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1、實(shí)驗(yàn)名稱:探究純牛奶對(duì)大鼠應(yīng)激性潰瘍的影響年級(jí):班級(jí):姓名:學(xué)號(hào):日期:實(shí)驗(yàn)流程:實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),材料準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì),材料準(zhǔn)備分組分組:大鼠40只,分高劑量組、中劑量組、對(duì)照組和自然組四組,每組10只得出結(jié)論分析:分別計(jì)算四組潰瘍指數(shù)(均值標(biāo)準(zhǔn)差),兩兩做比較觀察:觀察大鼠胃潰瘍情況,按Guth法計(jì)算潰瘍指數(shù)取胃:處死大鼠,將胃取出,沿胃大彎剪開并展平得出結(jié)論分析:分別計(jì)算四組潰瘍指數(shù)(均值標(biāo)準(zhǔn)差),兩兩做比較觀察:觀察大鼠胃潰瘍情況,按Guth法計(jì)算潰瘍指數(shù)取胃:處死大鼠,將胃取出,沿胃大彎剪開并展平應(yīng)激:高劑量組、中劑量組、對(duì)照組均采用束縛水浸法建立應(yīng)激性潰瘍模型,自然組不做處理給藥:采用灌胃法,
2、高劑量組:1.5ml/100g純牛奶中劑量組:1.0ml/100g純牛奶對(duì)照組給:1.5ml/100g生理鹽水自然組:不做處理 探究純牛奶對(duì)大鼠應(yīng)激性潰瘍的影響二、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?應(yīng)激性潰瘍是指在大面積燒傷、嚴(yán)重創(chuàng)傷、休克、敗血癥、腦血管意外和嚴(yán)重心理應(yīng)激(如精神創(chuàng)傷、過度緊張)等應(yīng)激狀態(tài)下所出現(xiàn)的胃、十二指腸黏膜的急性損傷,其主要表現(xiàn)胃及十二指腸黏膜的糜爛、潰瘍、出血1李桂源.病理生理學(xué)M.北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:189。近年來,應(yīng)激性潰瘍的發(fā)病率有增高的趨勢,主要原因是由于重癥監(jiān)護(hù)的加強(qiáng),生命器官的有效支持,以及抗感染藥物的更新,增加了發(fā)生應(yīng)激性潰瘍的機(jī)會(huì)。由于牛奶的營養(yǎng)價(jià)值高且有較好的
3、潤滑特性,一直被廣泛用于潰瘍病的飲食預(yù)防和治療,直到后來研究表明,胃潰瘍病人常飲牛奶不不利于潰瘍愈合,牛奶中含有豐富的蛋白質(zhì)和鈣質(zhì),均能促進(jìn)胃酸分泌,因而不利于潰瘍愈合2張愛軍.胃潰瘍病人的飲食誤區(qū)J.山東食品科技,2001,11:35。目前國內(nèi)關(guān)于牛奶對(duì)應(yīng)激性潰瘍影響作用的研究報(bào)道并不多見,因此,本實(shí)驗(yàn)采用大鼠束縛水浸法復(fù)制應(yīng)激性胃潰瘍模型,觀察純牛奶對(duì)大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的影響作用,旨在為臨床應(yīng)激性潰瘍飲食治療提供理論依據(jù)。1李桂源.病理生理學(xué)M.北京:人民衛(wèi)生出版社,2010:1892張愛軍.胃潰瘍病人的飲食誤區(qū)J.山東食品科技,2001,11:35三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容實(shí)驗(yàn)對(duì)象:SD大鼠40只,體重
4、200240g,雌雄均可。實(shí)驗(yàn)藥品:純牛奶(蒙牛牌250ml裝)、生理鹽水、100g/L的福爾馬林水溶液。實(shí)驗(yàn)器材:手術(shù)器械(鼠固定板、手術(shù)剪、鑷子)、灌胃管、注射器(5ml)、游標(biāo)卡尺。實(shí)驗(yàn)環(huán)境:溫度1825,濕度50%60%,自然通風(fēng)。動(dòng)物分組:將小鼠隨機(jī)分成4組,每組10只,分別為高劑量組、中劑量組、對(duì)照組、自然組,各組編號(hào)110。建立模型:采用灌胃法給藥,高劑量組給l.5ml/100g純牛奶,中劑量組給1.0ml/100g純牛奶,對(duì)照組給1.5ml/100g生理鹽水,高劑量組、中劑量組、對(duì)照組均采用束縛水浸法建立應(yīng)激性潰瘍模型。自然組不做處理。結(jié)果分析:觀察胃粘膜損傷的程度和形態(tài),胃壁
5、按潰瘍或糜爛面積大小給予計(jì)分,損傷分?jǐn)?shù)的判定參考Guth的方法,數(shù)據(jù)以“均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差”表示,采用單因素方差分析(F檢驗(yàn)和q檢驗(yàn))兩兩比較高劑量組、中劑量組、對(duì)照組和自然組的結(jié)果,P0.05表示差異有顯著性3溫瑞興,肖向茜.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)教程M.北京工業(yè)大學(xué)出版社,2014,36-423溫瑞興,肖向茜.藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)教程M.北京工業(yè)大學(xué)出版社,2014,36-42實(shí)施方案灌胃:以左手拇指和食指捏住大鼠耳朵處頭頸部皮膚,其余三指將大鼠背部固定手掌大魚際肌上,使其頭頸部充分伸直(圖1)。右手持灌胃器將灌胃管自口角插入口腔,緊貼上顎,至咽后壁。用灌胃管輕壓大鼠上顎部,使口腔和食管成一直線,再將灌胃管自咽后壁緩緩
6、插入至預(yù)定深度(圖2),如無呼吸困然,即可將溶液注入4林旭,佘菲菲.生物醫(yī)學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)M.北京:科學(xué)出版社,2014:49。給藥劑量見實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。4林旭,佘菲菲.生物醫(yī)學(xué)常用實(shí)驗(yàn)技術(shù)M.北京:科學(xué)出版社,2014:49應(yīng)激:采用束縛水浸法復(fù)制大鼠應(yīng)激性潰瘍。實(shí)驗(yàn)前禁食24h,禁水1h,將四肢及頭部束縛于鼠固定板上,將鼠板垂直浸入(1821)水浴中,水面平胸骨劍突,各組應(yīng)激持續(xù)時(shí)間均為6h。自然組放在相同室溫環(huán)境下,不做應(yīng)激處理。取胃:采用頸椎脫臼法處死大鼠:用鑷子或用左手拇指與食指向下壓住大鼠頭部枕骨處,另一只手抓住鼠尾用力向后拉,使之頸椎脫臼,鼠立即死亡。打開腹腔,暴露鼠胃,將胃幽門口結(jié)扎后
7、取出,置于100g/L福爾馬林水溶液中浸泡。30min后沿胃大彎剪開并展平,用小棉球輕輕將胃粘液及血凝塊擦掉,觀察胃粘膜損傷的程度和形態(tài)。計(jì)算:胃壁按潰瘍或糜爛面積大小給予計(jì)分,損傷分?jǐn)?shù)(潰瘍指數(shù))的判定參考Guth的方法,點(diǎn)狀潰瘍:每3個(gè)點(diǎn)狀潰瘍(粘膜缺損小于1mm或出血性糜爛小點(diǎn),稱點(diǎn)狀潰瘍)計(jì)1分條狀出血:以游標(biāo)卡尺測量潰瘍面的最大長徑和垂直于最大長徑的最大寬徑,寬為1mm者每mm長為1分;2mm寬者每mm長為2分;3mm寬者每mm長為3分5劉立偉,王振軍,高慧英,王新成,王洪海.潰瘍康對(duì)小鼠應(yīng)激性胃潰瘍干預(yù)效果的實(shí)驗(yàn)研究J.泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,28(2):825劉立偉,王振軍,高慧英,王新成,王洪海.潰瘍康對(duì)小鼠應(yīng)激性胃潰瘍干預(yù)效果的實(shí)驗(yàn)研究J.泰山醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2007,28(2):82各組潰瘍指數(shù)分值各組潰瘍指數(shù)分值鼠號(hào) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 評(píng)價(jià)值 標(biāo)準(zhǔn)
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