山東大學(xué)2020-2021學(xué)年第1學(xué)期生物技術(shù)《現(xiàn)代分子生物學(xué)》考試試卷

1、山東大學(xué) 20202021 學(xué)年第 學(xué)期 現(xiàn)代分生物學(xué)考試卷（ A ）院/系年級(jí)專業(yè)姓名學(xué)號(hào)考答須1 所有題目答題答必須做在考點(diǎn)發(fā)給的答題紙上，做在本試題冊(cè)上無(wú)效。請(qǐng)考生務(wù)必在答題紙上寫清題號(hào)。 2 評(píng)卷時(shí)不評(píng)閱本題冊(cè)，答題如有做在本試題冊(cè)上而影響成績(jī)的，后果由考生自己負(fù)責(zé)。3 答題時(shí)一律使用、黑色墨水筆或圓珠筆作答（畫圖可用鉛筆其它筆答題不給分。4 答題時(shí)不準(zhǔn)使用改液等具有明顯標(biāo)記的涂改用品。一 選（ 題，題 分共 20 分。題備項(xiàng)中只一最合意 下列關(guān)于基因表達(dá)調(diào)控的論述正確的是（ A在原核生物中，阻遏物的調(diào)節(jié)功能只能發(fā)生在 RNA 合酶結(jié)合啟動(dòng)子之前B在原核生物中，由激活物調(diào)控的基因往往需

2、要下游調(diào)控因子C腸桿菌的 蛋可以調(diào)控許多個(gè)基因的表達(dá)D核物核糖體蛋白的表達(dá)調(diào)控主要發(fā)生在轉(zhuǎn)錄水平原核生物基因啟動(dòng)子中 區(qū)與35 區(qū)最佳距離是（ 中山大學(xué) 2008 研A BC20bp D0信號(hào)識(shí)別顆粒SRP）的作用是（ 河北大學(xué) 研A指導(dǎo) RNA 拼接 B在蛋白質(zhì)的共翻譯運(yùn)轉(zhuǎn)中發(fā)揮作用C引核糖體大小亞基結(jié)合 D導(dǎo)錄終止蛋白質(zhì)翻譯后的修飾主要包括（A乙?；疊糖基化C酸化D述種修飾 縱子模型可以成功地說明基因錄的調(diào)控機(jī)制，照此假說，實(shí)現(xiàn)對(duì)基因活性起調(diào)節(jié)作用的 是（ A誘導(dǎo)酶B阻遏蛋白C 聚酶DDNA 聚酶以下關(guān)于乳糖操縱子的調(diào)控作用敘述錯(cuò)誤的是（ AcAMP 可與 結(jié)合成復(fù)合物B 復(fù)物合在啟動(dòng)子方

3、第 頁(yè) 共 6 C萄糖充足時(shí)cAMP 水平不高D萄和乳糖并存時(shí)，細(xì)菌優(yōu)先利用乳糖E葡萄糖和乳糖并存時(shí)，細(xì)菌優(yōu)先利用葡萄糖真核基因經(jīng)常被斷開（ A反映了真核生物的 mRNA 是多順反子B因?yàn)榫幋a序列外顯子被非編碼序列內(nèi)含子所分隔C為真核生物的 線性而且被分開在各個(gè)染色體上所以同個(gè)基因的不同部可能分布 于不同的染色體上D明始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物必須被加工后才可被翻譯E表明真核基因可能有多種表達(dá)產(chǎn)物，因?yàn)樗锌赡茉?RNA 加工的過程中采用不同外顯子重 組方式下列哪種是終端分化細(xì)胞？（ A神經(jīng)元B骨髓干細(xì)胞C細(xì)胞D皮胞有關(guān)原核生物 因子，錯(cuò)誤的是（ A是一個(gè)翻譯起始因子B是一個(gè)翻譯延伸因子C與 EF-Tu 的再

4、生D 都確下列有關(guān) 序列的說法，哪個(gè)是正確的？（ ）ASD 序?qū)υ松锖驼婧松锏姆g都是重要的BSD 序相對(duì)于起始密碼子 AUG 而言，是與方向和位置都無(wú)關(guān)C 序列有時(shí)也會(huì)隱藏在 mRNA 的一環(huán)結(jié)構(gòu)中對(duì)翻譯起到抑制作用D核物中的編碼基因的翻譯共同受到一個(gè)上游 SD 列的控制二填題共 5 題每題 分共 10 分）大腸桿菌 合酶 I 酶切后，得到大小片段，其中大片段具_(dá)酶活性酶活 性，小片段具有_酶活性。對(duì)于低豐度 的 cDNA 克隆的分離，一種辦法是構(gòu)建的 cDNA 文，另一種方法是。 在腸桿菌中cAMP 的濃度受到葡萄糖代謝的調(diào)節(jié)如將菌放在缺乏碳源的培養(yǎng)基中培 養(yǎng)，細(xì)胞內(nèi) cAMP 濃就

5、高；如果在含葡萄糖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)cAMP 的度就；果 培養(yǎng)基中只有甘油或乳糖等不進(jìn)行糖酵解途徑的碳源cAMP 的濃度會(huì)_。因此推測(cè)糖酵 解途徑中位于葡磷酸與甘油之間的某些代謝產(chǎn)物是腺苷酸環(huán)化酶活性的抑制劑。 人 X 色體具有一個(gè)重要的基_該基因只在失活的 X 染體上表達(dá)，而不在活性的第 頁(yè) 共 6 X 染體上表達(dá)。在活性 X 染體上該因總_。而失活 X 染體上該位點(diǎn)都 的。失活的 X 染體上其他絕大多數(shù)基因都于關(guān)閉狀態(tài) 序都呈高度_。 RNA 分結(jié)氨基酸和識(shí)別 mRNA 的個(gè)結(jié)構(gòu)區(qū)域分別稱為和。三是題共 5 題每題 分共 10 分。確用 T 表示，誤用 F 表）根據(jù)某一感興趣蛋白質(zhì)的序列、抗原

6、性以及配基結(jié)合性質(zhì)制備探針，可 文篩選到相 應(yīng)的基因。（ ）華南理工大學(xué) 研基因工程的一個(gè)必需步驟是利用限制性內(nèi)切核酸酶切割目的基因使其產(chǎn)生黏性末，然后連 接到載體上。（ ）四大學(xué) 2007 研在真核生物中，雙鏈 DNA 的換是一種普遍現(xiàn)象，而在原核生物中，雙鏈 的組交換 是很少見的。（ ）阻遏作用和誘導(dǎo)作用的解釋都是以乳糖操縱子學(xué)說為基礎(chǔ)。（ ）真核生物基因表達(dá)的調(diào)控單位是操縱子。（ ）四簡(jiǎn)題共 5 題每題 分共 30 分）舉例說明什么是 C 悖論。闡述同源重組的機(jī)理。說明基因克隆的一種方法。怎樣將一個(gè)平末端 片插入到 限制點(diǎn)中去？為什么被 RNA 聚酶識(shí)別的啟動(dòng)子不常見？五論題共 2 題每

7、題 分， 分）你對(duì)應(yīng)用 RACE 技克 的 末端和 3末端的原理有怎樣的了解？東師范大學(xué) 研試述 的要理化性質(zhì)。第 頁(yè) 共 6 山東大學(xué) 20202021 學(xué)年第 學(xué)期 現(xiàn)代分生物學(xué)考試卷（ A ）標(biāo)準(zhǔn)答案一 單選題共 10 題每 分共 分。題備項(xiàng)，有個(gè)符題意CBBDBDAADC二填題共 5 題每題 分共 10 分）聚合；3外切；5外切富含目的基因序列；扣除雜交低；很高Xist甲基化；去甲基化；甲基化受體臂；反密碼子臂三是題共 5 題每題 分共 10 分。確用 T 表示，誤用 F 表）FFTTF四簡(jiǎn)題共 5 題每題 分共 30 分） 值一種生物的單倍體基因組的 DNA 量。它是每一種活生物的一

8、個(gè)性質(zhì)。C 悖論指物種的 與生物結(jié)構(gòu)或組成的復(fù)雜性或生物在進(jìn)化上所處地位的高低不一致的現(xiàn) 象， 值其進(jìn)化復(fù)雜性之間無(wú)嚴(yán)格對(duì)應(yīng)關(guān)系?；蚪M中編碼序列的選擇壓力大，而真核物中 不編碼蛋白的序列很多，發(fā)生變異的概率增加，因此基因組大小會(huì)出現(xiàn)很大的變化，在長(zhǎng)期的 化過程中，基因組的大小不能完全代表生物進(jìn)化程度。舉例如下：人類和兩棲類有非常接近的 值表明并非越高等的生物遺傳復(fù)雜性越高。兩棲 類生物中最小的基因組不足， ，最大的則達(dá) ，蠅和果蠅，二者的 C 值差近 6 倍則表明表 現(xiàn)復(fù)雜度沒有明顯變化的一定物種中 值卻有很大變化。同源重組是指發(fā)生在 的源序列之間的重組，真核生物的非姐妹染色單體的交換，細(xì)菌

9、 的轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和接合，噬菌體的重組等都屬于這種類型。同源重組要求較大的 DNA 片進(jìn)行交第 頁(yè) 共 6 換，它們的序列相同或接近相同。同源重組的機(jī)理是：（1兩個(gè)雙鏈 分子配對(duì)，同源區(qū)發(fā)生鏈的斷裂；（2斷開的單鏈交叉連接，形成異源雙鏈 ；（3分支點(diǎn)遷移：兩個(gè)雙螺旋形成的交叉連接以拉鏈?zhǔn)叫?yīng)擴(kuò)散，即鏈交換沿雙鏈滑動(dòng)，形成 異源雙鏈區(qū)的雜種 長(zhǎng)片段；（4Holliday 中體的形成；（5連接分子的拆分：根據(jù)切開方向Holliday 中體的拆分可產(chǎn)生兩種螺旋，親體雙螺旋和重 組雙螺旋。無(wú)論哪種拆分方式，鏈交換后總會(huì)在兩條 分上留下一段異源雙鏈區(qū)，但側(cè)翼 區(qū)域的重組過程不一定會(huì)同時(shí)發(fā)生?；蚩寺∈?年代

10、發(fā)展起的一項(xiàng)具有革命性的研究技術(shù)，可概括為分、切、連、轉(zhuǎn)、選。 最終目的在于通過相應(yīng)技術(shù)手段，將目的基因?qū)爰闹骷?xì)胞，在宿主細(xì)胞內(nèi)目的基因被大量的 制。基因克隆的方法有多種，常見的基因克隆的方法有：基因捕獲技術(shù)，功能克隆，定位克隆，差 克隆等。其中差異克隆的方法如下：差異克隆是利用來(lái)源不同 DNA 之的表現(xiàn)度差來(lái)分離差異表達(dá)基因的功能克隆方法。在任何 組織中都表達(dá)的基因是管家基因在多數(shù) cDNA 文庫(kù)中都出現(xiàn)用個(gè)來(lái)源的 cDNA 去第二 個(gè)來(lái)源中共同的 RNA，下獨(dú)特的 RNA 用文庫(kù)構(gòu)建。將一個(gè)平末端 片段插入到 限制位點(diǎn)中，操作步驟如下：（1將平末端片段利用甲基化酶處理，保護(hù)其中的 Eco

11、R識(shí)別序列（如果平末端序列中不含有 EcoR位點(diǎn)，此步驟省略）；（2）化學(xué)合成一些長(zhǎng)為 10bp 含 別位點(diǎn)的短的 段，然后與帶克隆片段兩端連 接起來(lái)；（3利用 工割該片段，產(chǎn)生帶有 EcoR黏性末端的片段；第 頁(yè) 共 6 （4通過 連酶的作用，將處理后的片段插入到 制位點(diǎn)中。被 RNA 聚酶識(shí)別的啟動(dòng)子不常見的原因如下（1RNA 聚酶負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄一類具有轉(zhuǎn)錄物不編碼蛋白質(zhì)和基因通常以多拷貝存在兩種特征基 因。（2RNA 聚酶負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄的基因有 5SrRNA 和 tRNA 基。與其他基因的啟動(dòng)子不同，在研 究 的基因 5端序列時(shí)發(fā)現(xiàn)這類基因的啟動(dòng)子位于基因的內(nèi)部基因的前 50 對(duì)苷 酸完全缺失轉(zhuǎn)錄起

12、始毫無(wú)影樣地 以序列的失對(duì)轉(zhuǎn)錄起始也沒有影響此 50 到 間的序列為 5SrRNA 基的動(dòng)子。（3更少見的是，tRNA 因的啟動(dòng)子被分成 A B 兩分，它們之間的序列缺失不影響啟動(dòng) 子的效率。五論題共 2 題每題 分， 分） 全是 ，文名稱是 cDNA 末快速擴(kuò)增法RACE 是 于從已知 cDNA 片擴(kuò)全長(zhǎng)基因的方法，根據(jù)已知序列設(shè)計(jì)基因片段內(nèi)部特異引物，由該片段 向外側(cè)進(jìn)行 PCR 擴(kuò)得到目的序列。 技在已知 序的基礎(chǔ)上克隆 端或 3端 的缺失序列很程度上依賴 接酶連接和寡聚帽子的快速擴(kuò)增于增 5端的方法 稱為 ，用于擴(kuò)增 3端的稱為 。理如下：（15RACE 的理以 5端 RNA 寡接頭的

13、部分序列和基因特異的 3端反向引物進(jìn)行 PCR 擴(kuò)得基因的 5 端序列。在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，用已知基因片段內(nèi)部特異性引物）起始 cDNA 第條鏈的合成。用 RNase 合物降解模板 mRNA 并化已合成的 的一條鏈。用末端轉(zhuǎn)移酶在 鏈 加入連續(xù)的 dCTP，形 oligo（）巴。以連有 oligo（）錨定引物 和因片段內(nèi)部特異的引物 進(jìn)巢式 擴(kuò)增，以 期得到目的基因 5端片段。（23RACE 的理以 5端基因特異的引物和 3端寡 下部分序列為引物進(jìn)行 PCR 擴(kuò)得因的 3端序第 頁(yè) 共 6 列。在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下，以連有可以和 mRNA3多核苷酸末端配對(duì)的 （dT）的錨定引物 起 cDNA 第

14、條鏈的合成。用 RNase 解模板 mRNA用錨定引物 AP 和因片段內(nèi)部特異引物 進(jìn) PCR 增得目的基因的 3端片段并 可用巢式 PCR 的法繼續(xù)進(jìn)行測(cè)和擴(kuò)增。DNA 的要理化性質(zhì)如下：（1核酸的帶電荷性質(zhì)無(wú)論是 還 ，苷酸鏈內(nèi)既有酸性的磷酸基又有堿性的含氮雜環(huán)堿基，因此核酸是 兩性電解質(zhì)。由于磷酸基的酸性較強(qiáng)，核酸通常表現(xiàn)為酸性。在中性或堿性溶液中，核酸帶負(fù)電荷，在外加電場(chǎng)作用下向陽(yáng)極移動(dòng)。核酸的帶電荷性質(zhì)可用于分離分子質(zhì)量大小不同的核酸。帶負(fù)電荷的核酸與帶正電荷的金屬 子成鹽，在有乙醇或異丙醇存在時(shí)核酸即可從溶液中沉淀析出。常用氯化鈉、乙酸鈉、乙酸鉀或乙酸銨等鹽溶液來(lái)制備核酸。（2核酸

15、的高分子性質(zhì)核酸是分子質(zhì)量很大的高分子化合物，因此核酸溶液具有較大的黏性。核酸溶液的黏性與分子的不對(duì)稱性有關(guān)，分子不對(duì)稱性愈大，其黏度也就愈大，不規(guī)則分子 球形分子溶液的黏度大，線性分子溶液的黏度更大。DNA 分的長(zhǎng)度與其直徑之比可達(dá) ，因此極稀的 溶也有較大的黏度。RNA 溶的黏度較 小。當(dāng)核酸溶液在受熱或酸堿等素作用下發(fā)生變性時(shí)，分子不對(duì)稱 性變小，溶液黏度下降。因此可用黏度測(cè)定作為 DNA 變的標(biāo)。（3核酸的紫外吸收第 頁(yè) 共 6 核酸分子的堿基中含有的共軛雙鍵具有吸收紫外線的性質(zhì)。蛋白質(zhì)的最大吸收波長(zhǎng)為 ，核酸的最大紫外吸收波長(zhǎng)為 。利用核酸的紫外吸收特性可鑒別核酸樣品中的蛋白質(zhì)雜質(zhì)，對(duì)核酸進(jìn)行定性、定量分析。也 以利用核酸的最大紫外吸收受分子中間結(jié)構(gòu)影響極大的特性研究核酸的變性。（4核酸的變性和復(fù)性核酸的變性是指在極