毒理學(xué)專題2課件

1、第二章 化學(xué)物的致突變作用第一節(jié) DNA的損傷第二節(jié) DNA的修復(fù)第三節(jié) 誘變試驗(yàn)第一節(jié) DNA的損傷一、基因的結(jié)構(gòu)與功能1、DNA的結(jié)構(gòu) DNA的一級、二級、三級結(jié)構(gòu) DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu) DNA的超螺旋結(jié)構(gòu) DNA的三股螺旋結(jié)構(gòu)第一節(jié) DNA的損傷一、基因的結(jié)構(gòu)與功能 2、基因的調(diào)控 轉(zhuǎn)錄前調(diào)控 轉(zhuǎn)錄后調(diào)控 翻譯的調(diào)控 翻譯后的調(diào)控第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷 DNA損傷：是指在某些因素的作用下，DNA的結(jié)構(gòu)和功能發(fā)生改變，阻礙DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。包括： 基因突變?nèi)旧w畸變DNA鏈斷裂DNA-DNA交聯(lián)和DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián)第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷 1、基因突變 0

2、.2um 4.7106bp 自發(fā)突變和誘發(fā)突變 生物體內(nèi)正常的代謝物和環(huán)境因素的自然本底值均能引起DNA損傷，他所引起的突變?yōu)樽园l(fā)突變第一節(jié) DNA的損傷 點(diǎn)突變和移碼突變 同義突變、錯(cuò)義突變和無義突變 同義突變：如UUA、UUG、CUU、CUC、CUA、CUG均代表亮氨酸，如UUA中的A被G置換，遺傳信息的含義未改變，這就叫同義突變二、DNA的化學(xué)損傷 1、基因突變第一節(jié) DNA的損傷 錯(cuò)義突變：指堿基的突變使密碼子的堿基組成發(fā)生改變，且導(dǎo)致遺傳信息的含義改變，如CUA中的C被G轉(zhuǎn)換，則原代表亮氨酸的變成了頡氨酸 無義突變：指堿基的突變使代表氨基酸的密碼子變?yōu)殡逆満铣傻慕K止密碼子，如賴氨酸A

3、AG中的C被G轉(zhuǎn)換，則原代表亮氨酸的變成了頡氨酸第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷 2、染色體畸變 染色體數(shù)目的異常 染色體結(jié)構(gòu)的異常第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷 3、DNA鏈斷裂 單鏈斷裂（single strand breakage,SSB) 雙鏈斷裂（double strand breakage,DSB)第一節(jié) DNA的損傷二、DNA的化學(xué)損傷 、DNA-DNA交聯(lián)和DNA-蛋白質(zhì)交聯(lián) DPC（DNA-protein crosslinks）第二節(jié) DNA的修復(fù)二、堿基切除修復(fù) 尿嘧啶或烷化的堿基-N-糖基化酶-排除異常堿基-去嘌啉或嘧啶的位點(diǎn)-核酸內(nèi)切酶-磷酸二酯鍵斷裂

4、-核酸外切酶-DNA修復(fù)合成三、核苷酸切除修復(fù) 核酸內(nèi)切酶-斷裂-核酸外切酶-切除損傷部位-DNA修復(fù)合成-DNA連接酶連接第二節(jié) DNA的修復(fù)四、復(fù)制后DNA修復(fù) 應(yīng)急修復(fù)或SOS修復(fù)五、損傷的DNA復(fù)制六、錯(cuò)配修復(fù) 5-甲基胞嘧啶殘基脫氨基形成胸腺嘧啶第三節(jié) 誘變試驗(yàn) 2、成套試驗(yàn)設(shè)計(jì)的原因 化學(xué)毒物的種類和結(jié)構(gòu)不同 化學(xué)毒物的致突變作用機(jī)制不同 化學(xué)毒物的致突變性有強(qiáng)弱之分第三節(jié) 誘變試驗(yàn) 3、成套試驗(yàn)的選擇原則 包括每一類型的遺傳學(xué)終點(diǎn) 應(yīng)盡量包括多種進(jìn)化程度不同的物種 體內(nèi)試驗(yàn)與體外試驗(yàn)結(jié)合 生殖細(xì)胞與體細(xì)胞結(jié)合第三節(jié) 誘變試驗(yàn) 4、觀察方法的新進(jìn)展 轉(zhuǎn)基因小鼠致突變系統(tǒng) Big Blue Mouse,Muta Mouse 微核自動(dòng)化檢測技術(shù) 熒光原位雜交技術(shù)第三節(jié) 誘變試驗(yàn)二、誘變試驗(yàn)中的一些問題 1、陰性和陽性對照的設(shè)立 陰性對照 陽性對照第三節(jié) 誘變試驗(yàn)二、誘變試驗(yàn)中的一些問題 2、體外試驗(yàn)的活化系統(tǒng) 哺乳動(dòng)物細(xì)胞介導(dǎo) 肝S9 純化酶和基因工程第三節(jié) 誘變試驗(yàn) 致癌物： 遺傳毒性致癌物 非遺傳毒性致癌物 遺傳毒性非致癌物 非遺傳毒性非致癌物 二、誘變試驗(yàn)中的一些問題第三節(jié) 誘變試驗(yàn)4、試驗(yàn)結(jié)果在毒理學(xué)安全性評價(jià)中的作用致突變試驗(yàn)的質(zhì)量控制： 設(shè)立陰性與陽性對照組 盲法觀察 資料的統(tǒng)計(jì)分析 結(jié)果的重現(xiàn)性二、誘變試驗(yàn)中的一些問題