羅氏試劑盒說明書 T3 11810456001V18

1、11810456001V18三碘甲狀腺原氨酸（Triiodothyronine，T3） Elecsys 和 cobas e 分析儀 5/5 2009-04, V 18 11731360 122 200測試本試劑盒適用的分析儀Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用于體外定量檢測人體血清或血漿中的總T3。Elecsys和cobas e 免疫分析儀的工作原理是電化學(xué)發(fā)光免疫分析“ECLIA”。臨床應(yīng)用三碘甲狀腺原氨酸（T3）是一種作用于各種靶器官的主要甲狀腺激素。T3（3、5、3-三碘酪氨酸）

2、主要是在肝臟內(nèi)由T4經(jīng)酶解脫去5位的碘而生成。因此，血清中T3的濃度更能反映出外周組織的功能狀態(tài)，而非甲狀腺的分泌功能。由T4向T3的轉(zhuǎn)化減少會(huì)導(dǎo)致T3濃度的下降，可見于一些藥物的影響（如丙醇、糖皮質(zhì)類固醇、胺碘酮）以及重癥非甲狀腺疾?。∟TI），也被稱為T3低下綜合征。與T4一樣，99%以上的T3與運(yùn)輸?shù)鞍捉Y(jié)合，但親和力要低10倍左右。1，2，3，4T3檢測可診斷T3型甲亢，甲亢早期的篩查和人為造成的甲狀腺毒癥的診斷。5，6，7ElecsysT3采用競爭法原理和特異性的T3多克隆抗體。使用8-苯基-1-萘磺酸（ANS）釋放內(nèi)源性的T3與添加的生物素化的T3衍生物競爭結(jié)合釕復(fù)合物標(biāo)記抗體的結(jié)合

3、位點(diǎn)。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三聯(lián)吡啶釕檢測原理競爭法，總檢測時(shí)間：18分鐘第一次孵育：30l樣本和釕復(fù)合物標(biāo)記的特異性抗T3抗體一起孵育；樣本中與結(jié)合蛋白結(jié)合的T3經(jīng)ANS作用而釋放。第二次孵育：添加生物素化的T3和包被鏈霉素的磁珠微粒，前者將與未結(jié)合的標(biāo)記抗體結(jié)合，形成抗體-半抗原復(fù)合物。復(fù)合物通過生物素、鏈霉素之間的反應(yīng)結(jié)合到微粒上。將反應(yīng)液吸入測量池中，通過電磁作用將磁珠吸附在電極表面。未與磁珠結(jié)合的物質(zhì)通過ProCell被去除。給電極加以一定的電壓，使復(fù)合體化學(xué)發(fā)光，并通過光電倍增器測量發(fā)光強(qiáng)度。Elecs

4、ys軟件自動(dòng)通過定標(biāo)曲線計(jì)算得到檢測結(jié)果。試劑工作溶液M包被鏈霉素的磁珠微粒（透明瓶蓋），每瓶12ml；包被鏈霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐劑。R1釕復(fù)合物標(biāo)記的Anti-T3抗體（灰色瓶蓋），每瓶16ml：釕復(fù)合物標(biāo)記的多克隆Anti-T3抗體（羊），75ng/mL；ANS 0.8 mg/Ml;磷酸鹽緩沖液100 mmol/L，Ph7.4; 防腐劑。R2 生物素化的T3（黑色瓶蓋），每瓶16ml：生物素化的T3 3ng/mL；磷酸鹽緩沖液100 mmol/L，pH7.4; 防腐劑。警告和注意事項(xiàng)僅用于體外診斷。在使用本試劑盒時(shí)必需遵循所有試驗(yàn)室試劑操作的注意事項(xiàng)。所有廢棄物必需按照

5、當(dāng)?shù)胤ㄒ?guī)進(jìn)行處置。專業(yè)人員可要求獲得安全數(shù)據(jù)報(bào)告。避免試劑和樣本（樣本、定標(biāo)液和質(zhì)控品）產(chǎn)生氣泡。試劑處理試劑盒（M,R1和R2）為即用型，不能分開使用。試劑相關(guān)信息可以通過試劑條形碼閱讀獲取。儲(chǔ)存及穩(wěn)定性存放于28。請(qǐng)垂直擺放Elecsys T3試劑盒，確保儀器的自動(dòng)攪拌器能夠完全混勻磁珠微粒。穩(wěn)定性：未開封試劑，28有效期內(nèi)均可使用開封試劑，2812周放置分析儀MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上8周放置分析儀Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置分析儀Elecsys 1010上8周（試劑交替放置于冰箱和20-25的分析儀中，持續(xù)

6、開蓋的情況下至多20小時(shí)）樣本的采集和準(zhǔn)備下僅以下羅列的樣本類型通過測試并符合檢測要求。血清樣本須用標(biāo)準(zhǔn)試管或有分離膠的真空管收集。肝素鋰、鈉、銨，K3-EDTA，枸櫞酸鈉，氟化鈉/草酸鉀抗凝的血漿都適用。標(biāo)準(zhǔn)：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。穩(wěn)定性： 2-8可保存7天；-20可保存1個(gè)月。4一次凍融。選擇合適的試管進(jìn)行不同類型樣本的采集，不是所有的試管均可用于檢測。不同廠商的樣本采集系統(tǒng)可能含有不同的物質(zhì)，某些情況下會(huì)影響檢測結(jié)果。如果使用原始管進(jìn)行檢測（樣本前處理系統(tǒng)）時(shí)，應(yīng)遵循生產(chǎn)商所提供的指導(dǎo)。有沉淀和冰凍的樣本檢測前必須先作離心處理。避免使用熱滅活的樣本。添加

7、疊氮化合物的樣本和質(zhì)控品均不能使用。檢測前，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品須室溫平衡(20-25)。由于蒸發(fā)因素的影響，樣本、定標(biāo)液及質(zhì)控品在分析儀上的檢測必須2小時(shí)內(nèi)完成。提供的物品參閱“試劑工作溶液”章節(jié)。需要的物品（未提供）貨號(hào)11731548122, T3 CalSet, 規(guī)格4 x1 ml貨號(hào)11731416122, PreciControl Universal，規(guī)格2 x3 ml，分別為PreciControl Universal 1和2或貨號(hào)11731416190, PreciControl Universal，規(guī)格2 x3 ml，分別為PreciControl Universal 1和2

8、實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)設(shè)備Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析儀Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析儀所需材料：貨號(hào)11662988122, ProCell, 6 x 380 mL ,系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL,測量池洗液 貨號(hào)11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL 附加洗液貨號(hào)11933159001, SysClean 適配器 貨號(hào)11706829001, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反應(yīng)管或者貨

9、號(hào)11706802, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反應(yīng)管貨號(hào)11706799001, Elecsys 2010 分析吸頭, 30 x 120 移液管吸頭 MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析儀所需材料：貨號(hào)04880340190,ProCell M, 2 x 2 L 系統(tǒng)緩沖液貨號(hào)04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L測量池洗液 貨號(hào)03023141001, PC/CC杯, 12個(gè)用于在檢測前預(yù)熱Procell M及Cleancell M。貨號(hào)03005712190,ProbeWash M, 12 x 70

10、 mL 清洗液，用于在檢測完畢后或更換試劑時(shí)清洗試劑針。貨號(hào)12102137001,反應(yīng)杯/吸頭 組合裝,84反應(yīng)杯/吸頭 組合裝48盒,廢物袋 貨號(hào)03023150001, WasteLiner,廢物袋 貨號(hào)03027651001,系統(tǒng)清潔適配器 M所有分析儀需要：貨號(hào)11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系統(tǒng)清洗液 檢測要優(yōu)化檢測性能，請(qǐng)遵照本說明書中有關(guān)分析儀的相關(guān)指導(dǎo)，并參照分析儀操作手冊。試劑使用前分析儀自動(dòng)攪拌磁珠微粒，使其處于懸浮狀態(tài)。試劑相關(guān)信息可通過條形碼自動(dòng)讀取，在特殊情況下，分析儀無法自動(dòng)讀取條碼信息時(shí)，請(qǐng)輸入條碼標(biāo)簽上的15

11、位數(shù)字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析儀：將冷藏試劑室溫平衡至20C左右，放置分析儀的試劑盤（20C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。分析儀能自動(dòng)調(diào)節(jié)試劑溫度和開、關(guān)各試劑盒瓶蓋。Elecsys 1010 分析儀: 將冷藏試劑室溫平衡至20-25C左右，放置分析儀的試劑盤（20- 25C）內(nèi)。避免泡沫產(chǎn)生。使用前后手動(dòng)開關(guān)試劑盒瓶蓋。使用后保存于2-8C冰箱。定標(biāo)溯源性：Elecsys T3 檢測可溯源至稱量摻入法參考標(biāo)準(zhǔn)。每套Elecsys T3試劑的條碼標(biāo)簽上均含有其批號(hào)特異的定標(biāo)信息。使用Elecsys T3 定標(biāo)液可調(diào)整定標(biāo)曲線。定校頻率

12、：新批號(hào)試劑必須進(jìn)行定標(biāo)（新試劑盒在分析儀上放置不能超過24小時(shí)）。以下情況建議重新進(jìn)行定標(biāo)：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析儀:使用同一批號(hào)試劑，1月后（28天）7天后（同一試劑盒在分析儀上使用）Elecsys 1010 分析儀:每盒試劑7天后（室溫 20-25C）3天后（室溫 25-32C）所有儀器根據(jù)需要：如失控。質(zhì)控室內(nèi)質(zhì)控可使用Elecsys PreciControl Universal 1和2。也可以使用其他合適的質(zhì)控品。各濃度質(zhì)控至少每24小時(shí)內(nèi)檢測一次，每次更換試劑盒或定標(biāo)后也須進(jìn)行質(zhì)控。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室可根據(jù)各自的情況

13、設(shè)定合適的控制限和質(zhì)控周期。質(zhì)控值必須處于規(guī)定的控制限內(nèi)。若失控每個(gè)試驗(yàn)室必須采取相應(yīng)的糾正措施。計(jì)算儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算每個(gè)樣本中的分析物濃度，單位是nmol/L，ng/mL或ng/dL。轉(zhuǎn)換因子:nmol/L0.651=ng/Mlnmol/L65.09998=ng/dLng/mL1.536nmol/L 干擾因素檢測結(jié)果不受黃疸（膽紅素599mol/L或35 mg/dL）, 溶血（血紅蛋白1.2mmol/L或 2.0g/dL）, 脂血(脂肪乳劑 1800mg/dL)和生物素40.9 nmol/L或 5mg/天），必須在末次生物素治療8小時(shí)后采集樣本。濃度高達(dá)1500 IU/ml的類風(fēng)濕因子和血液透

14、析樣本均對(duì)檢測無影響。體外對(duì)26種常用藥物進(jìn)行試驗(yàn)未發(fā)現(xiàn)會(huì)影響檢測結(jié)果。胺碘酮治療能夠?qū)е耇3濃度的降低。苯妥英、苯基丁氮酮和水楊酸鹽類能夠?qū)е陆Y(jié)合蛋白結(jié)合的T3釋放，因此導(dǎo)致總T3濃度的降低，但FT3水平正常。8甲狀腺激素的自身抗體能夠干擾檢測。結(jié)合蛋白異常，如FDH患者 (家族性異常白蛋白高甲狀腺素血癥)在特定條件下可能會(huì)導(dǎo)致檢測值偏離預(yù)期結(jié)果。9病理性的結(jié)合蛋白濃度（TBG、白蛋白）能夠?qū)е耇3水平超出正常范圍，盡管其甲狀腺功能代謝是正常的（如NTI病人、妊娠、口服避孕藥）。這些病例需要檢測FT3和FT4的水平。少數(shù)病例中極高濃度的特異性被分析物抗體、鏈霉素抗體或釕抗體會(huì)影響檢測結(jié)果。通

15、過適宜的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)可減少這些干擾。作為診斷指標(biāo)，必須結(jié)合患者病史，臨床檢查和其他臨床資料來綜合評(píng)估檢測結(jié)果。檢測范圍0.300-10.00 nmol/L或O.195-6.51 ng/mL（通過最低檢出限和廠商定標(biāo)曲線的最高值確定）。低于檢出限的值報(bào)告50.00 nmol/L或6.51 ng/mL。稀釋檢測范圍較寬，標(biāo)本不需要稀釋。期望值1.3-3.1 nmol/L或0.8-2.0 ng/mL：甲狀腺機(jī)能正常該期望值通過檢測514例健康個(gè)體的T3，取2.5th和97.5th的百分位點(diǎn)值獲得。 注:MCE Elecsys2010，1996，校驗(yàn)1998年第一季度如果需要獲取兒童、青春期和妊娠婦女的參

16、考區(qū)間信息可參見名為兒童和成人參考區(qū)間的小冊子，貨號(hào)：04640292（英語）；04625889（德語）。該手冊還包含了參考人群組的甲狀腺參數(shù)影響因素的研究結(jié)果。參照NACB導(dǎo)則的入選及排除規(guī)則也羅列在內(nèi)（如：甲狀腺超聲檢測的量和密度）。每個(gè)實(shí)驗(yàn)室應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)確定參考范圍的適用性，必要時(shí)建立本實(shí)驗(yàn)室的參考范圍。特殊的性能指標(biāo)試劑在分析儀上的性能試驗(yàn)數(shù)據(jù)如下。各實(shí)驗(yàn)室由于具體情況不同，所得出的數(shù)據(jù)可能會(huì)稍有差異。精密度應(yīng)用Elecsys試劑盒、人混合血清/血漿樣本和質(zhì)控品驗(yàn)證重復(fù)性，按照CLSI的EP5-A執(zhí)行：每天6次，共10天 (n=60)。批內(nèi)精密度由 MODULAR ANALYTICS E

17、170分析儀完成，n=21下面是獲得的結(jié)果。分析靈敏度最低檢出限0.300 nmol/L或者0.195 ng/mL最低檢出限是指區(qū)別于零點(diǎn)的最低分析物濃度。方法學(xué)比較使用臨床標(biāo)本比較Elecsys T3（y）檢測和酶免 T3（x） 檢測，相關(guān)性數(shù)據(jù)如下（nmol/L）：標(biāo)本數(shù)n=300Passing/Bablok10 線性回歸y = 1.26x - 0.56 y = 1.18x - 0.35r = 0.754 r = 0.957比較樣品濃度約為0.59 nmol/L(大約0.35.9 ng/mL)。分析特異性抗體交叉反應(yīng)如下：D-T3 100%;L-T40.16%; D-T40.16%; L-

18、rT30.04%;L-T21.0%;3,3,5-triiodothyroacetic acid106%;3,3,5,5-tetra-iodothyroacetic acid0.01%.參考文獻(xiàn)1. Wheeler MH, Lazarus JH. Diseases of the Thyroid. London, Glasgow, Weinheim, New York, Tokyo, Melbourne, Madras:2. Pfannenstiel P, Saller B. Schilddrsenkrankheiten Diagnose und Therapie. Berliner Medizi

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