PCR實(shí)驗(yàn)室報(bào)批細(xì)節(jié)、注意事項(xiàng)、常見(jiàn)問(wèn)題問(wèn)答

1、時(shí)間：二 時(shí)間：二 O 二一年七月二十九日時(shí)間：二 時(shí)間：二 O 二一年七月二十九日?qǐng)?bào) 批 細(xì) 節(jié)之答祿夫天創(chuàng)作時(shí)間：二O 二一年七月二十九日時(shí)間：二O 二一年七月二十九日1、技術(shù)檔案：技術(shù)人員簡(jiǎn)歷表、培訓(xùn)檔案、要求有實(shí)質(zhì)性文件如每人的學(xué)歷證書(shū)、上崗證、科研工效（課題）、技術(shù)文章、獲獎(jiǎng)證書(shū)等的復(fù)印件2、儀器檔案：實(shí)驗(yàn)室一切儀器的購(gòu)買、使用、校正、放置地址、出廠編號(hào)、說(shuō)明書(shū)復(fù)印件等計(jì)需出具計(jì)量局校正陳說(shuō)文件（可每種只校正一套作為標(biāo) 準(zhǔn)）.擴(kuò)增儀需有儀器廠家專業(yè)技術(shù)人員維持校正陳說(shuō) ,和校正后的參數(shù).加樣器的出廠編號(hào)、使用時(shí)間、校正記錄.5700 維持后驗(yàn)證記錄用同一公司或校準(zhǔn)試劑或用自制質(zhì)控血清

2、并且記錄數(shù)值3、其他細(xì)節(jié):垃圾處治：按生物污染性制品,交醫(yī)院統(tǒng)一處治. 儀器簡(jiǎn)單把持流程標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟筆、槍頭盒等一些小物品都要標(biāo)明分區(qū).儀器的申請(qǐng)、推銷、使用、驗(yàn)證法式樣本收集（針關(guān)于臨床醫(yī)護(hù)人員）、運(yùn)輸、收集法式樣本的唯一編號(hào)原則應(yīng)區(qū)分開(kāi)分歧天、分歧種類的標(biāo)本 始標(biāo)本（原則上至少保管一周）檢測(cè)結(jié)果的保管、備份記錄、質(zhì)控記錄保管 ,除電腦記錄外應(yīng)有相應(yīng)的手抄記錄（類似于基因日檢測(cè)統(tǒng)計(jì)表類型的）. 埋怨記錄應(yīng)有時(shí)間、事件（項(xiàng)目）、接待人、處治方法、處治結(jié)果、處治人簽字確認(rèn)注 意 事 項(xiàng)1、回答任何問(wèn)題都應(yīng)與自己寫(xiě)的 SOP 文件相一致.寫(xiě)你所做的, 做你所寫(xiě)的.2、SOP 文件不能寫(xiě)的太虛,無(wú)法

3、做到的工具不要寫(xiě),比如公司版的SOP 文件里的加樣器的校準(zhǔn)一般實(shí)驗(yàn)室就做不到.模棱兩可也不要寫(xiě),比如消毒時(shí)間一到兩小時(shí)不能這樣寫(xiě),幾多就是幾多.3、處治標(biāo)本要在生物平安柜內(nèi),而加樣則在柜外.4、各區(qū)門口要貼有各區(qū)的工作制度,限入標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟.還要準(zhǔn)備兩個(gè)掛號(hào)本,一個(gè)來(lái)記錄紫外消毒,一個(gè)來(lái)記錄工作人員收支.區(qū)內(nèi)還要有一個(gè)工作記錄本 ,用來(lái)記錄各區(qū)每天的工作內(nèi)容 ,便于監(jiān)測(cè)每天的工作全進(jìn)程.5、每把槍的用途要清楚,不能弄亂.比如稀釋陽(yáng)模的槍和處治標(biāo)本的槍不成混用.6、普通離心機(jī)處治分泌物標(biāo)本時(shí)應(yīng)在離心后靜置 20 分鐘才華開(kāi)蓋.(許斌這樣認(rèn)為)7、一切儀器、設(shè)備都要有檔案卡.8、一切的清潔消毒要在

4、實(shí)驗(yàn)結(jié)束后馬上進(jìn)行,尤其是儀器、設(shè)備. 像擴(kuò)增儀,每天都要清潔,做完的反映管決關(guān)于不能留在樣本槽內(nèi).9、各區(qū)的拖把、抹布不得混用,標(biāo)識(shí)表記標(biāo)幟清楚.10、生物防護(hù)意識(shí)要強(qiáng),手套要隨時(shí)更換.生物防護(hù)平安的保證要從三個(gè)方面:制度、硬件、意識(shí).11、爆管如何處治:立即停滯實(shí)驗(yàn),水浴里的水要倒失落,沖刷.一切可能污染的處所要用消毒液擦洗,紫外照射,通風(fēng)排風(fēng).12、各區(qū)應(yīng)有日常工作核查表,做為每天工作記錄的填補(bǔ).13、各區(qū)要有泡有消毒液的生物污物桶,用來(lái)處治生物垃圾.14、驗(yàn)收組帶來(lái)的標(biāo)本要按平時(shí)看待臨床標(biāo)本一樣處治,要有接受記錄,結(jié)果掛號(hào)等.15、拒絕德律風(fēng)或代領(lǐng)等非正常方式發(fā)放陳說(shuō)單.16、寄存標(biāo)本

5、的冰箱要上鎖,鑰匙及電腦資料的密碼要由本科室人員專人保管.17、陳說(shuō)單上要注明試劑的檢測(cè)下限 ,不能寫(xiě)成參考范圍.除有把持者,還要有核校者,且兩者姓名除電子打印還要用手簽.定量結(jié)果不能有陰陽(yáng)性提示,只能報(bào)數(shù)值.18SOPPE57001530為 80.19SOP醫(yī)院申報(bào)實(shí)驗(yàn)室注意事項(xiàng) 1,“你們的冰箱的鐵鏈我可以從底下抽上來(lái),實(shí)驗(yàn)室能做好保密性嗎？可以的,你們能做到就行,注意保密！2,實(shí)驗(yàn)室需要配置冷凍離心機(jī),生物平安柜,如果做 HCV 時(shí),注意重新添置新實(shí)驗(yàn)室.3,生物防護(hù)中是否有銳器的防護(hù)注意事項(xiàng)？4,實(shí)驗(yàn)室的溫濕度計(jì)的放置位置？ 最好放在實(shí)驗(yàn)室內(nèi).5,實(shí)驗(yàn)室中如何做好離心管克制物的檢測(cè)？

6、而非爆管、裂管的檢測(cè)！6,在做 HCV 時(shí)規(guī)則從抽血化驗(yàn)到送達(dá)實(shí)驗(yàn)室要幾個(gè)小時(shí)要有明規(guī)則！3 小時(shí)左右！7,溶血標(biāo)本有何具體的判斷標(biāo)準(zhǔn)？脂血呢？實(shí)驗(yàn)室末次會(huì)議的提問(wèn)1,你們單元（達(dá)安）HBV40升+40 微升提取液處治,待放置過(guò)夜后,第二天加樣時(shí),有的標(biāo)本特難取樣,有何處治法子？2,實(shí)驗(yàn)室中垃圾你們?nèi)绾翁幹蔚模?,實(shí)驗(yàn)室中陰性標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)后釀成陽(yáng)性你怎么辦？（我們實(shí)驗(yàn)室一共有三管陰性陰性關(guān)于比,第一個(gè)陰性檢測(cè)管是試劑什么都不加 ,直接上機(jī),第二個(gè)陰性檢測(cè)管是試劑中加入在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)翻開(kāi)蓋的離心管帶有蒸餾水的,第三個(gè)陰性檢測(cè)管是與實(shí)驗(yàn)一起提取的陰性血清.）4,實(shí)驗(yàn)中如果陽(yáng)性質(zhì)控,陽(yáng)性梯度,標(biāo)本呈陰性請(qǐng)

7、訣別解釋？5,實(shí)驗(yàn)室必需配置生物平安柜,高速離心機(jī)！臨床基因擴(kuò)增試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收現(xiàn)場(chǎng)問(wèn)卷（口試和/或口試）一. 現(xiàn)有一個(gè)患者向你提出：“我在你們醫(yī)院檢測(cè) HBV （該題主要是考實(shí)驗(yàn)室人員是否知道并且遵守所制定的埋怨處治法式）HBV NAPCR說(shuō)單找到 PCRPCR,HBV NA5107拷貝數(shù)/ml后二周,再檢測(cè)結(jié)果為 3107 拷貝數(shù)/ml,降了很多,但再過(guò)二周檢測(cè),又釀成了 6107 拷貝數(shù)/ml,升高很多,這究竟是怎么回事？”, 如果這個(gè)年夜夫剛好問(wèn)的是你,你怎么辦？并且如何解釋其提出的問(wèn)題？(該題除考實(shí)驗(yàn)室人員是否知道并且遵守所制定的埋怨處治法式外,還要求其關(guān)于特定PCR 試驗(yàn)的批間變

8、異有充沛的認(rèn)識(shí)) 回答思路：這兩題訣別關(guān)于應(yīng)患者和臨床醫(yī)生提出的埋怨.考點(diǎn)為你是否依照所制定的法式來(lái)處治：無(wú)論是患者還是醫(yī)生提出埋怨,我們都應(yīng)該“依照”法式先記錄埋怨人姓名、埋怨內(nèi)容等,然后等問(wèn)題解決后記錄處治結(jié)果等,最后記錄反饋意見(jiàn)等.度欠好還是結(jié)果陳說(shuō)禁絕,醫(yī)生埋怨的是檢測(cè)結(jié)果和臨床診斷不符還是陳說(shuō)發(fā)放不即時(shí),回答的方向都應(yīng)該是：“我們接待他們后 , 先在掛號(hào)表上記錄埋怨的什么什么相關(guān)信息 ,做相應(yīng)處治,解決后記錄處治結(jié)果,最后填反饋表,歸檔總結(jié),跟著以后改進(jìn)等等等等”. 如果題目中呈現(xiàn)要你具體“解釋某某提出的問(wèn)題”時(shí),這時(shí)是PCR異有否充沛的認(rèn)識(shí)：一般 PCR 檢測(cè)試劑盒存在著一定的批間

9、甚至批內(nèi)不同,而且 PCR 檢測(cè)前處治也存在著一定的誤差,分析軟件相關(guān)參數(shù)的選擇也會(huì)使定量結(jié)果發(fā)生變動(dòng),這是方法學(xué)造成的不成防止的事實(shí).同一把持人、同一儀器、同一批號(hào)試劑、同一份標(biāo)本同果存在一定范圍的偏差,一般為一個(gè)數(shù)量級(jí)的拷貝數(shù).5107、107 和 6107 種情況很正常,這說(shuō)明了該病人用藥效果欠安.若定量結(jié)果有 三現(xiàn)有一人打德律風(fēng)到科室,說(shuō)：“我孩子在你們醫(yī)院做了PCRXXX,（該題考的是實(shí)驗(yàn)室人員在患者要求以電子郵件、德律風(fēng)、傳真等方式傳遞陳說(shuō)時(shí),是否能按相應(yīng)的法式去做）回答思路：也是考形式.“關(guān)于這種非正常的陳說(shuō)發(fā)放形式,我們依照法式, 是這樣這樣處治的.”因?yàn)楦鱾€(gè)醫(yī)院實(shí)際情況分歧

10、,所以無(wú)論你怎樣處治,只要法式中體現(xiàn)了關(guān)于患者結(jié)果的保密原則 ,具體細(xì)節(jié)不會(huì)太要求.在法式中按以下幾個(gè)方式寫(xiě)都是可以的：1、我們均不以任何非正常形式發(fā)放陳說(shuō) .（最干脆！就是有點(diǎn)通情達(dá)理,不外關(guān)于我們來(lái)說(shuō)省事）2、實(shí)在有特殊情況,可以德律風(fēng)查結(jié)果,其它發(fā)放形式不成. 提供患者I3、可以經(jīng)過(guò)德律風(fēng)、圖文傳真、電子郵件等形式傳送結(jié)果 , 和上面一樣,需要核實(shí)身份.（最寬松了,不外麻煩了很多）要注意的是：這些情況均應(yīng)明確告知查詢者 ,這幾種非正常形式發(fā)放的陳說(shuō)均僅為臨床提供參考 ,實(shí)驗(yàn)的最終結(jié)果以正式檢測(cè)陳說(shuō)單為準(zhǔn).特殊情況陳說(shuō)發(fā)放后需詳細(xì)掛號(hào),簽署陳“陳說(shuō)的正確發(fā)放”為考核重點(diǎn) ,一般可能還會(huì)引申

11、出“你們是如何發(fā)放檢測(cè)結(jié)果陳說(shuō)？”之類的問(wèn)題,依照法式中寫(xiě)的實(shí)際情況回答就行的了.只要遵循保密原則就OK.最簡(jiǎn)單的無(wú)非把事情都推給醫(yī)院：說(shuō)門診患者陳說(shuō)單送至服務(wù)臺(tái)門診陳說(shuō)發(fā)放處,由那里的醫(yī)生確認(rèn)身份后發(fā)放 .（具體她們是怎么確認(rèn)、確不確認(rèn)這已經(jīng)不關(guān)我們的事了）.形碼（若醫(yī)院采納計(jì)算機(jī)網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)）四現(xiàn)有你科室同事,拿了一份血清標(biāo)本給你,說(shuō)：“這是我一個(gè)熟人的標(biāo)本,他要做 HCV RNA 檢測(cè),剛好他還做生化和免疫檢測(cè),我從生化標(biāo)天職了一些出來(lái),給你做 HCV RNA嗎？為什么？（該題主要是考實(shí)驗(yàn)室人員關(guān)于有關(guān)標(biāo)本的收集法式是否清楚并且遵守）回答思路：?jiǎn)柕搅恕盀槭裁?？”暗示具體考到細(xì)節(jié)了.依照我們的

12、收集法式,做 PCR 尤其是 RNA 項(xiàng)目需要自力取血,不能從其它檢測(cè)的標(biāo)本中分出一些來(lái)做.而且關(guān)于 RNA 標(biāo)本的收集、保管、運(yùn)輸都有嚴(yán)格的要求.集？采血的人員有否經(jīng)過(guò)專門培訓(xùn)？收集的標(biāo)本如何保管？HBV NAPCR（103107 /ml）1Ct回答思路：此為具體問(wèn)題：題目已經(jīng)假設(shè)了方法的定量測(cè)定范圍為 103107 拷貝數(shù)/ml的曲線（S）S,CtHBV NA渡過(guò)年夜,不在檢測(cè)線性范圍內(nèi),應(yīng)該進(jìn)行濃度梯度稀釋（ 1/101/100、1/1000）,重做實(shí)驗(yàn),看哪個(gè)梯度處于線性范圍內(nèi) ,獲得原始濃度乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)即得.若不是特異擴(kuò)增的曲線（也就是罕見(jiàn)的那種前面翹、與閾值線有交點(diǎn)的陰性曲線,

13、計(jì)算機(jī)不會(huì)具體分析,見(jiàn)有交點(diǎn)就給 Ct 值, 而且CtCycle）六在 PCR 檢測(cè)的核酸提取離心中,如發(fā)現(xiàn)有一管離心管呈現(xiàn)破裂,此時(shí)你怎么辦？（該題是考實(shí)驗(yàn)室人員關(guān)于其制定的實(shí)驗(yàn)室及儀器設(shè)備消毒清潔法式是否知道并且遵守）回答思路：依照離心機(jī)的消毒清潔法式：必需先停滯實(shí)驗(yàn),將破裂管密封放入生物垃圾桶,再用 75%酒精擦拭離心室消毒,用移動(dòng)紫外燈照射 3060 分鐘后才華開(kāi)始實(shí)驗(yàn).可以引申出：離心管破裂 ,可能質(zhì)量有問(wèn)題,為防止以后同類事情的發(fā)生,依照耗材質(zhì)檢法式進(jìn)行離心管質(zhì)檢實(shí)驗(yàn) ,若分歧格停滯使用,重新購(gòu)買并且進(jìn)行質(zhì)檢,合格的耗材才華使用.PCRPCRABI 7000原因挪動(dòng)轉(zhuǎn)移到了另一個(gè)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面,實(shí)驗(yàn)室只是將儀器外概況擦了擦,即用于慣例擴(kuò)增檢測(cè)工作 ,你覺(jué)得該實(shí)驗(yàn)室做得關(guān)于嗎？為什 么？（該題是考實(shí)驗(yàn)室人員關(guān)于其制定的 PCR 儀校準(zhǔn)法式是否知道并且遵守）回答思路：考核實(shí)驗(yàn)室人員關(guān)于其制定的 PCR 儀校準(zhǔn)法式是否知道并且遵守. 儀器移動(dòng)應(yīng)該依照法式進(jìn)行校準(zhǔn)后才華重新用于慣例擴(kuò)增檢測(cè)工 7000 型核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)儀為復(fù)雜精密儀器,其校準(zhǔn)工作需由專業(yè)工程師進(jìn)行.實(shí)驗(yàn)室聯(lián)系儀器廠家派技術(shù)人員來(lái)校準(zhǔn)儀器.平時(shí)就算不挪動(dòng)轉(zhuǎn)移儀器 ,實(shí)驗(yàn)室也