木質(zhì)素基載藥微球的制備及性能研究

摘要續(xù)發(fā)展領(lǐng)域的應(yīng)用。由于木質(zhì)素磺酸鈉（SL）和堿木質(zhì)素（）的極性較強(qiáng)，與農(nóng)藥的相容性較差，難以直接用作壁材有效制備載藥微球。本文以木質(zhì)素磺酸鈉和堿木質(zhì)素(CTAB)靜電自組裝法和烷載體制備阿維菌素載藥微球。制備的載藥微球具有良好的緩釋性能，并且可以保護(hù)易光解的農(nóng)藥阿維菌素（緩釋劑型的創(chuàng)制提供了新材料和新方法，也是木質(zhì)素高值化應(yīng)用的一個(gè)新嘗試。CTAB進(jìn)行靜電自組裝，制備出疏水性膠體球SL-CTAB。SL-CTAB的凝聚和解聚可以通過調(diào)節(jié)系統(tǒng)的親疏水環(huán)境自由切換。利用SL-CTAB的自組裝可控性能，將其應(yīng)用于光敏型農(nóng)藥阿維菌素的包裹，制備出緩釋可控和抗光解性能可控的載藥微球。TEMSEMXXPS）等手段對進(jìn)行表征。結(jié)果顯示被成功包裹在SL-CTAB內(nèi)部；所制備的載藥微球的形貌是均一的實(shí)心微球，表面嚴(yán)密、無任何孔徑和裂縫出現(xiàn)。對阿維菌素的載藥量在70.82±0.34%62.58±0.06%以上；通過檢測發(fā)現(xiàn)，對阿維菌素的緩釋作用很強(qiáng)，在釋放70小時(shí)之后，仍保留有49.94±1.13%的阿維菌素；同時(shí)通過抗光解實(shí)驗(yàn)可以證明可以將阿維菌素的半衰期延長到266.3小時(shí)，是阿維菌素原藥的7.35SL-CTAB）與芯材（）的比例對性能的影響發(fā)現(xiàn)可以通過調(diào)節(jié)壁材與芯材的比例對的載藥量、包封率以及緩釋和抗光解效果進(jìn)行自由調(diào)控。分別利用乙酰氯和苯甲酰氯對堿木質(zhì)素進(jìn)行?；男裕苽涑鲆阴；瘔A木質(zhì)素（ACAL）和苯甲酰化堿木質(zhì)素（BZAL）以改善堿木質(zhì)素與阿維菌素的相容性；然后生聚集，阿維菌素在聚集的過程中被包裹在木質(zhì)素內(nèi)部，制備出乙?；瘔A木質(zhì)素基載藥微球和苯甲?；瘔A木質(zhì)素基載藥微球。掃描電鏡觀察發(fā)現(xiàn)及苯環(huán)與阿維菌素之間的疏水作用，使得其對于阿維菌素的緩釋更有優(yōu)勢；通過研究酚羥基的含量對于載藥微球的性能的影響，發(fā)現(xiàn)酚羥基含量的改變會(huì)影響壁材的疏水性，從而改變壁材與芯材之間的相容性，而壁材與芯材之間的相容性越好，載藥微球的包載性能越好；同時(shí)，酚羥基的含量越高，載藥微球的抗光解性能也越好。對比ACAL和BZAL制備的載藥微球的性能發(fā)現(xiàn)，對木質(zhì)素進(jìn)行疏水化改性以提高其與阿維菌素之間的相容性對于阿維菌素的包裹來說非常關(guān)鍵；對比緩釋性能發(fā)現(xiàn)，自組裝的木質(zhì)素磺酸鈉制備的載藥微球的緩釋性能最優(yōu)，緩釋性能的優(yōu)劣與壁材的空間結(jié)構(gòu)密切相關(guān)，壁材的空間位阻越大，緩釋的效果越好。關(guān)鍵詞：木質(zhì)素磺酸鈉；十六烷基三甲基氯化銨（CTAB載藥微球；阿維菌素IIABSTRACTThehighutilizationofindustrialligninisapromisingandchallengingresearchfield.Thispaperattemptstomodifyindustrialsodiumlignosulfonate(SL)andalkalilignin(AL)throughhydrophobicitymodificationforpesticidecontrollreleasetoexpanditsapplicationinthefieldofagriculturalsustainabledevelopment.Duetothestrongpolarityoflignin,itscompatibilitywithpesticidewaspoor,whichmadeitdifficulttoencapsulatepesticideeffectively.Inthispaper,twodifferenthydrophobiclignin-basedmaterialswerepreparedbyelectrostaticself-assemblingwithcationicsurfactantcetyltrimethylammoniumbromide(CTAB)andacylatedmodifyingbyalkylacylchloride,respectively.Thesemodifiedligninwereemployedtoencapsulateavermectintomakedrug-loadedmicrospheres.Notonlycouldthesemicrospheresslowdownthedegradationrateofbutalsocouldhelpagainstultraviolet.Theresultsofthisstudyprovidenewmaterialsandmethodsfortheformulationofpesticidewhichisalsoanewattemptforthehighvalueuseoflignin.Inthispaper,anovellignin-basedmicrospherewasprepared.Throughself-assembly,SLandCTABaggregatedintouniformcolloidalspheres(SL-CTAB).SL-CTABperformedareversibleaggregationbehaviorandwasusedastheshellmaterialtopreparemicrospherestoencapsulateMoreover,themicrosphereexhibitedanuniformsphericalstructure.TorevealtheexcellentembeddingcapabilityofthecontrolledreleaseandantiphotolysisperformanceforAVMweresystematicallyinvestigatedinthiswork.Asaresult,theencapsulationefficiencyvalueofAVM@SL-CTABreachedto62.58±0.06%.Thereleaseoffromwasstillgoingonafter70h,anditscumulativereleaseamountatthattimewas49.96±1.13%.ThereleaseprocessofcouldbecontrolledbyadjustingthedopedproportionofSL-CTAB.Thehalf-lifeofinAthatofuncoatedTheenhancedphotoprotectionandthecontrolledreleaseofMimpliedthatSL-CTABpossessedagreatapplicationprospectforefficientpesticideutilization.Alkaliligninwasmodifiedbyacetylchlorideandbenzoylchloriderespectivelytoimprovethecompatibilityofalkaliligninwithavermectin.Byadjustingthehydrophobicityofthesystem,theacylatedligningathered,duringwhichavermectinwasencapsulatedinsidetopreparetheacetylatedlignin-baseddrug-loadedmicrospheresandSEMimagesrevealedthatthemorphologyofacylatedlignin-basedmicrospheresweresphericalnanoparticles.Bystudyingthedrug-loadingproperties,sustained-releasepropertiesandanti-photolysispropertiesofalkali-lignin-baseddrug-loadedmicrospheres,itwasfoundthatbenzoylatedlignindemonstratedabetterperformanceofcontrolled-releaseduetoitssterichindranceandhydrophobicinteractionbetweenbenzeneringandavermectin.Theeffectofphenolichydroxylcontentontheperformanceofdrug-loadedmicrosphereswasalsostudied.Theresultsshowedthatthechangeofphenolichydroxylgroupcouldaffectthehydrophobicityofthewallmaterial,whichiwrelatedwiththecompatibilityofthewallmaterialwiththecorematerial.Thebetterthecompatibilityis,thebettertheloadingperformanceofthedrug-loadedmicrosphereswillbe.Meanwhile,thehigherthecontentofthephenolichydroxylgroup,thebettertheanti-photolysisperformancewillbe.Theperformanceofthedrug-loadedmicrospherespreparedbySL,AL,SL-CTAB,ACALandBZALwascompared.Itwasfoundthatthehydrophobicmodificationofligninwasveryessentialfortheencapsulationofavermectin.Comparingthesustained-releaseproperties,SL-CTABmanifestedabetterperformance.Theoptimalperformanceofthecontrolledreleaseperformanceiscloselyrelatedtothespatialstructureofthewallmaterial.Thegreaterthesterichindranceofthewallmaterial,thebetterthecontrolledreleaseperformancewillbe.Keywords:Sodiumlignosulphonate;Cetyltrimethylammoniumbromide(CTAB);Electrostaticself-assembly;Acidatedalkalilignin;AvermectinIV目錄摘要...........................................................................................................................................IABSTRACT.............................................................................................................................III目錄.........................................................................................................................................V主要符號表..............................................................................................................................IX第一章緒論..............................................................................................................................11.1木質(zhì)素.................................................................................................................11.1.1木質(zhì)素概述......................................................................................................11.1.2木質(zhì)素的改性研究進(jìn)展..................................................................................11.1.3木質(zhì)素的自組裝研究進(jìn)展..............................................................................31.2載藥微球技術(shù)研究進(jìn)展.....................................................................................31.2.1載藥微球技術(shù)概述..........................................................................................31.2.2載藥微球常用制備方法..................................................................................41.2.3木質(zhì)素在載藥領(lǐng)域的研究進(jìn)展......................................................................51.3阿維菌素類藥物制劑的研究進(jìn)展.....................................................................61.3.1阿維菌素類藥物的特點(diǎn)..................................................................................71.3.2載藥微球和微膠囊在阿維菌素類藥物制劑中的應(yīng)用現(xiàn)狀..........................81.3.3木質(zhì)素基材料在阿維菌素類制劑中的應(yīng)用現(xiàn)狀..........................................81.4研究背景、意義及研究內(nèi)容..............................................................................91.4.1背景和意義.......................................................................................................91.4.2研究內(nèi)容.........................................................................................................101.4.3創(chuàng)新點(diǎn).............................................................................................................10第二章實(shí)驗(yàn)技術(shù)與測試方法................................................................................................122.1主要實(shí)驗(yàn)原料、試劑和儀器...........................................................................122.1.1主要實(shí)驗(yàn)原料................................................................................................122.1.2主要實(shí)驗(yàn)試劑................................................................................................12V2.1.3主要實(shí)驗(yàn)儀器................................................................................................132.2木質(zhì)素磺酸鈉基載藥微球的制備及表征.......................................................142.2.1SL-CTAB的制備............................................................................................142.2.2的制備...............................................................................142.2.3透射電鏡（TEM）測試...............................................................................152.2.4動(dòng)態(tài)光散射（DLS）測試............................................................................152.2.5掃描電鏡（SEM）測試................................................................................152.2.6X射線光電子能譜（XPS）測試..................................................................152.2.7元素分析（）測試...................................................................................152.2.8紅外光譜（FT-IR）測試..............................................................................152.2.9靜態(tài)接觸角測試............................................................................................162.2.10載藥微球主要性能測試..............................................................................熱穩(wěn)定性分析...........................................................................................載藥量和包封率的測定...........................................................................載藥微球的緩釋性能測試.......................................................................抗光解性能測試.......................................................................................192.3堿木質(zhì)素基載藥微球的制備及表征...............................................................202.3.1酚羥基含量的測定........................................................................................202.3.2乙酰化堿木質(zhì)素的制備................................................................................212.3.3苯甲?；瘔A木質(zhì)素的制備............................................................................212.3.4核磁共振氫譜（1HNMR）測試.................................................................212.3.5堿木質(zhì)素基載藥微球的制備........................................................................212.3.6堿木質(zhì)素基載藥微球載藥量和包封率的測定............................................222.3.7堿木質(zhì)素基載藥微球的性能測試................................................................22第三章木質(zhì)素磺酸鈉基載藥微球的制備及性能研究........................................................233.1引言...................................................................................................................233.2載藥微球的制備..................................................................233.2.1SL-CTAB的制備及溶液行為研究................................................................243.2.2以SL-CTAB為壁材制備載藥微球的方法..................................................273.2.3以SL-CTAB為壁材制備載藥微球的制備條件的考察..............................283.3載藥微球的形成性分析......................................................303.3.1的表面形貌.......................................................................303.3.2的元素分布.......................................................................313.3.3的紅外光譜分析...............................................................343.3.4的形成機(jī)理探究...............................................................363.4載藥微球的主要性能表征..................................................403.4.1的熱穩(wěn)定性.......................................................................403.4.2的控制釋放性能...............................................................423.4.3的抗光解性能...................................................................443.4.4壁材與芯材的比例對的性能影響.................................463.5工藝條件對載藥微球主要性能的影響............................493.5.1含水量對性能的影響.....................................................493.5.2攪拌速度對粒徑的影響.................................................503.5.3水的滴加速度對粒徑的影響.........................................513.5.4放置時(shí)間對粒徑的影響.................................................523.6本章小結(jié)...........................................................................................................53第四章堿木質(zhì)素基載藥微球的制備及性能研究................................................................544.1引言...................................................................................................................544.2?；瘔A木質(zhì)素的制備及表征...........................................................................554.2.1?；瘔A木質(zhì)素的制備原理............................................................................554.2.2?；瘔A木質(zhì)素的表征....................................................................................564.3堿木質(zhì)素基載藥微球的制備及表征...............................................................584.3.1堿木質(zhì)素基載藥微球的制備........................................................................594.3.2堿木質(zhì)素基載藥微球的表征........................................................................594.4堿木質(zhì)素基載藥微球的性能研究...................................................................614.4.1堿木質(zhì)素基載藥微球的緩釋性能研究........................................................624.4.2堿木質(zhì)素基載藥微球的抗光解性能研究....................................................624.5酚羥基含量對載藥微球的性能影響...............................................................634.5.1酚羥基含量對載藥微球的載藥性能影響....................................................644.5.2酚羥基含量對載藥微球的緩釋性能影響....................................................654.5.3酚羥基含量對載藥微球的抗光解性能影響................................................664.6木質(zhì)素基載藥微球的性能對比.......................................................................674.6.1木質(zhì)素基載藥微球的形貌對比....................................................................684.6.2木質(zhì)素基載藥微球的載藥性能對比............................................................704.6.3木質(zhì)素基載藥微球的緩釋性能對比............................................................714.6.4木質(zhì)素基載藥微球的抗光解性能對比........................................................724.7本章小結(jié)...........................................................................................................72結(jié)論與展望..............................................................................................................................74參考文獻(xiàn)..................................................................................................................................76攻讀碩士學(xué)位期間取得的研究成果...........................................90致謝........................................................................................................................................91主要符號表（1）簡稱或代號簡稱或代號代表的意義SLAL木質(zhì)素磺酸鈉；堿木質(zhì)素；阿維菌素；CTAB十六烷基三甲基溴化銨；自組裝木質(zhì)素磺酸鈉；以SL-CTAB為壁材制備的阿維菌素載藥微球；SL-CTAB和阿維菌素的物理混合物；乙?；瘔A木質(zhì)素；SL-CTABACALACALBZAL以ACAL為壁材制備的阿維菌素載藥微球；苯甲?；瘔A木質(zhì)素；BZALDMF以BZAL為壁材制備的阿維菌素載藥微球；以SL為壁材制備的阿維菌素載藥微球；以AL為壁材制備的阿維菌素載藥微球；阿維菌素原藥；阿維菌素商品微膠囊；N,N-二甲基甲酰胺；DMSO氘代二甲基亞砜；DLS動(dòng)態(tài)光散射；FT-IR傅立葉變換紅外光譜；透射電鏡；TEMSEM環(huán)境掃描電鏡；TG熱重分析法；DTG差熱重量分析法；H-NMR核磁共振氫譜；IX第一章緒論1.1木質(zhì)素1.1.1木質(zhì)素概述2003～201387%天然氣等化石能源。但是由于化石能源屬于非可再生能源，其儲(chǔ)存量每天都在減少。[1]同時(shí)，由于化石能源的使用帶來的水污染、大氣污染、全球變暖等環(huán)境問題已經(jīng)嚴(yán)重威脅到人類的生存。如今社會(huì)各界也早已意識(shí)到，大力發(fā)展可再生能源是解決能源危機(jī)[2]地?zé)崮?、太陽能等清潔能源正在逐漸的進(jìn)入工業(yè)和民用領(lǐng)域，為緩解能源壓力帶來了希望。生物質(zhì)能源由于儲(chǔ)量豐富、清潔、低污染等優(yōu)勢成為可再生能源中的明星能源，[3]提高其利用效率一直是整個(gè)社會(huì)共同追求的夢想。同時(shí)，發(fā)展生物質(zhì)能源也可帶來不菲的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，尤其對于邊遠(yuǎn)地區(qū)來說更是提高經(jīng)濟(jì)水平的絕佳途徑。[4]是一類重要的可再生能源。據(jù)估算，地球上的木質(zhì)素儲(chǔ)量約有300Gt。工業(yè)上，木[5][6]質(zhì)素主要來自于造紙工藝和生物乙醇煉制的脫木質(zhì)化環(huán)節(jié)產(chǎn)生的副產(chǎn)物。然而，目前[7]的木質(zhì)素利用率仍是很低，除了被用作鍋爐燃料之外，木質(zhì)素僅在高分子添加劑、表面。木[8,9]素是由三種苯丙烷結(jié)構(gòu)單元通過脫氫聚合的方法所形成的無定形的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)[10]。[6]因此，為了實(shí)現(xiàn)其高值化應(yīng)用，通過對木質(zhì)素進(jìn)行改性以拓寬木質(zhì)素的應(yīng)用領(lǐng)域成為目前最熱門的提高木質(zhì)素的利用率的思路。[11]1.1.2木質(zhì)素的改性研究進(jìn)展由于木質(zhì)素中含有芳香核，還有豐富的醇羥基、酚羥基、甲氧基、羧基、羰基和各[12]1對化學(xué)反應(yīng)性能影響比較大的主要有酚羥基、醇羥基、羰基、羧基等基團(tuán)，可以在這些基團(tuán)上發(fā)生鹵化、酯化、?；⑼榛雀男苑磻?yīng)。[13]木質(zhì)素的改性方法主要有化學(xué)改性、生物改性、物理共混等方法[14-16]。1）木質(zhì)素降解成單酚或其他芳香化合物小分23）功能化羥基，以提高木質(zhì)素的反應(yīng)性O(shè)uyang等以HO為氧化劑，CuO/Fe（SO）[17][19]22243/NaOH為催化劑，以1:1（v/v）的甲醇/水為反應(yīng)介質(zhì)對木質(zhì)素進(jìn)行熱氧化解聚，可以將單酚化合物的收率提高到17.92%。ShurongWang等為實(shí)現(xiàn)生物油中水不溶相的高[19]值化利用，使用與有機(jī)溶劑結(jié)合的酸堿溶液從該相中熱裂解木質(zhì)素，分離單酚，發(fā)現(xiàn)通過反應(yīng)獲得的酚類化合物濃度高達(dá)94.35%，愈創(chuàng)木酚含量達(dá)到48.27%。木質(zhì)素具有多種官能團(tuán)，但由于其結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性，木質(zhì)素的高端用途并未被充分挖掘。為了規(guī)避這一限制，可以通過增加木質(zhì)素的化學(xué)活性位點(diǎn)或增加羥基反應(yīng)性等方法來修飾木質(zhì)素。[20]如對木質(zhì)素進(jìn)行磺化/脫烷基化、羧化、酯化、?；痀ang[21][22][23][24][25]Q等通過羧化和磺化反應(yīng)對木質(zhì)素進(jìn)行親水性修飾，可以將木質(zhì)素的疏水性降低[26]22-30%，從而將木質(zhì)素對纖維素酶解的抑制作用減少了76～96%。YPu等通過采用[27]酸水解法從白楊漂白紙漿中分離出木質(zhì)素，并將提取出的木質(zhì)素用乙酸酐乙?；?，核磁>>γ測鏈醇羥基>α側(cè)木質(zhì)素的光學(xué)變色。木質(zhì)素的生物改性目前多集中在木質(zhì)素的預(yù)處理階段和木質(zhì)素的生物酶解反應(yīng)中[28-31][32]XiL等利用遺傳工程的方法來修飾木質(zhì)素以改善生物燃料的生產(chǎn)。YanK等[33]以評估EHRL物產(chǎn)率和愈創(chuàng)?；蛯αu基苯基丙烷型衍生物產(chǎn)率的比例分別提高了33.18%和25.30%。木質(zhì)素的物理共混改性因?yàn)榫G色、易行等優(yōu)點(diǎn)正在逐漸引起人們的重視，在木質(zhì)素的改性中扮演越來越重要的作用Samal等通過使用乙烯/[34][35]物作為增容劑，過渡金屬鹽作為羰基生物降解促進(jìn)劑，制備了低成本的可生物降解聚乙烯（PE）/木質(zhì)素復(fù)合聚合物復(fù)合材料。ThungaM將木質(zhì)素進(jìn)行丁?；男裕⑴c聚[36]2乳酸進(jìn)行共混探究其作為碳纖維前體的潛力，并研究了木質(zhì)素與聚乳酸的混容性，及他們對所得纖維的熱穩(wěn)定性和碳產(chǎn)率的影響。ChenF等通過自組裝的方法將NiO嵌入[37]木質(zhì)素衍生的介孔碳（MPC）框架中，制成超級電容器材料。1.1.3木質(zhì)素的自組裝研究進(jìn)展自組裝是一種由無序到有序、由多組分到單一組分、由簡單到復(fù)雜的自我修正和完[38]、[41][39][40][42]π堆積作用[44-45]，[43]可以應(yīng)用在藥物遞送、醫(yī)學(xué)診斷、催化等領(lǐng)域。[47][46]裝改性利用靜電逐層自組裝技術(shù)將木質(zhì)素磺酸鈉與聚二烯丙基二甲基氯[48][49]化銨交替吸附，制備出多層自組裝的木質(zhì)素磺酸鈉吸附膜。ZhouM等通過接枝反應(yīng)[50]SL-PEGSL-PEG與十六烷基三甲基溴化銨（CTAB）利用靜電自組裝技術(shù)制備成木質(zhì)素基陰陽離子表面活性劑，可用于農(nóng)藥制劑，具有良好的表面活性和界面吸附性能。鄧永紅等[51]合成了木質(zhì)素基偶氮聚合物，并利用自組裝技術(shù)將其膠體化，制備出具有載藥潛力的木質(zhì)素偶氮聚合物膠體球，并且可以通過調(diào)節(jié)緩沖溶液的pH實(shí)現(xiàn)對阿霉素的控制釋放。湯潛潛CTAB[52]出規(guī)整的納米微球，并探索了其在聚乙烯復(fù)合材料領(lǐng)域的應(yīng)用。XiongF等將一定濃[53]性的納米球，30天后納米球的平均直徑并無明顯變化。1.2載藥微球技術(shù)研究進(jìn)展1.2.1載藥微球技術(shù)概述載藥微球技術(shù)是一種將固體、液體或氣體狀態(tài)的活性物質(zhì)用適宜的載體包裹起來，實(shí)現(xiàn)活性物質(zhì)與周圍環(huán)境的隔離，以達(dá)到靶向送藥、控制釋放、抗光解等效果的新型制劑技術(shù)[54-56]。所包裹的活性物質(zhì)一般被稱作芯材，而所選的載體被稱作壁材，經(jīng)載藥微球技術(shù)所制得的微米級球狀產(chǎn)物稱為載藥微球[55-57]。通過壁材的包裹，可以實(shí)現(xiàn)芯材穩(wěn)3[58-59]。因此，載藥微球技術(shù)一經(jīng)問世便受到廣泛關(guān)注[60-61]。載藥微球技術(shù)自20世紀(jì)六七十年代起就已經(jīng)引起大家的廣泛關(guān)注，應(yīng)用范圍不斷[62-63]。載藥微球一般是根據(jù)用途選用適宜的高分子材料為載體制成的球形或者是類球形的微粒，其粒徑大小為微米級，一般為1～500μm800μm0.01～10μm；載藥微球擁有各種不同的結(jié)構(gòu)形式，如雙層核殼結(jié)構(gòu)、成孔性微球和中空微球等結(jié)構(gòu)。載藥微球技術(shù)發(fā)展至今，其應(yīng)用潛力不斷被挖掘。憑借其對活性物質(zhì)的包裹[64]作用，使其可以應(yīng)用于醫(yī)藥領(lǐng)域的靶向藥物的制備、多功能包衣的制備和藥物的控制釋放等領(lǐng)域[65]；在食品、廢水處理、獸醫(yī)、個(gè)人護(hù)理等領(lǐng)域都有非常廣泛的應(yīng)用。[69][66][67][68][70]1.2.2載藥微球常用制備方法大類：第一類所包含的方法的特點(diǎn)是，起始材料為聚合物單體或預(yù)聚體，常用的有乳[55]液聚合法、界面聚合法、原位聚合法等。這些方法在制備載藥微球的過程中通常會(huì)涉及化學(xué)反應(yīng)。第二類所包含的方法中，起始材料多為聚合物，常用的有溶劑蒸發(fā)提取法、復(fù)凝聚法、層層沉積法、噴霧干燥法，在這種方法制備載藥微球的過程中一般不涉及化學(xué)反應(yīng)，只有簡單的物理構(gòu)造變化。界面聚合法界面聚合法涉及到兩相互補(bǔ)單體在兩相界面處的縮聚。為制備載藥微球，需將兩相體系在特定操作條件下進(jìn)行混合，使得其中一相（分散相）在另一相（連續(xù)相）中形成小液滴。因此，被包裹物必須是以液滴或分散微粒的形式存在。因此，為防止制備載藥[71-72]SunQ等提出一種新型的一鍋法，通過界面聚合法在反向油包水乳液界面處制備空心微球。[73]JabbariE等PEG400）[74]為二元醇、1，4-丁二醇作為擴(kuò)鏈劑制備聚氨酯微球以包裹二嗪農(nóng)。該方法具有包封率其應(yīng)用存在一定的局限性。原位聚合法全部溶于芯材的內(nèi)部或者外部。因?yàn)閱误w在其中一相中可溶，但是生成的聚合物在整個(gè)體系卻是不溶，如此聚合物便會(huì)沉積在芯材液滴的表面。李彥等采用原位聚合法，[75][76]20%藝下的包封率達(dá)95%。溶劑蒸發(fā)提取法[77-78]。通過該方法制備12）使壁材與芯材34）將制得的載藥微球洗滌，干燥。倪卓PET）為壁材制備出[79]一種可包裹水溶性芯材的微膠囊。噴霧干燥法利用噴霧干燥法制備載藥微球，是將壁材與芯材的混合液分散成霧滴，然后迅速蒸發(fā)成微球的技術(shù)。王朝輝等以海藻酸鈉為載體，利用噴霧干燥法制備出雙氯芬酸鈉/海[80][81]藻酸鈉載藥微球，通過調(diào)節(jié)投料比可得到不同載藥量、包封率、粒徑的載藥微球。復(fù)凝聚法在載藥微球的制備方法中，復(fù)凝聚法是比較常用的一種。他是通過利用兩種帶有相反電荷的高分子材料作為壁材，并將芯材分散在形成壁材的水溶液中，加入一定的凝聚劑，使得正負(fù)電荷相互吸引凝結(jié)，形成溶解度較低的微球從溶液中析出[82]?？紫檎齕83]等以十二醇為芯材，利用復(fù)凝聚法使聚[2-（甲基丙烯酰氧）乙基三甲基氯化銨]與阿拉選用明膠和阿拉伯[84]霉素的抗光解性能。1.2.3木質(zhì)素在載藥領(lǐng)域的研究進(jìn)展木質(zhì)素的應(yīng)用潛力不停地被挖掘，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域的應(yīng)用也不斷地被開拓。從20世[85]5紀(jì)20年代起，國內(nèi)外便開始將木質(zhì)素應(yīng)用于緩釋氮肥，后又不斷拓寬領(lǐng)域，用于制[86]備緩釋長效復(fù)合肥、磷肥改良劑、螯合微量元素肥料、農(nóng)藥分散緩釋劑等。[89][87][88][90]其中木質(zhì)素在載藥微球領(lǐng)域的應(yīng)用也是木質(zhì)素在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域一個(gè)非常重要的應(yīng)用分支。[91]木質(zhì)素是一種復(fù)雜的高分子化合物，由于復(fù)雜的三維網(wǎng)狀分子結(jié)構(gòu)、可降解性以及可直接用于土壤上等特點(diǎn)使其在藥物的緩釋領(lǐng)域具有特殊的優(yōu)勢[92-93]。Fernández-PérezM等[94]面包裹木質(zhì)素基薄膜，制成控制釋放劑，包封率高達(dá)94%FerrazA等通過將除草劑[95]2,4-D（2,4-二氯苯氧基乙酸）與木質(zhì)素熔融混合，然后造粒至0.7-1.0mm以制備顆?？刂苹|(zhì)制劑，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)：除草劑在靜態(tài)水中的釋放速率與時(shí)間的平方根相關(guān)。Fernández-PérezM等通過熔融法將環(huán)丙嗪摻入木質(zhì)素聚乙二醇（PE）控制釋放制劑[96]中將環(huán)丙嗪包裹在木質(zhì)素基膜內(nèi)，發(fā)現(xiàn)環(huán)丙嗪釋放速率受涂膜厚度和滲透率影響最大。YearlaS.R.等研究了利用納米技術(shù)以亞硫桿菌木質(zhì)素為基質(zhì)制備敵敵畏除草劑的控[97]制釋放劑型的潛力，結(jié)果表明，除草劑被成功裝載，并開辟了以木質(zhì)素為基質(zhì)控釋農(nóng)藥SunY等利用木質(zhì)素和聚丙烯酸制備了一種新型復(fù)合多孔水凝膠，可[98]用于百草枯、氟氯氰菊酯、氰氟草酯的控制釋放。FigueiredoP等開發(fā)了三種木質(zhì)素[99]納米粒子：純木質(zhì)素納米粒子，鐵（）-復(fù)合木質(zhì)素納米粒子和FeO注入的木質(zhì)素34納米粒子，以索拉非尼、苯扎明、希羅達(dá)等抗腫瘤藥物為模型藥物，研究了木質(zhì)素納米ChenN等通過界面聚合法成功制備了木質(zhì)素基pH響應(yīng)微膠囊。先將木質(zhì)素通過醚[100]化接枝丙烯基，然后通過超聲處理分散在水包油體系中，將改性后的木質(zhì)素與微乳液中的硫醇基交聯(lián)劑反應(yīng)制成納米微膠囊。制成的微膠囊可以裝載疏水性香豆素，且可以通過調(diào)節(jié)溶液的pH來控制香豆素的釋放。1.3阿維菌素類藥物制劑的研究進(jìn)展）類藥物是一類低毒、高效、高選擇性的新型農(nóng)畜兩用的抗生素類藥物[101-102]1975阿維菌素（圖1-11985年，一經(jīng)問世，其巨大的發(fā)6展?jié)摿Ρ阏孤稛o遺，年制劑量達(dá)萬噸級別[103-105]。截止目前，市售的阿維菌素系列農(nóng)藥阿維菌素類藥物在農(nóng)藥領(lǐng)域仍是占有舉足輕重的地位。[106]圖1.3.1阿維菌素類藥物的特點(diǎn)（1）廣譜高效。阿維菌素類藥物可以用于防治雙翅目、鞘翅目、鱗翅目、同翅目和蝸類害蟲，應(yīng)用于棉花、蔬菜、果樹、煙草、大豆等多種農(nóng)作物，亦可應(yīng)用于治療禽畜的螨、線蟲病和寄生性昆蟲病，防效高達(dá)90%以上[107-110]。（2）持效期長。阿維菌素可以深入到植物的薄壁組織存留較長時(shí)間，對害蟲有持效作用，但是對于天敵的影響很小，適用于綜合防治。鱗翅目類害蟲的殘效期為10~15天，害螨類則為1～1.5個(gè)月。[111]（3）低殘留、易降解，對人、畜、作物有高度安全性。阿維菌素因?yàn)槭怯|殺型神經(jīng)毒劑，其作用機(jī)制是干擾害蟲的神經(jīng)生理活動(dòng)，刺激害蟲體內(nèi)產(chǎn)生γ-氨基丁酸，從而阻斷運(yùn)動(dòng)神經(jīng)信息的傳遞，切斷害蟲的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)和肌肉的聯(lián)系，使得害蟲麻痹、拒食而死。由于哺乳動(dòng)物的GABA受體位于中樞神經(jīng)，而阿維菌素不容易通過血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)，由此可推斷，阿維菌素類藥物對哺乳動(dòng)物的毒性較小。[104]（4）光穩(wěn)定性差。由于大環(huán)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)和共軛雙鍵的存在，使得阿維菌素見光極易分解。在陽光照射下，阿維菌素在水中的半衰期少于12個(gè)小時(shí)，而在空氣中則[112][113]7降解得更快，阿維菌素在薄膜上的降解半衰期僅有4～6小時(shí)。[114]1.3.2載藥微球和微膠囊在阿維菌素類藥物制劑中的應(yīng)用現(xiàn)狀便一直備受關(guān)注?，F(xiàn)已研制出微乳劑、可濕性粉劑、乳油劑、水乳劑、顆粒、片劑、[115]口服液、控制釋放劑等各種劑型。控制釋放劑型因其可以減少環(huán)境中光、水、空氣等對藥物活性成分的分解，減少藥物的揮發(fā)和流失，從而減少用藥量，加之其具有使高毒藥物低毒化的優(yōu)勢，使之成為制劑領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)[120-121]。載藥微球和微膠囊是兩種典型的控釋釋放劑。楊愷等選用明膠、阿拉伯膠為[122][82]壁材，利用復(fù)凝聚法制備出穩(wěn)定性良好、具有緩釋特性的核殼型阿維菌素載藥微球。所制得的載藥微球的平均粒徑為5.64μm，平均包封率為64.48%。付仁春等以脲醛樹[123]脂為壁材，通過原位聚合法制備阿維菌素微膠囊，通過正交試驗(yàn)法篩選出阿維菌素微膠囊的最佳制備條件，并考察了微膠囊在不同溫度下的穩(wěn)定性。結(jié)果，制得的阿維菌素微膠囊形態(tài)圓整，包封率達(dá)98%，平均粒徑為（25±4.35）μm。李珠柱等以納米碳酸[124]鈣為無機(jī)模板，表面活性劑作為有機(jī)模板，通過溶膠凝膠法制備出空心多孔的SiO納2米顆粒用于阿維菌素的載藥研究。結(jié)果表明，空心多孔SiO納米顆粒對阿維菌素的吸2附作用很強(qiáng)，包埋率高達(dá)62.5%LiuX等利用玉米蛋白為壁材，通過相分離法將伊[125]維菌素包裹，制備成載藥微球。結(jié)果表明載藥微球?qū)σ辆S菌素具有緩釋效果，具有制備組織支架的應(yīng)用潛力。1.3.3木質(zhì)素基材料在阿維菌素類制劑中的應(yīng)用現(xiàn)狀人嘗試。周斌等采用層層自組裝法，先將阿維菌素分散于十二烷基苯磺酸鈉水溶[126][127]素磺酸鈉水溶液中進(jìn)行層層自組裝，制備出具有不同組裝層數(shù)的阿維菌素微膠囊，對阿行調(diào)節(jié)，釋放速率隨組裝層數(shù)的增加顯著下降。許銳林等[128]采用曼尼希反應(yīng)對木質(zhì)素磺酸鈉進(jìn)行胺化改性，制備出具有pH響應(yīng)性的胺基木質(zhì)素磺酸鈉，并以之為壁材，利8用復(fù)凝聚法制備出具有pH響應(yīng)性的阿維菌素微膠囊，結(jié)果表明：所制得的阿維菌素微膠囊的最佳載藥量為50%，包封率為90%，緩釋性能與商品微膠囊的性能相當(dāng)。不僅是出不窮。蘇玲等以堿木質(zhì)素和聚乙烯醇為原料制備出堿木質(zhì)素/聚乙烯醇交聯(lián)薄膜和[129]聚電解質(zhì)交聯(lián)薄膜材料，并將薄膜應(yīng)用于阿維菌素的控制釋放，發(fā)現(xiàn)阿維菌素在此制劑條件下的釋放是擴(kuò)散和溶蝕的綜合作用的結(jié)果。錢勇[130]將堿木質(zhì)素進(jìn)行疏水化改性，通過加水沉淀制備出聚集可控、粒徑均一，同時(shí)具有一定的阿維菌素負(fù)載潛力的納米膠體球。王素雅對堿木質(zhì)素先進(jìn)行磺甲基化改性，再通過接枝反應(yīng)在磺甲基化堿木質(zhì)[131]素的羥基上接入聚氧乙烯長鏈制備出一種木質(zhì)素基高分子陰-非離子表面活性劑（SAL-PEG阿維菌素微膠囊。1.4研究背景、意義及研究內(nèi)容1.4.1背景和意義化學(xué)或是生物方法對木質(zhì)素的結(jié)構(gòu)進(jìn)行一定的修飾，以達(dá)到一定的應(yīng)用目的。通過對木質(zhì)素進(jìn)行改性，可以賦予木質(zhì)素特定的溶解性能或一定的反應(yīng)活性位點(diǎn)，使得木質(zhì)素更容易參與到各種制劑研究中，對于拓展木質(zhì)素的應(yīng)用領(lǐng)域來說非常有意義，同時(shí)也有利于提高木質(zhì)素的使用效率，減少木質(zhì)素這一優(yōu)質(zhì)資源的浪費(fèi)。阿維菌素類藥物是近幾年應(yīng)用非常廣泛的一類生物農(nóng)藥，由于其廣譜、高效、低毒等優(yōu)點(diǎn)使得阿維菌素的應(yīng)用范圍越來越廣，用量也越來越大。但是阿維菌素由于其特殊的化學(xué)結(jié)構(gòu)：阿維菌素分子內(nèi)部的共軛雙鍵和大環(huán)內(nèi)酯都不穩(wěn)定，尤其是在紫外光的照射下非常容易降解。因此為了提高藥效，制劑企業(yè)和農(nóng)民往往采取加大藥量或提高藥用頻次等手段以實(shí)現(xiàn)快速除害的目的。然而，長此以往，阿維菌素的濫用已經(jīng)給環(huán)境帶來了非常大的負(fù)擔(dān)，土壤和水源逐漸被污染[132]；阿維菌素類藥物的無節(jié)制甚至導(dǎo)致很多害蟲開始對阿維菌素產(chǎn)生抗藥性。因此對阿維菌素類藥物的劑型改善已迫在眉睫。[133]本研究對木質(zhì)素進(jìn)行疏水化改性，以改善木質(zhì)素與阿維菌素的相容性，從而使改性9放，最關(guān)鍵是可以大大提高阿維菌素的抗光解性能，對于阿維菌素類藥物的應(yīng)用具有非常重要的意義；同時(shí)，將木質(zhì)素改性后應(yīng)用于農(nóng)藥的控制釋放制劑，對于拓寬木質(zhì)素的應(yīng)用領(lǐng)域、實(shí)現(xiàn)木質(zhì)素的高值化利用也具有非常深遠(yuǎn)的意義。1.4.2研究內(nèi)容于制備阿維菌素載藥微球。并分別研究兩種載藥微球?qū)Π⒕S菌素的包裹能力和緩釋、抗光解等重要性能。（一）木質(zhì)素磺酸鈉基載藥微球的制備及性能研究（1）通過采用靜電自組裝的方法將木質(zhì)素磺酸鈉與十六烷基三甲基溴化銨進(jìn)行自組裝，并探究了自組裝木質(zhì)素磺酸鈉的載藥潛力。（2）利用自組裝木質(zhì)素磺酸鈉為壁材包裹阿維菌素，制備木質(zhì)素磺酸鈉基載藥微球。利用透射電鏡、掃描電鏡、紅外光譜、XPS和元素分析等手段對木質(zhì)素磺酸鈉基載藥微球進(jìn)行表征。（3）研究了壁材與芯材的比例、含水量、水的滴加速度、攪拌速度等工藝條件對木質(zhì)素磺酸鈉基載藥微球的性能的影響。（二）堿木質(zhì)素基載藥微球的制備及性能研究（1）設(shè)計(jì)?；〈磻?yīng)，分別利用乙酰氯和苯甲酰氯將木質(zhì)素的酚羥基取代成乙?；捅郊柞；苽涑鲆阴；瘔A木質(zhì)素和苯甲?；瘔A木質(zhì)素。（2利用掃描電鏡、紅外、元素分析等手段對載藥微球進(jìn)行表征。（3）研究了堿木質(zhì)素基載藥微球?qū)Π⒕S菌素的載藥能力和在阿維菌素的控制釋放和抗光解等性能上的作用。（三）不同方法改性的木質(zhì)素基載藥微球的性能對比（1）對比木質(zhì)素磺酸鈉基載藥微球和堿木質(zhì)素基載藥微球的性能特征。（2）分析不同種類的木質(zhì)素對阿維菌素的載藥微球性能的影響。1.4.3創(chuàng)新點(diǎn)（1）本研究課題圍繞木質(zhì)素的資源化高值利用和農(nóng)藥緩釋技術(shù)而開展研究。以木CTAB靜電自組裝法和烷載體制備阿維菌素載藥微球。本研究方案制備的木質(zhì)素基疏水材料方法簡單、成本低、效果顯著，具有顯著的理論創(chuàng)新性和實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。（2）本研究制備的木質(zhì)素基載藥微球除了具有緩釋功能外，對負(fù)載藥物還具有抗光解功能，其中木質(zhì)素磺酸鈉基載藥微球在抗光解實(shí)驗(yàn)中經(jīng)50小時(shí)紫外光照后阿維菌素的保留率高達(dá)90.39%，半衰期延長到阿維菌素原藥的7.35倍；乙?；瘔A木質(zhì)素基載藥微球和苯甲?；瘔A木質(zhì)素基載藥微球經(jīng)50小時(shí)的紫外光照后阿維菌素的保留率分別為67.61%和77.01%。11第二章實(shí)驗(yàn)技術(shù)與測試方法2.1主要實(shí)驗(yàn)原料、試劑和儀器2.1.1主要實(shí)驗(yàn)原料木質(zhì)素磺酸鈉（SL漿廢液。處理后得到。阿維菌素原藥（92.2%。阿維菌素商品微膠囊（6.879%。2.1.2主要實(shí)驗(yàn)試劑表表－2.1.3主要實(shí)驗(yàn)儀器表13表X2.2木質(zhì)素磺酸鈉基載藥微球的制備及表征2.2.1SL-CTAB的制備參考湯潛潛的方法[52]，配制60wt的木質(zhì)素磺酸鈉水溶液，將318g木質(zhì)素磺酸鈉溶于212g水中，在常溫下以800rmp的轉(zhuǎn)速攪拌72小時(shí)；配制50wt%的CTAB乙醇水溶液，將112.75gCTAB溶于67.65g乙醇和45.10g水組成的醇水混合溶劑中，在常溫下以700rmp的轉(zhuǎn)速攪拌72小時(shí)；將木質(zhì)素磺酸鈉水溶液與CTAB乙醇水溶液以）為2.82:1的比例均勻混合，形成陰陽離子復(fù)合溶液；在攪拌的條件下（轉(zhuǎn)速設(shè)置為500rpm2000g的水在30分鐘內(nèi)均勻滴加入復(fù)合溶液中；靜置24小時(shí)后，將沉淀物用水洗滌，洗滌后的沉淀物經(jīng)-50°C冷凍干燥即得純化的自組裝木質(zhì)素磺酸鈉壁材（SL-CTAB2.2.2的制備將一定比例的SL-CTAB與阿維菌素原藥溶解于80g溶劑中，得到有機(jī)相；將有機(jī)相超聲分散5分鐘（超聲頻率為30KHz，超聲功率為300W200rpm的攪拌速度3SL-CTAB包埋阿維菌素后的載藥微球懸浮液（2.2.3透射電鏡（）測試測試儀器：HitachiH-7650型透射電子顯微鏡。測試地點(diǎn)：廣東省微生物研究所。樣品準(zhǔn)備：用1mL注射器吸取一定的載藥微球懸浮液，滴一滴在銅網(wǎng)上，在室溫下放置過夜，自然風(fēng)干，備測。2.2.4動(dòng)態(tài)光散射（DLS）測試測試儀器：ZetaPlus型Zeta電位及粒度測試儀。樣品準(zhǔn)備：取3mL待測懸浮液，沿樣品池壁緩慢放入樣品室，防止起泡。25°C90°。2.2.5掃描電鏡（）測試測試儀器：Merlin型場發(fā)射掃描電子顯微鏡。樣品準(zhǔn)備：用1mL注射器吸取少量的載藥微球懸浮液，滴一滴在硅片上，在室溫下自然風(fēng)干；風(fēng)干后對樣品進(jìn)行噴金處理，待測。2.2.6X射線光電子能譜（）測試測試儀器：AxisUltraDLD型X射線光電子能譜儀。樣品準(zhǔn)備：將樣品放入真空烘箱內(nèi)烘干，用研缽研磨成粉末，檢測碳、氧、氮、硫四種元素的元素分布。5×10-9torrAlKαMono能量為1486.6，5mA×15KV；束斑大小為700×300μm；掃描模式為CAE。2.2.7元素分析（）測試測試儀器：VarioELcube型元素分析儀。樣品準(zhǔn)備：樣品經(jīng)真空干燥后備測；檢測樣品的碳、氫、氮、硫四個(gè)元素的含量。2.2.8紅外光譜（FT-IR）測試測試儀器：ThermoNicoLet380型傅立葉變換紅外光譜儀。樣品準(zhǔn)備：將樣品真空干燥后，用壓片機(jī)在10MPa的壓力下壓片，壓片時(shí)間約為5分鐘。15掃描波長：400～4000cm。-12.2.9靜態(tài)接觸角測試測試儀器：PowerEachJC2000C1型靜態(tài)接觸角測量儀。樣品準(zhǔn)備：將樣品真空干燥后，用壓片機(jī)在10MPa的壓力下壓片，壓片時(shí)間約為3分鐘。測試方法：將測試臺(tái)調(diào)平，然后樣品放置在通水針頭正下方；打開測試軟件，旋轉(zhuǎn)選取基準(zhǔn)線，采用量角法計(jì)算藥品與水之間的接觸角。2.2.10載藥微球主要性能測試熱穩(wěn)定性分析測試儀器：STA449C型綜合熱分析儀。測試條件：溫度范圍為25°C～600°C；保護(hù)氣為氮?dú)?，流量?00mL/min；升溫速率為10K/min。測試方法：將樣品粉末干燥后，稱取5～10mg于潔凈的瓷坩堝中；先走基線，設(shè)置相關(guān)測量參數(shù)，樣品的測量過程中不需要加蓋坩堝蓋。載藥量和包封率的測定為了檢測阿維菌素的濃度，需要先繪制阿維菌素的液相標(biāo)準(zhǔn)曲線。首先配置一系列/88/121mL/min，柱溫為40°C245nm20L每個(gè)樣品測試3次，求平均值。以阿維菌素的濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，繪[134]制阿維菌素的標(biāo)準(zhǔn)曲線，如圖2-1所示。[135]80000006000000y=42213.6x-30742.42aer4000000AkaeP20000000050100150200Concentration/(mg/L)圖載藥量是指單位載藥微球中原藥所占的質(zhì)量百分比。測試方法：將2.2.2中制備的載藥微球懸浮液利用循環(huán)水式真空泵，配合使用尼龍66號濾膜將載藥微球進(jìn)行過濾，并選取二氯甲烷為洗脫劑1，將未包裹的阿維菌素洗掉；選取水為洗脫劑2，將多余的SL和CTAB洗掉。將抽濾所得產(chǎn)物經(jīng)真空干燥后避光保存，得載藥微球提純物。準(zhǔn)確稱取20mg提純的載藥微球，溶解于40mL乙醇中，經(jīng)細(xì)胞破碎儀處理10分鐘，充分50mL棕色容量瓶內(nèi)，由液相檢測20μL進(jìn)樣量的峰面積，經(jīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線換算得阿維菌素的濃度。利用式2-1可計(jì)算出阿維菌素載藥微球的載藥量。AVMloading(%)=(C)×100（2-1）1M1式2-1中l(wèi)oading即為載藥微球的載藥量，；C為所取載藥微球溶入0.05L1后的濃度，W為阿維菌素原藥的純度，%M為測量所稱取的載藥微球的質(zhì)量，01；包封率是指經(jīng)農(nóng)藥包載工藝，被包裹的原藥占初始加入的原藥質(zhì)量的百分比。可由式2-2計(jì)算所得。Entrapmenteffiency(%)=(2)×100%(2-2)0式2-2中Entrapmenteffiency為載藥微球的包封率，；M為實(shí)驗(yàn)制得的載藥微球的總217質(zhì)量，；M為初始加入的阿維菌素原藥的質(zhì)量，。0載藥微球的緩釋性能測試截至目前為止，在農(nóng)藥載藥微球和載藥微膠囊領(lǐng)域，無論是科研還是商業(yè)領(lǐng)域，由于藥物品種繁多、性質(zhì)各異，且制劑的性能要求差別較大，因此對于載藥微球的緩釋性的測試方法是在文獻(xiàn)方法和企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)的適合本研究的壁材和所選藥物的一個(gè)方法。本研究檢測了不同的溶劑對于阿維菌素、木質(zhì)素磺酸鈉、SL-CTAB、堿木質(zhì)素的溶解情況，如表2-3所示。表和水×√√√√√×√√×√√×××××××××××√×√×√×√××××××√×××√××××為了驗(yàn)證載藥微球的緩釋性能，所選的緩釋溶劑需要能夠很好的溶解阿維菌素，但是不能夠溶解壁材，同時(shí)還要盡量做到綠色無污染。因此，從表2-3中挑選丙酮為緩釋溶劑的原料。為了配制合適濃度的緩釋溶液，本實(shí)驗(yàn)研究了常溫下阿維菌素在體積濃度為20%、30%、50%（v/v）的丙酮水溶液中的溶解度。結(jié)果如表2-4所示。表））為滿足滲漏條件（perfectsinkcondition]，釋放藥品的最大濃度應(yīng)控制在釋放環(huán)境的最大溶解度的20%50%v/v這個(gè)體系的特點(diǎn)是：1.對本文采用的壁材不溶解，因此不必?fù)?dān)心壁材被溶劑破壞而無法檢測；2.對阿維菌素可以完全溶解，因此可以實(shí)現(xiàn)加速阿維菌素在該溶劑體系中快速溶出，實(shí)現(xiàn)加速釋放的目的。在本課題中，阿維菌素的緩釋實(shí)驗(yàn)中所用的釋放介質(zhì)為50%v/v試方法為：用移液管吸取20mL載藥微球懸浮液放于分子量為1000的透析袋中；然后將裝有載藥微球的透析袋放于100mL恒溫振蕩器的溫度設(shè)為25°C200rpm1mL的釋放液，經(jīng)0.45μm的針孔過濾器過濾，液相檢測樣品濃度。同時(shí)補(bǔ)充1mL新鮮釋放介質(zhì)于緩釋體系中，以保證緩釋體積不變。以時(shí)間為橫坐標(biāo)，釋放百分?jǐn)?shù)為縱坐標(biāo)，繪制阿維菌素的釋放曲線。與此同時(shí)，為了驗(yàn)證載藥微球的緩釋優(yōu)勢，在保證初始含藥量相等的條件下，設(shè)置空白阿維菌素原藥（（）和阿維菌素商品微膠囊（）為對比樣，在同樣的操作條件下進(jìn)行釋放實(shí)驗(yàn)?？构饨庑阅軠y試首先移取10mL載藥微球懸浮液，放在直徑為6cm，高為3cm的稱量瓶內(nèi)，平行取樣六份；將這些樣品避光干燥成膜；將干燥后的載藥微球薄膜放置在30W，310nm的紫外老化箱中分別照射0h10h20h3040h50h50mL容量瓶中，液相檢測其濃度。然后以時(shí)間為橫坐標(biāo)，阿維菌素剩余百分?jǐn)?shù)為縱坐標(biāo)，繪制阿維菌素的降解曲線。與此同時(shí)，為了驗(yàn)證載藥微球的抗光解性能，設(shè)置四個(gè)對比樣，分別為阿維菌素乙醇溶液、阿維菌素商品微膠囊、先將阿維菌素的乙醇溶液干燥成第一層膜，然后19Films”初始含量與載藥微球中的阿維菌素含量相等。2.3堿木質(zhì)素基載藥微球的制備及表征2.3.1酚羥基含量的測定測試儀器：Metrohm809Titrando型自動(dòng)電位滴定儀。測試方法1）以四丁基氫氧化銨為滴定液，按照10%四丁基氫氧化銨水溶液:[137]異丙醇=1:（v/v）的配比，制備0.05mol/L2）返滴定實(shí)驗(yàn)：為明確所配制的滴定液的濃度，需要對所配制的四丁基氫氧化銨溶液進(jìn)行標(biāo)定。準(zhǔn)確稱取0.0300g鄰苯二甲酸氫鉀，加入適量的水超聲溶解之后，采用自動(dòng)電位滴定儀進(jìn)行滴定，并記錄下等當(dāng)點(diǎn)所對應(yīng)的體積，然后根據(jù)式2-3計(jì)算四丁基氫氧化銨溶液的濃度C3）滴定空白樣：稱取0.0300g對羥基苯甲酸，用適量的DMF溶解，然后四丁基氫氧化銨加入一滴濃鹽酸進(jìn)行酸化，利用電位滴定儀進(jìn)行滴定，當(dāng)三個(gè)等當(dāng)點(diǎn)完全出現(xiàn)之后停止滴定，并且記錄下第二個(gè)等當(dāng)點(diǎn)所對應(yīng)的四丁基氫氧化銨的消耗體積V和第三個(gè)等當(dāng)2點(diǎn)對應(yīng)的體積V4）樣品的滴定：選用100mL高腳杯做容器，準(zhǔn)確稱量0.1000g待3測樣品粉末，并加入0.0300gN,N-二甲基甲酰胺溶解樣品及內(nèi)標(biāo)物，然后向待測樣品中加入一滴濃鹽酸，充分混合后利用自動(dòng)電位滴定儀進(jìn)行滴定，待三個(gè)峰完全出現(xiàn)之后，停止滴定，并記錄下第二和第三個(gè)等當(dāng)點(diǎn)對應(yīng)的體積V和V?！?3根據(jù)式2-4計(jì)算出樣品的酚羥基含量C。所有的標(biāo)定、樣品滴定、空白滴定、酚羥基返滴定等都需要進(jìn)行三次平行實(shí)驗(yàn)，取平均值。=1（2-3）式2-3中C為滴定液四丁基氫氧化銨的濃度，mol/Lm為所稱取的鄰苯二1四丁基氫氧化銨甲酸氫鉀的質(zhì)量，V為返滴定到等電點(diǎn)時(shí)所消耗的四丁基氫氧化銨的體積，204.23為鄰苯二甲酸氫鉀的摩爾質(zhì)量，g/mol。CV'VVV'(2-4)C四丁基氫氧化銨3m232酚羥基2式2-4中C為酚羥基含量，mmol/gC酚羥基為四丁基氫氧化銨的濃度，；四丁基氫氧化銨m為所稱取的樣品的質(zhì)量，；V和V分別為空白滴定的第二和第三個(gè)等當(dāng)點(diǎn)對應(yīng)的223體積，；V和V’分別為樣品滴定的第二和第三個(gè)等當(dāng)點(diǎn)對應(yīng)的體積，。232.3.2乙酰化堿木質(zhì)素的制備參考邱學(xué)青的方法，選取500mL三口燒瓶為反應(yīng)容器，稱取20g烘干過的堿[138]木質(zhì)素加入三口燒瓶中，然后加入180mL的二甲基甲酰胺（DMF溫控及攪拌開關(guān)，設(shè)置反應(yīng)溫度為50