臨床微生物標(biāo)本采集規(guī)范課件

臨床微生物標(biāo)本

采集規(guī)范精品課件1臨床微生物標(biāo)本

采集規(guī)范精品課件1世界人口死因感染性疾?。?5％

抗生素時代，感染仍是人類健康的主要“殺手”精品課件2精品課件2高死亡率原因新現(xiàn)傳染?。航?0年，已有近30種新的病原生物，其中包括HIV、SARS、禽流感和各種新型肝炎病毒等引起的各種疾病。再現(xiàn)傳染?。阂酝驯徽J(rèn)為得到很好控制的傳染病，如結(jié)核、登革熱等的流行和傳播又重新抬頭。精品課件3高死亡率原因新現(xiàn)傳染病：近30年，已有近30種新的病原生物，低免疫人群急劇上升：艾滋病、移植醫(yī)學(xué)國際間交通的快速便捷使得當(dāng)今疾病傳播無國界的概念。氣候變暖，人口快速增長，都市化進程加快，伴隨人口密度和人口流動增加，清潔水源不足和衛(wèi)生設(shè)施的不完善，以及生態(tài)破壞造成人與媒介生物接觸機會增多（動物微生物向人類的襲擊）等。人類還沒有足夠的能力戰(zhàn)勝病原體。病原生物的抗藥性產(chǎn)生的速度已超過新型抗生素發(fā)明的速度（細(xì)菌耐藥性的快速發(fā)展)。精品課件4低免疫人群急劇上升：艾滋病、移植醫(yī)學(xué)國際間交通的快速便捷使得

提高感染樣本送檢率加強細(xì)菌耐藥監(jiān)測關(guān)注細(xì)菌性疾病的病原學(xué)診斷，已成為臨床工作者、臨床微生物與微生態(tài)工作者、藥學(xué)家和從事感染控制的工作者共同關(guān)注的熱門焦點。精品課件5提高感染樣本送檢率精品課件5成功治療感染癥的因素?成功分離病原菌

–標(biāo)本收集、運送、保存

–標(biāo)本處理方法

–檢驗醫(yī)師專業(yè)知識?醫(yī)師判讀病原菌培養(yǎng)結(jié)果?選擇適當(dāng)治療方法精品課件6成功治療感染癥的因素精品課件6臨床醫(yī)生要合理用好兩種數(shù)據(jù)1.本地區(qū)、本單位病原流行病學(xué)資料，指導(dǎo)經(jīng)驗用藥。（微生物室、院感科、臨床科室）2.藥敏試驗報告，糾正經(jīng)驗用藥。重視病原學(xué)檢查,盡可能在應(yīng)用抗菌藥物之前留取標(biāo)本送檢。以提高病原學(xué)診斷率,為選藥和調(diào)整藥物提供依據(jù)。精品課件7臨床醫(yī)生要合理用好兩種數(shù)據(jù)1.本地區(qū)、本單位病原流行病學(xué)資“正確的微生物學(xué)檢驗始自正確的標(biāo)本采取。臨床醫(yī)師、護師及檢驗技師都必須通曉其要領(lǐng)?！?/p>

著名的臨床微生物檢驗專著ManualofClinicalMicrobiology的主編PatrickMurray精品課件8“正確的微生物學(xué)檢驗始自正確的標(biāo)本采取。臨床醫(yī)師、護師及

標(biāo)本采集和運送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)鍵但由于標(biāo)本的采集和運送常由護士或醫(yī)生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道問題所在之處，造成的后果是:臨床醫(yī)生最不能接受的問題:陽性率低精品課件9標(biāo)本采集和運送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)鍵精品課件9國內(nèi)微生物標(biāo)本的采集目前存在的問題：

標(biāo)本送檢率低從全國來看，抗感染治療前，送檢相關(guān)標(biāo)本可能只占應(yīng)送標(biāo)本的一半左右，與抗菌藥物應(yīng)用率之高形成鮮明的反差。一些醫(yī)師在經(jīng)驗性治療受挫后方送標(biāo)本，此時已失去陽性培養(yǎng)的機會。標(biāo)本有缺陷正確收集各種臨床標(biāo)本，關(guān)注特檢標(biāo)本采樣與送檢的方法和條件，是完成病原學(xué)診斷的先決條件。精品課件10國內(nèi)微生物標(biāo)本的采集目前存在的問題：精品課件10微生物讓人類步步為營， 我們應(yīng)該追求： “準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷” “針對性病原學(xué)治療”

正確的微生物標(biāo)本采集和運送，是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！精品課件11微生物讓人類步步為營，精品課件11標(biāo)本規(guī)范化采集的重要性正確采集、處理與運送細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本直接關(guān)系到致病菌培養(yǎng)的正確性與陽性率的高低，是臨床細(xì)菌檢驗成功的關(guān)鍵。標(biāo)本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤，不當(dāng)?shù)臉?biāo)本可導(dǎo)致假陰性、假陽性結(jié)果的出現(xiàn)，因此標(biāo)本采集與處理的規(guī)范化是準(zhǔn)確、及時地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎(chǔ)。好的微生物檢驗標(biāo)本可提升實驗室工作效率及病患照顧質(zhì)量，降低醫(yī)療成本。精品課件12標(biāo)本規(guī)范化采集的重要性正確采集、處理與運送細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本直接如何提高細(xì)菌陽性檢出率標(biāo)本采集時機標(biāo)本采集方法標(biāo)本的質(zhì)與量標(biāo)本的運送與保存鏡檢篩選合格標(biāo)本高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境合理的收費制度精品課件13如何提高細(xì)菌陽性檢出率標(biāo)本采集時機精品課件13微生物樣本采樣基本原則

1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查

2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本

3.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作

4.采樣后立即送檢甚至床旁接種尤其是厭氧培養(yǎng)

5.棉拭子標(biāo)本宜用運送培養(yǎng)基

6.混有正常菌群污染標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)

7.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑

8.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康木氛n件14微生物樣本采樣基本原則

1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查

標(biāo)本收集部位

非無菌部位無菌部位眼血液耳脊髓液呼吸道胸膜液腸胃道腹膜液泌尿道關(guān)節(jié)液皮膚毛發(fā)精品課件15標(biāo)本收集部位

非無菌部位一、血培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范精品課件16一、血培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范精品課件16相似規(guī)模醫(yī)院的血培養(yǎng)數(shù)?

國內(nèi)多數(shù)三甲綜合醫(yī)院2～10瓶/天?

復(fù)旦大學(xué)中山醫(yī)院20～50瓶/天?

香港瑪麗醫(yī)院200瓶/天?

臺灣大學(xué)醫(yī)院300瓶/天?

我院約10～20瓶/天精品課件17相似規(guī)模醫(yī)院的血培養(yǎng)數(shù)精品課件17（一）血培養(yǎng)檢測采血指征臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血液感染的患者

1.發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）

2.寒戰(zhàn)

3.白細(xì)胞增多（>10×109/L，特別有“核左移”未成熟的或桿狀核白細(xì)胞增多）

4.粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞<1×109/L）

5.血小板減少

6．皮膚粘膜出血

7．昏迷，休克

8．多器官衰竭

9.CRP升高在評估可疑新生兒敗血癥時，除發(fā)熱或低燒外，很少培養(yǎng)出細(xì)菌，應(yīng)該補充尿液和腦脊液培養(yǎng)。

對入院危重感染患者未進行系統(tǒng)性抗菌藥物治療之前，應(yīng)及時采集血培養(yǎng)。精品課件18（一）血培養(yǎng)檢測采血指征精品課件18（二）血培養(yǎng)檢測消毒程序

1.皮膚消毒程序：嚴(yán)格執(zhí)行三步法（防止皮膚寄生菌污染）

（1）用75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上；

（2）然后用1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒，從穿刺點向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達3cm以上；（3）最后用75%酒精脫碘，待酒精揮發(fā)干燥后采血。

新生兒及對碘過敏的患者，只能用75%酒精消毒60s，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。

2.培養(yǎng)瓶消毒程序：

（1）用75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60秒。

（2）用無菌紗布或無菌棉簽清除橡皮塞表面剩余的酒精，然后注入血液。

精品課件19精品課件19要求：嚴(yán)格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手按壓靜脈，除非帶有無菌手套。不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭，采用真空采血裝置能降低污染率。說明：無論采用何種采血方法，血培養(yǎng)可接受的污染率通常是≤3%。研究表明，經(jīng)過專門培訓(xùn)的熟練抽血者采集血培養(yǎng)的污染率為3%，而未經(jīng)培訓(xùn)的住院醫(yī)生和護士污染率則達11%。因此對臨床護士就血培養(yǎng)標(biāo)本采集進行專門的、嚴(yán)格的培訓(xùn)是非常必要的。精品課件20要求：精品課件20（三）血培養(yǎng)標(biāo)本采集和運送1.采集時間要求：對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。必須同時或間隔短時間內(nèi)采集2套（每套包括1只普通血培養(yǎng)瓶及1只厭氧血培養(yǎng)瓶）以上血培養(yǎng)標(biāo)本。說明：實驗數(shù)據(jù)表明細(xì)菌入血后約1小時，寒戰(zhàn)和發(fā)燒開始出現(xiàn)2小時內(nèi)，此時為采集血培養(yǎng)標(biāo)本進行病原菌培養(yǎng)的最佳時機。在不同的時間點采血只有在以下情況才有必要：疑似感染性心內(nèi)膜炎或其他血管內(nèi)（如導(dǎo)管相關(guān)性感染）感染患者的連續(xù)性菌血癥。精品課件21（三）血培養(yǎng)標(biāo)本采集和運送精品課件21你認(rèn)為對嗎？

為了提高病人血培養(yǎng)的陽性率，最好的抽血時間是：

A.發(fā)熱開始時

B.寒戰(zhàn)開始時

C.發(fā)熱最高峰時

D.寒戰(zhàn)結(jié)束時

E.預(yù)計寒戰(zhàn)發(fā)熱前

精品課件22你認(rèn)為對嗎？

為了提高病人血培養(yǎng)的陽性率，最好的抽血時間是：細(xì)菌量

體溫

時間上升幅度精品課件23細(xì)菌量體溫時間上升幅度精品課件232.采集部位要求：從兩側(cè)上肢靜脈采血，“雙瓶雙側(cè)”采血培養(yǎng)。至少做到“雙側(cè)雙瓶”。必要時從下肢靜脈采血做第三套血培養(yǎng)。說明：不建議采集（1）動脈血，因其診斷價值沒有比靜脈血更大；（2）靜脈留置導(dǎo)管，因其常伴有高污染率。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，也應(yīng)同時從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標(biāo)本，以幫助陽性結(jié)果的判讀。精品課件242.采集部位精品課件24

所謂“雙瓶雙側(cè)”，是指從一個部位采血接種一套培養(yǎng)瓶，再從另一部位采血接種另一套培養(yǎng)瓶。（通常是雙臂）所謂“雙側(cè)雙瓶”，是指從一個部位采血接種一個需氧瓶，再從另一部位采血接種另一個厭氧瓶。一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單個血培養(yǎng)。精品課件25所謂“雙瓶雙側(cè)”，是指從一個部位采血接種一套培養(yǎng)瓶，3.采集次數(shù)要求：對懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者，推薦同時采集2~3套（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。（即雙瓶雙臂同時采集血培養(yǎng)標(biāo)本。）嬰幼兒患者，推薦同時采集2次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。說明：除特殊情況之外，在采取血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。因為抗菌治療的2至5天內(nèi)，血液中的細(xì)菌不會立即消失。研究證明，血培養(yǎng)只做1套的檢出率為65%，做2套和3套的檢出率分別為80%和96%。單瓶的血培養(yǎng)檢出率不高，而且結(jié)果很難做出臨床解釋。精品課件263.采集次數(shù)精品課件264.采血量要求：成年患者推薦的采血量為每套不少于10ml，每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者推薦的采血量為每瓶不少于2ml。說明：血標(biāo)本采集的量是影響檢出率的最重要的因素。成人血培養(yǎng)采血量在2~30ml之間，病原菌檢出率與采血量成正比例增長。每增加1ml的血液，病原菌的檢出率增加3.2%。兒童患者因為血液中病原菌濃度較高，血培養(yǎng)量無需等同于成人。對血液病患者或者血容量相對較低的患者建議使用兒童瓶來減少血液的采集量增加病原菌的檢出率。精品課件274.采血量精品課件27菌血癥病人血中細(xì)菌濃度成年病人:鏈球菌心內(nèi)膜炎1to30organisms/ml葡萄球菌心內(nèi)膜炎1to20organisms/ml革蘭氏陰性菌血癥少于1to10organisms/ml革蘭氏陽性菌血癥1to300organisms/ml幼兒病人:革蘭氏陰性菌血癥5to1000organisms/ml75%幼兒菌血癥病人血液有＞100organisms/ml所以采血量一定要足夠！精品課件28菌血癥病人血中細(xì)菌濃度精品課件285.血液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配要求：一個需氧瓶和一個厭氧瓶為一套血培養(yǎng)，作為常規(guī)血培養(yǎng)的組合。說明：采用一對需氧瓶+厭氧瓶組合，比采用二個需氧瓶的組合可檢出能更多的葡萄球菌、腸桿菌科細(xì)菌和厭氧菌。而且，采兩瓶可以保證足夠的采血量。當(dāng)被用來做培養(yǎng)的采血量少于推薦值時，血必須首先接種需氧瓶，然后將剩余的血液接種入?yún)捬跗俊Ｒ驗槎鄶?shù)菌血癥是由需氧和兼性需氧細(xì)菌造成的，而這些細(xì)菌從需氧瓶中更好的被分離。

精品課件295.血液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配精品課件29由于嬰幼兒患者厭氧菌所致菌血癥比較罕見，嬰幼兒血培養(yǎng)可以僅用需氧瓶，為提高檢出率、區(qū)分污染菌，應(yīng)采用兩只需氧瓶為一組血培養(yǎng)。仍然采用雙側(cè)雙瓶的采血方式。真菌血培養(yǎng)采用需氧血培養(yǎng)瓶采集標(biāo)本。采用中和/滅活抗菌藥物的血培養(yǎng)瓶可提高真菌的檢出率。自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)不能用于雙相真菌的檢測。精品課件30由于嬰幼兒患者厭氧菌所致菌血癥比較罕見，嬰幼兒血培養(yǎng)可以僅用6.血培養(yǎng)標(biāo)本的運送要求：（1）采集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時之內(nèi)送往實驗室。（2）血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏和冷凍。說明：血培養(yǎng)瓶冷藏或冷凍會將一些微生物殺滅，將裝著液體的容器冰凍也會使容器破裂。精品課件316.血培養(yǎng)標(biāo)本的運送精品課件317.血培養(yǎng)的培養(yǎng)周期要求：自動化血培養(yǎng)儀的標(biāo)準(zhǔn)血培養(yǎng)周期為5天。說明：有研究表明，95%-97%的有臨床價值的細(xì)菌會在3-4天內(nèi)被自動血培養(yǎng)系統(tǒng)檢出，目前仍推薦5天的培養(yǎng)周期。特殊情況可適當(dāng)延長培養(yǎng)時間。如臨床懷疑布魯菌感染，可延長培養(yǎng)至28天等。精品課件327.血培養(yǎng)的培養(yǎng)周期精品課件32血培養(yǎng)假陽性的危害1、增加患者抗生素用量，破壞其微生態(tài)環(huán)境2、延長了住院天數(shù)3、延誤病情診斷4、增加經(jīng)濟負(fù)擔(dān)

防止皮膚寄生菌或環(huán)境微生物污染精品課件33血培養(yǎng)假陽性的危害精品課件33二、下呼吸道（痰培養(yǎng)）

標(biāo)本采集規(guī)范精品課件34二、下呼吸道（痰培養(yǎng)）

標(biāo)本采集規(guī)范精品課件34病原體種類繁多而復(fù)雜

使下呼吸道感染病原診斷成為難題細(xì)菌（包括放線菌與奴卡菌，厭氧菌與分枝桿菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲寄生蟲精品課件35病原體種類繁多而復(fù)雜

使下呼吸道感染病原診斷成為難題細(xì)菌（包我國痰培養(yǎng)現(xiàn)狀標(biāo)本送檢率低苛養(yǎng)菌檢出率極低結(jié)果重復(fù)性差報告速度慢感染菌與污染菌不易區(qū)分藥敏結(jié)果與治療反應(yīng)存在差距精品課件36我國痰培養(yǎng)現(xiàn)狀標(biāo)本送檢率低精品課件36標(biāo)本采集方法醫(yī)師或護士直視下采集標(biāo)本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格！咳痰標(biāo)本精品課件37標(biāo)本采集方法咳痰標(biāo)本精品課件37咳痰途經(jīng)口咽部不可避免地受到污染唾液中口咽部定植菌的濃度可達108

～109/ml。研究顯示，國內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。精品課件38咳痰途經(jīng)口咽部不可避免地受到污染精品課件38合格標(biāo)本的判斷標(biāo)準(zhǔn)外觀：觀察顏色、粘度、有無血絲或膿。若標(biāo)本為水狀且很明顯是唾液，則應(yīng)拒收。為了判定是否來自下呼吸道的痰，需檢查是否為合格的痰標(biāo)本。白細(xì)胞＞25個/低倍鏡視野、鱗狀上皮細(xì)胞＜10個/低倍鏡視野為合格標(biāo)本。采集合格標(biāo)本對細(xì)菌的診斷極為重要。合格痰液標(biāo)本不合格痰液標(biāo)本精品課件39合格標(biāo)本的判斷標(biāo)準(zhǔn)合格痰液標(biāo)本不合格痰液標(biāo)本精品課件39（一）采集指征凡是發(fā)熱、咳嗽和咳痰，痰呈膿性、粘稠或血性，并伴有胸痛、氣急，肺部聞及濕羅音，外周白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞比例明顯增高，X線檢查提示肺部有炎性浸潤或胸腔積液，甚至出現(xiàn)感染性休克和呼吸衰竭等患者，應(yīng)采集痰液或下呼吸道標(biāo)本。對可疑烈性呼吸道傳染?。ㄈ鏢ARS、肺炭疽、肺鼠疫等）患者采集檢驗標(biāo)本時必須注意生物安全防護。精品課件40（一）采集指征精品課件40（二）采集方法自然咳痰法以晨痰為佳。用清水反復(fù)漱口，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入無菌容器中，盡快送檢。否則有的細(xì)菌（如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌）在外界可能死亡。不能及時送檢的標(biāo)本，室溫保存≤2h。要求采到肺深部的痰液，不要唾液。精品課件41（二）采集方法精品課件41在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本;標(biāo)本采集后1～2h內(nèi)必須立即進行實驗室處理；咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛，但也是最受爭議的標(biāo)本;取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口;深咳，采集標(biāo)本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo);對于細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2～3天；不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀改變；懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢。精品課件42在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本;精品課件422.小兒取痰法

用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子深入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部和氣管分泌物，粘在棉拭子上送檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。3.支氣管鏡采集法

–-經(jīng)支氣管鏡直接吸引

–-支氣管肺泡灌洗

–-防污染樣本毛刷精品課件432.小兒取痰法用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子深入咽部，小兒經(jīng)（三）注意事項1.痰標(biāo)本不能及時送檢者，可暫存4℃冰箱。室溫下耽擱數(shù)小時，定植于口咽部的非致病菌過度生長而肺炎鏈球菌、葡萄球菌和流感嗜血桿菌檢出率則明顯降低。2.在臨床上咳痰仍是診斷肺部感染最常用的標(biāo)本，但咳痰也最易被口咽部正常菌群污染。痰液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗，必須區(qū)分是病原菌還是來自上呼吸道的正常菌群。經(jīng)過洗滌處理的痰液或自氣管鏡采集及氣管穿刺所獲標(biāo)本，結(jié)果比較可靠。

精品課件44（三）注意事項精品課件443.由于口腔和咽部存在大量的革蘭陽性和革蘭陰性厭氧細(xì)菌，而且缺乏可靠的方法區(qū)分它們究竟是致病菌還是定植菌，因此不主張對咳痰標(biāo)本進行厭氧菌培養(yǎng)。4.約有1/4～1/2肺部感染患者可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時做血培養(yǎng)。精品課件453.由于口腔和咽部存在大量的革蘭陽性和革蘭陰性厭氧細(xì)菌，而且三、尿培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范

尿路感染是指尿道內(nèi)有大量微生物繁殖而引起的尿路炎癥。根據(jù)感染部位分為：

上尿路感染（腎盂腎炎）下尿路感染（膀胱炎、尿道炎）男性可出現(xiàn)前列腺炎。精品課件46三、尿培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范

尿路感染是指尿道內(nèi)有大量微生物繁（一）尿培養(yǎng)標(biāo)本送檢指征1.有典型的尿路感染癥狀；2.有肉眼膿尿或血尿；3.尿常規(guī)檢查白細(xì)胞或亞硝酸鹽陽性；4.有不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；5.留置導(dǎo)尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱；6.膀胱排空功能受損；7.泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前；8.有尿路感染癥狀者，前次培養(yǎng)結(jié)果陰性或抗菌治療48h后仍持續(xù)發(fā)熱。9.抗生素停藥后，感染癥狀再次出現(xiàn)。精品課件47（一）尿培養(yǎng)標(biāo)本送檢指征精品課件47

正常人尿液是無菌的，而尿液細(xì)菌培養(yǎng)最大的問題是雜菌污染。正常人外尿道有大腸桿菌、葡萄球菌等存在。而這些細(xì)菌又是尿路感染中常見的病原菌。因此要作好尿液細(xì)菌學(xué)檢查，首先應(yīng)注意標(biāo)本收集問題。尿液經(jīng)尿道排出時會受到尿道內(nèi)正常菌群的污染,但定量培養(yǎng)時計數(shù)不會超過103CFU/ml,泌尿系感染時定量培養(yǎng)在104～105CFU/ml。另外,由于絕大多數(shù)的泌尿系感染是由腸桿菌科細(xì)菌引起,而此類細(xì)菌的硝酸鹽還原實驗為陽性,故可參考尿檢查常規(guī)中的硝酸鹽還原實驗來推斷是否有細(xì)菌感染。精品課件48正常人尿液是無菌的，而尿液細(xì)菌培養(yǎng)最大的問題是雜菌污染（二）尿培養(yǎng)標(biāo)本采集方法標(biāo)本采集應(yīng)在使用抗生素之前，避免消毒劑污染標(biāo)本。1．清潔中段尿留取清晨清潔中段尿標(biāo)本，先用肥皂水仔細(xì)清洗會陰部，再用清水沖洗尿道口周圍；將前段尿排去，留取中段尿10ml左右于無菌容器內(nèi)，立即加蓋送檢，2h內(nèi)接種。該方法簡單、易行，是最常用的尿標(biāo)本收集方法，但是容易受到會陰部細(xì)菌污染。2．恥骨上膀胱穿刺使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消毒穿入膀胱吸取尿液，是評估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法，主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集。精品課件49（二）尿培養(yǎng)標(biāo)本采集方法精品課件493．直接導(dǎo)尿按常規(guī)方法對會陰局部進行消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液，可減少尿液標(biāo)本污染，準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能下尿道細(xì)菌進入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。4．小兒收集包無自控能力的小兒可用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗結(jié)果為陰性時才有意義。如果檢驗結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進行分析，必要時可使用膀胱上穿刺或?qū)蚍羧?biāo)本進行復(fù)檢。5．留置導(dǎo)尿管收集尿液用導(dǎo)尿管導(dǎo)取10-15ml尿液置滅菌容器內(nèi)送檢。長期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換新導(dǎo)尿管后留取尿標(biāo)本。留置導(dǎo)尿患者應(yīng)消毒導(dǎo)尿管外部及尿管口，采取無菌操作方法，用注射器通過導(dǎo)尿管吸取尿液。注意防止混入消毒劑，不能從尿液收集袋中采集尿液。精品課件503．直接導(dǎo)尿按常規(guī)方法對會陰局部進行消毒后，用導(dǎo)尿管直接（三）采集時間和標(biāo)本運送

1.應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用前或停用抗菌藥物5天后采集尿液。2.通常采集清晨第1次尿液送檢，確保尿液在膀胱內(nèi)停留4h以上，使細(xì)菌有足夠時間繁殖。囑患者睡前少飲水以免尿液稀釋。3.懷疑沙門菌感染時應(yīng)在發(fā)病2周左右采集尿液培養(yǎng)。4.對無癥狀的患者應(yīng)連續(xù)采集3天晨尿送檢。5.懷疑結(jié)核分枝桿菌感染時，患者應(yīng)停藥1-2天后采集晨尿或24h尿的沉渣部分10-15ml送檢。6.標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢、及時接種，室溫下保存時間不得超過2h（夏季保存時間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存），冷藏保存標(biāo)本必須在6h內(nèi)進行接種，但冷藏保存的標(biāo)本不能用于淋病奈瑟菌培養(yǎng)。精品課件51（三）采集時間和標(biāo)本運送精品課件51（四）注意事項1.由于自然排尿收集的標(biāo)本很難避免會陰部及下尿道細(xì)菌污染，所以需要定量接種、合理評價才能判斷培養(yǎng)的細(xì)菌是否與尿路感染有關(guān)。尿標(biāo)本菌落計數(shù)中革蘭陰性桿菌數(shù)>105CFU/ml或革蘭陽性球菌數(shù)>104CFU/ml時有臨床診斷意義。（不是絕對的，受多因素影響，綜合判斷）2.尿液標(biāo)本的采集和培養(yǎng)中的問題是污染雜菌，故應(yīng)嚴(yán)格進行無菌操作。3.尿標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，以免污染，尿液中不得加防腐劑和消毒劑。精品課件52（四）注意事項精品課件524.除非是流行病學(xué)調(diào)查，長期留置導(dǎo)尿管患者常規(guī)尿培養(yǎng)沒有臨床意義，大量病原菌?？稍谶@類患者中檢出，導(dǎo)尿管留置時間延長易導(dǎo)致與引起患者尿道感染不一致的微生物定植生長；5.不可從集尿袋的下端管口留取標(biāo)本，集尿袋內(nèi)的尿液也不能用于培養(yǎng)，可能會引起污染；6.臨床常讓患者留取清潔中段尿，應(yīng)該在醫(yī)護人員監(jiān)督指導(dǎo)下讓患者正確的留取清潔中段尿；7.由于種種原因，患者常常不能正確地留取清潔中段尿，實驗室只是針對尿液標(biāo)本培養(yǎng)的結(jié)果進行評估，或常常由于分析前尿液標(biāo)本污染了多種細(xì)菌無法正確解釋的結(jié)果，可能延誤了臨床的正確診斷和治療。精品課件534.除非是流行病學(xué)調(diào)查，長期留置導(dǎo)尿管患者常規(guī)尿培養(yǎng)沒有臨床下列因素可使尿液中細(xì)菌數(shù)量減少，判斷結(jié)果時應(yīng)注意

①使用抗生素治療，細(xì)菌生長受到抑制；②尿液稀釋，尿比重＜1.003，營養(yǎng)成分減少，細(xì)菌生長遲緩；③尿PH＜5.0或＞8.5，細(xì)菌生長受阻；④尿頻時，膀胱內(nèi)細(xì)菌停留時間短，菌落數(shù)減少；⑤尿道口消毒液混入標(biāo)本中，影響細(xì)菌繁殖，菌落數(shù)減少；⑥不同種類的細(xì)菌生長速度不同、營養(yǎng)要求不同，菌落計數(shù)有所不同。精品課件54下列因素可使尿液中細(xì)菌數(shù)量減少，判斷結(jié)果時應(yīng)注意

①使用抗生四、大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范

精品課件55四、大便培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范精品課件55（一）采集時間腹瀉患者應(yīng)在急性期，并盡可能在使用抗生素之前采集新鮮糞便；傷寒患者在發(fā)病2周以后。（二）采集方法1．自然排便采集法自然排便后，挑取有膿血或黏液部位的糞便2-3g，液狀糞便取絮狀物盛于無菌的容器內(nèi)或置于保存液或增菌液中送檢。2．直腸拭子采集法對不易獲得糞便或排便困難的患者及嬰幼兒，可采用直腸拭子法采集標(biāo)本，其方法是將拭子前端用甘油濕潤。然后插入肛門約4～5cm（幼兒約2～3cm）處，輕輕在直腸內(nèi)旋轉(zhuǎn)，擦取直腸表面粘液后取出，盛入無菌試管或保存液中送檢。精品課件56（一）采集時間精品課件56（三）實驗室檢查

腸道細(xì)菌大多為革蘭陰性桿菌，且因糞便標(biāo)本中有各種正常菌群，形態(tài)上區(qū)分困難，因此一般不做直接涂片檢查。只有當(dāng)臨床懷疑腸道菌群失調(diào)或檢查霍亂弧菌、結(jié)核分枝桿菌、疑似葡萄球菌或難辯梭菌引起的偽膜性腸炎以及真菌性腹瀉時，才做直接涂片檢查。疑似葡萄球菌引起的抗菌素相關(guān)性腸炎，可取水樣便或腸黏膜樣物涂片，革蘭染色后鏡檢，見革蘭陰性桿菌明顯減少，革蘭陽性球菌大量散在或成堆（葡萄狀）排列，可提示腸道菌群失調(diào)。精品課件57（三）實驗室檢查精品課件57（四）注意事項在腹瀉發(fā)病的正確時間收集標(biāo)本，病人應(yīng)盡量在急性期（3d）內(nèi)和用藥前采集標(biāo)本，以提高檢出率。大便標(biāo)本中含有很多雜菌，糞便標(biāo)本的采集須注意防止外界臟物污染，盡量采用無菌容器。為提高陽性檢出率，要采集新鮮標(biāo)本，立即送檢。精品課件58（四）注意事項在腹瀉發(fā)病的正確時間收集標(biāo)本，病人應(yīng)盡量在急性五、生殖道標(biāo)本采集規(guī)范

精品課件59五、生殖道標(biāo)本采集規(guī)范精品課件59（一）送檢指征

1.男性泌尿系統(tǒng)表現(xiàn)尿急、尿頻、尿痛尿道分泌物增多會陰部疼痛及陰囊疼痛性功能障礙泌尿生殖器畸形和缺損精品課件60（一）送檢指征

1.男性泌尿系統(tǒng)表現(xiàn)精品課件602.女性泌尿系統(tǒng)表現(xiàn)

分泌物增多及性狀異常尿道口搔癢及膿性分泌物流暢下腹疼痛月經(jīng)失調(diào)陰道出血外陰搔癢外陰或陰道疼痛性功能障礙精品課件61精品課件61（二）標(biāo)本采集生殖器官標(biāo)本包括子宮頸、陰道、前列腺；男性及女性外生殖器的分泌物及經(jīng)血等。應(yīng)根據(jù)感染的部位和可能的病原體決定用于病原學(xué)診斷的標(biāo)本種類、采集部位和采集方法等。陰道、子宮頸及前列腺等分泌物應(yīng)由醫(yī)師采集，收集于無菌試管內(nèi)送檢。精品課件62（二）標(biāo)本采集精品課件62尿道分泌物1.女性尿道：患者排尿1小時后采集，首先拭去尿道口的滲出物；再用拭子通過陰道，靠著恥骨聯(lián)合，按摩尿道，采集分泌物；如未獲得分泌物，清洗外尿道，用滅菌紗布或棉球擦拭，用泌尿生殖道拭子插入尿道2－4cm，旋轉(zhuǎn)拭子2秒。2.男性尿道：用泌尿生殖道拭子插入尿道腔2－4cm，旋轉(zhuǎn)拭子，至少停留20秒，而使之容易吸收。精品課件63尿道分泌物精品課件63陰道分泌物擦除過多的分泌物和排出液，用無菌棉拭子采取陰道口內(nèi)4厘米內(nèi)側(cè)壁或后穹窿處分泌物，如果需要涂片，需再用一個拭子。男性前列腺：用前列腺按摩法采集前列腺液。清洗尿道口，沖洗尿道膀胱，從肛門用手指按摩前列腺，使前列腺液溢出，用無菌容器收集。無肉眼可見膿液時，可用滅菌拭子輕輕伸入前尿道內(nèi)，旋轉(zhuǎn)拭子采集標(biāo)本。精品課件64陰道分泌物精品課件64（三）注意事項

1.生殖器是開放性器官，標(biāo)本采集過程中應(yīng)嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)程以減少雜菌污染。

2.由于陰道正常菌群的存在而使細(xì)菌的分離鑒定受到干擾，所以在采集女性生殖道標(biāo)本時應(yīng)注意盡量減少或避免正常菌群的污染。

3.疑有宮腔感染，如遇產(chǎn)婦需行剖宮產(chǎn)，待胎兒娩出后取宮腔分泌物，并同時取嬰兒耳拭子一同送檢。

4.沙眼衣原體和病毒均在宿主細(xì)胞內(nèi)繁殖，取材時拭子應(yīng)在病變部位（移行上皮處稍內(nèi)）停留十幾秒鐘，并采集盡可能多的上皮細(xì)胞。精品課件65（三）注意事項精品課件655.生殖道感染厭氧菌也較多見，疑有厭氧菌感染時，標(biāo)本采集和運送應(yīng)避免與氧氣接觸，最佳方法是床邊采樣，直接接種至厭氧裝置內(nèi)。

6.淋病奈瑟菌檢查時，取材的深度一定要夠，因為淋球菌好發(fā)于柱狀上皮細(xì)胞而不是復(fù)層鱗狀上皮細(xì)胞。不論男女尿道及子宮頸均需用拭子插入尿道及子宮頸3cm深轉(zhuǎn)動并停留10-30s取樣送檢。

7.淋病奈瑟菌抵抗力低，對外環(huán)境變化頗為敏感，對寒冷和干燥抵抗力很弱。因此，為了保證培養(yǎng)有足夠的成功率，取材后要盡快送檢，立即接種，標(biāo)本離體時間越短越好。精品課件66精品課件66六、化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本采集規(guī)范精品課件67六、化膿和創(chuàng)傷標(biāo)本采集規(guī)范精品課件67

組織或器官的化膿性感染，其病原菌的來源可分為兩類：①內(nèi)源性：感染源是炎癥局部周圍器官中的正常菌群，由于損傷等因素進入無菌狀態(tài)的組織內(nèi)，發(fā)生感染。②外源性：感染源是存在于人體外部自然界的微生物，由于外傷和直接接觸通過人體表面進入人體，造成感染。膿液的細(xì)菌學(xué)檢查對于確定感染的種類（結(jié)核性或非結(jié)核性等）、提供藥物敏感結(jié)果和指導(dǎo)臨床治療有重要的意義。精品課件68組織或器官的化膿性感染，其病原菌的來源可分為兩類：精品課件（一）標(biāo)本采集1．開放性感染和已潰破的化膿灶標(biāo)本采集前先用滅菌生理鹽水拭去表面滲出物，盡可能用抽吸或?qū)⑹米由钊雮冢o貼傷口前沿取樣，從膿腫底部或膿腫壁取樣，效果最好。慢性感染，污染嚴(yán)重，很難分離到致病菌，可取感染部位下的組織，研磨成組織勻漿接種于適宜的培養(yǎng)基。2．封閉性膿腫局部消毒后用針及注射器抽吸膿腫壁，將所有物質(zhì)置于無菌試管內(nèi)送檢，疑為厭氧菌感染時立即作床邊接種或置于厭氧轉(zhuǎn)運裝置送檢（針頭插一橡皮塞隔絕空氣）。但取樣時，可能會帶入與感染過程無關(guān)的定植細(xì)菌。3．大面積創(chuàng)傷感染：可取感染組織塊或沾有膿汁的內(nèi)層敷料送檢。精品課件69（一）標(biāo)本采集精品課件69（二）注意事項細(xì)菌對干燥敏感或只能采集少量標(biāo)本時，用棉拭子采集標(biāo)本后立即放入液體培養(yǎng)基內(nèi)，或采標(biāo)本前先將棉拭子沾少許肉湯以保持標(biāo)本濕度。對于不能立即送檢的標(biāo)本，應(yīng)放4℃保存，培養(yǎng)淋病奈瑟菌和腦膜炎奈瑟菌的標(biāo)本除外。盡可能在用藥前采集標(biāo)本。采樣前病灶局部應(yīng)避免用抗菌藥物或消毒劑。革蘭染色對標(biāo)本進行評估。涂片中如出現(xiàn)上皮細(xì)胞提示標(biāo)本已被污染。沒有上皮細(xì)胞而有白細(xì)胞說明標(biāo)本采集正確。有的創(chuàng)傷均可有細(xì)菌污染，但不一定發(fā)生感染，因此對分離到的細(xì)菌要根據(jù)創(chuàng)傷的情況、菌量和種數(shù)，收集標(biāo)本的處理過程、機體免疫力及抗生素的使用情況等多種因素來分析判斷。精品課件70精品課件70七、穿刺液標(biāo)本采集規(guī)范

精品課件71七、穿刺液標(biāo)本采集規(guī)范精品課件71穿刺液主要包括:

腦脊液膽汁胸水腹水心包液關(guān)節(jié)液鞘膜液在正常人體中，上述體液均是無菌的。有感染的情況下檢出的細(xì)菌，在排除污染后應(yīng)視為病原菌，及時給予正確的治療，使病人早日恢復(fù)健康。精品課件72穿刺液主要包括:精品課件72（一）腦脊液1.采集時間：懷疑為腦膜炎的病人，應(yīng)立即采集腦脊液，最好在使用抗菌藥物以前采集標(biāo)本。2.采集方法：用腰穿方法采集腦脊液3～5ml，分裝到3個無菌試管中，每個試管1～2ml。第一管用于細(xì)菌培養(yǎng)!

也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶,用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。精品課件73（一）腦脊液精品課件733.標(biāo)本運送和保存：腦膜炎奈瑟菌離體后會迅速自溶,肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌也很容易死亡,因此,標(biāo)本應(yīng)立即送檢,并注意保溫、防干燥。切不可置冰箱保存,否則會影響檢出率。腦脊液標(biāo)本送檢的理想時間為15分鐘內(nèi)，半小時送檢是可接受的，如果送檢時間超過1小時，則會影響結(jié)果。如不能及時送檢，可使用血培養(yǎng)瓶（懷疑腦膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染時，請勿使用血培養(yǎng)瓶）精品課件743.標(biāo)本運送和保存：腦膜炎奈瑟菌離體后會迅速自溶,肺炎鏈球菌新型隱球菌墨汁負(fù)染色左圖：低倍鏡；右圖：高倍鏡精品課件75新型隱球菌墨汁負(fù)染色精品課件75

（二）膽汁及其它穿刺液（胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液及鞘膜液等）

1.采集時間懷疑感染存在，應(yīng)盡早采集標(biāo)本，一般在患者使用抗菌藥物之前或停止用藥后2-3天采集。

2.采集方法①無菌操作穿刺抽取標(biāo)本或外科手術(shù)采集標(biāo)本。②標(biāo)本采集量應(yīng)＞1ml。胸腔積液、腹水可抽取10ml,心包液、關(guān)節(jié)液等可抽取2～5ml。③標(biāo)本采集后注入無菌小瓶或無菌試管中送檢也可將抽取液直接注入血培養(yǎng)瓶，用血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。為防止穿刺液的凝固，應(yīng)在無菌試管中預(yù)先加入滅菌肝素，再注入穿刺液。精品課件76（二）膽汁及其它穿刺液（胸水、腹水、心包液、關(guān)節(jié)液及八、眼、耳、鼻、咽拭子標(biāo)本采集規(guī)范

精品課件77八、眼、耳、鼻、咽拭子標(biāo)本采集規(guī)范精

正常眼部、中耳及鼻竇內(nèi)是無菌的，而咽峽部有口腔的常在菌叢。耳、鼻、咽部的細(xì)菌感染病原菌多源于口腔，口腔中既有需氧菌也有厭氧菌，所以，其周圍組織器官的感染不僅考慮是需氧菌，也須檢查厭氧菌。精品課件78正常眼部、中耳及鼻竇內(nèi)是無菌的，而咽峽部有口腔的常（一）標(biāo)本采集

1.眼結(jié)膜：分別用（無菌鹽水預(yù)濕）拭子繞每一個結(jié)膜取；采集完即接種培養(yǎng)基；將拭子涂片在兩個玻片上染色。角膜刮擦：滴兩滴局部麻醉液；用無菌鏟刮擦膿腫或潰瘍，將刮擦物直接接種于培養(yǎng)基；將剩余材料涂于兩個干凈的玻片上染色。液體或抽吸物：備眼，用針頭抽吸液體。先用無菌生理鹽水沖洗眼部，然后用棉拭子拭干，再用無菌棉拭子采集分泌物。精品課件79（一）標(biāo)本采集精品課件792.耳

內(nèi)耳：對復(fù)雜的、反復(fù)的或慢性頑固的中耳炎做鼓膜穿刺術(shù)，接觸耳鼓室先用肥皂水清洗耳道再用注射器收集液體；對破裂的鼓室，借助耳科診視器，用軟桿拭子收集液體。外耳：用濕拭子將耳道的任何碎屑或痂皮拭去；在外耳道用力旋轉(zhuǎn)拭子取樣。3．鼻或鼻咽分泌物直接用拭子涂抹病灶部位，切勿接觸周圍粘膜或皮膚，標(biāo)本立即送檢。4．咽分泌物先用清水漱口，用壓舌板將舌向下向外壓，將咽拭子在咽后壁或懸雍垂后側(cè)涂抹數(shù)次，插入運送培養(yǎng)基。切勿接觸口腔和舌粘膜。

精品課件802.耳精品課件80（二）標(biāo)本運送和保存標(biāo)本采集時，無菌手續(xù)以稍蘸肉湯的拭子采集病變明顯處的膿液和分泌物。采取后拭子應(yīng)置于運送培養(yǎng)基或培養(yǎng)拭子運送，以防干燥。立即送檢，如不能及時送檢，應(yīng)置于４℃冰箱保存，超過48h不可使用。精品課件81（二）標(biāo)本運送和保存精品課件81九、導(dǎo)管標(biāo)本采集規(guī)范

精品課件82九、導(dǎo)管標(biāo)本采集規(guī)范精品課件82

血管內(nèi)留置管道是現(xiàn)代醫(yī)護工作，尤其是ICU一個不可缺少的部分。目前使用的有外周靜脈導(dǎo)管和單腔、多腔的中心靜脈導(dǎo)管、隧道式的中心靜脈導(dǎo)管、漂浮式肺動脈導(dǎo)管、經(jīng)外周靜脈置入中心靜脈的導(dǎo)管、外周動脈導(dǎo)管等。這些可留置的通道為醫(yī)療工作的液體、血液制品、營養(yǎng)物質(zhì)、藥物的輸入、血流動力學(xué)監(jiān)測、采血及急救通道的維持提供了可靠途徑；但同時也帶來了各種并發(fā)癥，如導(dǎo)管相關(guān)的局部感染與菌血癥、血栓形成、血栓性脈管炎、膿性血栓脈管炎等。精品課件83血管內(nèi)留置管道是現(xiàn)代醫(yī)護工作，尤其是ICU一個不血管導(dǎo)管培養(yǎng)

?

血管導(dǎo)管（intravascularcathetertips）及腹膜透析導(dǎo)管（peritonealdialysiscatheters）培養(yǎng)是偵測血流感染源方法之一

?

標(biāo)準(zhǔn)方法：經(jīng)由導(dǎo)管抽取20ml血液，進行血液培養(yǎng)；導(dǎo)管周圍的皮膚乙醇消毒，然后以無菌剪刀取下約5cm長度，置于無菌容器中送檢（防干燥，不能作床旁接種者，可將導(dǎo)管置含有少量生理鹽水的無菌試管內(nèi)送檢。也可將剪下的導(dǎo)管體內(nèi)段置肉湯增菌液或用于血培養(yǎng)液內(nèi)，但不能區(qū)分導(dǎo)管感染菌與少量的定植菌）再由靜脈端抽血進行另外一套血液培養(yǎng)。精品課件84血管導(dǎo)管培養(yǎng)精品課件84

標(biāo)本處理：

實驗室將體內(nèi)段導(dǎo)管立即置血平皿上作滾動涂布接種，將血平板置35℃培養(yǎng)8～24h，觀察有無細(xì)菌生長，如細(xì)菌菌落數(shù)≥15CFU/Tip即為陽性，則認(rèn)為血流感染是可能與導(dǎo)管有關(guān)。精品課件85標(biāo)本處理：精品課件85導(dǎo)管相關(guān)感染主要病原菌：凝固酶陰性的葡萄球菌（主要是表皮葡萄球菌）是最常見的導(dǎo)致導(dǎo)管相關(guān)性感染的細(xì)菌，所占比例超過50%。主要原因是凝固酶陰性的葡萄球菌易粘附塑料導(dǎo)管，易導(dǎo)致導(dǎo)管相關(guān)菌血癥。其次是革蘭氏陰性腸桿菌屬及真菌，特別是白色念珠菌。較少見的還有假單胞菌屬、棒狀菌屬等。其它如黃桿菌屬、不動桿菌等不常見的感染，常提示輸液品感染或環(huán)境污染。精品課件86導(dǎo)管相關(guān)感染主要病原菌：精品課件86十、組織標(biāo)本采集規(guī)范

精品課件87十、組織標(biāo)本采集規(guī)范精品課件87

根據(jù)不同的病變部位，炎癥或壞死組織部位，采用相應(yīng)的方法采集組織標(biāo)本。（一）表淺組織表淺的感染組織和各種竇道標(biāo)本可用棉簽擦拭、小刀刮取、穿刺抽吸或手術(shù)切除。對竇道和瘺管應(yīng)深部刮取管壁組織。

1．皮膚、黏膜、指甲用棉簽或小刀擦取或刮取，也可用手術(shù)切除或穿刺抽取置無菌試管送檢。

2．牙周穿刺活檢或抽取炎性分泌物置無菌的容器內(nèi)送檢。

3．竇道、瘺管用深部刮取術(shù)，采集一小部分管壁組織，置無菌的容器內(nèi)送檢。采集時間一般表淺皮膚黏膜組織在使用抗菌藥物之前采集。精品課件88

（二）深部組織

深部組織標(biāo)本可經(jīng)皮膚穿刺采集或手術(shù)切取。標(biāo)本置無菌容器并加少量生理鹽水以保濕度，或置肉湯增菌液，或置血平皿送檢。如果懷疑為厭氧菌感染，應(yīng)把組織放入?yún)捬醯膫鬏斚到y(tǒng)內(nèi)立即送檢。

采集各種深部組織活檢之前，應(yīng)嚴(yán)格進行皮膚消毒后才行無菌穿刺采集。采集時間

深部組織包括肺、腦、胃、十二指腸等腹部臟器、支氣管、淋巴結(jié)、附件、扁桃體等，在手術(shù)或內(nèi)窺鏡檢查時采集。精品課件89（二）深部組織精品課件89（三）作病原體分離的組織標(biāo)本，不可用福爾馬林固定。疑有污染的較大組織塊，可用燒紅的烙鐵燒灼其表面或置沸水中5～10s使表面變白消除污染后，再用無菌器械切開組織，取中央部位組織送檢。懷疑軍團菌感染時，肺組織切片不要加入生理鹽水，因為生理鹽水可抑制軍團菌生長。各種活檢組織標(biāo)本，在常溫下保存最長時間為24h。精品課件90（三）作病原體分離的組織標(biāo)本，不可用福爾馬林固定。疑有污染的微生物標(biāo)本的保存儲存環(huán)境標(biāo)本來源4℃冰箱尿液、痰液、糞便

35℃溫箱腦脊液細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本室溫眼、耳、鼻、咽、血管導(dǎo)管、組織、體液、生殖道、厭氧菌培養(yǎng)標(biāo)本、血液培養(yǎng)瓶指甲，頭發(fā)，皮膚刮取物霉菌培養(yǎng)標(biāo)本

精品課件91微生物標(biāo)本的保存精品課件91精品課件92精品課件92臨床微生物標(biāo)本

采集規(guī)范精品課件93臨床微生物標(biāo)本

采集規(guī)范精品課件1世界人口死因感染性疾病：25％

抗生素時代，感染仍是人類健康的主要“殺手”精品課件94精品課件2高死亡率原因新現(xiàn)傳染病：近30年，已有近30種新的病原生物，其中包括HIV、SARS、禽流感和各種新型肝炎病毒等引起的各種疾病。再現(xiàn)傳染?。阂酝驯徽J(rèn)為得到很好控制的傳染病，如結(jié)核、登革熱等的流行和傳播又重新抬頭。精品課件95高死亡率原因新現(xiàn)傳染?。航?0年，已有近30種新的病原生物，低免疫人群急劇上升：艾滋病、移植醫(yī)學(xué)國際間交通的快速便捷使得當(dāng)今疾病傳播無國界的概念。氣候變暖，人口快速增長，都市化進程加快，伴隨人口密度和人口流動增加，清潔水源不足和衛(wèi)生設(shè)施的不完善，以及生態(tài)破壞造成人與媒介生物接觸機會增多（動物微生物向人類的襲擊）等。人類還沒有足夠的能力戰(zhàn)勝病原體。病原生物的抗藥性產(chǎn)生的速度已超過新型抗生素發(fā)明的速度（細(xì)菌耐藥性的快速發(fā)展)。精品課件96低免疫人群急劇上升：艾滋病、移植醫(yī)學(xué)國際間交通的快速便捷使得

提高感染樣本送檢率加強細(xì)菌耐藥監(jiān)測關(guān)注細(xì)菌性疾病的病原學(xué)診斷，已成為臨床工作者、臨床微生物與微生態(tài)工作者、藥學(xué)家和從事感染控制的工作者共同關(guān)注的熱門焦點。精品課件97提高感染樣本送檢率精品課件5成功治療感染癥的因素?成功分離病原菌

–標(biāo)本收集、運送、保存

–標(biāo)本處理方法

–檢驗醫(yī)師專業(yè)知識?醫(yī)師判讀病原菌培養(yǎng)結(jié)果?選擇適當(dāng)治療方法精品課件98成功治療感染癥的因素精品課件6臨床醫(yī)生要合理用好兩種數(shù)據(jù)1.本地區(qū)、本單位病原流行病學(xué)資料，指導(dǎo)經(jīng)驗用藥。（微生物室、院感科、臨床科室）2.藥敏試驗報告，糾正經(jīng)驗用藥。重視病原學(xué)檢查,盡可能在應(yīng)用抗菌藥物之前留取標(biāo)本送檢。以提高病原學(xué)診斷率,為選藥和調(diào)整藥物提供依據(jù)。精品課件99臨床醫(yī)生要合理用好兩種數(shù)據(jù)1.本地區(qū)、本單位病原流行病學(xué)資“正確的微生物學(xué)檢驗始自正確的標(biāo)本采取。臨床醫(yī)師、護師及檢驗技師都必須通曉其要領(lǐng)。”

著名的臨床微生物檢驗專著ManualofClinicalMicrobiology的主編PatrickMurray精品課件100“正確的微生物學(xué)檢驗始自正確的標(biāo)本采取。臨床醫(yī)師、護師及

標(biāo)本采集和運送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)鍵但由于標(biāo)本的采集和運送常由護士或醫(yī)生或病人自己完成，所以也是最不容易做好的事情，而且不知道問題所在之處，造成的后果是:臨床醫(yī)生最不能接受的問題:陽性率低精品課件101標(biāo)本采集和運送是細(xì)菌培養(yǎng)成功的最最重要的關(guān)鍵精品課件9國內(nèi)微生物標(biāo)本的采集目前存在的問題：

標(biāo)本送檢率低從全國來看，抗感染治療前，送檢相關(guān)標(biāo)本可能只占應(yīng)送標(biāo)本的一半左右，與抗菌藥物應(yīng)用率之高形成鮮明的反差。一些醫(yī)師在經(jīng)驗性治療受挫后方送標(biāo)本，此時已失去陽性培養(yǎng)的機會。標(biāo)本有缺陷正確收集各種臨床標(biāo)本，關(guān)注特檢標(biāo)本采樣與送檢的方法和條件，是完成病原學(xué)診斷的先決條件。精品課件102國內(nèi)微生物標(biāo)本的采集目前存在的問題：精品課件10微生物讓人類步步為營， 我們應(yīng)該追求： “準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷” “針對性病原學(xué)治療”

正確的微生物標(biāo)本采集和運送，是準(zhǔn)確的病原學(xué)診斷的前提！精品課件103微生物讓人類步步為營，精品課件11標(biāo)本規(guī)范化采集的重要性正確采集、處理與運送細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本直接關(guān)系到致病菌培養(yǎng)的正確性與陽性率的高低，是臨床細(xì)菌檢驗成功的關(guān)鍵。標(biāo)本質(zhì)量的好壞直接影響診斷結(jié)果的正誤，不當(dāng)?shù)臉?biāo)本可導(dǎo)致假陰性、假陽性結(jié)果的出現(xiàn)，因此標(biāo)本采集與處理的規(guī)范化是準(zhǔn)確、及時地向臨床提供重要的臨床感染信息的基礎(chǔ)。好的微生物檢驗標(biāo)本可提升實驗室工作效率及病患照顧質(zhì)量，降低醫(yī)療成本。精品課件104標(biāo)本規(guī)范化采集的重要性正確采集、處理與運送細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本直接如何提高細(xì)菌陽性檢出率標(biāo)本采集時機標(biāo)本采集方法標(biāo)本的質(zhì)與量標(biāo)本的運送與保存鏡檢篩選合格標(biāo)本高質(zhì)量、多種分離培養(yǎng)基培養(yǎng)環(huán)境合理的收費制度精品課件105如何提高細(xì)菌陽性檢出率標(biāo)本采集時機精品課件13微生物樣本采樣基本原則

1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查

2.在抗菌藥物使用前采集標(biāo)本

3.采樣時嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作

4.采樣后立即送檢甚至床旁接種尤其是厭氧培養(yǎng)

5.棉拭子標(biāo)本宜用運送培養(yǎng)基

6.混有正常菌群污染標(biāo)本，不可置肉湯培養(yǎng)

7.標(biāo)本容器須滅菌處理，但不得使用消毒劑

8.送檢標(biāo)本應(yīng)注明來源和檢驗?zāi)康木氛n件106微生物樣本采樣基本原則

1.及時采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查

標(biāo)本收集部位

非無菌部位無菌部位眼血液耳脊髓液呼吸道胸膜液腸胃道腹膜液泌尿道關(guān)節(jié)液皮膚毛發(fā)精品課件107標(biāo)本收集部位

非無菌部位一、血培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范精品課件108一、血培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范精品課件16相似規(guī)模醫(yī)院的血培養(yǎng)數(shù)?

國內(nèi)多數(shù)三甲綜合醫(yī)院2～10瓶/天?

復(fù)旦大學(xué)中山醫(yī)院20～50瓶/天?

香港瑪麗醫(yī)院200瓶/天?

臺灣大學(xué)醫(yī)院300瓶/天?

我院約10～20瓶/天精品課件109相似規(guī)模醫(yī)院的血培養(yǎng)數(shù)精品課件17（一）血培養(yǎng)檢測采血指征臨床上疑為敗血癥、膿毒血癥或其他血液感染的患者

1.發(fā)熱（≥38℃）或低溫（≤36℃）

2.寒戰(zhàn)

3.白細(xì)胞增多（>10×109/L，特別有“核左移”未成熟的或桿狀核白細(xì)胞增多）

4.粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞<1×109/L）

5.血小板減少

6．皮膚粘膜出血

7．昏迷，休克

8．多器官衰竭

9.CRP升高在評估可疑新生兒敗血癥時，除發(fā)熱或低燒外，很少培養(yǎng)出細(xì)菌，應(yīng)該補充尿液和腦脊液培養(yǎng)。

對入院危重感染患者未進行系統(tǒng)性抗菌藥物治療之前，應(yīng)及時采集血培養(yǎng)。精品課件110（一）血培養(yǎng)檢測采血指征精品課件18（二）血培養(yǎng)檢測消毒程序

1.皮膚消毒程序：嚴(yán)格執(zhí)行三步法（防止皮膚寄生菌污染）

（1）用75%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上；

（2）然后用1%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒，從穿刺點向外畫圈消毒，至消毒區(qū)域直徑達3cm以上；（3）最后用75%酒精脫碘，待酒精揮發(fā)干燥后采血。

新生兒及對碘過敏的患者，只能用75%酒精消毒60s，待穿刺部位酒精揮發(fā)干燥后穿刺采血。

2.培養(yǎng)瓶消毒程序：

（1）用75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60秒。

（2）用無菌紗布或無菌棉簽清除橡皮塞表面剩余的酒精，然后注入血液。

精品課件111精品課件19要求：嚴(yán)格無菌操作，不允許在皮膚消毒后用手按壓靜脈，除非帶有無菌手套。不推薦采血和接種血培養(yǎng)瓶更換注射器針頭，采用真空采血裝置能降低污染率。說明：無論采用何種采血方法，血培養(yǎng)可接受的污染率通常是≤3%。研究表明，經(jīng)過專門培訓(xùn)的熟練抽血者采集血培養(yǎng)的污染率為3%，而未經(jīng)培訓(xùn)的住院醫(yī)生和護士污染率則達11%。因此對臨床護士就血培養(yǎng)標(biāo)本采集進行專門的、嚴(yán)格的培訓(xùn)是非常必要的。精品課件112要求：精品課件20（三）血培養(yǎng)標(biāo)本采集和運送1.采集時間要求：對懷疑菌血癥、真菌血癥的患者，在考慮使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集血培養(yǎng)標(biāo)本。必須同時或間隔短時間內(nèi)采集2套（每套包括1只普通血培養(yǎng)瓶及1只厭氧血培養(yǎng)瓶）以上血培養(yǎng)標(biāo)本。說明：實驗數(shù)據(jù)表明細(xì)菌入血后約1小時，寒戰(zhàn)和發(fā)燒開始出現(xiàn)2小時內(nèi)，此時為采集血培養(yǎng)標(biāo)本進行病原菌培養(yǎng)的最佳時機。在不同的時間點采血只有在以下情況才有必要：疑似感染性心內(nèi)膜炎或其他血管內(nèi)（如導(dǎo)管相關(guān)性感染）感染患者的連續(xù)性菌血癥。精品課件113（三）血培養(yǎng)標(biāo)本采集和運送精品課件21你認(rèn)為對嗎？

為了提高病人血培養(yǎng)的陽性率，最好的抽血時間是：

A.發(fā)熱開始時

B.寒戰(zhàn)開始時

C.發(fā)熱最高峰時

D.寒戰(zhàn)結(jié)束時

E.預(yù)計寒戰(zhàn)發(fā)熱前

精品課件114你認(rèn)為對嗎？

為了提高病人血培養(yǎng)的陽性率，最好的抽血時間是：細(xì)菌量

體溫

時間上升幅度精品課件115細(xì)菌量體溫時間上升幅度精品課件232.采集部位要求：從兩側(cè)上肢靜脈采血，“雙瓶雙側(cè)”采血培養(yǎng)。至少做到“雙側(cè)雙瓶”。必要時從下肢靜脈采血做第三套血培養(yǎng)。說明：不建議采集（1）動脈血，因其診斷價值沒有比靜脈血更大；（2）靜脈留置導(dǎo)管，因其常伴有高污染率。如果必須從留置導(dǎo)管內(nèi)采血，也應(yīng)同時從外周靜脈采集另外一個血培養(yǎng)標(biāo)本，以幫助陽性結(jié)果的判讀。精品課件1162.采集部位精品課件24

所謂“雙瓶雙側(cè)”，是指從一個部位采血接種一套培養(yǎng)瓶，再從另一部位采血接種另一套培養(yǎng)瓶。（通常是雙臂）所謂“雙側(cè)雙瓶”，是指從一個部位采血接種一個需氧瓶，再從另一部位采血接種另一個厭氧瓶。一次靜脈采血注入到多個培養(yǎng)瓶中應(yīng)視為單個血培養(yǎng)。精品課件117所謂“雙瓶雙側(cè)”，是指從一個部位采血接種一套培養(yǎng)瓶，3.采集次數(shù)要求：對懷疑菌血癥、真菌血癥的成人患者，推薦同時采集2~3套（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。（即雙瓶雙臂同時采集血培養(yǎng)標(biāo)本。）嬰幼兒患者，推薦同時采集2次（不同部位）血培養(yǎng)標(biāo)本。說明：除特殊情況之外，在采取血培養(yǎng)后的2至5天內(nèi)，無需重復(fù)采取血培養(yǎng)。因為抗菌治療的2至5天內(nèi)，血液中的細(xì)菌不會立即消失。研究證明，血培養(yǎng)只做1套的檢出率為65%，做2套和3套的檢出率分別為80%和96%。單瓶的血培養(yǎng)檢出率不高，而且結(jié)果很難做出臨床解釋。精品課件1183.采集次數(shù)精品課件264.采血量要求：成年患者推薦的采血量為每套不少于10ml，每瓶不少于5ml。嬰幼兒患者推薦的采血量為每瓶不少于2ml。說明：血標(biāo)本采集的量是影響檢出率的最重要的因素。成人血培養(yǎng)采血量在2~30ml之間，病原菌檢出率與采血量成正比例增長。每增加1ml的血液，病原菌的檢出率增加3.2%。兒童患者因為血液中病原菌濃度較高，血培養(yǎng)量無需等同于成人。對血液病患者或者血容量相對較低的患者建議使用兒童瓶來減少血液的采集量增加病原菌的檢出率。精品課件1194.采血量精品課件27菌血癥病人血中細(xì)菌濃度成年病人:鏈球菌心內(nèi)膜炎1to30organisms/ml葡萄球菌心內(nèi)膜炎1to20organisms/ml革蘭氏陰性菌血癥少于1to10organisms/ml革蘭氏陽性菌血癥1to300organisms/ml幼兒病人:革蘭氏陰性菌血癥5to1000organisms/ml75%幼兒菌血癥病人血液有＞100organisms/ml所以采血量一定要足夠！精品課件120菌血癥病人血中細(xì)菌濃度精品課件285.血液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配要求：一個需氧瓶和一個厭氧瓶為一套血培養(yǎng)，作為常規(guī)血培養(yǎng)的組合。說明：采用一對需氧瓶+厭氧瓶組合，比采用二個需氧瓶的組合可檢出能更多的葡萄球菌、腸桿菌科細(xì)菌和厭氧菌。而且，采兩瓶可以保證足夠的采血量。當(dāng)被用來做培養(yǎng)的采血量少于推薦值時，血必須首先接種需氧瓶，然后將剩余的血液接種入?yún)捬跗?。因為多?shù)菌血癥是由需氧和兼性需氧細(xì)菌造成的，而這些細(xì)菌從需氧瓶中更好的被分離。

精品課件1215.血液標(biāo)本在需氧瓶和厭氧瓶中的分配精品課件29由于嬰幼兒患者厭氧菌所致菌血癥比較罕見，嬰幼兒血培養(yǎng)可以僅用需氧瓶，為提高檢出率、區(qū)分污染菌，應(yīng)采用兩只需氧瓶為一組血培養(yǎng)。仍然采用雙側(cè)雙瓶的采血方式。真菌血培養(yǎng)采用需氧血培養(yǎng)瓶采集標(biāo)本。采用中和/滅活抗菌藥物的血培養(yǎng)瓶可提高真菌的檢出率。自動化血培養(yǎng)系統(tǒng)不能用于雙相真菌的檢測。精品課件122由于嬰幼兒患者厭氧菌所致菌血癥比較罕見，嬰幼兒血培養(yǎng)可以僅用6.血培養(yǎng)標(biāo)本的運送要求：（1）采集后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)在1小時之內(nèi)送往實驗室。（2）血培養(yǎng)瓶在接種前和接種后均不得冷藏和冷凍。說明：血培養(yǎng)瓶冷藏或冷凍會將一些微生物殺滅，將裝著液體的容器冰凍也會使容器破裂。精品課件1236.血培養(yǎng)標(biāo)本的運送精品課件317.血培養(yǎng)的培養(yǎng)周期要求：自動化血培養(yǎng)儀的標(biāo)準(zhǔn)血培養(yǎng)周期為5天。說明：有研究表明，95%-97%的有臨床價值的細(xì)菌會在3-4天內(nèi)被自動血培養(yǎng)系統(tǒng)檢出，目前仍推薦5天的培養(yǎng)周期。特殊情況可適當(dāng)延長培養(yǎng)時間。如臨床懷疑布魯菌感染，可延長培養(yǎng)至28天等。精品課件1247.血培養(yǎng)的培養(yǎng)周期精品課件32血培養(yǎng)假陽性的危害1、增加患者抗生素用量，破壞其微生態(tài)環(huán)境2、延長了住院天數(shù)3、延誤病情診斷4、增加經(jīng)濟負(fù)擔(dān)

防止皮膚寄生菌或環(huán)境微生物污染精品課件125血培養(yǎng)假陽性的危害精品課件33二、下呼吸道（痰培養(yǎng)）

標(biāo)本采集規(guī)范精品課件126二、下呼吸道（痰培養(yǎng)）

標(biāo)本采集規(guī)范精品課件34病原體種類繁多而復(fù)雜

使下呼吸道感染病原診斷成為難題細(xì)菌（包括放線菌與奴卡菌，厭氧菌與分枝桿菌）真菌（包括肺孢子菌）病毒支原體、衣原體與立克次體原蟲寄生蟲精品課件127病原體種類繁多而復(fù)雜

使下呼吸道感染病原診斷成為難題細(xì)菌（包我國痰培養(yǎng)現(xiàn)狀標(biāo)本送檢率低苛養(yǎng)菌檢出率極低結(jié)果重復(fù)性差報告速度慢感染菌與污染菌不易區(qū)分藥敏結(jié)果與治療反應(yīng)存在差距精品課件128我國痰培養(yǎng)現(xiàn)狀標(biāo)本送檢率低精品課件36標(biāo)本采集方法醫(yī)師或護士直視下采集標(biāo)本病人先漱口，去除表面的菌群教育病人深咳，收集從下呼吸道咳出的痰液臨床上約半數(shù)咳痰標(biāo)本不合格！咳痰標(biāo)本精品課件129標(biāo)本采集方法咳痰標(biāo)本精品課件37咳痰途經(jīng)口咽部不可避免地受到污染唾液中口咽部定植菌的濃度可達108

～109/ml。研究顯示，國內(nèi)常規(guī)痰標(biāo)本中約半數(shù)存在唾液嚴(yán)重污染現(xiàn)象。精品課件130咳痰途經(jīng)口咽部不可避免地受到污染精品課件38合格標(biāo)本的判斷標(biāo)準(zhǔn)外觀：觀察顏色、粘度、有無血絲或膿。若標(biāo)本為水狀且很明顯是唾液，則應(yīng)拒收。為了判定是否來自下呼吸道的痰，需檢查是否為合格的痰標(biāo)本。白細(xì)胞＞25個/低倍鏡視野、鱗狀上皮細(xì)胞＜10個/低倍鏡視野為合格標(biāo)本。采集合格標(biāo)本對細(xì)菌的診斷極為重要。合格痰液標(biāo)本不合格痰液標(biāo)本精品課件131合格標(biāo)本的判斷標(biāo)準(zhǔn)合格痰液標(biāo)本不合格痰液標(biāo)本精品課件39（一）采集指征凡是發(fā)熱、咳嗽和咳痰，痰呈膿性、粘稠或血性，并伴有胸痛、氣急，肺部聞及濕羅音，外周白細(xì)胞總數(shù)及中性粒細(xì)胞比例明顯增高，X線檢查提示肺部有炎性浸潤或胸腔積液，甚至出現(xiàn)感染性休克和呼吸衰竭等患者，應(yīng)采集痰液或下呼吸道標(biāo)本。對可疑烈性呼吸道傳染?。ㄈ鏢ARS、肺炭疽、肺鼠疫等）患者采集檢驗標(biāo)本時必須注意生物安全防護。精品課件132（一）采集指征精品課件40（二）采集方法自然咳痰法以晨痰為佳。用清水反復(fù)漱口，用力咳出呼吸道深部的痰，痰液直接吐入無菌容器中，盡快送檢。否則有的細(xì)菌（如肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌）在外界可能死亡。不能及時送檢的標(biāo)本，室溫保存≤2h。要求采到肺深部的痰液，不要唾液。精品課件133（二）采集方法精品課件41在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本;標(biāo)本采集后1～2h內(nèi)必須立即進行實驗室處理；咳痰標(biāo)本應(yīng)用最早且廣泛，但也是最受爭議的標(biāo)本;取標(biāo)本前應(yīng)摘去牙托，清潔口腔如刷牙和漱口;深咳，采集標(biāo)本過程中要有專業(yè)的醫(yī)務(wù)人員指導(dǎo);對于細(xì)菌性肺炎，痰標(biāo)本送檢每天1次，連續(xù)2～3天；不建議24h內(nèi)多次采集，除非痰液外觀性狀改變；懷疑分枝桿菌感染者，應(yīng)連續(xù)收集3天清晨痰液送檢。精品課件134在抗生素應(yīng)用前采集痰標(biāo)本;精品課件422.小兒取痰法

用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子深入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部和氣管分泌物，粘在棉拭子上送檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。3.支氣管鏡采集法

–-經(jīng)支氣管鏡直接吸引

–-支氣管肺泡灌洗

–-防污染樣本毛刷精品課件1352.小兒取痰法用彎壓舌板向后壓舌，用棉拭子深入咽部，小兒經(jīng)（三）注意事項1.痰標(biāo)本不能及時送檢者，可暫存4℃冰箱。室溫下耽擱數(shù)小時，定植于口咽部的非致病菌過度生長而肺炎鏈球菌、葡萄球菌和流感嗜血桿菌檢出率則明顯降低。2.在臨床上咳痰仍是診斷肺部感染最常用的標(biāo)本，但咳痰也最易被口咽部正常菌群污染。痰液標(biāo)本的細(xì)菌學(xué)檢驗，必須區(qū)分是病原菌還是來自上呼吸道的正常菌群。經(jīng)過洗滌處理的痰液或自氣管鏡采集及氣管穿刺所獲標(biāo)本，結(jié)果比較可靠。

精品課件136（三）注意事項精品課件443.由于口腔和咽部存在大量的革蘭陽性和革蘭陰性厭氧細(xì)菌，而且缺乏可靠的方法區(qū)分它們究竟是致病菌還是定植菌，因此不主張對咳痰標(biāo)本進行厭氧菌培養(yǎng)。4.約有1/4～1/2肺部感染患者可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時做血培養(yǎng)。精品課件1373.由于口腔和咽部存在大量的革蘭陽性和革蘭陰性厭氧細(xì)菌，而且三、尿培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范

尿路感染是指尿道內(nèi)有大量微生物繁殖而引起的尿路炎癥。根據(jù)感染部位分為：

上尿路感染（腎盂腎炎）下尿路感染（膀胱炎、尿道炎）男性可出現(xiàn)前列腺炎。精品課件138三、尿培養(yǎng)標(biāo)本采集規(guī)范

尿路感染是指尿道內(nèi)有大量微生物繁（一）尿培養(yǎng)標(biāo)本送檢指征1.有典型的尿路感染癥狀；2.有肉眼膿尿或血尿；3.尿常規(guī)檢查白細(xì)胞或亞硝酸鹽陽性；4.有不明原因的發(fā)熱，無其他局部癥狀；5.留置導(dǎo)尿管的患者出現(xiàn)發(fā)熱；6.膀胱排空功能受損；7.泌尿系統(tǒng)疾病手術(shù)前；8.有尿路感染癥狀者，前次培養(yǎng)結(jié)果陰性或抗菌治療48h后仍持續(xù)發(fā)熱。9.抗生素停藥后，感染癥狀再次出現(xiàn)。精品課件139（一）尿培養(yǎng)標(biāo)本送檢指征精品課件47

正常人尿液是無菌的，而尿液細(xì)菌培養(yǎng)最大的問題是雜菌污染。正常人外尿道有大腸桿菌、葡萄球菌等存在。而這些細(xì)菌又是尿路感染中常見的病原菌。因此要作好尿液細(xì)菌學(xué)檢查，首先應(yīng)注意標(biāo)本收集問題。尿液經(jīng)尿道排出時會受到尿道內(nèi)正常菌群的污染,但定量培養(yǎng)時計數(shù)不會超過103CFU/ml,泌尿系感染時定量培養(yǎng)在104～105CFU/ml。另外,由于絕大多數(shù)的泌尿系感染是由腸桿菌科細(xì)菌引起,而此類細(xì)菌的硝酸鹽還原實驗為陽性,故可參考尿檢查常規(guī)中的硝酸鹽還原實驗來推斷是否有細(xì)菌感染。精品課件140正常人尿液是無菌的，而尿液細(xì)菌培養(yǎng)最大的問題是雜菌污染（二）尿培養(yǎng)標(biāo)本采集方法標(biāo)本采集應(yīng)在使用抗生素之前，避免消毒劑污染標(biāo)本。1．清潔中段尿留取清晨清潔中段尿標(biāo)本，先用肥皂水仔細(xì)清洗會陰部，再用清水沖洗尿道口周圍；將前段尿排去，留取中段尿10ml左右于無菌容器內(nèi)，立即加蓋送檢，2h內(nèi)接種。該方法簡單、易行，是最常用的尿標(biāo)本收集方法，但是容易受到會陰部細(xì)菌污染。2．恥骨上膀胱穿刺使用無菌注射器直接從恥骨上經(jīng)皮膚消毒穿入膀胱吸取尿液，是評估膀胱內(nèi)細(xì)菌感染的“金標(biāo)準(zhǔn)”方法，主要用于厭氧菌培養(yǎng)或留取標(biāo)本困難的嬰兒尿標(biāo)本的采集。精品課件141（二）尿培養(yǎng)標(biāo)本采集方法精品課件493．直接導(dǎo)尿按常規(guī)方法對會陰局部進行消毒后，用導(dǎo)尿管直接經(jīng)尿道插入膀胱，獲取膀胱尿液，可減少尿液標(biāo)本污染，準(zhǔn)確地反映膀胱感染情況。但有可能下尿道細(xì)菌進入膀胱，導(dǎo)致繼發(fā)感染，一般不提倡使用。4．小兒收集包無自控能力的小兒可用收集包收集尿液，這種裝置由于很難避免會陰部菌群污染產(chǎn)生假陽性，所以只有在檢驗結(jié)果為陰性時才有意義。如果檢驗結(jié)果為陽性，應(yīng)結(jié)合臨床進行分析，必要時可使用膀胱上穿刺或?qū)蚍羧?biāo)本進行復(fù)檢。5．留置導(dǎo)尿管收集尿液用導(dǎo)尿管導(dǎo)取10-15ml尿液置滅菌容器內(nèi)送檢。長期留置導(dǎo)尿管者，應(yīng)在更換新導(dǎo)尿管后留取尿標(biāo)本。留置導(dǎo)尿患者應(yīng)消毒導(dǎo)尿管外部及尿管口，采取無菌操作方法，用注射器通過導(dǎo)尿管吸取尿液。注意防止混入消毒劑，不能從尿液收集袋中采集尿液。精品課件1423．直接導(dǎo)尿按常規(guī)方法對會陰局部進行消毒后，用導(dǎo)尿管直接（三）采集時間和標(biāo)本運送

1.應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用前或停用抗菌藥物5天后采集尿液。2.通常采集清晨第1次尿液送檢，確保尿液在膀胱內(nèi)停留4h以上，使細(xì)菌有足夠時間繁殖。囑患者睡前少飲水以免尿液稀釋。3.懷疑沙門菌感染時應(yīng)在發(fā)病2周左右采集尿液培養(yǎng)。4.對無癥狀的患者應(yīng)連續(xù)采集3天晨尿送檢。5.懷疑結(jié)核分枝桿菌感染時，患者應(yīng)停藥1-2天后采集晨尿或24h尿的沉渣部分10-15ml送檢。6.標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢、及時接種，室溫下保存時間不得超過2h（夏季保存時間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存），冷藏保存標(biāo)本必須在6h內(nèi)進行接種，但冷藏保存的標(biāo)本不能用于淋病奈瑟菌培養(yǎng)。精品課件143（三）采集時間和標(biāo)本運送精品課件51（四）注意事項1.由于自然排尿收集的標(biāo)本很難避免會陰部及下尿道細(xì)菌污染，所以需要定量接種、合理評價才能判斷培養(yǎng)的細(xì)菌是否與尿路感染有關(guān)。尿標(biāo)本菌落計數(shù)中革蘭陰性桿菌數(shù)>105CFU/ml或革蘭陽性球菌數(shù)>104CFU/ml時有臨床診斷意義。（不是絕對的，受多因素影響，綜合判斷）2.尿液標(biāo)本的采集和培養(yǎng)中的問題是污染雜菌，故應(yīng)嚴(yán)格進行無菌操作。3.尿標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢，以免污染，尿液中不得加防腐劑和消毒劑。精品課件144（四）注意事項精品課件524.除非是流行病學(xué)調(diào)查，長期留置導(dǎo)尿管患者常規(guī)尿培養(yǎng)沒有臨床意義，大量病原菌?？稍谶@類患者中檢出，導(dǎo)尿管留置時間延長易導(dǎo)致與引起患者尿道感染不一致的微生物定植生長；5.不可從集尿袋的