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革蘭氏陽(yáng)性球菌
1革蘭氏陽(yáng)性球菌1球菌(coccus)革蘭氏陽(yáng)性球菌革蘭氏陰性球菌獸醫(yī)臨床重要的革蘭氏陽(yáng)性球菌葡萄球菌屬鏈球菌屬2球菌(coccus)2第一節(jié)葡萄球菌屬(Staohylococcus)
3第一節(jié)葡萄球菌屬(Staohylococcus)3分布自然界及人、畜、禽的體表與體內(nèi)。致病情況多數(shù)是非致病菌,少數(shù)有致病性。后者主要引起化膿性感染,故又稱化膿性球菌。亦可引起食物中毒。重要的葡萄球菌本屬分為37個(gè)種,較重要有:金黃色葡萄球菌豬葡萄球菌4分布4金黃色葡萄球菌(S.aureus)一、主要生物學(xué)特性(一)形態(tài)與染色球菌,直徑0.7~1μm革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽孢,無(wú)鞭毛,多數(shù)無(wú)莢膜葡萄串狀或雙球及短鏈狀排列5金黃色葡萄球菌(S.aureus)一、主要生物學(xué)特性球菌,電鏡下的葡萄球菌6電鏡下的葡萄球菌6(二)生長(zhǎng)要求及培養(yǎng)特性常用普通瓊脂或血瓊脂37℃培養(yǎng)。普通瓊脂形成濕潤(rùn)、光滑、隆起、邊緣整齊、直徑1~2mm的圓形菌落,顏色金黃色。7(二)生長(zhǎng)要求及培養(yǎng)特性7血瓊脂致病性菌株菌落周圍形成完全透明的溶血環(huán)(β溶血),非致病菌無(wú)此作用。8血瓊脂8(三)生化特性不同菌株生化反應(yīng)不同。致病菌株在厭氧條件下分解甘露醇產(chǎn)酸,非致病菌無(wú)此作用。9(三)生化特性9(四)抗原構(gòu)造
1、多糖抗原
存在于莢膜中,分11個(gè)型,臨床分離株多為5型和8型。2、蛋白抗原
即葡萄球菌蛋白A(SPA),存在于細(xì)胞壁上,具有種特異性,無(wú)型特異性。90%以上的金黃色葡萄球菌菌株都含有SPA,CowanⅠ株含量最高(推算每個(gè)菌細(xì)胞上含80000個(gè)SPA分子),其他葡萄球菌不含SPA。10(四)抗原構(gòu)造10SPA的生物學(xué)活性①與IgG結(jié)合②激活補(bǔ)體③激活B細(xì)胞④抗吞噬作用⑤SPA的免疫原性⑥抑制ADCC⑦SPA具有良好佐劑的作用11SPA的生物學(xué)活性11SPA的應(yīng)用
①協(xié)同凝集試驗(yàn)②用作免疫吸附劑③標(biāo)記SPA的應(yīng)用④制備抗IgG抗體12SPA的應(yīng)用12二、致病性與毒力因子(一)毒力因子1、溶血毒素
分為α、β、γ、δ四種,其中以α溶血毒素為主。13二、致病性與毒力因子13α溶血毒素(α毒素)
成分為蛋白質(zhì),分子量為34000,不耐熱,65℃30min可被破壞。溶解多種動(dòng)物和人的紅細(xì)胞,也能破壞白細(xì)胞、血小板和巨噬細(xì)胞。作用平滑肌,使平滑肌收縮,導(dǎo)致局部缺血、麻痹、壞死。與牛羊的壞疽性乳腺炎有關(guān)。注射到家兔皮下,引起皮膚壞死,靜脈注射可使家兔死亡。類毒素可用于葡萄球菌感染的預(yù)防和治療。
14α溶血毒素(α毒素)142、腸毒素成分是蛋白質(zhì),耐熱抗酸,能經(jīng)受100℃30min或胃蛋白酶的水解。該毒素可引起人類、貓、猴、仔豬的食物中毒。根據(jù)抗原性差異,腸毒素分20多個(gè)型,其中A、B、最常見(jiàn),其次為D型。152、腸毒素153、凝固酶多數(shù)致病菌株能產(chǎn)生凝固酶,此酶能使含有抗凝劑的動(dòng)物血漿凝固。該酶有助于細(xì)菌抗吞噬和抗其他殺菌物質(zhì)的作用,同時(shí)也使感染局限化。163、凝固酶164、耐熱核酸酶100℃作用15min不失去活性,該酶由致病菌株產(chǎn)生。感染部位組織細(xì)胞和白細(xì)胞崩解時(shí)釋放出核酸,使?jié)B出液粘性增加,此酶能迅速分解核酸,有利于細(xì)菌擴(kuò)散。174、耐熱核酸酶17葡萄球菌還可產(chǎn)生毒素與酶:溶纖維蛋白酶透明質(zhì)酸酶殺白細(xì)胞素卵磷脂酶磷酸酶脂酶毒素休克綜合癥毒素表皮剝脫毒素18葡萄球菌還可產(chǎn)生毒素與酶:18(二)所致疾病1、葡萄球菌病
多由傷口感染引起,主要表現(xiàn)為化膿性炎癥,如創(chuàng)傷感染、膿腫、蜂窩織炎、乳房炎、關(guān)節(jié)炎、皮炎等,有時(shí)也可引起敗血癥或膿毒敗血癥等。雛雞、仔兔的葡萄球菌病可出現(xiàn)暴發(fā)流行,大量死亡。19(二)所致疾病192、食物中毒被葡萄球菌腸毒素污染的食物或飼料能引起人和動(dòng)物的食物中毒,表現(xiàn)急性胃腸炎癥狀。其發(fā)病率多于沙門氏菌和肉毒梭菌食物中毒的總和。因此,該菌在公共衛(wèi)生上是一個(gè)重要的細(xì)菌。202、食物中毒20皮膚充血、出血,關(guān)節(jié)滑膜囊腫大關(guān)節(jié)腫大關(guān)節(jié)腔內(nèi)有灰白色膿汁關(guān)節(jié)腫大、出血21皮膚充血、出血,關(guān)節(jié)滑膜囊腫大關(guān)節(jié)腫大關(guān)節(jié)腔內(nèi)有2222232324242525手部化膿感染26手部化膿感染26癰、毛囊炎27癰、毛囊炎27三、微生物學(xué)診斷(一)病料采集
根據(jù)不同的病型采集不同的標(biāo)本,如膿汁、滲出液、血液、乳汁、可疑食物、嘔吐物或糞便等。28三、微生物學(xué)診斷28(二)細(xì)菌學(xué)檢查病料涂片革蘭氏染色鏡檢分離純培養(yǎng)鑒定29(二)細(xì)菌學(xué)檢查病料涂片革蘭氏染色鏡檢分離純培養(yǎng)鑒定29致病性葡萄球菌鑒定要點(diǎn)①菌落顏色②溶血試驗(yàn)③凝固酶試驗(yàn)④分解甘露醇試驗(yàn)⑤耐熱核酸酶試驗(yàn)⑥動(dòng)物試驗(yàn)30致病性葡萄球菌鑒定要點(diǎn)30(三)腸毒素檢查發(fā)生食物中毒時(shí),從剩余食物或嘔吐物分離細(xì)菌,然后進(jìn)行腸毒素檢查。方法:動(dòng)物接種
ELISADNA探針技術(shù)31(三)腸毒素檢查31第二節(jié)鏈球菌屬(Streptococcu)32第二節(jié)鏈球菌屬(Streptococcu)32
概述一類鏈狀排列的G+球菌,有60多種。分布在自然界及動(dòng)物體表、消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜、乳汁等部位。有些是非致病菌,有些可致人或動(dòng)物的各種化膿性疾病、肺炎、乳腺炎、敗血癥等。33概述33
一、主要特性(一)形態(tài)球形或卵圓形,直徑0.5~1μm,常排列成鏈狀或成雙。革蘭氏陽(yáng)性。無(wú)鞭毛、不形成芽胞。多數(shù)有莢膜。34一、主要特性34鏈球菌35鏈球菌353636(二)培養(yǎng)
生長(zhǎng)要求鏈球菌多數(shù)為兼性厭氧菌,少數(shù)為厭氧菌。最適生長(zhǎng)溫度37℃,最適pH7.4~7.6。致病菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高,普通培養(yǎng)基中生長(zhǎng)不良,需添加血液、血清、葡萄糖等。
37(二)培養(yǎng)37培養(yǎng)特性血瓊脂形成灰白色,表面光滑,邊緣整齊,直徑0.1~1.0mm的小菌落。多數(shù)致病菌菌落周圍形成溶血環(huán)。血清肉湯呈輕度渾濁,管底有粘性、絮狀沉淀。38培養(yǎng)特性38(三)分類
α型溶血鏈球菌菌落周圍形成1~2mm寬的不透明草綠色溶血環(huán)(α溶血)。這種細(xì)菌致病力不強(qiáng),多為條件致病菌。β型溶血鏈球菌
菌落周圍形成2~4mm寬的完全透明的溶血環(huán)(β溶血)。這類菌致病力強(qiáng),常引起人及動(dòng)物各種疾病。γ型鏈球菌
菌落周圍無(wú)溶血環(huán),此類菌無(wú)致病性。39(三)分類39二、致病性(一)毒力因子致病性鏈球菌可以產(chǎn)生多種毒素或酶,是其致病的主要物質(zhì)。
包括:鏈球菌溶血素致熱外毒素(紅疹毒素)鏈激酶(溶纖維蛋白酶)鏈道酶(鏈球菌DNA酶)透明質(zhì)酸酶等40二、致病性40(二)所致疾病1、無(wú)乳鏈球菌
停乳鏈球菌牛、羊乳房炎
乳房鏈球菌2、馬鏈球菌馬亞種馬腺疫3、馬鏈球菌獸疫亞種多種家畜的炎癥
及敗血病4、豬鏈球菌致豬腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、
肺炎、心內(nèi)膜炎、流
產(chǎn)和局部膿腫
41(二)所致疾病415、化膿鏈球菌人的化膿性炎癥、猩紅熱、扁桃腺炎、產(chǎn)褥熱、敗血癥、風(fēng)濕病及腎小球腎炎等,也可引起牛乳腺炎。6、肺炎鏈球菌為人類大葉性肺炎或腦膜炎的病原體,亦可致幼畜(犢牛、羔羊、仔豬)肺炎、胃腸炎或敗血癥。425、化膿鏈球菌42三、微生物學(xué)診斷1、病料采集膿汁、乳汁、血液、組織臟器等。2、涂片鏡檢見(jiàn)G+成對(duì)或鏈狀排列的球菌,可作初步診斷。3、分離培養(yǎng)用血瓊脂或血清瓊脂平板,得到的純培養(yǎng)物,進(jìn)行溶血試驗(yàn)、生化試驗(yàn)和動(dòng)物試驗(yàn)(接小白鼠)進(jìn)行鑒定。43三、微生物學(xué)診斷43四、馬鏈球菌獸疫亞種舊稱獸疫鏈球菌。該菌普遍存在于動(dòng)物的黏膜,尤其是馬屬動(dòng)物的皮膚、上呼吸道黏膜、扁桃體及生殖道處,致多種家畜的炎癥及敗血癥。該菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高,在含血清的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)較好,血瓊脂上呈輕微的β溶血。根據(jù)M蛋白抗原性差異,至少分15個(gè)血清型44四、馬鏈球菌獸疫亞種44馬鏈球菌獸疫亞種所致動(dòng)物疾病
馬
創(chuàng)傷感染、敗血癥、子宮炎、流產(chǎn)、關(guān)節(jié)炎、腹膜炎、幼駒臍帶炎
牛
乳腺炎、子宮炎
豬
敗血癥、關(guān)節(jié)炎、流產(chǎn)
羊
敗血癥、心包炎、胸膜炎、肺炎
雞
敗血癥45馬鏈球菌獸疫亞種所致動(dòng)物疾病45五、馬鏈球菌馬亞種舊稱馬腺疫鏈球菌,是馬腺疫的病原體。該病是馬、騾、驢的一種急性傳染病,其特征為頜下淋巴結(jié)呈急性化膿性炎癥。病原菌存在于病馬的鼻液和膿腫及膿汁內(nèi),有時(shí)健康馬的扁桃體及上呼吸道黏膜也存在馬腺疫鏈球菌。可通過(guò)污染的飼料、飲水、用具等經(jīng)消化道感染,也可通過(guò)飛沫經(jīng)呼吸道感染,還可通過(guò)創(chuàng)傷及交配感染。46五、馬鏈球菌馬亞種46(一)形態(tài)膿汁或液體培養(yǎng)中的菌呈長(zhǎng)鏈、短鏈或成對(duì)排列,有些菌株有莢膜。(二)培養(yǎng)營(yíng)養(yǎng)要求較高,需在加血液或血清的培養(yǎng)基培養(yǎng)在血平板上形成透明、閃光、微隆起、有粘性的露滴狀菌落,菌落周圍有明顯的β溶血環(huán)。47(一)形態(tài)47(三)致病性自然條件下感染馬、驢、騾等動(dòng)物,尤其是一歲左右的動(dòng)物最易感。(四)微生物學(xué)診斷
1、涂片鏡檢2、分離鑒定48(三)致病性48革蘭氏陽(yáng)性球菌
49革蘭氏陽(yáng)性球菌1球菌(coccus)革蘭氏陽(yáng)性球菌革蘭氏陰性球菌獸醫(yī)臨床重要的革蘭氏陽(yáng)性球菌葡萄球菌屬鏈球菌屬50球菌(coccus)2第一節(jié)葡萄球菌屬(Staohylococcus)
51第一節(jié)葡萄球菌屬(Staohylococcus)3分布自然界及人、畜、禽的體表與體內(nèi)。致病情況多數(shù)是非致病菌,少數(shù)有致病性。后者主要引起化膿性感染,故又稱化膿性球菌。亦可引起食物中毒。重要的葡萄球菌本屬分為37個(gè)種,較重要有:金黃色葡萄球菌豬葡萄球菌52分布4金黃色葡萄球菌(S.aureus)一、主要生物學(xué)特性(一)形態(tài)與染色球菌,直徑0.7~1μm革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽孢,無(wú)鞭毛,多數(shù)無(wú)莢膜葡萄串狀或雙球及短鏈狀排列53金黃色葡萄球菌(S.aureus)一、主要生物學(xué)特性球菌,電鏡下的葡萄球菌54電鏡下的葡萄球菌6(二)生長(zhǎng)要求及培養(yǎng)特性常用普通瓊脂或血瓊脂37℃培養(yǎng)。普通瓊脂形成濕潤(rùn)、光滑、隆起、邊緣整齊、直徑1~2mm的圓形菌落,顏色金黃色。55(二)生長(zhǎng)要求及培養(yǎng)特性7血瓊脂致病性菌株菌落周圍形成完全透明的溶血環(huán)(β溶血),非致病菌無(wú)此作用。56血瓊脂8(三)生化特性不同菌株生化反應(yīng)不同。致病菌株在厭氧條件下分解甘露醇產(chǎn)酸,非致病菌無(wú)此作用。57(三)生化特性9(四)抗原構(gòu)造
1、多糖抗原
存在于莢膜中,分11個(gè)型,臨床分離株多為5型和8型。2、蛋白抗原
即葡萄球菌蛋白A(SPA),存在于細(xì)胞壁上,具有種特異性,無(wú)型特異性。90%以上的金黃色葡萄球菌菌株都含有SPA,CowanⅠ株含量最高(推算每個(gè)菌細(xì)胞上含80000個(gè)SPA分子),其他葡萄球菌不含SPA。58(四)抗原構(gòu)造10SPA的生物學(xué)活性①與IgG結(jié)合②激活補(bǔ)體③激活B細(xì)胞④抗吞噬作用⑤SPA的免疫原性⑥抑制ADCC⑦SPA具有良好佐劑的作用59SPA的生物學(xué)活性11SPA的應(yīng)用
①協(xié)同凝集試驗(yàn)②用作免疫吸附劑③標(biāo)記SPA的應(yīng)用④制備抗IgG抗體60SPA的應(yīng)用12二、致病性與毒力因子(一)毒力因子1、溶血毒素
分為α、β、γ、δ四種,其中以α溶血毒素為主。61二、致病性與毒力因子13α溶血毒素(α毒素)
成分為蛋白質(zhì),分子量為34000,不耐熱,65℃30min可被破壞。溶解多種動(dòng)物和人的紅細(xì)胞,也能破壞白細(xì)胞、血小板和巨噬細(xì)胞。作用平滑肌,使平滑肌收縮,導(dǎo)致局部缺血、麻痹、壞死。與牛羊的壞疽性乳腺炎有關(guān)。注射到家兔皮下,引起皮膚壞死,靜脈注射可使家兔死亡。類毒素可用于葡萄球菌感染的預(yù)防和治療。
62α溶血毒素(α毒素)142、腸毒素成分是蛋白質(zhì),耐熱抗酸,能經(jīng)受100℃30min或胃蛋白酶的水解。該毒素可引起人類、貓、猴、仔豬的食物中毒。根據(jù)抗原性差異,腸毒素分20多個(gè)型,其中A、B、最常見(jiàn),其次為D型。632、腸毒素153、凝固酶多數(shù)致病菌株能產(chǎn)生凝固酶,此酶能使含有抗凝劑的動(dòng)物血漿凝固。該酶有助于細(xì)菌抗吞噬和抗其他殺菌物質(zhì)的作用,同時(shí)也使感染局限化。643、凝固酶164、耐熱核酸酶100℃作用15min不失去活性,該酶由致病菌株產(chǎn)生。感染部位組織細(xì)胞和白細(xì)胞崩解時(shí)釋放出核酸,使?jié)B出液粘性增加,此酶能迅速分解核酸,有利于細(xì)菌擴(kuò)散。654、耐熱核酸酶17葡萄球菌還可產(chǎn)生毒素與酶:溶纖維蛋白酶透明質(zhì)酸酶殺白細(xì)胞素卵磷脂酶磷酸酶脂酶毒素休克綜合癥毒素表皮剝脫毒素66葡萄球菌還可產(chǎn)生毒素與酶:18(二)所致疾病1、葡萄球菌病
多由傷口感染引起,主要表現(xiàn)為化膿性炎癥,如創(chuàng)傷感染、膿腫、蜂窩織炎、乳房炎、關(guān)節(jié)炎、皮炎等,有時(shí)也可引起敗血癥或膿毒敗血癥等。雛雞、仔兔的葡萄球菌病可出現(xiàn)暴發(fā)流行,大量死亡。67(二)所致疾病192、食物中毒被葡萄球菌腸毒素污染的食物或飼料能引起人和動(dòng)物的食物中毒,表現(xiàn)急性胃腸炎癥狀。其發(fā)病率多于沙門氏菌和肉毒梭菌食物中毒的總和。因此,該菌在公共衛(wèi)生上是一個(gè)重要的細(xì)菌。682、食物中毒20皮膚充血、出血,關(guān)節(jié)滑膜囊腫大關(guān)節(jié)腫大關(guān)節(jié)腔內(nèi)有灰白色膿汁關(guān)節(jié)腫大、出血69皮膚充血、出血,關(guān)節(jié)滑膜囊腫大關(guān)節(jié)腫大關(guān)節(jié)腔內(nèi)有7022712372247325手部化膿感染74手部化膿感染26癰、毛囊炎75癰、毛囊炎27三、微生物學(xué)診斷(一)病料采集
根據(jù)不同的病型采集不同的標(biāo)本,如膿汁、滲出液、血液、乳汁、可疑食物、嘔吐物或糞便等。76三、微生物學(xué)診斷28(二)細(xì)菌學(xué)檢查病料涂片革蘭氏染色鏡檢分離純培養(yǎng)鑒定77(二)細(xì)菌學(xué)檢查病料涂片革蘭氏染色鏡檢分離純培養(yǎng)鑒定29致病性葡萄球菌鑒定要點(diǎn)①菌落顏色②溶血試驗(yàn)③凝固酶試驗(yàn)④分解甘露醇試驗(yàn)⑤耐熱核酸酶試驗(yàn)⑥動(dòng)物試驗(yàn)78致病性葡萄球菌鑒定要點(diǎn)30(三)腸毒素檢查發(fā)生食物中毒時(shí),從剩余食物或嘔吐物分離細(xì)菌,然后進(jìn)行腸毒素檢查。方法:動(dòng)物接種
ELISADNA探針技術(shù)79(三)腸毒素檢查31第二節(jié)鏈球菌屬(Streptococcu)80第二節(jié)鏈球菌屬(Streptococcu)32
概述一類鏈狀排列的G+球菌,有60多種。分布在自然界及動(dòng)物體表、消化道、呼吸道、泌尿生殖道黏膜、乳汁等部位。有些是非致病菌,有些可致人或動(dòng)物的各種化膿性疾病、肺炎、乳腺炎、敗血癥等。81概述33
一、主要特性(一)形態(tài)球形或卵圓形,直徑0.5~1μm,常排列成鏈狀或成雙。革蘭氏陽(yáng)性。無(wú)鞭毛、不形成芽胞。多數(shù)有莢膜。82一、主要特性34鏈球菌83鏈球菌358436(二)培養(yǎng)
生長(zhǎng)要求鏈球菌多數(shù)為兼性厭氧菌,少數(shù)為厭氧菌。最適生長(zhǎng)溫度37℃,最適pH7.4~7.6。致病菌對(duì)營(yíng)養(yǎng)要求較高,普通培養(yǎng)基中生長(zhǎng)不良,需添加血液、血清、葡萄糖等。
85(二)培養(yǎng)37培養(yǎng)特性血瓊脂形成灰白色,表面光滑,邊緣整齊,直徑0.1~1.0mm的小菌落。多數(shù)致病菌菌落周圍形成溶血環(huán)。血清肉湯呈輕度渾濁,管底有粘性、絮狀沉淀。86培養(yǎng)特性38(三)分類
α型溶血鏈球菌菌落周圍形成1~2mm寬的不透明草綠色溶血環(huán)(α溶血)。這種細(xì)菌致病力不強(qiáng),多為條件致病菌。β型溶血鏈球菌
菌落周圍形成2~4mm寬的完全透明的溶血環(huán)(β溶血)。這類菌致病力強(qiáng),常引起人及動(dòng)物各種疾病。γ型鏈球菌
菌落周圍無(wú)溶血環(huán),此類菌無(wú)致病性。87(三)分類39二、致病性(一)毒力因子致病性鏈球菌可以產(chǎn)生多種毒素或酶,是其致病的主要物質(zhì)。
包括:鏈球菌溶血素致熱外毒素(紅疹毒素)鏈激酶(溶纖維蛋白酶)鏈道酶(鏈球菌DNA酶)透明質(zhì)酸酶等88二、致病性40(二)所致疾病1、無(wú)乳鏈球菌
停乳鏈球菌牛、羊乳房炎
乳房鏈球菌2、馬鏈球菌馬亞種馬腺疫3、馬鏈球菌獸疫亞種多種家畜的炎癥
及敗血病4、豬鏈球菌致豬腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、
肺炎、心內(nèi)膜炎、流
產(chǎn)和局部膿腫
89(二)所致疾病415、化膿鏈球菌人的化膿性炎癥、猩紅熱、扁桃腺炎、產(chǎn)褥熱、敗血癥、風(fēng)濕病及腎小球腎炎等,也可引起牛乳腺炎。6、肺炎鏈球菌為人類大葉性肺炎或腦膜炎的
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