硝酸纖維素膜NC膜

1、硝酸纖維素膜NCI目錄概念NC膜的生產(chǎn)原理NC膜的供應(yīng)商及現(xiàn)狀NC膜的選擇膜的質(zhì)控方式膜的深入探討和應(yīng)用技巧NC膜的應(yīng)用舉例概念NC膜的生產(chǎn)原理NC膜的供應(yīng)商及現(xiàn)狀NC膜的選擇膜的質(zhì)控方式膜的深入探討和應(yīng)用技巧NC膜的應(yīng)用舉例概念硝酸纖維素膜（nitrocellulose filter membrane，簡(jiǎn)稱NC膜），在膠體金試紙中用做 C/T線的承 勺發(fā)生處。NC膜是生物學(xué)試驗(yàn)中最重要的耗材之一。勻漿配比購(gòu)買回來(lái)的原料硝酸纖維素粒子是一種非常普遍的有機(jī)化學(xué)物，溶解形成混漿，在該漿體內(nèi)，通過(guò)加入一定比例的試劑來(lái)調(diào)整最后形成的膜的性質(zhì)，一般主要包含表面活性劑/高分子聚合物/鹽離子/成型劑等溶解的

2、一個(gè)緩沖體系內(nèi)。不同的廠家加入的溶液配方不一樣，導(dǎo)致了產(chǎn)品的差異。滾筒鋪膜配好的勻漿通過(guò)滾筒，形成了一張薄膜，平攤在十分光滑的平面載體上。過(guò)程與造紙非常相似。成型當(dāng)勻漿內(nèi)的成型劑開(kāi)始揮發(fā)，膜逐步干燥成型。同時(shí)在這個(gè)過(guò)程中由于溫度比較高，有些廠家 在這個(gè)過(guò)程采取了在密閉腔體內(nèi)成型，同時(shí)補(bǔ)充配方溶液的形式，來(lái)避免一些有效成分的蒸發(fā)。切割通過(guò)以上步驟生產(chǎn)出來(lái)的膜是呈一個(gè)寬度極大的產(chǎn)品，寬度的大小直接和滾筒的大小相關(guān)，滾 筒越大生產(chǎn)越方便，但設(shè)備的成本也越高.寬膜要經(jīng)過(guò)切割才能成為我們購(gòu)買到的 25mm或18mm（或 20mm）寬的膜，而長(zhǎng)度上，成品卷膜和寬膜的長(zhǎng)度是相同的.理論上可以讓廠家切成你需要

3、的任意寬度，但這樣會(huì)造成原料的浪費(fèi)和人力成本的增加，后來(lái)廠商在和試紙生產(chǎn)廠家的協(xié)調(diào)過(guò)程中，綜 合用料成本和生產(chǎn)便利性基本確定了上面說(shuō)的寬度，以次為標(biāo)準(zhǔn)。從生產(chǎn)過(guò)程，我們可以得知，NC膜本身已經(jīng)添加了表面活性劑來(lái)改善親水能力，而且已經(jīng)存在 阮定系瞪商及現(xiàn)喉響不會(huì)很大）?，F(xiàn)在有銷售的NC膜品牌型號(hào)如下：PALL（美國(guó)）MILLIPORE （美國(guó)），M135 （有背襯/無(wú)背襯兩種） M180 （有背襯/無(wú)背襯兩種）WHATMAN and SS，Puraband impurabandSARTORIUS （德國(guó)），CN140伊能（國(guó)產(chǎn)），8um 6umMDI （印度），8um 6um說(shuō)到這些供應(yīng)商，不得

4、不談?wù)劙l(fā)展的歷史.SS是膜行業(yè)的鼻祖，這點(diǎn)所有的膜公司都承認(rèn)。millipore，SARTORIUS和whatman都是后輩，由于SS在市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)的過(guò)程中經(jīng)營(yíng)方式落后，最后被 whatman收購(gòu)。就產(chǎn)品質(zhì)量來(lái)說(shuō)SS的AE99和AE98是非常優(yōu)良的。而MDI是近年才出現(xiàn)的一個(gè)膜公司，可能與印度膠體金試紙生產(chǎn)行業(yè)的快速發(fā)展密切相關(guān)，其 所有的產(chǎn)品都是在印度生產(chǎn)，經(jīng)營(yíng)者為父子兩人，父親負(fù)責(zé)技術(shù)，兒子進(jìn)行經(jīng)營(yíng)。國(guó)產(chǎn)膜伊能主要特點(diǎn)成本較低，性能與一些進(jìn)口膜很接近，經(jīng)過(guò)一些有針對(duì)性的優(yōu)化后可以用 在HCG產(chǎn)品的生產(chǎn)。但不是所有的工廠都能購(gòu)輕易的完成這個(gè)優(yōu)化工作。膜的國(guó)產(chǎn)化是一個(gè)趨勢(shì)， 但進(jìn)口廠家要實(shí)現(xiàn)國(guó)產(chǎn)化

5、還面臨很大的問(wèn)題，其中廠房設(shè)備的搬遷就是一個(gè)非常大的問(wèn)題。幾家供應(yīng)商的國(guó)內(nèi)聯(lián)絡(luò)人和技術(shù)支持分別是PALL （美國(guó)），Mr Xiaoliang Tang, Dong WangMILLIPORE （美國(guó)），Mrs Yang，harryWHATMAN and SS，Clark，kevinSARTORIUS （德國(guó)），Mr Xu，Iric伊能（國(guó)產(chǎn)），connie，Mr YangMDI （印度），Ashawant Gupta銷售模式都是直銷式，少量購(gòu)買需通過(guò)代理商購(gòu)買。價(jià)格上PALL、MILLIPORE與WHATMAN相當(dāng)，SARTORIUS便宜一些，國(guó)產(chǎn)膜更便宜一些。印度膜和 SARTORIUS價(jià)格

6、相同。在科研市場(chǎng)， PALL、MILLIPORE 使用最多。生產(chǎn)客戶中，MILLIPORE，HATMAN，SARTORIUS 占有量相當(dāng)， N能現(xiàn)在也的選一些工廠客戶了，MDI量最小投訴也最多。以上談了該行業(yè)的一些發(fā)展現(xiàn)狀，那么我們大致了解后，回到最關(guān)心的問(wèn)題，如何選擇膜？經(jīng) 常會(huì)遇到的問(wèn)題是，我是做項(xiàng)目的，我該選擇那類膜？這里涉及到一個(gè)膜的分類標(biāo)準(zhǔn)問(wèn)題，一個(gè)供應(yīng)商可能提供這個(gè)膜是8um，但另一個(gè)供應(yīng)商告訴你膜是135s的。這之間的區(qū)別與聯(lián)系是什么？um指的是膜孔徑，而從上面膜的生產(chǎn)過(guò)程，我們可以看出，膜的孔徑實(shí)際上是沒(méi)有辦法界定的。 由于干燥成型等過(guò)程的非絕對(duì)均一，膜的孔徑也是非均一的.膜孔

7、徑的說(shuō)法實(shí)際上是沿用了一直以來(lái) 的一個(gè)形象稱呼.而以秒為單位的定義為，每4cm膜，水的層析時(shí)間是*s.該單位已經(jīng)越來(lái)越被各大 廠商所接受，成為了一個(gè)通用的比較標(biāo)準(zhǔn).以下我們將采用s單位來(lái)進(jìn)行交流。換算情況大致為：8um=135s ； 6um=180s不同秒數(shù)的膜對(duì)反應(yīng)有什么影響呢？首先，我們分析一下液體在膜上的運(yùn)動(dòng)過(guò)程。一張長(zhǎng)度為 4cm的膜，每隔1cm做一個(gè)標(biāo)記， 當(dāng)液體運(yùn)動(dòng)過(guò)標(biāo)記處時(shí)記錄時(shí)間點(diǎn).那么你將會(huì)發(fā)現(xiàn)液體在膜上的運(yùn)動(dòng)是呈減速前行的。而兩張不 同秒數(shù)的膜（例如135s，180s）在同一時(shí)間標(biāo)記點(diǎn)處的運(yùn)動(dòng)速度不同.這個(gè)試驗(yàn)用清水做不好觀察， 可以考慮用色素水溶液，非常明顯。那么從這個(gè)試

8、驗(yàn)可以看出，在通過(guò)同一 T線噴點(diǎn)位置時(shí)，金溶液通過(guò)的速度是快速膜 慢速膜。 那么通過(guò)速度越快和包被在 T線的物質(zhì)反應(yīng)時(shí)間也就越短，讀數(shù)快，那么靈敏度也就越低。反之， 反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，讀數(shù)慢，也就靈敏度高。同時(shí)還有一個(gè)問(wèn)題是，反應(yīng)時(shí)間越長(zhǎng)，發(fā)生非特異性結(jié)合的 可能性就越大，所以過(guò)長(zhǎng)時(shí)間的反應(yīng)不一定就能夠真正的提升靈敏度。所以這里就有一個(gè)讀數(shù)時(shí)間/反應(yīng)靈敏度/非特異性結(jié)合的均衡。其實(shí)我們并沒(méi)有那么多選擇。經(jīng)過(guò)使用實(shí)踐，各供應(yīng)商一般都只提供兩個(gè)型號(hào)，就是135s和180s。雖然看到有些廠家的產(chǎn)品目錄上型號(hào)種類繁多，但這兩個(gè)型號(hào)的定貨量就占了95%以上，其他型號(hào)供貨上也就遠(yuǎn)不如這兩個(gè)型號(hào)來(lái)得順利。135s

9、 一般用在雙抗體夾心法，180s 一般用在競(jìng)爭(zhēng)法.你所要做的是，先選擇其中的一個(gè)型號(hào)，然后比較不同供應(yīng)商同一個(gè)型號(hào)的差異，由于前面說(shuō)的添加配方與你的試驗(yàn)條件配合的不同，這個(gè)差異可能大也可能小。具體要根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果來(lái)確定最 |膜選擇貴我個(gè)芳式建議地毯式的測(cè)試不同規(guī)格 /不同廠家的膜，這樣成本高，成功的幾率也小。本節(jié)適合用膜量較大的公司用戶參考。對(duì)于一卷膜可以用上幾個(gè)月的用戶來(lái)說(shuō)，廠家的質(zhì)控標(biāo) 準(zhǔn)已經(jīng)完全能滿足你的要求，而不需要自己再做相關(guān)的質(zhì)控。膜的質(zhì)控雖屬于原輔料 QC職能，但由于其專業(yè)性強(qiáng)，一般都由小樣調(diào)試人員來(lái)執(zhí)行。膜入原 料庫(kù)后需要進(jìn)行如下檢驗(yàn)工作：查收COA在購(gòu)買時(shí)， 供應(yīng)商會(huì)隨產(chǎn)品為每

10、個(gè)lot的膜提供一張紙質(zhì)的出廠質(zhì)量證書，該證書被稱為COA。如果你已經(jīng)購(gòu)買某一批次的膜，而沒(méi)有索取相應(yīng)的證書，如果有需要可提供批號(hào)向廠家要求補(bǔ) 發(fā)。其實(shí)在很多行業(yè)都有廠商為自己的產(chǎn)品附上 COA的習(xí)慣。COA 一般只提供給大客戶，對(duì)小客戶是沒(méi)有意義的。其內(nèi)容主要是廠家在產(chǎn)品出廠時(shí)做過(guò)一些測(cè)試的羅列。作用可以理解為質(zhì)量憑證和測(cè)試數(shù)據(jù)參考。檢查物理性能膜的物理性能主要是2個(gè)參數(shù)，膜厚度和寬度。長(zhǎng)度不需要檢測(cè)。使用中可以關(guān)注長(zhǎng)度上是否 有斷面重接現(xiàn)象，斷面多費(fèi)料則多，少數(shù)發(fā)生。厚度，由螺旋測(cè)微尺，選擇幾個(gè)測(cè)量點(diǎn)檢測(cè)后算 平均。膜生產(chǎn)的必測(cè)參數(shù)。主要表現(xiàn)為厚度不均勻影響生物原料在膜上的擴(kuò)散性能，點(diǎn)出來(lái)

11、的C/T線寬窄不一，另外也影響爬速。寬度，普通直尺測(cè)量。物理性能一般都不會(huì)有什么大問(wèn)題。畢竟檢 測(cè)標(biāo)準(zhǔn)客觀，易把握。沒(méi)有條件執(zhí)行的廠家可省略。跑水性能樣本采用含有有色食用色素的水溶液，目的是容易觀測(cè)，需制作一個(gè)簡(jiǎn)易支架。操作：注入足夠溶液到下部槽內(nèi)，將不同批次膜每隔1cm做一次標(biāo)記（總長(zhǎng)大于4cm）并放到傾斜支架，整個(gè)支架下端放入溶液槽，膜開(kāi)始吸液，計(jì)時(shí)。記錄每個(gè)標(biāo)記處的通過(guò)時(shí)刻，并與對(duì)照 組比較。跑板時(shí)，理論上溶液呈水平線形式上吸，觀測(cè)是否有波浪傾斜或包圍潤(rùn)濕等反常現(xiàn)象。點(diǎn)樣測(cè)試C/T線出線時(shí)間，其他試驗(yàn)條件相同情況下，記錄和比較 C/T線出現(xiàn)時(shí)間是否與對(duì)照有差異。靈敏度，比較不同樣本濃度情

12、況下，T線的變化是否和對(duì)照組同。一般每批次膜取前端一段用 來(lái)測(cè)試即可。由于制造過(guò)程的不均一性，不同批號(hào)的靈敏度會(huì)有一定差異，當(dāng)大批量使用時(shí)，這種差異影響是非常大的，那么就要按照靈敏度表現(xiàn)將不同批號(hào)的膜進(jìn)行分類。在膜的STOCK中要能夠輕易的分辨出來(lái)。當(dāng)進(jìn)入后期生產(chǎn)調(diào)用時(shí)，就能根據(jù)這些分類，按照訂單要求取用不同批號(hào)的膜， 或者用強(qiáng)靈敏度的原料和差靈敏度的膜來(lái)搭配。關(guān)于膜的批內(nèi)差。批內(nèi)差是肯定存在的，只是差距大小的問(wèn)題，依據(jù)一般的測(cè)試條件是很困難 獲得詳細(xì)的數(shù)值，因?yàn)槟悴豢赡軐?duì)每一卷膜的每一段都做詳細(xì)的測(cè)試。減小膜批內(nèi)差的最有效方法 是不購(gòu)入邊緣膜帶。前面說(shuō)過(guò)膜的生產(chǎn)方式，生產(chǎn)出的半成品是寬幅很大

13、的一個(gè)膜面，要通過(guò)截面 裁切才能獲得25mm或者20mm的寬度。那么就有中間部分，和邊緣部分之分.越靠近中間部分，膜 的均勻性越好，邊緣部分則相對(duì)要差，就造成了批內(nèi)差。一般可以通過(guò)COA獲得具體位置信息，例如MILLIPORE就在切割后用字母A，B，C來(lái)表示切出的窄膜在寬幅膜中的位置。如果是試用某個(gè)型號(hào)的膜小樣，還需要在以上檢測(cè)后加入膜加速老化試驗(yàn)，包括膜單獨(dú)的老化 試驗(yàn)和點(diǎn)好膜后產(chǎn)品的老化試驗(yàn)，具體試驗(yàn)方法請(qǐng)參看我以前寫的研發(fā)思路一文。膜的深入探討和應(yīng)用技巧從本節(jié)開(kāi)始，我們開(kāi)始對(duì)膜進(jìn)行深入討論和談一些應(yīng)用技巧。蛋白與膜的結(jié)合原理蛋白與膜的結(jié)合原理，已知的結(jié)合力包括疏水作用力H鍵靜電作用力等，

14、確切的結(jié)合原理并不明確，主要靠假說(shuō)來(lái)支撐。主要有兩種假說(shuō)：1）首先兩者靠靜電作用力結(jié)合，然后靠 H鍵和疏水作用來(lái)維持長(zhǎng)時(shí)間結(jié)合。2）首先兩者靠疏水作用結(jié)合，然后靠靜電作用來(lái)維持長(zhǎng)時(shí)間結(jié)合。兩條假說(shuō)，都表明其結(jié)合過(guò)程分為兩步，首先結(jié)合和后面長(zhǎng)時(shí)間結(jié)合。由于結(jié)合原理的不明確 性，導(dǎo)致在這方面的工作非常依賴實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)。膜對(duì)結(jié)合的影響1）膜孔徑有些技術(shù)人員傾向使用膜孔徑來(lái)區(qū)分不同的膜，但是請(qǐng)注意這只僅僅限于同一廠家的產(chǎn)品，如 果是不同廠家的產(chǎn)品，這種比較是無(wú)意義的。膜孔徑與層析速度的關(guān)系，已在上文描述。隨著膜孔 徑減小，膜的實(shí)際可用表面積遞增，膜結(jié)合蛋白的量也遞增.估量表面積的參數(shù)為表面積比率（實(shí)際可用

15、表面積與所用膜平面積的比率）。另外，膜孔徑越小，層析速度也越小，那么金標(biāo)復(fù)合物通過(guò)T線的時(shí)間也就越長(zhǎng)，反應(yīng)也就越充分。綜合以上兩點(diǎn)，結(jié)論為膜孔徑越小靈敏度越高。但是同時(shí)也減慢了跑板速度，增加了非特異性 結(jié)合的機(jī)會(huì)，也就是假陽(yáng)性越高.所以要按照試驗(yàn)結(jié)果挑選適合實(shí)際項(xiàng)目的膜，找到合適的平衡點(diǎn)。2）不同廠家的膜差異這個(gè)差異主要來(lái)源于兩點(diǎn)：1生產(chǎn)膜時(shí)，使用的聚合物和表面活性劑的來(lái)源，類型，數(shù)量不同。同理，在膜處理中這兩類 物質(zhì)一般會(huì)對(duì)性能產(chǎn)生較大影響。2處理過(guò)程不同。生物原料，緩沖溶液的試劑和配方1）生物原料， 作為CT線的生物原料使用情況各異，所以這里只做略述。首先，單克隆抗體與膜的結(jié)合優(yōu)于多克隆抗

16、體，主要時(shí)由于多克隆抗體有很多不同的表面位點(diǎn)， 而各位點(diǎn)與膜的最佳結(jié)合條件都有細(xì)微的差別，毫無(wú)疑問(wèn)就增加了優(yōu)化難度。其次，分子量越大， 蛋白越難結(jié)合到固相材料上。2）緩沖液大家最關(guān)心的可能就是希望獲得一個(gè)性能優(yōu)良的配方，包括緩沖液，封閉液等等處理溶液配方。其實(shí)我也無(wú)法提供給你一個(gè)萬(wàn)用配方清單。因?yàn)椴煌姆磻?yīng)體系需要不同的配方來(lái)支持，而不同機(jī)構(gòu)的反應(yīng)體系又有差異。想獲”魚”先學(xué)”漁”.。為了不誤導(dǎo)大家，我在下面涉及到配方的問(wèn)題上， 僅提供思路，具體配方請(qǐng)自己摸索。緩沖液的構(gòu)成一般是：PBS （或其他緩沖體系）+作用物質(zhì)（針對(duì)某一特定問(wèn)題）+PH調(diào)整. 我在參考過(guò)以前的各種資料后，個(gè)人意見(jiàn)為配方原

17、則為宜簡(jiǎn)不宜繁，根據(jù)自己的需要添加作用物質(zhì)， 原來(lái)的很多需要添加的作用物質(zhì)，由于膜制造技術(shù)的改進(jìn)已經(jīng)不再需要。推薦的緩沖體系為0.01M PBS PH7-7.2，該緩沖體系對(duì)多種抗原抗體都有良好的適應(yīng)性。作用物質(zhì)的情況大致羅列如下：少量NACL，減少信號(hào)強(qiáng)度，消假陽(yáng)。有機(jī)醇（甲醇，異丙醇等），潤(rùn)濕膜，減少膜帶有的靜電，利于結(jié)合包被。個(gè)人不推薦，因制 膜工藝改進(jìn)。表面活性劑（TW20，TX100），增加親水力，可避免線條中空現(xiàn)象，也可增色。糖，保護(hù)劑，減緩老化速度，也可以增加親水力同上。調(diào)PH到某個(gè)位置，可以消假陽(yáng)。點(diǎn)樣環(huán)境環(huán)境濕度對(duì)點(diǎn)膜過(guò)程非常重要。最佳濕度一般在 45-65%。濕度過(guò)低，膜上

18、容易聚集靜電荷，點(diǎn) 膜容易出現(xiàn)散點(diǎn)，導(dǎo)致測(cè)試會(huì)出現(xiàn)疏水斑。濕度過(guò)高，膜上毛細(xì)作用加強(qiáng)，點(diǎn)膜容易引起CT線變寬甚至擴(kuò)散。為了保證點(diǎn)樣時(shí)膜濕度的均一性，一般在點(diǎn)樣前把膜放到該濕度條件下平衡一段時(shí)間。點(diǎn)樣儀器與膜面情況的關(guān)系目前有兩種點(diǎn)樣方式，劃膜式和非接觸點(diǎn)膜式.非接觸點(diǎn)膜式優(yōu)于劃膜式，進(jìn)口劃膜式優(yōu)于國(guó)產(chǎn) 劃膜式。因劃膜式為軟管將抗體劃到膜表面，而膜本身的物理性質(zhì)為軟脆，劃管會(huì)在其表面留下印痕.進(jìn)口的劃膜機(jī)由于使用的材料和控制系統(tǒng)較好，所以留下的劃痕較輕，而國(guó)產(chǎn)儀器較差，留下的劃痕 也就比較嚴(yán)重。劃痕容易對(duì)層析的金標(biāo)復(fù)合物形成阻力，導(dǎo)致假陽(yáng)性。同時(shí)容易出現(xiàn)跑板時(shí)在T線位置出現(xiàn)若有若無(wú)一條細(xì)線（鬼線

19、），而跑板結(jié)束后鬼線消失的奇怪現(xiàn)象。膜的寬度與點(diǎn)樣位置膜的寬度一般有18mm （or 20mm）和25mm兩種， 分別使用在做測(cè)試條和做測(cè)試板上。然 而，不同的T線點(diǎn)樣位置將帶來(lái)不同的靈敏度。點(diǎn)樣位置上移，金標(biāo)復(fù)合物通過(guò)T線位置時(shí)速度變慢，反應(yīng)時(shí)間增加，靈敏度升高。反之靈敏度降低。這個(gè)方法可以用來(lái)改變靈敏度和消除假陽(yáng)性。溶液在膜上的擴(kuò)散溶液在膜上的點(diǎn)樣量一般情況下為1ml/cm。溶液在膜上的擴(kuò)散是趨向兩端的，噴點(diǎn)上去的是均 勻的抗體溶液，但當(dāng)干燥時(shí)線條邊緣的干燥速度高于中間，中間的抗體會(huì)不斷向兩邊擴(kuò)散，所以干 燥后抗體是向線條的兩端聚集的。一般情況下不影響你的試驗(yàn)。如果你發(fā)現(xiàn)線條出現(xiàn)兩端紅，中

20、間 淡的現(xiàn)象，就要考慮這個(gè)問(wèn)題了?？梢约尤缟厦嬲f(shuō)的作用物質(zhì)來(lái)解決。點(diǎn)膜前后的封閉作用從供應(yīng)商處購(gòu)買回的膜基本上都是已經(jīng)優(yōu)化處理好的，直接點(diǎn)膜就可使用.然而我們還是經(jīng)常會(huì)遇到關(guān)于封閉的討論。其實(shí)封閉不象大家認(rèn)為的那樣，一封閉什么問(wèn)題都解決了.老問(wèn)題走了新問(wèn)題又來(lái)了，而且更麻煩，我要說(shuō)的是慎用封閉。我極其反對(duì)點(diǎn)膜前封閉的做法。原因?yàn)閺S家在生產(chǎn) 膜時(shí)候，各種配方是混合加入原漿的。而點(diǎn)膜前封閉時(shí)要將膜浸泡在封閉液內(nèi)，必然擾亂了膜內(nèi)正 常的物質(zhì)分布。由此引發(fā)了許多問(wèn)題，也降低了工作效率。也有廠家遇到不封閉就無(wú)法包被上膜的 問(wèn)題，其實(shí)可以通過(guò)其他辦法來(lái)解決，封閉必然是下測(cè)。我經(jīng)常使用的封閉手法有兩種：流動(dòng)

21、封閉，將作用物質(zhì)處理在樣品墊上。膜上定點(diǎn)封閉，將作 用物質(zhì)配成溶液噴點(diǎn)在膜的特定位置上。該方法需要使用BIODOT的A舊JET噴頭，可以將不合格的半成品大板重新復(fù)活。只要是將封閉做在了膜上，就必然會(huì)對(duì)產(chǎn)品的穩(wěn)定性造成影響，具體的影 響程度要通過(guò)穩(wěn)定性測(cè)試來(lái)評(píng)判。膜的儲(chǔ)存剛生產(chǎn)出的膜一般含有5-10%的水分。關(guān)于膜的老化機(jī)理，有個(gè)理論支持，不過(guò)爭(zhēng)議比較大。 理論認(rèn)為：膜的老化是因?yàn)槟ど系乃终舭l(fā)，使膜變得疏水，帶電荷并變脆。儲(chǔ)存膜一般要求是避光，密封，過(guò)干或過(guò)濕都不利。在這種保存條件下，一般可以放置兩年。但是如果膜上做了封閉處 理，就要根據(jù)具體試驗(yàn)情況來(lái)判斷了。有些膜由于生產(chǎn)工藝的問(wèn)題，使用后靈

22、敏度會(huì)在一段時(shí)間內(nèi) 發(fā)生變化，遇到這種問(wèn)題，就需要在點(diǎn)膜后放置一段時(shí)間，待穩(wěn)定后方可進(jìn)入調(diào)試生產(chǎn)。硝酸纖維素膜NC膜規(guī)格：15X20cm孔徑：0.45pm保存：5-15 C密封保存，保質(zhì)期一年產(chǎn)品簡(jiǎn)介：本品外觀潔白，膜正面呈光澤，與水接觸應(yīng)立即浸潤(rùn)，不能立即浸潤(rùn)老者視為失活，不能點(diǎn)樣，膜面有花斑或有粉性結(jié)構(gòu)皆視為次品。用于轉(zhuǎn)移電泳，宜選孔經(jīng)0.22或0.45，以保證膜的強(qiáng)度，并減少穿透損失，硝纖膜過(guò)份干燥時(shí)脆，濕時(shí)有彈性，操作時(shí)室內(nèi)應(yīng)保持中常溫度，避免過(guò) 份干燥，防止發(fā)脆，本品靜電吸附膜的親水性好，滲濾時(shí)間適中，蛋白吸附力強(qiáng)，轉(zhuǎn)膜的蛋白集中NC而不擴(kuò)性高，背景低。NC而不擴(kuò)性高，背景低。1.分子雜交雜交技術(shù)有固相雜交和液相雜交之分。固相雜交技術(shù)目前較為常用，先將待測(cè)核酸結(jié)合到一定 的固相支持物上，再與液相中的標(biāo)記探針進(jìn)行雜交。固相支持物常用硝酸纖維素膜。固相雜交包括膜上印跡雜交和原位雜交。前者包括三個(gè)基本過(guò)程：第一，通過(guò)印跡技術(shù)將核酸 片段轉(zhuǎn)移到固相支持物上；第二，用標(biāo)記探針與支持物上的核酸片段進(jìn)行雜交；第三，雜交信號(hào)的 檢測(cè)。用探針對(duì)細(xì)胞或組織切片中的核酸雜交并進(jìn)行檢測(cè)的方法稱之為核酸原位雜交。某特點(diǎn)是靶分 子固定在細(xì)胞中，細(xì)胞固定在載玻片上，以固定的細(xì)胞代替純化的核酸，然后將載玻片浸入溶有探 針的溶液里，探針進(jìn)入組織細(xì)胞與靶分子雜交，而靶分子仍固定在細(xì)胞內(nèi)