狗肝菜多糖對(duì)D半乳糖胺所致大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用

1、狗肝菜多糖對(duì)D-半乳糖胺所致大鼠急性肝損傷的保護(hù)作用【摘要】目的觀察狗肝菜多糖對(duì)D-半乳糖胺所致大鼠急性肝損傷的影響。方法建立D-半乳糖胺D-GalN誘發(fā)的大鼠急性肝損傷模型，不同濃度狗肝菜多糖干預(yù)后，測(cè)定動(dòng)物血清ALT、AST。肝組織常規(guī)制片及HE染色觀察組織病理學(xué)改變。結(jié)果狗肝菜多糖能使肝損傷動(dòng)物血清ALT、AST程度顯著降低。組織病理學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)狗肝菜多糖處理后肝組織損害程度降低。結(jié)論狗肝菜多糖對(duì)D-半乳糖胺所致大鼠急性肝損傷具有保護(hù)作用?！娟P(guān)鍵詞】狗肝菜多糖急性肝損傷保肝Abstrat：bjetiveTbservetheeffetftheDilipterahinensisplysahar

2、identheratauteliverinjuryinduedbyD-GalNethdsD-GalN-induedauteliverinjurydelasesablishedinrats.AfteradinistrateddifferentdsefDilipterahinensisplysaharide,ratseruasneatedfrdetetinfthententsfALT,AST.HEstainingasusedtevaluatehistpathlgialhangefliver.ResultsDilipterahinensisplysaharideuldreduetheserunent

3、sfALT,AST,alleviatehistpathlgialinjury.nlusinDilipterahinensisplysaharidehasprtetiveeffetnD-GalN-induedauteliverinjury.Keyrds：Dilipterahinensisplysaharide；Auteliverinjury；Liverprtetin狗肝菜Dilipterahinensis(L.)Nees.是爵床科(Aanthaeae)華九頭獅子草屬(Diliptera)，全草味甘、微苦、性寒，歸心、肝、肺經(jīng)，具有清熱、涼血、利濕、解毒、生津、利尿等成效，臨床常用于治療感冒發(fā)熱、

4、熱病發(fā)斑、暑熱煩渴、吐衄血、便血、尿血、崩漏、肺熱咳嗽、咽喉腫痛、肝熱目赤、眼結(jié)膜炎、小兒驚風(fēng)、小便淋瀝、帶下、帶狀皰疹、癰腫疔癤、蛇犬咬傷等證1，2。?中國(guó)藥典?(2022版)部曾收錄，擬定其來(lái)源為爵床科植物狗肝菜的枯燥全草1。狗肝菜為廣西民間藥食兩用的中草藥，也是壯族地區(qū)常用壯藥，主要含有多糖、有機(jī)酸、氨基酸等物質(zhì)2。多糖類(lèi)中藥作為具有抗氧化及免疫調(diào)節(jié)作用，有抗肝炎及肝損傷作用3。本文利用D-半乳糖胺所致大鼠急性肝損傷模型來(lái)評(píng)價(jià)狗肝菜多糖抗肝損傷的作用。1材料1.2藥物與試劑狗肝菜多糖提取方法見(jiàn)參考文獻(xiàn)4，AST谷草轉(zhuǎn)氨酶試劑盒批號(hào)：20220818、ALT丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶試劑盒批號(hào)：20

5、220808均購(gòu)自南京建成生物工程研究所。D-半乳糖胺D-GalN:江蘇啟冬化學(xué)，批號(hào)：20221108。聯(lián)苯雙酯滴丸：廣州星群藥業(yè)股份，批號(hào)：EF40049。1.3儀器及設(shè)備電子天平TP-4101，Denver，超聲波清洗儀B2200S-T，必能信超聲產(chǎn)品，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀BHIB-490，移液器Eppendrf、真空泵SHB-，鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)，電熱恒溫水浴鍋DK-S26，上海精細(xì)實(shí)驗(yàn)設(shè)備)，旋渦混合器H-861，上海環(huán)球物化儀器廠)，離心機(jī)(TDL-4，上海安亭科學(xué)儀器廠)，分光光度計(jì)(722型，上海第三分析儀器廠)。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2方法2.1D-半乳糖胺致大鼠急性肝損傷模型的建立及藥物

6、處理取安康大鼠36只，雌雄各半，180220g，適應(yīng)性飼養(yǎng)2d，每組6只，隨機(jī)分為空白組，模型組，聯(lián)苯雙酯組陽(yáng)性藥物對(duì)照組，狗肝菜多糖高、中、低劑量組。聯(lián)苯雙酯組劑量為50gkg-1；狗肝菜多糖高、中、低劑量組狗肝菜多糖劑量分別為300，200，100gkg-1。除空白對(duì)照組和模型組給予等體積生理鹽水外，各組均灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7d。第6天給藥1h后，除空白對(duì)照組腹腔注射等體積生理鹽水外，其余各組分別腹腔注射D-半乳糖胺400gkg-1，禁食不禁水，末次給藥1h后，摘除眼球取血，放置1h，3000r/in離心，取上清液，20冰箱中保存，檢測(cè)生化指標(biāo)ALT、AST；快速取出肝臟，取肝左葉一

7、樣部位組織于4%中性緩沖福爾馬林溶液中固定16h，常規(guī)石蠟包埋及切片，HE染色。2.2統(tǒng)計(jì)學(xué)方法各項(xiàng)指標(biāo)均s，統(tǒng)計(jì)軟件SPSS11.5對(duì)組間比擬進(jìn)展獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。3結(jié)果3.1血清學(xué)指標(biāo)結(jié)果見(jiàn)表1。其中模型組血清ALT和AST兩種轉(zhuǎn)氨酶活性均明顯高于空白組說(shuō)明模型建立成功。狗肝菜多糖高、中、低劑量組血清ALT、AST程度均較模型組明顯降低，其中高、中劑量組有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。表1D-半乳糖胺肝損傷模型的血清學(xué)改變略3.2組織病理學(xué)改變D-半乳糖胺模型組肝損傷嚴(yán)重，肝小葉中央大局部區(qū)域肝細(xì)胞水腫，出現(xiàn)肝細(xì)胞的碎片狀壞死，小葉周邊肝細(xì)胞中至重度脂肪變性；陽(yáng)性對(duì)照組和高劑量組病理改變一樣，中

8、央靜脈周?chē)渭?xì)胞輕度水腫，出現(xiàn)少量點(diǎn)狀壞死；多糖中劑量組肝小葉中央肝細(xì)胞水腫及周邊少量肝細(xì)胞輕度脂肪變性，出現(xiàn)散在點(diǎn)狀壞死；多糖低劑量組中央靜脈嚴(yán)重水腫，有散在點(diǎn)狀壞死及碎片狀壞死，小葉周邊肝細(xì)胞輕至中度脂肪變性。見(jiàn)圖1。4討論D-半乳糖胺是肝細(xì)胞磷酸尿嘧啶核苷的干擾劑，當(dāng)D-GalN進(jìn)入體內(nèi)后與磷酸尿苷UDP結(jié)合形成UDP-半乳糖胺致使UDP耗竭，從而使依賴(lài)其生物合成的核酸、糖蛋白、脂肪、糖等物質(zhì)合成受到抑制，限制了細(xì)胞器及酶的生成和補(bǔ)充，導(dǎo)致肝細(xì)胞受損。因此，D-GalN肝損傷模型可用于抗病毒性肝炎藥物的研究5。肝細(xì)胞損傷時(shí)，ALT、AST從胞漿內(nèi)釋放并進(jìn)入血液，血清中ALT、AST升高。血清學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)狗肝菜多糖可使D-GalN所致大鼠肝損傷模型ALT、AST程度下降；大鼠肝臟病變明顯減輕,用高、中、低劑量的狗肝菜多糖處理后，大鼠肝組織細(xì)胞水腫及脂肪變性均較模型組明顯減少，其中以狗肝菜多糖高劑量組的作用最明顯,效果與聯(lián)苯雙酯治療組相當(dāng),說(shuō)明狗肝菜多糖對(duì)D-GalN所致肝損害有一定的保護(hù)作用,且其作用效應(yīng)與應(yīng)用劑量有關(guān)。但有關(guān)狗肝菜多糖保護(hù)肝細(xì)胞確實(shí)切機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1中國(guó)藥典委員會(huì).中國(guó)藥典S.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2022:369.2鄭宏鈞，詹亞華.現(xiàn)代中藥材鑒別手冊(cè).北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2001:837.3黃皓,干信