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1、,26 原理和操作步26 是通過限制性內(nèi)切酶片段的不同長度檢測 *4 多態(tài)性的,26 原理和操作步26 是通過限制性內(nèi)切酶片段的不同長度檢測 *4 多態(tài)性的一種 *4 分子標(biāo)記技術(shù)26技術(shù)主要特點(diǎn)*4量少，僅需 M；可重復(fù)性好；多態(tài)性強(qiáng)；XT，2際上是 8* 和 86 相結(jié)合的一種產(chǎn)物。它既克服了 8,26 技術(shù)復(fù)雜、有放射性危 斷將這一技術(shù)完善、發(fā)展，使得2626原26 也是通過限制性內(nèi)切酶片段的不同長度檢測*4 多態(tài)性的一種*4分子標(biāo)記技術(shù)引物結(jié)合位點(diǎn)。實驗中，根據(jù)需要通過選擇在末端上分別填加了 個選擇性核苷的不同 : * 4玻璃硅烷、 （一組*4提取和純 瓊脂 瓊脂組*4緩沖液至總體積

2、再等體積苯酚 ： 管中，加入 體積的4G和二倍體積預(yù)冷的無水乙醇，20放置 N 離心 O，用 的乙醇漂洗*4沉淀 次 ，風(fēng)干后溶于 30lTE緩沖液中 含 注： M組織可用 R溶， M可增加至 R，濃度大約為 TM R在 R離心管中加入：模板量約為 T，.5l 酶切緩沖液， 2.5l 3l M， M3引物， UR23 ， URJ:6 :M酶，3l10PCR30l 循環(huán)；6)8。反應(yīng)結(jié)束后，用 瓊 脂糖凝膠（含EB0.5g/ml）3l 取釋稀后的產(chǎn)物 3l，加入 EcoR選擇性引物、Mse選擇性引物各 T SR ， R 取釋稀后的產(chǎn)物 3l，加入 EcoR選擇性引物、Mse選擇性引物各 T SR ， R 反應(yīng)參數(shù)為：9490s；9430s，651min，721min， 循環(huán)（每循環(huán)降 ；9430s561min， 721min， 循環(huán)；725min（6+6)8含 變性聚丙 SS電泳儀。拔出梳子， = 恒功率預(yù)電泳 分鐘，溫度達(dá)到 。務(wù)必使每個洗出尿素。選擇性擴(kuò)增產(chǎn)物中加入等體積上樣緩沖液（ SSU2*: 二甲苯青， 溴酚藍(lán)） 變性 SOT（6+6)8儀 = 分鐘，使樣品迅速集中到孔底部，再調(diào)到 = 恒功率電泳，溫度保持在 ，加去離子水至 2。顯色液： M4G5， ， SM 、加入去離子水漂洗 次，每次 SOT 水漂洗凝膠 水漂洗凝膠 、

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