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文檔簡介
1、交叉配血試驗一、實驗?zāi)康亩?、實驗原理三、實驗步驟四、方法學(xué)局限性五、臨床意義六、臨床新進(jìn)展1交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022交叉配血試驗一、實驗?zāi)康?交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/20實驗?zāi)康恼莆漳郯方徊媾溲囼灥脑怼⒎椒ā?結(jié)果判讀熟悉交叉配血試驗的臨床意義2交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗?zāi)康恼莆漳郯方徊媾溲囼灥脑?、方法?交叉配血試驗臨實驗原理 交叉配血試驗分兩管: 主側(cè):受血者血清+供血者紅細(xì)胞 次側(cè):供血者血清+受血者紅細(xì)胞 3交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗原理 交叉配血試驗分兩管:3交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/實驗原理 紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷
2、,懸浮在電解質(zhì)溶液中,會吸引大量陽離子,紅細(xì)胞則被擴(kuò)散的雙層離子云所圍繞,形成zeta電位。4交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗原理 紅細(xì)胞表面帶有大量的負(fù)電荷,懸浮在電解質(zhì)溶實驗原理凝聚胺技術(shù)首先利用低離子溶液(LIM)降低介質(zhì)的離子強(qiáng)度,減少紅細(xì)胞周圍的電子云,如有紅細(xì)胞抗原相應(yīng)的血清抗體存在,則可促進(jìn)紅細(xì)胞抗原與血清抗體的特異結(jié)合。5交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗原理凝聚胺技術(shù)首先利用低離子溶液(LIM)降低介質(zhì)的離子實驗原理再加入凝聚胺溶液,溶解后產(chǎn)生很多正電荷,中和紅細(xì)胞表面帶有的負(fù)電荷,紅細(xì)胞zeta電位降低,縮短紅細(xì)胞距離,無論是否有紅細(xì)胞抗原相應(yīng)的血清抗體存
3、在,主、次側(cè)管均可產(chǎn)生非特異性聚集。6交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗原理再加入凝聚胺溶液,溶解后產(chǎn)生很多正電荷,中和紅細(xì)胞表實驗原理最后加入懸浮液,具有中和凝聚胺陽離子的作用,使正常紅細(xì)胞的非特異性凝集散開,紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)血清抗體的特異性凝集仍然存在。7交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗原理7交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟一、取出供血者血漿及紅細(xì)胞,并將冰凍血漿放入37溫箱解凍15分鐘。 8交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟一、取出供血者血漿及紅細(xì)胞,并將冰凍血漿放入37溫實驗步驟二、受血者抗凝全血標(biāo)本離心備用 3000r/min,5min9交
4、叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟二、受血者抗凝全血標(biāo)本離心備用3000r/min,5實驗步驟三、將受血者血漿2滴加入主側(cè)管,紅細(xì)胞1滴加入次側(cè)管 10交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟三、將受血者血漿2滴加入主側(cè)管,紅細(xì)胞1滴加入次側(cè)管實驗步驟四、剪下供血者血袋上的血辮,將供血者紅細(xì)胞1滴加入主側(cè)管,血漿2滴加入次側(cè)管 11交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟四、剪下供血者血袋上的血辮,將供血者紅細(xì)胞1滴加入主實驗步驟五、在主次側(cè)各加入低離子溶液各0.65毫升,混合均勻。12交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟五、在主次側(cè)各加入低離子溶液各0.65毫
5、升,混合均勻?qū)嶒灢襟E六、在主、次側(cè)管分別加入2滴凝聚胺溶液,混勻后3400r/min離心10秒,棄去上清,觀察紅細(xì)胞的非特異凝集現(xiàn)象。棄上清13交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟六、在主、次側(cè)管分別加入2滴凝聚胺溶液,混勻后340實驗步驟七、最后各加入懸浮液2滴,輕輕轉(zhuǎn)動試管混勻并觀察結(jié)果。14交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟七、最后各加入懸浮液2滴,輕輕轉(zhuǎn)動試管混勻并觀察結(jié)果實驗步驟八、如果在60秒內(nèi),主、側(cè)管凝集均散開,說明是由凝聚胺溶液引起的非特異性凝集,配血相合。15交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟八、如果在60秒內(nèi),主、側(cè)管凝集均散開,說明是由
6、凝聚實驗步驟九、如果凝集不散開,則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的特異性反應(yīng),配血結(jié)果不相合,如有疑問,可進(jìn)一步鏡檢確認(rèn)。16交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟九、如果凝集不散開,則為紅細(xì)胞抗原抗體結(jié)合的特異性反實驗步驟十、同時對受血者ABO和RH血型使用玻片法進(jìn)行復(fù)查。17交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟十、同時對受血者ABO和RH血型使用玻片法進(jìn)行復(fù)查。實驗步驟十一、對受血者ABO和RH血型使用玻片法進(jìn)行復(fù)查。18交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022實驗步驟十一、對受血者ABO和RH血型使用玻片法進(jìn)行復(fù)查。1臨床意義一、保證輸血安全二、發(fā)現(xiàn)亞型和不規(guī)則抗體 19交叉配血試
7、驗臨床應(yīng)用10/2/2022臨床意義一、保證輸血安全19交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2方法學(xué)局限性對罕見不規(guī)則抗體抗K敏感性低!20交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022方法學(xué)局限性20交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022臨床新進(jìn)展流式細(xì)胞術(shù)基因分型技術(shù)卡式微柱凝膠法21交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022臨床新進(jìn)展流式細(xì)胞術(shù)21交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/202卡式微柱凝膠法22交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022卡式微柱凝膠法22交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022卡式微柱凝膠法23交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022卡式微柱凝膠法23交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022戴安娜全自動配血系統(tǒng)卡式微柱凝膠法可實現(xiàn)自動檢測24交叉配血試驗臨床應(yīng)用10/2/2022戴安娜全自動配血系統(tǒng)卡式微柱凝膠法可實現(xiàn)自動檢測24交叉配血二 實驗原理 血型就是紅細(xì)胞膜上特異抗原的類型。在ABO血型系統(tǒng)中,紅細(xì)胞膜上抗原分A和B兩種抗原,而血清抗體分抗A和抗B兩種抗體。血型鑒定是將受試者的紅細(xì)胞加入標(biāo)準(zhǔn)A型血清(含有抗B抗體)與標(biāo)準(zhǔn)B型血清(含有抗A抗體)中,觀察有無凝集現(xiàn)
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