力相關(guān)功能基因研究及疫苗開(kāi)發(fā)和海洋文昌魚(yú)繁育與免疫基

1、關(guān)于發(fā)布863計(jì)劃海洋技術(shù)領(lǐng)域遲鈍愛(ài)德華氏菌毒力相關(guān)功能基因研究及疫苗開(kāi)發(fā)和海洋文昌魚(yú)繁育與免疫基因功能解析關(guān)鍵技術(shù)研究項(xiàng)目申請(qǐng)指南的通知各有關(guān)單位：“十一五”期間，依據(jù)國(guó)家中長(zhǎng)期科學(xué)和技術(shù)發(fā)展規(guī)劃綱要(2006-2020)、國(guó)家“十一五”科學(xué)技術(shù)發(fā)展規(guī)劃和863計(jì)劃“十一五”發(fā)展綱要，863計(jì)劃海洋技術(shù)領(lǐng)域的戰(zhàn)略目標(biāo)是：“深化近淺海、開(kāi)拓深遠(yuǎn)海”，重點(diǎn)圍繞提高近海資源利用水平和深海戰(zhàn)略性資源的儲(chǔ)備，開(kāi)發(fā)近海邊際油田、深水油氣田、天然氣水合物和大洋海底固體礦產(chǎn)資源勘探開(kāi)發(fā)關(guān)鍵技術(shù)與重大裝備；發(fā)展和完善海洋環(huán)境監(jiān)測(cè)技術(shù)，特別是深遠(yuǎn)海監(jiān)測(cè)技術(shù)，形成200海里專(zhuān)屬經(jīng)濟(jì)區(qū)及西太平洋海洋環(huán)境立體綜合監(jiān)測(cè)

2、與監(jiān)控的技術(shù)能力；開(kāi)展深海生物資源的探查、開(kāi)發(fā)與利用技術(shù)研究，研制海洋創(chuàng)新藥物與海洋生物制品等高值產(chǎn)品；建立一批海洋高技術(shù)研發(fā)基地,發(fā)展一批海洋前沿技術(shù)；實(shí)現(xiàn)我國(guó)海洋技術(shù)從近淺海向深遠(yuǎn)海的戰(zhàn)略性轉(zhuǎn)移。圍繞“十一五”戰(zhàn)略目標(biāo)，863計(jì)劃海洋技術(shù)領(lǐng)域在項(xiàng)目和專(zhuān)題兩個(gè)層次進(jìn)行部署。項(xiàng)目分為重大項(xiàng)目和重點(diǎn)項(xiàng)目。重大項(xiàng)目以重大產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和重大技術(shù)體系建設(shè)為目標(biāo)，重點(diǎn)項(xiàng)目以突破核心技術(shù)、開(kāi)發(fā)單項(xiàng)戰(zhàn)略產(chǎn)品原型或解決中試中的重要工藝問(wèn)題為目標(biāo)。項(xiàng)目遵循“成熟一個(gè)、啟動(dòng)一個(gè)，成熟一批、啟動(dòng)一批”的原則，分次分批啟動(dòng)。此次發(fā)布的是本領(lǐng)域遲鈍愛(ài)德華氏菌毒力相關(guān)功能基因研究及疫苗開(kāi)發(fā)和海洋文昌魚(yú)繁育與免疫基因功能解析關(guān)

3、鍵技術(shù)研究2個(gè)重點(diǎn)項(xiàng)目的申請(qǐng)指南，合計(jì)擬安排863計(jì)劃專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)3200萬(wàn)元。本批重點(diǎn)項(xiàng)目的申請(qǐng)采取網(wǎng)上集中申報(bào)。申報(bào)通過(guò)“國(guó)家科技計(jì)劃項(xiàng)目申報(bào)中心”進(jìn)行，網(wǎng)址為，有關(guān)申請(qǐng)的程序要求和注意事項(xiàng)詳見(jiàn)“十一五”國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃（863計(jì)劃）申請(qǐng)指南。項(xiàng)目或課題申請(qǐng)負(fù)責(zé)人出生日期要求為1952年7月1日（含）以后。項(xiàng)目或課題申請(qǐng)受理的截止日期為2007年9月14日24時(shí)。指南內(nèi)容:附件一：“遲鈍愛(ài)德華氏菌毒力相關(guān)功能基因研究及疫苗開(kāi)發(fā)”重點(diǎn)項(xiàng)目申請(qǐng)指南附件二：“海洋文昌魚(yú)繁育與免疫基因功能解析關(guān)鍵技術(shù)研究”重點(diǎn)項(xiàng)目申請(qǐng)指南科學(xué)技術(shù)部863計(jì)劃海洋技術(shù)領(lǐng)域辦公室二八年七月二十四日附件一：“十一五”

4、863計(jì)劃海洋技術(shù)領(lǐng)域“遲鈍愛(ài)德華氏菌毒力相關(guān)功能基因研究及疫苗開(kāi)發(fā)”重點(diǎn)項(xiàng)目課題申請(qǐng)指南一、指南說(shuō)明“遲鈍愛(ài)德華氏菌毒力相關(guān)功能基因研究及疫苗開(kāi)發(fā)”是“十一五”863計(jì)劃海洋技術(shù)領(lǐng)域重點(diǎn)項(xiàng)目之一。其總體目標(biāo)是：針對(duì)目前嚴(yán)重危害我國(guó)各種經(jīng)濟(jì)海水養(yǎng)殖魚(yú)種的病原菌遲鈍愛(ài)德華氏菌，利用分子生物學(xué)、現(xiàn)代病原微生物學(xué)和疫苗學(xué)的原理和技術(shù)，揭示遲鈍愛(ài)德華氏菌黏附、侵染、胞內(nèi)寄生和疾病爆發(fā)相關(guān)的毒力因子以及它們的調(diào)控機(jī)制。針對(duì)遲鈍愛(ài)德華氏菌特定的毒力因子和致病機(jī)制，獲得具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的候選疫苗，促進(jìn)我國(guó)海水養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展。本項(xiàng)目擬下設(shè)1個(gè)課題，申報(bào)團(tuán)隊(duì)需按指南內(nèi)容進(jìn)行整體申報(bào)，提提出詳細(xì)可考核的課題考核

5、指標(biāo)。二、指南內(nèi)容1項(xiàng)目名稱(chēng)遲鈍愛(ài)德華氏菌毒力相關(guān)功能基因研究及疫苗開(kāi)發(fā)2項(xiàng)目總體目標(biāo)確定遲鈍愛(ài)德華氏菌的易感魚(yú)類(lèi)和細(xì)胞系，揭示遲鈍愛(ài)德華氏菌黏附、侵染、胞內(nèi)寄生和疾病爆發(fā)相關(guān)的毒力因子以及它們的調(diào)控機(jī)制；針對(duì)遲鈍愛(ài)德華氏菌特定的毒力因子和致病機(jī)制，獲得34個(gè)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的高效疫苗，進(jìn)行疫苗的實(shí)驗(yàn)室安全和效力評(píng)價(jià)，至少一株獲得環(huán)境安全試驗(yàn)許可證書(shū)，并進(jìn)入環(huán)境安全試驗(yàn)。3項(xiàng)目主要研究?jī)?nèi)容（1）遲鈍愛(ài)德華氏菌易感細(xì)胞和動(dòng)物模型研究。選取遲鈍愛(ài)德華氏菌易感魚(yú)類(lèi)細(xì)胞（系）和宿主動(dòng)物，考察其在感染過(guò)程中與遲鈍愛(ài)德華氏菌之間的相互作用，建立用于遲鈍愛(ài)德華氏菌侵染和致病規(guī)律研究的易感宿主模型。（2）遲鈍

6、愛(ài)德華氏菌全基因組測(cè)序和基因組學(xué)分析。對(duì)遲鈍愛(ài)德華氏菌進(jìn)行全基因組測(cè)序并拼裝；對(duì)獲得的全基因組序列進(jìn)行全面的生物信息學(xué)分析，初步篩選出候選的毒力相關(guān)基因，并對(duì)其進(jìn)行功能驗(yàn)證；分析遲鈍愛(ài)德華氏菌不同毒株間的基因差異及其與毒力差異之間的關(guān)系。（3）遲鈍愛(ài)德華氏菌重要致病相關(guān)基因/蛋白的表達(dá)調(diào)控分析。以全基因組序列為基礎(chǔ)，以病原細(xì)菌重要毒力調(diào)控基因/蛋白為靶點(diǎn)，進(jìn)行基因表達(dá)譜差異分析，確定關(guān)鍵毒力基因及其調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。研究重要調(diào)控基因和蛋白在病原菌致病過(guò)程中的生物學(xué)功能，建立遲鈍愛(ài)德華氏菌作為魚(yú)類(lèi)胞內(nèi)寄生病原菌的致病機(jī)制模型。（4）遲鈍愛(ài)德華氏菌抗原蛋白組學(xué)分析。以遲鈍愛(ài)德華氏菌的全基因組為平臺(tái)，預(yù)測(cè)毒

7、力因子、分泌抗原及表面相關(guān)抗原，尋找外膜抗原以及侵染和毒力相關(guān)的抗原。對(duì)篩選得到的免疫顯性抗原進(jìn)行免疫保護(hù)力評(píng)價(jià)，為海水養(yǎng)殖疫苗研究提供候選靶點(diǎn)。（5）遲鈍愛(ài)德華氏菌疫苗的構(gòu)建和評(píng)價(jià)。以關(guān)鍵毒力基因或保護(hù)性抗原為靶點(diǎn)，設(shè)計(jì)和構(gòu)建遲鈍愛(ài)德華氏菌減毒活疫苗或者亞單位疫苗，并在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模上進(jìn)行安全性和免疫效力評(píng)價(jià)，篩選具有產(chǎn)業(yè)開(kāi)發(fā)前景的疫苗。初步確定疫苗的實(shí)驗(yàn)室制備工藝和免疫策略，在此基礎(chǔ)上進(jìn)行環(huán)境安全試驗(yàn)。4主要考核指標(biāo)（1）完成遲鈍愛(ài)德華氏菌的全基因組測(cè)序，全基因組測(cè)序覆蓋率達(dá)到10倍以上；進(jìn)行遲鈍愛(ài)德華氏菌全基因組序列的拼裝，給出全基因組的精細(xì)圖，完成遲鈍愛(ài)德華氏菌全基因組分析。（2）建立遲鈍

8、愛(ài)德華氏菌致病機(jī)制研究的易感細(xì)胞和動(dòng)物模型。開(kāi)展遲鈍愛(ài)德華氏菌與魚(yú)類(lèi)致病相關(guān)基因的功能研究，對(duì)其中的10-20個(gè)基因的功能進(jìn)行較深入系統(tǒng)的研究。新發(fā)現(xiàn)1-2個(gè)重要致病因子。（3）構(gòu)建34個(gè)遲鈍愛(ài)德華氏菌的減毒活疫苗或者亞單位疫苗，浸泡或者口服的相對(duì)免疫保護(hù)率達(dá)到70%以上。至少一株獲得環(huán)境安全試驗(yàn)許可證書(shū)，并進(jìn)入環(huán)境安全試驗(yàn)。申請(qǐng)或獲得國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利34項(xiàng)，國(guó)際發(fā)明專(zhuān)利12項(xiàng)。5項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)及組成本重點(diǎn)項(xiàng)目總支持經(jīng)費(fèi)為1320萬(wàn)元，其中863專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)擬支持1200萬(wàn)元，要求落實(shí)地方或部門(mén)配套經(jīng)費(fèi)120萬(wàn)元。配套經(jīng)費(fèi)需提供證明。6項(xiàng)目支持年限自課題任務(wù)書(shū)簽定日起4年。7其他內(nèi)容本項(xiàng)目申請(qǐng)必須針對(duì)項(xiàng)目整

9、體任務(wù)，針對(duì)部分研究?jī)?nèi)容的申請(qǐng)將視為無(wú)效申請(qǐng)。項(xiàng)目申請(qǐng)者需填寫(xiě)項(xiàng)目申請(qǐng)書(shū)。附件二： “十一五”863計(jì)劃海洋技術(shù)領(lǐng)域“海洋文昌魚(yú)繁育與免疫基因功能解析關(guān)鍵技術(shù)研究”重點(diǎn)項(xiàng)目課題申請(qǐng)指南一、指南說(shuō)明“海洋文昌魚(yú)繁育與免疫基因功能解析關(guān)鍵技術(shù)研究”是“十一五”863計(jì)劃海洋技術(shù)領(lǐng)域重點(diǎn)項(xiàng)目之一。項(xiàng)目總體目標(biāo)：本重點(diǎn)項(xiàng)目通過(guò)文昌魚(yú)全基因組的測(cè)序和相關(guān)生物信息學(xué)分析， 再進(jìn)行系統(tǒng)的功能研究，以獲取生殖與免疫相關(guān)的功能基因，從而為海水養(yǎng)殖的優(yōu)良品種培育與病害控制提供關(guān)鍵技術(shù)和自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的保證。項(xiàng)目重點(diǎn)任務(wù)：完成中國(guó)文昌魚(yú)全基因組序列測(cè)定、組裝和全部基因潛在功能的注釋?zhuān)⑽牟~(yú)的人工繁育與養(yǎng)殖技術(shù)體系

10、，建立文昌魚(yú)細(xì)胞系及其相關(guān)的培養(yǎng)技術(shù)，初步建立文昌魚(yú)遺傳基因的修飾與改造技術(shù)，獲得一系列與海水魚(yú)養(yǎng)殖繁育和免疫防御相關(guān)的功能基因，其中至少獲得10個(gè)功能基因的知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)，為海水養(yǎng)殖優(yōu)良品種培育與病害控制提供關(guān)鍵技術(shù)，提高我國(guó)在海洋生物科技方面的創(chuàng)新力和競(jìng)爭(zhēng)力。說(shuō)明：根據(jù)863計(jì)劃有關(guān)管理辦法和規(guī)定，本重點(diǎn)項(xiàng)目參照重大項(xiàng)目任務(wù)落實(shí)方式，對(duì)項(xiàng)目全部?jī)?nèi)容公開(kāi)發(fā)布課題申請(qǐng)指南，以課題為單位進(jìn)行申請(qǐng)，申請(qǐng)者請(qǐng)?zhí)顚?xiě)項(xiàng)目課題申請(qǐng)書(shū)。本項(xiàng)目擬支持的863專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)控制額為2000萬(wàn)元，課題支持年限為自課題任務(wù)書(shū)簽定日起4年。二、指南內(nèi)容課題1海洋模式生物文昌魚(yú)全基因組的測(cè)序和基因功能注釋的生物信息分析 研究目

11、標(biāo)：通過(guò)建立我國(guó)文昌魚(yú)高質(zhì)量基因組BAC文庫(kù)，采用超快速基因測(cè)序技術(shù)完成中國(guó)文昌魚(yú)基因組測(cè)序，對(duì)全基因組序列進(jìn)行拼接、組裝，完成全部基因潛在功能的注釋?zhuān)⑿畔⑼暾?、?shù)據(jù)豐富、界面友好、開(kāi)放應(yīng)用的中國(guó)文昌魚(yú)全基因組數(shù)據(jù)庫(kù)和研究平臺(tái)，奠定我國(guó)在海洋模式生物及其功能基因研究領(lǐng)域的國(guó)際競(jìng)爭(zhēng)力。主要研究?jī)?nèi)容：建立高質(zhì)量單一個(gè)體的文昌魚(yú)BAC基因組文庫(kù)，對(duì)文昌魚(yú)全基因組進(jìn)行大規(guī)模測(cè)序，用生物信息技術(shù)對(duì)大量的原始序列數(shù)據(jù)進(jìn)行拼接組裝，利用已有的中國(guó)文昌魚(yú)EST數(shù)據(jù)和國(guó)際文昌魚(yú)數(shù)據(jù)庫(kù)中的EST數(shù)據(jù)，給合生物信息技術(shù)，對(duì)全部基因潛在功能進(jìn)行注釋?zhuān)①Y源共享的數(shù)據(jù)庫(kù)。主要考核指標(biāo)：文昌魚(yú)基因組文庫(kù)的平均插入片

12、段不小于100 kb，總庫(kù)容達(dá)基因組10倍以上；全基因組測(cè)序覆蓋深度達(dá)8，組裝序列對(duì)基因組的覆蓋率不低于98%；注釋基因不少于1.5萬(wàn)，達(dá)到高質(zhì)量工作“框架圖”要求；基因組數(shù)據(jù)庫(kù)信息完整，界面友好并開(kāi)放使用；申請(qǐng)或獲得國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利2-3項(xiàng)。課題設(shè)置：本課題擬支持專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)700萬(wàn)元，擬支持課題數(shù)不超過(guò)1個(gè)。課題2海洋文昌魚(yú)的人工繁育與養(yǎng)殖及其生殖相關(guān)功能基因的研究研究目標(biāo)：利用我國(guó)豐富的文昌魚(yú)資源，突破文昌魚(yú)人工繁育和養(yǎng)殖的技術(shù)瓶頸，建立實(shí)驗(yàn)室條件下長(zhǎng)期繁育的文昌魚(yú)人工繁殖群，克隆一批文昌魚(yú)生殖相關(guān)功能基因，為將文昌魚(yú)作為模式動(dòng)物奠定基礎(chǔ)。主要研究?jī)?nèi)容：通過(guò)品種篩選和優(yōu)化養(yǎng)殖條件，提高文昌魚(yú)生長(zhǎng)

13、速度，縮短生殖周期；研究文昌魚(yú)卵母細(xì)胞和精原細(xì)胞基本發(fā)育規(guī)律，實(shí)現(xiàn)產(chǎn)卵時(shí)間的可預(yù)見(jiàn)性和可調(diào)控性，誘導(dǎo)養(yǎng)殖群體室內(nèi)產(chǎn)卵；改變?cè)猩盍?xí)性和生殖習(xí)性，使文昌魚(yú)能在人工海水中長(zhǎng)期養(yǎng)殖；研制和建立適合實(shí)驗(yàn)室大規(guī)模養(yǎng)殖的專(zhuān)用設(shè)備和技術(shù)方法；克隆文昌魚(yú)生殖相關(guān)功能基因，研究這些基因的功能及其在文昌魚(yú)生殖周期和繁育中的作用。主要考核指標(biāo)：建立一個(gè)不少于10萬(wàn)尾全人工繁育的文昌魚(yú)實(shí)驗(yàn)室繁殖群，調(diào)節(jié)延伸產(chǎn)卵期至自然條件下2倍以上，建立人工海水條件下的繁育和室內(nèi)誘導(dǎo)產(chǎn)卵技術(shù)，申請(qǐng)或獲得國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利2-3項(xiàng)。經(jīng)費(fèi)安排：本課題擬支持專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)550萬(wàn)元，擬支持課題數(shù)不超過(guò)1個(gè)。課題3：海洋模式生物文昌魚(yú)免疫防御的關(guān)鍵基

14、因研究研究目標(biāo)：針對(duì)海水養(yǎng)殖病害防治這一關(guān)鍵問(wèn)題，研究海洋模式生物文昌魚(yú)對(duì)病原感染應(yīng)答的規(guī)律和免疫防御機(jī)制，克隆一批重要的免疫相關(guān)基因，研究這些基因在免疫防御中的作用，為開(kāi)發(fā)海水養(yǎng)殖病害控制新的免疫防治技術(shù)提供理論依據(jù)。主要研究?jī)?nèi)容：不同病原感染文昌魚(yú)的轉(zhuǎn)錄組研究；不同病原感染文昌魚(yú)的蛋白組學(xué)研究；文昌魚(yú)重要免疫基因家族研究；重要免疫細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路及關(guān)鍵基因研究；免疫相關(guān)組織和器官發(fā)生相關(guān)基因研究；早期免疫識(shí)別分子的產(chǎn)生和識(shí)別機(jī)制研究；原始適應(yīng)性免疫分子的簽定和功能研究等。主要考核指標(biāo)：克隆30-60個(gè)病害控制和免疫防御相關(guān)的功能基因，闡明10-20個(gè)重要病害控制和免疫防御相關(guān)基因的功能，發(fā)表高水平研究論文5-10篇以上，申請(qǐng)或獲得國(guó)家發(fā)明專(zhuān)利3-5個(gè)。經(jīng)費(fèi)安排：本課題擬支持專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)550萬(wàn)元，擬支持課題數(shù)不超過(guò)1個(gè)。課題4：海洋文昌魚(yú)細(xì)胞系的建立及其遺傳修飾與改造技術(shù)研究目標(biāo)：針對(duì)文昌魚(yú)細(xì)胞不能體外培養(yǎng)這一難題，本課題將突破文昌魚(yú)細(xì)胞體外培養(yǎng)的技術(shù)瓶頸，實(shí)現(xiàn)文昌魚(yú)細(xì)胞的原代培養(yǎng)和永生細(xì)胞系的建立，為重要海水養(yǎng)殖動(dòng)物的遺傳育種和基因修飾改造提供技術(shù)支持。主要研究?jī)?nèi)容：建立文昌魚(yú)原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件和傳代培養(yǎng)的方法；通過(guò)各種誘導(dǎo)方法，使原代培養(yǎng)細(xì)胞轉(zhuǎn)化為細(xì)