn)儀器處于正常狀態(tài)；流淌相的制備：按高效液相色譜法流淌相配制標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程配制需要的流淌相。一般1020min。更換流淌相：瓶蓋；將排液管的出口端放入廢液瓶中，并蓋好瓶蓋

2、。供試溶液的配制：Agilent 1260供試品用規(guī)定溶劑配制成供試品溶液。定量測(cè)定時(shí)，比照品溶液和供試品溶液均應(yīng)分別配制 2 份。6.1.5.2 如有必要，樣品需預(yù)處理，如過濾等，以免對(duì)色譜系統(tǒng)產(chǎn)生污染和色譜干擾。選擇色譜柱：依據(jù)待檢供試品的檢測(cè)方法確定所需的色譜柱；檢查儀器上安裝的色譜柱是否與其一樣，假設(shè)不同則需進(jìn)展更換。更換色譜柱拆卸原色譜柱：先握住色譜柱，再松動(dòng)色譜柱出口端螺帽，取下出口端的管線；松動(dòng)色譜柱入口端螺帽，取下入口端的管線；用止動(dòng)塞將色譜柱的進(jìn)出口塞住擰緊后，將色譜柱放回原專用包裝盒內(nèi)。安裝色譜柱：從專用包裝盒內(nèi)取精彩譜柱，松動(dòng)并取下色譜柱出入口的止動(dòng)塞；將與進(jìn)樣器相連的管

3、線一端插入色譜柱入口端，擰緊螺帽；(留意:安裝時(shí)色譜柱上的流向標(biāo)志應(yīng)與管路的流淌相流向全都。)將與檢測(cè)器相連的管線一端插入色譜柱出口端，擰緊螺帽。開機(jī)通電前應(yīng)檢查儀器設(shè)備之間的電源線、數(shù)據(jù)線和輸液管道是否連接正常。接通電源，翻開計(jì)算機(jī)和打印機(jī)開關(guān)。Windows翻開柱溫箱開關(guān)。待各模塊自檢完成后，點(diǎn)擊Windows桌面“”圖標(biāo)進(jìn)入化學(xué)工作站畫面。再連接工作站。把握”項(xiàng)，進(jìn)入方法和運(yùn)行把握窗口。操作泵的開啟和設(shè)置逆時(shí)針，右鍵點(diǎn)擊四元泵下面的空白處，選擇“方法”選項(xiàng)，進(jìn)入泵編輯畫面。Agilent 1260設(shè)流速：0ml/min，點(diǎn)擊“確定”。 右鍵點(diǎn)擊四元泵下面的空白處，選擇“把握”選項(xiàng)，選中“

4、啟動(dòng)”，點(diǎn)擊“確定”，泵開頭啟動(dòng)。5ml/min ，A100%，單擊“確定”。則系統(tǒng)開頭沖洗，直到管線內(nèi)由溶劑瓶到泵入口道無氣泡為止5min。或降低流速；10Bar，則應(yīng)更換排氣閥內(nèi)濾芯/過濾白頭。0ml/min，Purge順時(shí)針。相比例和流速或選擇已有方法開頭系統(tǒng)平衡?！按_定”。方法編輯驟建立：/采集”、“運(yùn)行時(shí)選項(xiàng)表”三項(xiàng)，點(diǎn)擊確定；息，點(diǎn)擊確定；泵參數(shù)設(shè)定1ml/min，B”80.0,(A=100-B-C-D)入 ”一行“時(shí)間表”,編輯梯度。在“壓力限”處輸入柱子的最大耐高壓,如 300bar，以保護(hù)柱子。點(diǎn)擊“確定”進(jìn)入下一參數(shù)設(shè)定。柱溫箱參數(shù)設(shè)定在柱溫箱上手動(dòng)輸入規(guī)定的溫度即可。紫外

5、檢測(cè)器VWDG1314F參數(shù)設(shè)定的空白處輸入所需的檢測(cè)波長(zhǎng),如254nm,在“峰寬(響應(yīng)時(shí)間)”下方點(diǎn)擊Agilent 12600.1min (2s)1min ，波長(zhǎng)=300nm。點(diǎn)擊“確定”，進(jìn)入下一參數(shù)設(shè)定。擊“確定”。運(yùn)行樣品所要繪圖的信號(hào)移到右邊的框中,點(diǎn)擊“確定”。從“運(yùn)行把握”菜單中選擇“樣品信息”選項(xiàng)，輸入操作者名稱；在“數(shù)據(jù)文件”中選/計(jì)數(shù)器”。的數(shù)據(jù)掩蓋掉。Pr在前綴/計(jì)數(shù)器 “前綴”框中輸入前綴，在“計(jì)數(shù)器”框中輸入計(jì)數(shù)器的vwd0001，vwd0002。點(diǎn)擊“確定”，從“儀器”菜單項(xiàng)選擇擇“系統(tǒng)開啟”。手動(dòng)進(jìn)樣數(shù)據(jù)處理雙擊電腦桌面的“入脫機(jī)工作站，從“視圖”菜單中選擇“數(shù)

6、據(jù)分析”，或點(diǎn)擊屏幕左下方的“數(shù)據(jù)分析”，進(jìn)展數(shù)據(jù)處理。處理的數(shù)據(jù)：從“文件”菜單中選擇“調(diào)用信號(hào)”，或者點(diǎn)擊屏幕左上方的圖標(biāo)“”，跳出一個(gè)對(duì)話框，選擇相應(yīng)文件夾里的數(shù)據(jù)文件名稱，單擊“確定”即可。調(diào)用方法：從“方法”菜單里選擇“調(diào)用方法”，或者點(diǎn)擊屏幕左上方的圖標(biāo)“跳出一個(gè)對(duì)話框，選擇相應(yīng)的方法名稱，單擊“確定”即可。積分：從“積分”菜單中選擇“積分”，當(dāng)前數(shù)據(jù)被積分。假設(shè)積分不是很抱負(fù)，則從“積分”菜單中選擇“積分大事”，選擇適宜的“斜率靈敏度”、“最小峰面積”、“最小峰高”等。從“積分”菜單中選擇“積分”，則當(dāng)前數(shù)據(jù)被重積分。6.3.4.3.3如積分不抱負(fù)，則重復(fù)6.3.4.3.1和6.

7、3.4.3.2，直到滿足為止，此時(shí)點(diǎn)擊圖標(biāo)“進(jìn)展積分參數(shù)的保存并退出積分參數(shù)設(shè)定界面。6.3.4.3.4 假設(shè)局部譜峰自動(dòng)積分不是很抱負(fù)，也可選擇手動(dòng)積分。點(diǎn)擊圖標(biāo)“”，繪制峰基線并積分點(diǎn)擊圖“切線撇去一個(gè)峰并積適合拖尾峰的處理點(diǎn)擊圖“手動(dòng)分裂已積分的峰適合未基線分別的峰的處理；點(diǎn)擊“”，刪除已積分的峰；點(diǎn)擊圖Agilent 1260標(biāo)“”，將當(dāng)前手動(dòng)積分大事保存到數(shù)據(jù)文件中。其他數(shù)據(jù)處理方式詳見工作站說明書。打印報(bào)告翻開打印機(jī)電源開關(guān)“報(bào)告菜單中選“設(shè)定報(bào)告或點(diǎn)擊屏幕中間的圖“跳出一對(duì)話框，選擇相應(yīng)的定量方法和報(bào)告格式，單擊確定后退出。從“報(bào)告”菜單中選擇“打印報(bào)告”，或點(diǎn)擊屏幕中間的圖標(biāo)“

8、 ”，則可預(yù)覽到報(bào)告。假設(shè)報(bào)告中顯示的時(shí)間范圍及響應(yīng)范圍不適宜，則可點(diǎn)擊“關(guān)閉”退出預(yù)覽。進(jìn)入“報(bào)告版面設(shè)計(jì)”界面，選擇相應(yīng)的報(bào)告格式，雙擊圖譜，點(diǎn)“自定義量程”，輸入適宜的時(shí)間范圍和響應(yīng)范圍，并選擇“全部使用一樣量程”，點(diǎn)擊“確定”并保存當(dāng)前模版后退出，再重進(jìn)入“數(shù)據(jù)分析”界面，重預(yù)覽報(bào)告，假設(shè)時(shí)間范圍和響應(yīng)范圍均適宜，單擊“打印報(bào)告”，即可。宏命令的使用在“視圖”下拉單中調(diào)出“化學(xué)工作站工作日程表”；輸入日期時(shí)間、命令并選好執(zhí)行命令的模式，點(diǎn)擊保存圖標(biāo)；開泵：pumpallon關(guān)泵：pumpall off開燈：lampall on 關(guān)燈：lampall off載入一個(gè)方法：loadmeth

9、od xxx.M 開頭一個(gè)方法：startmethod xxx.M停頓一個(gè)方法：stopmethod xxx.M 關(guān)閉整個(gè)系統(tǒng)：standby。6.5.4 留意事項(xiàng)：日程表編輯完畢后，肯定要保存，并且不能關(guān)閉；宏命令不區(qū)分大小寫。關(guān)機(jī)樣品測(cè)試完畢后，關(guān)機(jī)前，先關(guān)燈，用相應(yīng)的溶劑充分沖洗系統(tǒng)。/20min;30-60min./20min;/20min。退出化學(xué)工作站，依次提示關(guān)泵及其它窗口，關(guān)閉計(jì)算機(jī)。關(guān)閉Agilent 1260開關(guān)。做好儀器使用登記，并填寫試驗(yàn)室儀器設(shè)備使用記錄表。Agilent 1260系統(tǒng)日常維護(hù)和保養(yǎng)色譜柱pH相類型等。乙腈/甲醇-水應(yīng)用棕色玻璃瓶存放，避開光照，防止長(zhǎng)

10、菌。試樣配制盡量用流淌相配制試樣。必要時(shí)使用超聲波處理試樣，確保試樣完全溶解并混合均勻。選擇有機(jī)相或水相針頭過濾器。對(duì)含有顆粒的固體樣品，經(jīng)研磨均勻前方可取樣。手動(dòng)進(jìn)樣針：取樣前應(yīng)用試樣潤洗 3 次以上，使用后應(yīng)用甲醇/乙腈清洗 3 次以上。廢液處理：準(zhǔn)時(shí)清理廢液瓶，以防廢液溢出。儀器安全保障每天使用儀器之前，要翻開Purge 閥將各個(gè)通道沖洗 45min 左右； Purge Valve，5ml/min10bar時(shí))。Purge當(dāng)儀器使用緩沖溶液作業(yè)時(shí)，要用水進(jìn)展過渡并將柱塞桿清洗開關(guān)翻開。儀器暫停兩天以上不使用包括兩天，過濾板最好選用甲醇浸泡。每次使用前后，應(yīng)檢查泵頭、并清洗除去污染物或析出的固體鹽。降低以避開壓力波動(dòng)過大，損壞色譜柱。排解，排解故障前方能進(jìn)展操作。如壓力上升，甚至自動(dòng)停泵，應(yīng)檢查柱端有無污染、堵塞。等。對(duì)試驗(yàn)中儀器的出錯(cuò)，應(yīng)當(dāng)具體填寫具體的發(fā)生狀況以及處理方法。未能處理的，應(yīng)向他人求證，并對(duì)下位使用者提出問題所在。每次使用儀器之前，應(yīng)當(dāng)查看使用記錄，確定有沒有尚未