醫(yī)院檢驗(yàn)中心隱血試驗(yàn)操作規(guī)程

醫(yī)院檢驗(yàn)中心隱血試驗(yàn)操作規(guī)程上消化道有少量出血時(shí)，紅細(xì)胞被消化而分解破壞，由于顯微鏡下不能發(fā)現(xiàn)，故稱為隱血。1）免疫學(xué)檢測(cè)法[原理]大便隱血的免疫一步檢驗(yàn)法是一個(gè)高靈敏度的夾心式酶聯(lián)免疫測(cè)定法。該法采用抗人血紅蛋白的單克隆抗體和多克隆抗體，特異地針對(duì)糞便樣品中的人血紅蛋白。因此，本試驗(yàn)不受動(dòng)物血紅蛋白的干擾， 試驗(yàn)前不須禁食肉類。[操作]取一片潔凈干燥的載玻片，滴加 2—3滴蒸餾水，取糞便小許，調(diào)成均勻混懸液。取便隱血試紙條，按說明書操作，將試紙條的反應(yīng)端浸濕。在 5min內(nèi)觀察結(jié)果。若反應(yīng)線(T)和質(zhì)控線(C)同時(shí)呈藍(lán)色色帶即為陽(yáng)性； 若只有C線呈色為陰性；若丁線與 C線均不顯色，說明試驗(yàn)無效。[附注]1．敏感性和特異性敏感性：樣品中血紅蛋白濃度超過 0．2μg／m1，就可得到陽(yáng)性結(jié)果。特異性：便潛血免疫一步檢驗(yàn)法是特異對(duì)人體血紅蛋白的檢驗(yàn)，樣品中若含有如下干擾物，實(shí)驗(yàn)結(jié)果不會(huì)受影響：雞血紅蛋白 500μg／ml牛血紅蛋白 500μg／m1馬血紅蛋白 500μg／ml豬血紅蛋白 500μg／m1羊血紅蛋白 500μg／m1兔血紅蛋白 500μg／m1辣根過氧化酶 200μg／m12．試驗(yàn)局限性本法可以幫助醫(yī)生早期發(fā)現(xiàn)胃腸道病變，然而，由于家族性息肉或直腸癌可能不出血，或間斷性出血，或出血在糞便中分布不均勻，都可造成陰性結(jié)果。本法對(duì)正常人檢驗(yàn)有時(shí)也會(huì)得到陽(yáng)性結(jié)果，這是由于某種刺激胃腸道的藥物造成便潛血所至。本檢驗(yàn)法只能作為篩選或輔助診斷用，不能替代胃鏡、直腸鏡、內(nèi)窺鏡和X光檢查。[臨床意義]1．消化道出血時(shí)(如潰瘍病、惡性腫瘤、腸結(jié)核、傷寒、鉤蟲病等)本試驗(yàn)可陽(yáng)性。2．消化道惡性腫瘤時(shí)，糞便隱血可持續(xù)陽(yáng)性，潰瘍病時(shí)呈間斷性陽(yáng)性。3．本法可作為消化道惡性腫瘤普查初篩試驗(yàn)。（2）試帶法國(guó)內(nèi)外生產(chǎn)以四甲基聯(lián)苯胺為顯色基質(zhì)的隱血試驗(yàn)試帶，使用方便，患者也可自留標(biāo)本檢測(cè)。3）鄰甲聯(lián)苯胺法[原理]血紅蛋白中的亞鐵血紅素有類似過氧化物酶的活性，能催化過氧化氫，放出新生態(tài)氧，將受體鄰甲苯胺氧化成鄰甲偶氮苯而顯藍(lán)色。[試劑]1．10g／L

鄰甲聯(lián)苯胺

(o-tolidine)

溶液：取鄰甲聯(lián)苯胺 18，溶于冰醋酸及無水乙醇各 50m1的混合液中，置棕色瓶中，保存于 4℃冰箱中，可用8—12周，若變?yōu)榘瞪?，?yīng)重新配制；2．3％過氧化氫液[操作]1．用竹簽挑取少量糞便，涂在消毒棉簽上或白瓷板上。2．墑加0．15L/L鄰甲苯胺冰乙酸溶液 2—3滴于糞便上。3．滴加3％過氧化氫 2—3滴。4．立即觀察結(jié)果，在 2min內(nèi)顯藍(lán)色為陽(yáng)性。[結(jié)果判斷]陰性：加入試劑 2min后仍不顯色。十，加入試劑 10s后，由淺藍(lán)色漸變藍(lán)色。2十：加入試劑后初顯淺藍(lán)褐色， 逐漸呈明顯藍(lán)褐色。十：加入試劑后立即呈現(xiàn)藍(lán)褐色。十：加入試劑后立即呈現(xiàn)藍(lán)黑褐色。[附注]1．O—tolidine[3 ，3’-Dimethyl-(1 ，1’-biphenyl) —4，4’-Diamine，Cl4Hl6N2,MW212．3]，中文名稱鄰甲聯(lián)苯胺， 亦稱鄰聯(lián)甲苯胺。另有，O—toluidine(2-Aminot01uene ，C7H9N，MWl07。，中文名稱鄰甲苯胺，可用于血糖測(cè)定，兩者應(yīng)予區(qū)別。2．糞便標(biāo)本必須及時(shí)檢查，以免靈敏度降低。3．3％過氧化氫必須有效，應(yīng)進(jìn)行陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)，將過氧化氫滴血片上，產(chǎn)生泡沫，或滴加于重鉻酸鉀硫酸液，顯褐色示有效。4．強(qiáng)調(diào)實(shí)驗(yàn)前三天內(nèi)禁食動(dòng)物血、肉、肝臟及富含葉