祖卡木顆粒劑的除雜工藝研究

1、祖卡木顆粒劑的除雜工藝研究【關(guān)鍵詞】祖卡木顆粒摘要：目的優(yōu)選出祖卡木顆粒劑的除雜工藝。方法以總黃酮、總蒽醌、甘草酸的保存率及固形物減少率為考察指標(biāo)比擬不同除雜工藝超濾法、吸附澄清法、高速離心法、醇沉法及自然沉降法的效果。結(jié)果采用高速離心法進(jìn)展除雜，有效成分保存最多。結(jié)論在比照的幾種除雜方法中，采用高速離心法有效成分保存最多，而且操作簡(jiǎn)單，省時(shí)。關(guān)鍵詞：祖卡木顆粒劑；超濾法；吸附澄清法；高速離心法；醇沉法StudiesnthePurifiatinTehnlgyfZukauGranulesAbstrat:bjetiveTselettheptiupurifiedtehnlgyfZukaugranul

2、es.ethdsThepurifiatinnditinsereptiizedbyntentdeterinatinfttalflavnes，ttalanthraquinne，glyyrrhiziaidandtheyieldfdriedextratparingultrafiltratinethdithabsrbinglarifyingethd，ultraentrifugatinethdandalhlpreipitatinethd.ResultsAllfigurestreatedbyultraentrifugatinethderethehighestangthepurifiedtehnlgies.n

3、lusinTheultraentrifugatinethdisthebestbeausefhighntentpreserved，sipleperatinandsavingtie.Keyrds:ZukauGranules；Ultrafiltratinethd；Absrbinglarifyingethd；Ultraentrifugatinethd；Alhlpreipitatinethd祖卡木顆粒劑是由山萘、睡蓮花、大棗、大黃、甘草等藥材提取制成，具有調(diào)節(jié)異常氣質(zhì)、清熱、發(fā)汗、通竅之成效，用于感冒咳嗽、發(fā)熱無汗、咽喉腫痛、鼻塞流涕等病癥，療效顯著1。由于本品原工藝采用醇沉法除雜，需消耗大量乙醇和時(shí)間

4、，為降低本錢，需要尋找一個(gè)操作簡(jiǎn)便、本錢孝省時(shí)的除雜方法，同時(shí)又能保證藥物療效。本研究比擬了超濾法、吸附澄清法、高速離心法、醇沉法、自然沉降法等幾種除雜方法的效果，優(yōu)選出了祖卡木顆粒劑最正確的除雜方法。1儀器與材料1.1儀器UF80實(shí)驗(yàn)型膜別離(超濾)裝置，中空纖維膜組件(分子量截流值分別為1萬、3萬、5萬，膜材均為聚砜，天津膜天膜工程技術(shù))；GQ76高速管式別離機(jī)(上海市離心機(jī)械研究所)；島津L10ATvp高效液相色譜儀，SPD10Avp紫外可見檢測(cè)器，LASSvp6.0數(shù)據(jù)工作站(日本島津)；UV2501P紫外可見分光光度計(jì)(日本島津)；BS110S型電子天平(德國Sartrius)。1.

5、2材料藥材由新疆維吾爾藥業(yè)有限責(zé)任公司提供；蘆盯甘草酸單胺鹽、1，8二羥基蒽醌對(duì)照品均由中國藥品生物制品檢定所提供；殼聚糖由華東理工大學(xué)理學(xué)院華凱科技貿(mào)易公司提供；乙腈為色譜純，其余試劑均為分析純。2方法與結(jié)果2.1考察指標(biāo)確實(shí)定2除雜目的是降低出膏率，即增加固形物減少率，并且最大程度地保存有效成分，所以將固形物減少率作為考察指標(biāo)之一，權(quán)重系數(shù)定為0.1。因?yàn)楸局苿榭垢忻爸苿?，處方中多?shù)藥材都含有黃酮類成分，而黃酮類成分具有抗菌、抗病毒、抗炎等作用，故將其成分保存率作為考察指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)定為0.6；大黃為方中主藥之一，含蒽醌類衍生物，具有抗菌、抗病毒、抗炎作用，故將其成分保存率作為考察指標(biāo)，

6、權(quán)重系數(shù)定為0.2；甘草中所含的甘草酸具有抗炎、鎮(zhèn)咳祛痰及免疫增強(qiáng)作用，故將其成分保存率作為考察指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)定為0.1。本研究用成分保存率來表示不同除雜工藝對(duì)總黃酮、總蒽醌、甘草酸含量的影響，計(jì)算公式如下：2.2考察指標(biāo)的測(cè)定方法2.2.1總黃酮的測(cè)定方法3采用分光光度法測(cè)定總黃酮，即蘆丁對(duì)照品分別加5%亞硝酸鈉、10%硝酸鋁、4%氫氧化鈉溶液顯色，于510n波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值，得回歸方程為：(g)=0.01361+0.8936A，r=0.9998，在0.10451.0445g濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。精細(xì)量取一定量樣品溶液，同法操作，在510n處測(cè)定吸收值，代入回歸方程，計(jì)算含量。2.2.2

7、總蒽醌的測(cè)定方法4采用分光光度法測(cè)定總蒽醌，即1，8二羥基蒽醌對(duì)照品分別加0.5%醋酸鎂甲醇溶液顯色，于510n波長(zhǎng)處測(cè)定吸收值，得回歸方程為：(g)=-5.8417+239.3144A，r=0.9981，在47.232283.392g濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。樣品溶液加0.5l濃鹽酸和30l氯仿，加熱回流1h，放冷，分取氯仿層，水層再用氯仿提取3次(20l/次)。合并氯仿層，水浴蒸干，殘?jiān)蛹状既芙?，轉(zhuǎn)移至5l容量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度。取此樣品溶液同法操作，在510n處測(cè)定吸收值，代入回歸方程，計(jì)算含量。2.2.3甘草酸的測(cè)定方法5色譜條件：色譜柱為ShipakLDS柱4.6150，5；

8、流動(dòng)相為乙腈2%乙酸溶液(4060)；流速1l/in；檢測(cè)波長(zhǎng)254n；柱溫30。標(biāo)準(zhǔn)曲線制備：取甘草酸單胺鹽對(duì)照品約10g，精細(xì)稱定，置100l量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，精細(xì)量取一定體積用甲醇配成系列濃度溶液。精細(xì)汲取各溶液10l注入高效液相色譜儀，以甘草酸的峰面積A與甘草酸單胺鹽的濃度作直線回歸，得回歸方程為：(g/l)=-5.9524+1.397010-4A，r=0.9992，在13.52270.40g/l濃度范圍內(nèi)呈良好線性關(guān)系。供試品溶液制備及測(cè)定：精細(xì)量取一定量的樣品溶液置10l量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，靜置24h，離心，取上清液用0.45濾膜過濾。取續(xù)濾液10l注入高

9、效液相色譜儀，將測(cè)得的峰面積代入回歸方程，計(jì)算含量。陰性對(duì)照溶液的制備及測(cè)定：按處方比例，取除去甘草的其它藥味，制成模擬空白樣品。按前述方法操作，結(jié)果在甘草酸的出峰位置處無其它干擾。2.2.4出膏率及固形物減少率測(cè)定2精細(xì)量取一定體積的樣品溶液，置于已枯燥至恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，于真空枯燥箱中減壓枯燥至恒重，在枯燥器中冷卻30in，迅速稱重，計(jì)算出膏率及固形物減少率。轉(zhuǎn)貼于論文聯(lián)盟.ll.2.3除雜工藝條件挑選2.3.1提取液(原液)制備按處方比例稱取薄荷、洋甘菊、山奈，參加10倍量水，蒸餾法提取揮發(fā)油6h，蒸餾后的水溶液濾過，備用；其余甘草等七味，加14倍量水，煎煮3次，1h/次，合并煎

10、液，濾過，濾液與上述水溶液合并，濃縮至一定體積，即得。2.3.2超濾法超濾是根據(jù)體系中分子大小和形狀，通過膜孔的篩分作用，在分子程度上進(jìn)展別離，起到別離、純化、濃縮或脫鹽作用。影響超濾的主要因素有分子量截流值和超濾體積6，7，實(shí)驗(yàn)采用單因素考察法對(duì)這兩個(gè)因素進(jìn)展研究。分子量截流值考察：量取一定體積的提取液，倒入儲(chǔ)液罐中，連接超濾器進(jìn)展超濾?？刂埔欢ǖ膲毫Γ脸瑸V液的體積是原體積的1.5倍時(shí)，停頓超濾。測(cè)定濾液中的各指標(biāo)，計(jì)算綜合評(píng)分。結(jié)果見表1。表1分子量截流值考察分子量截流值略由表1可以看出，經(jīng)不同分子量截流值的膜超濾后的濾液，其固形物減少率差異不大，但是5萬分子量截流值的膜可以保存更多的有

11、效成分，故采用5萬分子量截流值的膜進(jìn)展超濾體積倍數(shù)考察。超濾體積倍數(shù)考察：用5萬分子量截流值的膜進(jìn)展超濾。控制一定的壓力，至規(guī)定的超濾體積倍數(shù)，停頓超濾。測(cè)定濾液中的各指標(biāo)，計(jì)算綜合評(píng)分。結(jié)果見表2。由表2可以看出，雖然3倍超濾體積可以保存更多的有效成分，但是需處理的液體量太大，使后續(xù)的濃縮枯燥過程變得很困難，故在實(shí)際消費(fèi)中不實(shí)用。表2超濾體積倍數(shù)考察超濾體積略2.3.3吸附澄清法近年來出現(xiàn)的吸附澄清工藝因其使用簡(jiǎn)便、本錢低、有效成分損失少而越來越受到人們的重視。甲殼素類澄清劑資源豐富、制備簡(jiǎn)單、本錢低、應(yīng)用方便，而且對(duì)人體無毒，體內(nèi)可生物降解。選用殼聚糖對(duì)提取液進(jìn)展吸附澄清處理，影響吸附澄清

12、效果的主要因素有殼聚糖的參加量和藥液濃度8，實(shí)驗(yàn)采用單因素考察法對(duì)這兩個(gè)因素進(jìn)展研究。殼聚糖用量考察：稱取一定量的殼聚糖，用1%醋酸溶液配成1%的殼聚糖溶液。量取一定體積的提取液數(shù)份，分別濃縮至12(藥材重量:濃縮液體積，單位為g/l)，水浴加熱至80，參加規(guī)定量的殼聚糖溶液，快速攪拌10in，靜置24h，觀察澄清效果并測(cè)定各指標(biāo)。結(jié)果澄清效果都不明顯，溶液均不澄清。詳細(xì)數(shù)據(jù)見表3。表3殼聚糖用量考察殼聚糖用量略由表3可以看出，不同殼聚糖用量對(duì)出膏率影響不大；在5%時(shí)可以保存更多的有效成分，應(yīng)選擇5%的用量進(jìn)展藥液濃度考察。藥液濃度考察：量取一定體積的提取液數(shù)份，分別濃縮至規(guī)定量，水浴加熱至8

13、0，參加5%的殼聚糖溶液，快速攪拌10in，靜置24h，觀察澄清效果并測(cè)定各指標(biāo)。結(jié)果澄清效果都不明顯，溶液均不澄清。詳細(xì)數(shù)據(jù)見表4。表4藥液濃度考察藥液濃度略表4可以看出，不同的藥液濃度出膏率變化不大，在16時(shí)可以保存更多的有效成分，此藥液濃度較合適殼聚糖的澄清處理。2.3.4沉降法自然沉降法：量取一定體積的提取液置500l量筒中，靜置48h，取上清液測(cè)定各指標(biāo)。結(jié)果見表5。表5沉降法考察結(jié)果處理方法略高速離心法：量取一定體積的提取液，經(jīng)高速管式別離機(jī)進(jìn)展高速離心，轉(zhuǎn)速為20000r/in。考察因素為離心次數(shù)，結(jié)果見表5。由表5可以看出，自然沉降法和高速離心法的出膏率特別高，但是可以保存更多

14、的有效成分，尤其是高速離心法對(duì)于總黃酮、總蒽醌和甘草酸的損失量很校2.3.5醇沉法影響醇沉效果的主要因素有醇沉濃度和藥液濃度2，本實(shí)驗(yàn)采用單因素考察法對(duì)這兩個(gè)因素進(jìn)展研究。醇沉濃度的考察：量取一定體積的提取液數(shù)份，分別濃縮至12(g/l)，參加規(guī)定量的乙醇，使醇沉濃度分別為40%，50%，60%，70%，80%，靜置24h，濾過，濾液濃縮至一定體積，測(cè)定各指標(biāo)。結(jié)果見表6。表6醇沉濃度考察醇沉濃度略由表6可以看出，醇沉濃度在70%時(shí)可以保存較多的有效成分，應(yīng)選擇70%的醇沉濃度進(jìn)展藥液濃度考察。藥液濃度考察：量取一定體積的提取液數(shù)份，分別濃縮至規(guī)定量，參加一定量乙醇，使醇沉濃度為70%，靜置2

15、4h，濾過，濾液濃縮至一定體積，測(cè)定各指標(biāo)。結(jié)果見表7。表7藥液濃度考察藥液濃度略由表7可以看出，藥液濃度在12與13時(shí)都可以較大程度地降低出膏率，并且保存較多的有效成分。3結(jié)果分析與討論將各種除雜方法中優(yōu)選出的工藝條件對(duì)各指標(biāo)的影響綜合列表。見表8。表8優(yōu)選出的各除雜工藝條件對(duì)各指標(biāo)的影響略超濾法制備的溶液非常澄清，特別適用于制備注射液和口服液，由于本制劑為固體制劑，超濾出的藥液體積很大，使后續(xù)的濃縮枯燥過程變得很困難，在實(shí)際消費(fèi)中不實(shí)用；而且出膏率也較高，有效成分損失較大，其綜合評(píng)分最低，這可能是由于本研究所用膜的材質(zhì)聚砜不適用于這幾類成分。吸附澄清法制備的溶液不澄清，有效成分損失較小，出

16、膏率也較高，綜合評(píng)分處于第二位，且操作不如高速離心法簡(jiǎn)單。高速離心法制備的溶液不澄清，出膏率很高，有效成分損失很小，是保存有效成分的最好方法，綜合評(píng)分最高，而且操作簡(jiǎn)單，省時(shí)。自然沉降法與高速離心法相比，出膏率一樣，但有效成分保存率稍差一些，消耗時(shí)間較長(zhǎng)，假設(shè)工廠內(nèi)溫度較高，藥液容易長(zhǎng)霉。醇沉法的出膏率低，可以有效降低劑量，但是有效成分的保存率比高速離心法、吸附澄清法低很多；與其它除雜方法相比，醇沉的本錢較高，需要用乙醇，還要回收乙醇，工序復(fù)雜。綜上所述，采用高速離心法進(jìn)展除雜，有效成分保存最多，而且操作簡(jiǎn)單，省時(shí)，所以本研究將除雜方法定為高速離心法。參考文獻(xiàn)：1帕麗，茹克婭.祖卡木顆粒治療上呼吸道感染50例的臨床觀察J.中國民族民間醫(yī)藥雜志，2000，45：205，248.2謝秀瓊.中藥新制劑開發(fā)與應(yīng)用(第2版).北京：人民衛(wèi)生出版社，2000：124.3韓瑩，張紅星.康壽降脂片的工藝研究J.中成藥，1998，20(7)：5.4巴根那，包寶柱，白玉霞，等.蒙藥方劑順氣湯配伍變化對(duì)總蒽醌含量的