教培用血細(xì)胞分析原理及白細(xì)胞散點(diǎn)圖臨床意義課件

1、血細(xì)胞分析原理及白細(xì)胞散點(diǎn)圖臨床意義血細(xì)胞分析原理及白細(xì)胞散點(diǎn)圖臨床意義一、血細(xì)胞各通道分析原理及散點(diǎn)圖分析 二、散點(diǎn)圖案例分析一、血細(xì)胞各通道分析原理及散點(diǎn)圖分析 一、血細(xì)胞各通道分析原理及散點(diǎn)圖分析血細(xì)胞分析儀提供了大量的警示信息和可供參考的研究 參數(shù)，如直方圖，DIFF散點(diǎn)圖， NRBC散點(diǎn)圖等。實(shí)驗(yàn)人員可根據(jù)這些信息從大量的標(biāo)本中挑出需要重點(diǎn)關(guān)注的,進(jìn)行涂片復(fù)檢確認(rèn)，提高工作效率，減少漏診率。一、血細(xì)胞各通道分析原理及散點(diǎn)圖分析血細(xì)胞分析儀提供了大量的DIFFWBC/BASONRBC半導(dǎo)體激光熒光染色（聚次甲基+噁嗪 ）主要原理FSC前向散射光：細(xì)胞大小SSC側(cè)向散射光：復(fù)雜程度（細(xì)胞

2、的顆粒 和細(xì)胞核等內(nèi)含物的信息）SFL側(cè)向熒光：核酸含量（DNA 、RNA)DIFF半導(dǎo)體激光主要原理FSC前向散射光：細(xì)胞大小DIFF通道分析原理4DL(陰離子表面活性劑）完全溶解RBCPLT 在WBC膜上打孔溶血素中加入有機(jī)酸，與嗜酸粒細(xì)胞內(nèi)的堿 性蛋白粘附，使Eo顆粒的復(fù)雜程度增加，在SSC顯示復(fù)雜程度是最大的。4DS對(duì)核酸染色縱坐標(biāo)：側(cè)向熒光（SFL）反映核酸含量橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC）反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜程度化學(xué)粘附大分子有機(jī)酸與嗜酸 粒細(xì)胞中的堿性顆粒 發(fā)生化學(xué)粘附嗜酸粒細(xì)胞大分子有機(jī)酸DIFF通道分析原理4DL(陰離子表面活性劑）完全溶解RBRNA/DNA熒光染色原理成熟白細(xì)胞：

3、高熒光特性網(wǎng)織紅細(xì)胞：弱熒光特性血小板：成熟RBC：原始細(xì)胞：幼稚細(xì)胞：微弱熒光特性 無熒光特性 極高熒光特性 極高熒光特性RNA/DNA熒光染色原理成熟白細(xì)胞：高熒光特性血小板：微弱瘧原蟲感染的散點(diǎn)圖（一）DIFF散點(diǎn)圖顯示淋巴與單核之 間融合，有分類結(jié)果，但不可 信。橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC）散點(diǎn)圖特點(diǎn)：嗜酸性粒細(xì)胞群向中性粒細(xì)胞靠攏，間距小?；野咨Ⅻc(diǎn)，完全融合，不分類。4DL(陰離子表面活性劑）中華臨床醫(yī)師雜志， ,5（2）:633-6355%的異常淋 巴細(xì)胞。紅色散點(diǎn)，儀器報(bào)警提示有大量 原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞。異型淋巴細(xì)胞增高與 多種病毒感染及變態(tài) 反應(yīng)有關(guān)。WBC增多對(duì)RBC計(jì)數(shù)

4、的干擾5%的早幼粒細(xì)胞，單 核細(xì)胞24.鏡檢：47%原始淋巴細(xì)胞，未見 異淋。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示細(xì)胞表 面標(biāo)志CD13和CD33陽性，為髓 細(xì)胞性白血病。大致分成兩群，一群為原始細(xì)胞， 一群為幼稚粒細(xì)胞。熒光染色WBC分類的優(yōu)勢(shì)檢測(cè)異常細(xì)胞提供幼稚粒細(xì)胞信息（IG）提供原始細(xì)胞信息（Other）瘧原蟲感染的散點(diǎn)圖（一）熒光染色WBC分類的優(yōu)勢(shì)檢測(cè)異常細(xì)胞10SFB溶血?jiǎng)?（酸性，低滲）溶解RBCPLT除嗜堿性粒細(xì)胞以外的白細(xì)胞處理成 裸核形態(tài)Baso保持原狀縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC） 反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向散射光（SSC）反映細(xì)胞內(nèi)部復(fù)雜程度嗜堿其它有 核細(xì)胞嗜堿粒細(xì)胞溶血素為酸性低滲

5、溶液，Baso內(nèi)的蛋白為酸性蛋白，因此在該溶液中受到保護(hù)，而其他有核細(xì)胞則被 溶解成裸核WBC/BASO 通道分析原理10SFB溶血?jiǎng)?（酸性，低滲）縱坐標(biāo)：前向散射光（FSCNRBC通道分析原理NR溶血?jiǎng)┩耆芙釸BC，PLTWBC保持原狀NRBC溶解為裸核NR染液對(duì)核酸染色縱坐標(biāo)：前向散射光（FSC）反映細(xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向熒光（SFL）反映核酸含量NRBC% = NRBC# / NRBC_WBC#NRBC通道分析原理NR溶血?jiǎng)┓从臣?xì)胞大小橫坐標(biāo)：側(cè)向熒光出現(xiàn)有核紅時(shí)WBC的修正紅系增生活躍時(shí)，外周血易見較多的NRBC，在WBC 計(jì)數(shù)時(shí)不被溶解，常被計(jì)入淋巴細(xì)胞中。出現(xiàn)有核紅時(shí)WBC的修正

6、紅系增生活躍時(shí)，外周血易見較多的NRWBC增多對(duì)RBC計(jì)數(shù)的干擾RBC：阻抗法RBC值含WBCWBC100*109/L時(shí)，需校正紅系統(tǒng)參數(shù)貧血越嚴(yán)重，對(duì)RBC影響越大WBC增多對(duì)RBC計(jì)數(shù)的干擾血紅蛋白通道光電比色法SLS（十二烷基磺酸鈉）：無氰無毒血紅蛋白通道光電比色法二、散點(diǎn)圖案例分析二、散點(diǎn)圖案例分析嗜堿性粒細(xì)胞增多癥在BASO散點(diǎn)圖上，嗜堿區(qū) 域出現(xiàn)大量散點(diǎn)，另外DIFF散點(diǎn)圖上，中性區(qū)域的左下方也為嗜堿區(qū)域， 也出現(xiàn)了大量的散點(diǎn)。BASO%：儀器13.4%鏡檢13.5%嗜堿性粒細(xì)胞增多癥在BASO散點(diǎn)圖上，嗜堿區(qū) 域出現(xiàn)大量散點(diǎn)AML-M1(例1)不可信DIFF散點(diǎn)圖顯示淋巴與單核之

7、 間融合，有分類結(jié)果，但不可 信。IMI散點(diǎn)圖也提示大量原始細(xì) 胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有77.5%的原始細(xì)胞。細(xì)胞表面標(biāo)志CD13和CD33陽 性，CD36陰性；為急性髓細(xì) 胞性白血病。AML-M1(例1)不可信AML-M2DIFF散點(diǎn)圖顯示白細(xì)胞完全融合 且不分類。IMI散點(diǎn)圖顯示大量原始細(xì)胞和幼 稚粒細(xì)胞。NRBC散點(diǎn)圖：紅色散點(diǎn)鏡檢發(fā)現(xiàn)有90%的原始細(xì)胞、3% 的早幼粒細(xì)胞哦、1%中幼粒細(xì)胞。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示細(xì)胞表 面標(biāo)志CD13和CD33陽性，為髓 細(xì)胞性白血病。AML-M2DIFF散點(diǎn)圖顯示白細(xì)胞完全融合 且不分類。AML-M3DIFF散點(diǎn)圖顯示白細(xì)胞完全融合且不分 類。IMI散點(diǎn)圖也顯

8、示大量原始細(xì)胞和幼稚粒 細(xì)胞。NRBC散點(diǎn)圖：紅色散點(diǎn)鏡檢發(fā)現(xiàn)3%的原始細(xì)胞，91%的早幼粒 細(xì)胞、3.5%的中幼粒細(xì)胞，0.5%晚幼 粒細(xì)胞。AML-M3DIFF散點(diǎn)圖顯示白細(xì)胞完全融合且不分 類。AML-M4DIFF散點(diǎn)圖，白細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量灰白色散點(diǎn)，完全融合，不分類。 大致分成兩群，一群為原始細(xì)胞， 一群為幼稚粒細(xì)胞。IMI散點(diǎn)圖也顯示大量原始細(xì)胞和幼 稚粒細(xì)胞。AML-M4DIFF散點(diǎn)圖，白細(xì)胞區(qū)域出現(xiàn)大量血細(xì)胞分析原理及白細(xì)胞散點(diǎn)圖臨床意義除嗜堿性粒細(xì)胞以外的白細(xì)胞處理成 裸核形態(tài)IMI散點(diǎn)圖也提示大量原始細(xì) 胞。溶血素中加入有機(jī)酸，與嗜酸粒細(xì)胞內(nèi)的堿 性蛋白粘附，使Eo顆粒的復(fù)雜

9、程度增加，在Baso內(nèi)的蛋白為酸性蛋白，因此在該大分子有機(jī)酸與嗜酸 粒細(xì)胞中的堿性顆粒 發(fā)生化學(xué)粘附NRBC散點(diǎn)圖：紅色散點(diǎn)瘧原蟲感染的散點(diǎn)圖（一）其他1 492份散點(diǎn)圖基本正常。在BASO散點(diǎn)圖上，嗜堿區(qū) 域出現(xiàn)大量散點(diǎn)，另外DIFF散點(diǎn)圖顯示白細(xì)胞完全融合 且不分類。血細(xì)胞分析儀提供了大量的警示信息和可供參考的研究 參數(shù)，如直方圖，DIFF散點(diǎn)圖， NRBC散點(diǎn)圖等。熒光染色WBC分類的優(yōu)勢(shì)報(bào)警提示異常淋巴細(xì)胞/原始細(xì) 胞，異淋？鏡檢發(fā)現(xiàn)59%的原始細(xì)胞，淋巴與單核區(qū)域分界不 清，儀器提示淋巴細(xì)胞 增多/原始淋巴。NRBC散點(diǎn)圖：紅色散點(diǎn)散點(diǎn)圖特點(diǎn)：嗜酸性粒細(xì)胞群向中性粒細(xì)胞靠攏，間距小。

10、DIFF散點(diǎn)圖淋巴與單核 融為一體，不分類，IMIAML-M5bDIFF散點(diǎn)圖淋巴與單核 融為一體，不分類，IMI散點(diǎn)圖顯示大量原始細(xì)胞 和幼稚粒細(xì)胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)59%的原始細(xì)胞，0.5%的早幼粒細(xì)胞，單 核細(xì)胞24.5%。血細(xì)胞分析原理及白細(xì)胞散點(diǎn)圖臨床意義AML-M5bDIFF散慢粒危象DIFF散點(diǎn)圖OTHER區(qū)域出現(xiàn)大 量散點(diǎn)，中性粒細(xì)胞上方也有少 量散點(diǎn)，IMI散點(diǎn)圖也出現(xiàn)大量紅色散點(diǎn)，儀器報(bào)警提示有大量 原始細(xì)胞和幼稚粒細(xì)胞。NRBC散點(diǎn)圖：紅色散點(diǎn)鏡檢發(fā)現(xiàn)38.5%的原始細(xì)胞，幼 稚粒細(xì)胞和幼稚的單核細(xì)胞。酯 酶染色陰性或弱陽性，可被氟化 鈉抑制。這是一例慢粒急單變。慢粒危象DIFF

11、散點(diǎn)圖OTHER區(qū)域出現(xiàn)大 量散點(diǎn)，中性粒細(xì)MDSDIFF：淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞之間界限不清，提示出現(xiàn)原 始細(xì)胞。中性粒細(xì)胞散點(diǎn)向 左下方延伸到嗜堿區(qū)域。IMI：少量紅點(diǎn)NRBC：幼紅鏡檢：原始：1%，BASO：5%，NRBC：MDSDIFF：淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞范*，女，67y。，診 斷為MDS伴原始細(xì)胞增多（10%）DIFF散點(diǎn)圖淋巴與單核區(qū)域融 合，提示出現(xiàn)原始細(xì)胞報(bào)警提示異常淋巴細(xì)胞/原始細(xì) 胞，異淋？鏡檢：47%原始淋巴細(xì)胞，未見 異淋。血片POX（-）。急淋變MDS急淋變范*，女，67y。，診 斷為MDS伴原始細(xì)胞增多（10急性T淋巴細(xì)胞白血病DIFF散點(diǎn)圖淋巴與單核完 全融合，IMI

12、散點(diǎn)圖幾乎沒有紅色散點(diǎn)，儀器提示異 常淋巴/原始淋巴細(xì)胞。鏡檢發(fā)現(xiàn)有59.5%的異常淋 巴細(xì)胞。本例被診為ATL。急性T淋巴細(xì)胞白血病DIFF散點(diǎn)圖淋巴與單核完 全融合，IMCLL淋巴與單核區(qū)域分界不 清，儀器提示淋巴細(xì)胞 增多/原始淋巴。鏡檢：L：%，幼淋2.0%CLL淋巴與單核區(qū)域分界不 清，儀器提示淋巴細(xì)胞 增多/原始異型淋巴細(xì)胞異型淋巴細(xì)胞增高與 多種病毒感染及變態(tài) 反應(yīng)有關(guān)。常見有：傳染性單核 細(xì)胞增多癥、病毒性 肺炎、病毒性肝炎、 腎綜合征出血熱等病 毒性感染。特點(diǎn)：胞體增大，胞 質(zhì)增多、嗜堿性增強(qiáng)，細(xì)胞核母細(xì)胞化， 熒光強(qiáng)度最強(qiáng)。異型淋巴細(xì)胞異型淋巴細(xì)胞增高與 多種病毒感染及變態(tài)

13、 反應(yīng)有關(guān)散點(diǎn)圖特點(diǎn)：嗜酸性粒細(xì)胞群向中性粒細(xì)胞靠攏，間距小。原因：瘧原蟲裂殖體破裂，瘧色素從感染的血細(xì)胞中釋放出來，繼而被白細(xì)胞吞噬，吞噬 了瘧色素的白細(xì)胞側(cè)向散射光強(qiáng)度改變，顯示在散點(diǎn)圖靠近中性粒細(xì)胞一側(cè)，但也被儀器 以Eo特有的紅色標(biāo)示出來。張時(shí)民等.血細(xì)胞分析儀測(cè)定瘧原蟲感染患者特征二例.中華臨床醫(yī)師雜志， ,5（2）:633-635瘧原蟲感染的散點(diǎn)圖（一）散點(diǎn)圖特點(diǎn)：嗜酸性粒細(xì)胞群向中性粒細(xì)胞靠攏，間距小。瘧原蟲感從儀器報(bào)警EO增高或無EO分類結(jié)果的1 501份標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)有9份瘧 原蟲標(biāo)本，6份散點(diǎn)圖表現(xiàn)為EO與NEG之間間距縮小(圖1) ，3份報(bào)警白細(xì)胞散 點(diǎn)圖異常,且散點(diǎn)圖顯示EO與N