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文檔簡介

1、關(guān)于唾液淀粉酶的影響因素第1頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四背景酶具有催化效率高,專一性強(qiáng),作用條件溫和等特點(diǎn),目前在科研、食品加工、飼料生產(chǎn)、醫(yī)療等方面具有廣泛的應(yīng)用。唾液淀粉酶存在于唾液中,是一種有催化活性的蛋白質(zhì),可將淀粉水解為麥芽糖。影響其活性的因素有很多,除了本身結(jié)構(gòu)特點(diǎn)和結(jié)構(gòu)功能特點(diǎn)影響之外,還主要包括PH值、溫度、重金屬離子、抑制劑、激活劑及酶濃度等。(唾液淀粉酶:ptyalin;salivary amylase)實(shí)驗(yàn)背景第2頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四實(shí)驗(yàn)原理麥芽糖、葡萄糖遇碘不顯色淀粉水解產(chǎn)物與碘液反應(yīng)生成不同的顏色反應(yīng)淀粉

2、+碘生成藍(lán)色糊精+碘根據(jù)水解程度,由紫色到橙色,水解越徹底,顏色越淺,直到生成無色糊精(碘不顯色) 第3頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)儀器:控溫水浴鍋、制冰機(jī)、電磁灶、不銹鋼鍋 白瓷板、試管、滴管、移液管(1-2ml)實(shí)驗(yàn)試劑:蒸餾水、1%淀粉液、1%蔗糖、0.1%尿素液 大豆尿素酶溶液、0.1%CuSO4、0.1%HgCl2 0.1%NaCl、1M NaOH、0.5M H2SO4、碘液 各種pH緩沖液:5.0;6.8;8.0第4頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四實(shí)驗(yàn)步驟第5頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四 一

3、 溫度對唾液淀粉酶的影響1.稀釋唾液的準(zhǔn)備。2.準(zhǔn)備好37水浴、冰水浴及沸水浴,點(diǎn)滴板加碘液 各1滴,備用。3.取小試管4支,編號,各加1%淀粉溶液30滴,pH 6.8緩沖液10滴。1號管作對照,2號管放37水浴, 3號管放冰水浴,4號管放沸水浴中,各預(yù)溫10min。4.向1號管加蒸餾水10滴,向2,3和4號管各加稀釋唾 液10滴,混勻放原水浴中。第6頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四5.5min后由2號管每隔一定時(shí)間(1min或2min),取 液1滴于白瓷凹板上做碘反應(yīng),觀察并記錄顏色變 化情況,到碘反應(yīng)接近淺紅色時(shí),取出各管,包括 1號管,分別各取1滴做碘反應(yīng),觀察對

4、比結(jié)果。6.把4支試管放入37水浴下,510min后取出,向各 管內(nèi)加碘液2滴,混勻,觀察結(jié)果。綜合分析所測 三種溫度下的酶活性情況,并以1號管為對照說明 冰水浴及沸水浴兩溫度對酶活性影響的異同。 試管號1234第一次碘反應(yīng)第二次碘反應(yīng)第7頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四 二 pH對唾液淀粉酶的影響第8頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四4.5號管加稀釋唾液10滴,放37水浴中,記錄時(shí)間,每隔1min或2min,由第5號試管中取出1滴溶液做碘反應(yīng),待碘反應(yīng)呈淺紅色或橙黃色時(shí),取出試管記錄保溫時(shí)間。5.14號試管放入37水浴中,向1號管加10滴蒸餾水。

5、以1min間隔,并記錄時(shí)間,依次向24號試管中加入稀釋唾液10滴,搖勻,按照5號管的保溫時(shí)間,以1min間隔,依次取出各管,并立即加碘液2滴,混勻。向1號管加2滴碘液。觀察各管顏色,判斷在同pH條件下淀粉被水解的程度,分析pH對淀粉酶活性的影響,確定其最適pH。時(shí)間(min)試管號12341234第9頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四 三 抑制劑對唾液淀粉酶的影響試劑(滴)管號12341%淀粉30303030pH=6.8緩沖液101010100.1%CuSO4100.1%NaCl10蒸餾水100.1%HgCl210稀釋唾液的準(zhǔn)備取點(diǎn)滴板1個(gè),向白瓷凹板內(nèi)各加碘液1滴,準(zhǔn)備好37水浴取小試管3支,如下表加入試劑第10頁,共12頁,2022年,5月20日,4點(diǎn)41分,星期四5min后由2號試管每隔1min,取液滴于白瓷凹板上做碘反應(yīng),觀察記錄顏色變化情況,至反應(yīng)為淺 色時(shí),取出各試管,分別取1滴做碘反應(yīng),對比結(jié)果。實(shí)驗(yàn)記錄試管號1234反應(yīng)顏色時(shí)間

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