菊花的組織培養(yǎng)(審定)

1、第一頁，共二十九頁。3.1菊花的組織培養(yǎng)第二頁，共二十九頁。 【學習目標】（1）說明組織培養(yǎng)的基本原理；（2）學習植物組織培養(yǎng)的基本技術；（3）進行菊花或其他植物的組織培養(yǎng)。 【重點和難點】重點：植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術;難點：植物組織培養(yǎng)過程中使用的無菌技術第三頁，共二十九頁。組別優(yōu) 秀 個 人1 康維德 王波 2 3 張?zhí)┰?賈思潔 周劍4 汪鵬程 康美婷 常京 5 謝裴 張魁 馬曉杰6 燕斌7 南宗汗 陳博8 楊偉鑫9 孫子涵 劉偉 邵永強 王文彤 自主預習反饋第四頁，共二十九頁。一基礎知識1植物組織培養(yǎng)的理論基礎細胞分化_過程中，細胞在_、_ 和_上出現(xiàn)_差異的過程。個體發(fā)育形

2、態(tài)結構功能穩(wěn)定性 已分化的植物細胞在離體時，若條件適宜可能發(fā)育成完整植株，即植物細胞具有_。全能性第五頁，共二十九頁。一基礎知識2植物組織培養(yǎng)的基本過程移栽成活_植物組織形成愈傷組織長出叢芽生根（1）請在橫線補充圖片所對應階段，說明愈傷組織中細胞特點。（2）說出序號表示的過程名稱；描述脫分化和再分化的起點及終點。 再分化脫分化再分化脫分化：由高度分化的植物組織或細胞產生愈傷組織的過程。再分化：由愈傷組織重新分化出根或芽等器官的過程。第六頁，共二十九頁。一基礎知識3影響植物組織培養(yǎng)的因素植物組織的種類植物材料 的年齡、保存時間營養(yǎng)條件調節(jié)劑（植物激素）環(huán)境因子（如pH、溫度、光照等）內因外因第七

3、頁，共二十九頁。 關于材料的年齡和保存時間長短，你來選一選： 你選擇未開花的菊花植株的莖上部新萌生的側枝？還是莖下部的老枝？ 你選擇昨天晚上采集的菊花枝條？還是今天早晨采集的？ 第八頁，共二十九頁。MS培養(yǎng)基 所屬類別 主要成分N、P、K 、 Ca、Mg、S等B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等甘氨酸、維生素、煙酸、肌醇、蔗糖等大量元素 微量元素有機物討論：1.上述成分各屬于哪類營養(yǎng)物質？微量元素、大量 元素、蔗糖、甘氨酸和維生素等的主要作用是什么？2. 微生物培養(yǎng)基與MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯不同？ 第九頁，共二十九頁。MS培養(yǎng)基 所屬類別 主要成分N、P、K 、 Ca、Mg、S等B

4、、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等甘氨酸、維生素、煙酸、肌醇、蔗糖等大量元素 微量元素有機物無機鹽碳源、維持細胞滲透壓滿足細胞代謝受影響后的特殊營養(yǎng)需求2. 微生物培養(yǎng)基以_營養(yǎng)為主； MS培養(yǎng)基包含大量_營養(yǎng)；有機無機第十頁，共二十九頁。植物激素使用順序 實驗結果 先生長素，后細胞分裂素 先細胞分裂素，后生長素 同時使用 討論： 1.生長素和細胞分裂素使用的先后順序如何影響植物細胞的發(fā)育？在組織培養(yǎng)過程中若只需從愈傷組織中提取某種成分，則上述激素使用順序如何？ 利于細胞分裂但不分化 細胞既分裂也分化 分化頻率提高 第十一頁，共二十九頁。生長素/細胞分裂素比值結果 比值高時 促_分化，

5、抑_形成 比值低時 促_分化，抑_形成 比值適中 促進_生長 植物激素討論： 2.同時使用時，生長素和細胞分裂素 使用的比例如何影響植物細胞的發(fā)育？根芽芽根愈傷組織第十二頁，共二十九頁。二實驗操作 1.菊花植物組織培養(yǎng)有哪些基本步驟？ 2.植物組織培養(yǎng)中的無菌操作至關重要，哪些操作過程中哪些環(huán)節(jié)進行了怎樣的無菌操作？第十三頁，共二十九頁。（一）制備MS固體培養(yǎng)基（二）外植體消毒（三）接種（四）培養(yǎng)（五）移栽（六）栽培二實驗操作第十四頁，共二十九頁。（一）制備MS固體培養(yǎng)基配制_ 配制培養(yǎng)液 調_培養(yǎng)基的_滅菌 MS培養(yǎng)基包括20多種營養(yǎng)成分，常用4下保存的配制好的培養(yǎng)基_來制備。配制各種母液母

6、液培養(yǎng)基_PH分裝_法高壓蒸汽滅菌第十五頁，共二十九頁。（二）外植體消毒生長旺盛的嫩枝莖段流水沖洗加洗衣粉刷洗流水沖洗無菌吸水紙_無菌水清洗無菌吸水紙_無菌水沖洗數(shù)次70%酒精0.1%氯化汞第十六頁，共二十九頁。（三）接種1. 無菌操作 _擦拭工作臺； 在_旁進行； 錐形瓶瓶口和用過的器械火焰_滅菌。2. 材料的切取和接種 消過毒的莖段切成小段（0.5-1cm）鑷子夾取菊花莖段插入錐形瓶中的培養(yǎng)基（應注意方向）70%酒精酒精燈火焰灼燒第十七頁，共二十九頁。（四）培養(yǎng)接種后的錐形瓶最好放在_箱中培養(yǎng)，培養(yǎng)期間應定期_培養(yǎng)溫度控制在_每日用日光燈光照_h無菌消毒18-2212第十八頁，共二十九頁。

7、（五）移栽打開封口膜清洗轉移移栽（移植到珍珠巖等環(huán)境）（移到土壤）第十九頁，共二十九頁。步驟無菌操作高壓蒸汽70%酒精灼燒70%酒精0.1%氯化汞無菌消毒移到消過毒的環(huán)境中生長一段時間二實驗操作制備MS培養(yǎng)基外植體消毒接種培養(yǎng)移栽栽培培養(yǎng)基_滅菌_、_處理 _擦拭工作臺、 酒精燈火焰_ _箱培養(yǎng)，定期_第二十頁，共二十九頁。三結果與評價正常苗污染苗第二十一頁，共二十九頁。菊花的組織培養(yǎng)再分化 材料性質、營養(yǎng)物質、調節(jié)物質、環(huán)境條件外植體的消毒接種基本原理:細胞的全能性基本過程:脫分化愈傷組織影響因素：操作流程：配制MS培養(yǎng)基培養(yǎng)移栽栽培第二十二頁，共二十九頁。1.植物組織培養(yǎng)過程可歸納為：，對

8、此敘述有錯誤的是（ ） A的再分化過程中，細胞增殖的方式為有 絲分裂 B植物組織培養(yǎng)依據(jù)的原理是細胞的全能性 C過程指植物的營養(yǎng)生長和生殖生長階段 D將經脫分化培養(yǎng)成時，再植上人造種皮可 獲得人工種子D鞏固練習第二十三頁，共二十九頁。2.菊花的組織培養(yǎng)需要嚴格的無菌操作，下列說法正確的是() A培養(yǎng)基應進行干熱滅菌 B剛經過再分化形成根和芽的幼苗可直接移栽到室外土壤 C用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長，一旦感染雜菌則前功盡棄 D將菊花莖段插入時應注意方向，不應倒插，是為了防止雜菌污染C第二十四頁，共二十九頁。三結果與評價污染途徑第二十五頁，共二十九頁。1、外植體帶菌2、培養(yǎng)基及接種器具滅菌不徹底3、接種操作時帶入4、環(huán)境不清潔污染途徑第二十六頁，共二十九頁。 細胞排列_而_規(guī)則,是高度_化的、呈_定形狀態(tài)的_壁細胞。愈傷組織:人參的愈傷組織菠蘿的愈傷組織疏松無液泡無薄第二十七頁，共二十九頁。 這兩組愈傷組織發(fā)育的方向若只由生長素和細胞分裂素比例不同造成，則兩組實驗中激素比例情況可能分別是怎樣的？ 第二十八頁，共二十九頁。內容總結3.1。1。2。5。8。9。再分化：由愈傷組織重新分化出根或芽等器官的過程。環(huán)境因子