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文檔簡(jiǎn)介

1、2002簡(jiǎn)1#——分別以一句話(huà)簡(jiǎn)介1999和2001年獎(jiǎng)獲獎(jiǎng)項(xiàng)目中有關(guān)細(xì)胞生物學(xué)的內(nèi)2、2005簡(jiǎn)1#——簡(jiǎn)介2002和2004年獎(jiǎng)獲獎(jiǎng)項(xiàng)目中有關(guān)細(xì)胞生物學(xué)的內(nèi)容5、2008簡(jiǎn)6#——最近和科學(xué)家分別將皮膚細(xì)胞改造成類(lèi)似胚胎干細(xì)胞,這一成果在理論上、實(shí)踐上有何1、1999年,科學(xué)家甘特·布洛貝爾。他發(fā)現(xiàn)了蛋白質(zhì)內(nèi)控制蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)傳輸和定位的信號(hào)。獲得2、2000年瑞典科學(xué)家阿爾維德·卡爾松、科學(xué)家保羅·格林加德、奧地利科學(xué)家埃里克·坎德?tīng)栆蛟谌祟?lèi)腦3、2001年科學(xué)家利蘭·哈特韋爾、英國(guó)科學(xué)家蒂莫西·、保羅·納斯因發(fā)現(xiàn)了細(xì)胞周期的關(guān)鍵分子調(diào)節(jié)物模型,找到了對(duì)細(xì)胞每一個(gè)和分化過(guò)程進(jìn)行的細(xì)胞圖譜,而共同獲得醫(yī)學(xué)及生理學(xué)獎(jiǎng)。5、2003年科學(xué)家保羅·勞特布爾、英國(guó)科學(xué)家彼得·曼斯菲爾德因在核磁成像技術(shù)領(lǐng)域的突破性成就,而共同獲得生理學(xué)及醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。6、2004年科學(xué)家理查德·阿克塞爾和琳達(dá)·巴克,以表彰兩人在氣味受體和嗅覺(jué)系統(tǒng)組織方式研究中作出的貢獻(xiàn),共同獲得生理學(xué)及醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)。7、2005年生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予澳大利亞科學(xué)家巴里"馬歇爾和羅賓"沃倫,以表彰他們發(fā)現(xiàn)了導(dǎo)致胃炎和胃8.2006年生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予科學(xué)家安德魯·菲爾和克雷格·梅洛,以表彰他們發(fā)現(xiàn)了控制信息流動(dòng)的基本機(jī)制,RNA9.2007年生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予科學(xué)家馬里奧-卡佩奇和奧利弗-史密西斯、英國(guó)科學(xué)家馬丁-埃文斯,這現(xiàn)導(dǎo)致了一種通常們稱(chēng)為“打靶”的強(qiáng)大技術(shù)。這一國(guó)際小組通過(guò)使用胚胎干細(xì)胞在老鼠身上實(shí)現(xiàn)了源重組技術(shù)成就的基礎(chǔ)之上,并促進(jìn)了相關(guān)技術(shù)的進(jìn)一步發(fā)展。打靶技術(shù)將廣泛應(yīng)用于功能研究、人類(lèi)疾小鼠組上任意位點(diǎn)進(jìn)行遺傳修飾的常規(guī)技術(shù)通過(guò)打靶獲得的突變小鼠己經(jīng)超過(guò)千種(相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)參見(jiàn)文活、點(diǎn)突變引人、缺失突變、外源定位引入、組大片段刪除等,并使修飾后的遺傳信息在生物內(nèi)遺型等。打靶技術(shù)的發(fā)展己使得對(duì)特定細(xì)胞、組織或者動(dòng)物的遺傳物質(zhì)進(jìn)行修飾成為可能。打靶技術(shù)在功能研究中的應(yīng)用、應(yīng)用打靶技術(shù)研制人類(lèi)疾病動(dòng)物模型、應(yīng)用打靶技術(shù)改良動(dòng)物品4、20064、2006簡(jiǎn)3#— 稱(chēng)之為“萬(wàn)用細(xì)胞”。干細(xì)胞是一類(lèi)具有自我更新和分化潛能的細(xì)胞。干細(xì)胞有兩種分類(lèi)方法,一是根據(jù)干細(xì)胞所處的發(fā)育階段分為胚胎干細(xì)胞(embryonicstemcell,ES胞)和成體干細(xì)胞(somaticstemcell)。第二種分類(lèi)方法是根據(jù)干細(xì)胞的發(fā)育潛能分為三類(lèi):全能干細(xì)胞(totipotentstemcell,TSC)、多能干細(xì)胞(pluripotentstemcell)和單能干細(xì)胞(unipotentstemcell)。胚胎干細(xì)胞的發(fā)育等CellMass)的細(xì)胞即為胚胎干細(xì)胞。胚胎干細(xì)胞具有全能性,可以自我更新并具有分化為體內(nèi)所有組織的能力。從而使組織和保持生長(zhǎng)和的動(dòng)態(tài)平衡。過(guò)去認(rèn)為成體干細(xì)胞主要包括上皮干細(xì)胞和造血干細(xì)胞。最近研究干細(xì)胞用:常泛涉到學(xué)多領(lǐng)。前學(xué)已能在外別分、化擴(kuò)和培養(yǎng)胚干胞并這的細(xì)為“”培一人組織。細(xì)及衍組織的泛臨應(yīng),產(chǎn)一全的療術(shù)也是造的至輕組織,而人夠上己或他的細(xì)或干胞衍出新組織,替身變或老組織。用血細(xì)移技術(shù)經(jīng)漸為療血、種化后起血統(tǒng)免系功能等病一重要??萍?用干胞代被壞神細(xì)有因髓傷癱的新立; 將來(lái)失明、帕金森氏綜合癥、、老年性癡呆、心肌梗塞和等絕大多數(shù)疾病的患者,都可望借助干細(xì)胞移植 的 答案:2008年10月8日 化 (reportergene)。一些經(jīng)修飾 GFP熒光極其穩(wěn)定,在激發(fā)光照射下,GFP抗光漂白(Photobleaching)能力比熒光素(fluorescein)強(qiáng),特別在450~490nm藍(lán)光波長(zhǎng)下更穩(wěn)定。GFP需要在氧化狀態(tài)下產(chǎn)生熒光,強(qiáng)還原劑能使GFP轉(zhuǎn)變?yōu)榉菬晒庑问?,但一旦重新在空氣或氧氣中,GFP熒光便立即得到恢復(fù)。而一些弱還原劑并不影響GFP熒光。中度氧化劑對(duì)GFP熒光影響也不大,如生物材料的固定、脫水劑戊二酸或等。由于GFP答案:2008年10月8日 化 (reportergene)。一些經(jīng)修飾 利用常規(guī)的DNA重組技術(shù)將GFP與目的蛋白的編碼區(qū)連接形成一個(gè)單一的融合表達(dá)載體,然置?;蛘呃肎FP的熒光特性對(duì)某一蛋白的N-或C-末端進(jìn)行標(biāo)記,然后借助熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡便可對(duì)標(biāo) 答案:掃描式電子顯微鏡的不穿過(guò)樣品,僅在樣品表面掃描激發(fā)出次級(jí)電子。放在樣品旁的閃爍晶辨率主要決定于樣品表面上的直徑。掃描式電子顯微鏡不需要很薄的樣品;圖像有很強(qiáng)的感;能利用電氣、液體(接近于生理環(huán)境的離子強(qiáng)度)等多種條件下工作,因?yàn)閽呙钑r(shí)不接觸樣品,又沒(méi)有高能轟擊,基2、2、2003簡(jiǎn)6#——以一種熒 1、原它可嵌入到DNA或RNA中,使壞死細(xì)胞,活細(xì)胞不.熒光鏡下用紫外激發(fā)光,高倍鏡下觀2、方PI染色細(xì) &染色:將瓶中的細(xì)胞搖勻,取200μl1.5ml管中,加入PI20μl,染色15滴片:取一載玻片,面膠圍成一小室,從離心管中各取以上染色后的細(xì)胞懸液10μl,加入小室內(nèi)蓋上蓋玻片,熒光鏡下用紫外激發(fā)光,高倍鏡下觀察細(xì)胞內(nèi)有熒光的則為壞死細(xì)胞,細(xì)胞內(nèi)無(wú)熒光的為活細(xì)胞。戊二醛固定——PBS沖洗——鋨酸固定——PBS沖洗——逐級(jí)脫水——樹(shù)脂(如EPON812)+滲透——純樹(shù)4420045#——答案:FDA2性的,活細(xì)胞染成藍(lán)色,作用與DAPI,PIDAPI雙鏈DNA熒光DAPIDNA時(shí)強(qiáng)染色秋水仙素能抑制有絲,破壞紡錘體,使停滯在中期,被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞學(xué)、遺傳學(xué)的研究520055#——如何檢驗(yàn)細(xì)胞膜的完整性,簡(jiǎn)述其原理及操作。1、原細(xì)胞膜是一選擇性的生物膜,一般的生物如PI等不能穿過(guò)質(zhì)膜.當(dāng)細(xì)胞壞死時(shí),質(zhì)膜不完整,PI就進(jìn)入細(xì)胞,它可嵌入到DNA或RNA中,使細(xì)胞.熒光鏡下用紫外激發(fā)光,高倍鏡下觀察2、方PI染色細(xì)染色:將瓶中的細(xì)胞搖勻,取200μl1.5ml管中,加入PI20μl,染色15滴片:取一載玻片,面膠圍成一小室,從離心管中各取以上染色后的細(xì)胞懸液10μl,加入小室內(nèi)蓋上蓋玻片, 差顯微鏡(ICM,interferencecontrastmicroscope)其優(yōu)點(diǎn)是能顯示結(jié)構(gòu)的三維投影影像。與相差顯微鏡相比,其標(biāo)本可略厚一點(diǎn),折射率差別更大,故影像的感更強(qiáng)。ICM使細(xì)胞的結(jié)構(gòu),特別是一些較大的細(xì)胞器,如核、線(xiàn)粒體等,感特別強(qiáng),適合于顯微操作。目前像注入、核移植、轉(zhuǎn)3 圖象的獲得,如7維圖象(XYZaλIt):xyt、xzt和xt掃描,時(shí)間序列掃描旋轉(zhuǎn)掃描、區(qū)域掃描、(3)電荷偶聯(lián)儀(CCD)(ChargeCoupledDevice)電荷藕合器件圖像傳感器,它使用一種、用碘化丙啶(propidiumiodide,PI)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,可以區(qū)別壞死及正常細(xì)胞它可嵌入到DNA或RNA中,使壞死細(xì)胞,活細(xì)胞不.熒光鏡下用紫外激發(fā)光,高倍鏡下觀察PI染色細(xì)染色:將瓶中的細(xì)胞搖勻,取200μl1.5ml管中,加入PI20μl,染色15滴片:取一載玻片,面膠圍成一小室,從離心管中各取以上染色后的細(xì)胞懸液10μl,加入小室內(nèi)蓋上蓋玻片,探針首先與某種介導(dǎo)分子(reportermolecule)結(jié)合,雜交后再通過(guò)免疫細(xì)胞化學(xué)過(guò)程連接上熒光。再用與熒光素分子偶聯(lián)的單克隆抗體與探針?lè)肿犹禺愋越Y(jié)合來(lái)檢測(cè)DNA序列在或DNA纖維切片上的定性定位、、答案:(1)相差顯微鏡是一種將光線(xiàn)通過(guò)透明標(biāo)本細(xì)節(jié)時(shí)所產(chǎn)生的光程差(即相位差)轉(zhuǎn)化為光強(qiáng)微鏡觀察染色的標(biāo)本(如活的細(xì)胞)時(shí),其形態(tài)和結(jié)構(gòu)往往難以分辨。然而,由于細(xì)胞各部分的折射率和厚度的不同,光線(xiàn)通過(guò)這種標(biāo)本時(shí),直射光和衍射光的光程就會(huì)有差別。隨著光程的增加或減少,加快或的光波的相位會(huì)發(fā)生改變(產(chǎn)生相位差)。光的相位差人眼感覺(jué)不到,但相差顯微鏡能通過(guò)其特殊裝置——環(huán)狀光闌和相板,利用光的現(xiàn)象,將光的相位差轉(zhuǎn)變?yōu)槿搜劭梢圆煊X(jué)的振幅差(明暗差),從而使原來(lái)透明的物體表現(xiàn)出明顯的明暗差異,對(duì)比度增強(qiáng),使能比較清楚的觀察到普通光學(xué)顯微鏡和暗視野顯微鏡下都看不到或看不用途:相差顯微鏡能觀察到透明樣品的細(xì)節(jié),適用于對(duì)細(xì)胞生活狀態(tài)下的生長(zhǎng)、運(yùn)動(dòng)、增殖情況及細(xì)微結(jié)構(gòu)的觀察。因此,是微生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、細(xì)胞和組織培養(yǎng)、細(xì)胞工程、雜交瘤技術(shù)等現(xiàn)物學(xué)研究的必有超大的景深(depthoffield),約為光學(xué)顯微鏡300,使得掃描式顯微鏡比光學(xué)顯微鏡更適合觀察表面起伏程度較大的試片.可進(jìn)行多種功能的分析.與X射線(xiàn)譜儀配接,可在觀察形貌的同時(shí)進(jìn)行微區(qū)成分分析;配有光學(xué)顯微鏡和單色儀等附件時(shí),可觀察陰極熒光圖像和進(jìn)行陰極熒光光譜分析等.可使用加熱,冷卻和拉伸等樣品臺(tái)進(jìn)行動(dòng)態(tài)試驗(yàn),觀察在不同環(huán)境條件下的相變及形態(tài)變化等.用途:特點(diǎn):樣后再電透成放而名它光與學(xué)微相。這電顯微中圖細(xì)對(duì)度由品原對(duì)的射成品薄度低部射少,較。果品厚過(guò),像對(duì)度會(huì)至因收的量被傷破。、組織原位雜交(Tisuensiuhyridzato)DA或RADNRNA0-00nt雜交減。最研究果明,核酸探(1-0n能出細(xì)菌組織胞,雜效明顯l/LHClK廣泛的交叉連接,不會(huì)影響探針入細(xì)胞或組織,空氣干燥后保存在-70℃。如冰箱溫度恒定,在-70℃切片可保切片由于與蛋白質(zhì)交聯(lián)的增加,影響核酸探針的,因而雜交信號(hào)常低于冰凍切片。同時(shí),在包埋的過(guò)程中可減低mRNA細(xì)胞融合(Cellfusion),即在自然條件下或用人工方法(生物的、物理的、化學(xué)的)使兩個(gè)或兩個(gè)以上的細(xì)細(xì)胞融合的誘導(dǎo)物種類(lèi)很多.常用的主要有滅活的仙臺(tái)(Sendai),聚乙二醇誘導(dǎo)融合是最早采用的融合劑。常用于誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合的有仙臺(tái)、新城雞瘟、而保留的融合活性。用滅活的仙臺(tái)誘導(dǎo)細(xì)胞融合的優(yōu)點(diǎn)是融合率較高,對(duì)各種動(dòng)物細(xì)胞都適宜,并且仙臺(tái)能在雞胚中大量繁殖,容易培養(yǎng);缺點(diǎn)是仙臺(tái)不穩(wěn)定,在保存過(guò)程中融合活性會(huì)降低,并且過(guò)程比較聚乙二醇誘導(dǎo)融合聚乙二醇具有吸水性以及凝聚和沉淀蛋白質(zhì)的作用,能夠有效地促進(jìn)植物原生和動(dòng)物細(xì)胞的融合。在不同種類(lèi)的動(dòng)物細(xì)胞混合液中加入聚乙二醇,就會(huì)發(fā)生細(xì)胞凝集作用;在稀釋和除去電場(chǎng)誘導(dǎo)融合細(xì)胞成串珠狀,然后施加高壓電脈沖,以促使細(xì)胞融合。緊密排列的細(xì)胞,在相互接觸的細(xì)胞膜之間會(huì)出現(xiàn)無(wú)11、20076#——簡(jiǎn)述鑒定下列細(xì)胞結(jié)構(gòu)的方法:細(xì)胞壁、細(xì)胞核、淀粉粒、油脂和蛋白質(zhì)劑,以檢查DNA。淀粉粒:遇碘變藍(lán)蛋白質(zhì):米氏反應(yīng),其中硝基試劑作用于細(xì)胞中蛋白質(zhì)側(cè)鏈上的酪氨酸基,形成紅色沉通過(guò)與其受體的結(jié)合抑制了細(xì)胞。該實(shí)驗(yàn)應(yīng)特別注意哪些關(guān)鍵環(huán)節(jié)?、、用0.5%濃度的臺(tái)盼藍(lán)(Trypanblue),用PBS配制,室溫保存,該只對(duì)死細(xì)胞,可測(cè)定活細(xì)胞數(shù)和計(jì)算存生物膜,一般的生物如PI等不能穿過(guò)質(zhì)膜.當(dāng)細(xì)胞壞死時(shí),質(zhì)膜不完整,PI就進(jìn)入細(xì)胞,它可嵌入到DNA或RNA中,使壞死細(xì)胞,活細(xì)胞不.熒光鏡下用紫外激發(fā)光,高倍鏡下觀察,沒(méi)有熒光的則為活細(xì)胞。進(jìn)。分為G1型、G1/S型S型和M型4類(lèi),各類(lèi)周期蛋白均含有一段約100個(gè)氨基酸的保守序列,稱(chēng)為周期蛋白框,介導(dǎo)周期蛋白與CDK合。cyclinD與cyclinD與CDK4和CDK6結(jié)合,cyclinE與CDK2結(jié)合。E-CDK2為S期啟動(dòng)所必需,E-CDK2與p107和E2F 胞周期由G1期向S期轉(zhuǎn)化;E-CDK2還直接參與了中心 開(kāi)始于G1/S,與SScyclinA-CDK2S主要的CDK酶中心使 在G2-M:主要的周期蛋白是cyclinB,也有cyclinA,與CDK1CDK1H1酸化酸化導(dǎo) 上,導(dǎo)致cyclinB和cyclinA(proteasome)降解,CDK1被CDK1白質(zhì)去磷酸化,細(xì)胞周期便從M 驗(yàn)點(diǎn)期的運(yùn)行,是在一系列稱(chēng)為檢驗(yàn)點(diǎn)(checkpoint)的嚴(yán)格檢控下進(jìn)行的,當(dāng)DNA發(fā)生損傷,不完全或紡錘體G1/S檢驗(yàn)點(diǎn):在酵母中稱(chēng)start點(diǎn),在哺乳動(dòng)物中稱(chēng)R點(diǎn)(restrictionpoint),控制細(xì)胞由狀態(tài)的G1進(jìn)入DNA合成期,相關(guān)的事件包括:DNA是否損傷?細(xì)胞外環(huán)境是否適宜?細(xì)胞體積是否足夠大?S期檢驗(yàn)點(diǎn):DNA是否完成Weel和cdc25c參與了檢驗(yàn)點(diǎn)的調(diào)控,在S期,Cdc25c活性比較低,而Weel的活性比較高,Weel可以促使CDK1入M期,啟動(dòng)細(xì)胞。細(xì)胞能啟動(dòng)有可能是Weel和cdc25c發(fā)生突變,無(wú)法完成檢驗(yàn)點(diǎn)的協(xié)同控制。細(xì)胞分化(celldifferentiation):在發(fā)育中,由一種相同的細(xì)胞類(lèi)型經(jīng)細(xì)胞后逐漸在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能在于特異性蛋白質(zhì);特異性蛋白質(zhì)實(shí)質(zhì)在于組織特異性在時(shí)間和空間上的差異性表達(dá);差異性表達(dá)的機(jī)制是由于表達(dá)的組合調(diào)控。細(xì)胞與決定:信號(hào)分子的有效作用時(shí)間是短暫的,然而細(xì)胞可以將這種短暫的作用起來(lái)并形成長(zhǎng)時(shí)間的,逐漸向特定方向分化。如果蠅成蟲(chóng)盤(pán),是一些初級(jí)分化的細(xì)胞群,在幼蟲(chóng)過(guò)程中,不同的成蟲(chóng)盤(pán)發(fā)盤(pán)在移植回幼蟲(chóng)體內(nèi)依然保留其,照例發(fā)育為相應(yīng)的。卵細(xì)胞質(zhì)的不均一性對(duì)細(xì)胞分化的影響:細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)除了有營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和多種蛋白外,還含有多不均勻分布,后細(xì)胞說(shuō)攜帶的信息已經(jīng)開(kāi)始有所不同,這種區(qū)別又通過(guò)信號(hào)分子影響其他細(xì)胞產(chǎn)生級(jí)聯(lián)效應(yīng),這樣最胡的信息不斷被修飾并逐漸形成更精細(xì)更復(fù)雜的指令,最終產(chǎn)生分化各異的細(xì)胞類(lèi)型。如海膽卵的育的原腸胚期,在由脊索細(xì)胞的由Shh的編碼的的信號(hào)蛋白的的作用下,靠近脊索的細(xì)胞分化形成底板,環(huán)境對(duì)決定的影響:溫度和的空間位置信息可影響分化。如蜥蜴在24度以下全發(fā)育為雌性,在32度以上則全發(fā)育為雄性。蝸牛形成上下相互疊壓的群于下方的發(fā)育為雌性,位于上方的發(fā)育為雄化。B淋巴細(xì)胞中的DNA經(jīng)過(guò)斷裂丟失與重排的復(fù)雜變化,從而利用有限的免疫球蛋白,可表達(dá)出多種抗體。期周期蛋白N端有一段序列與其降解有關(guān),稱(chēng)降解盒(destructionbox)。當(dāng)MPF活性達(dá)到最高時(shí),通過(guò)泛素連接酶催化泛素與cyclinB結(jié)合,cyclinB26S蛋白酶體水解。泛素76個(gè)氨基酸組成,高度保守,普遍存在于真核細(xì)胞,故名泛素。共價(jià)結(jié)合泛素的蛋白質(zhì)能被蛋白酶體識(shí)別和降解,這是細(xì)胞內(nèi)短蛋白和一些異常蛋白降解的普遍途徑,泛素相當(dāng)于蛋白質(zhì)被摧毀的。26S蛋白酶體是一個(gè)大型的蛋白酶,可將泛素化的蛋白質(zhì)分解成短肽。在蛋白質(zhì)的泛素化過(guò)程中,E1(ubiquitin-activatingenzyme,泛素激活酶)水解ATP獲取能量,通過(guò)其活性位置的半胱氨酸殘基與泛素的羧基末端形成高能硫酯鍵而①凋亡的起始:細(xì)胞表面的特化結(jié)構(gòu)如微絨毛,細(xì)胞間接觸的,但細(xì)胞膜依然完整;線(xiàn)粒體大體完整,但②凋亡小體的形成:核染色質(zhì)斷裂為大小不等的片段,與某些細(xì)胞器如線(xiàn)粒體一起,為反折的細(xì)胞質(zhì)膜所包 180~200bp特征性的DNA②凋亡細(xì)胞組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶tTG②DNA②DNA電泳 ④彗星電泳法(comet⑤流式細(xì)胞分析:根據(jù)凋亡細(xì)胞DNA化丙啶使DNA6、2005簡(jiǎn)4#——在某些生物發(fā)育的特定時(shí)期,一些細(xì)胞中的形態(tài)會(huì)發(fā)生巨大變化,簡(jiǎn)述這些的結(jié)在某些生物的細(xì)胞中,特別是在發(fā)育的某些階段會(huì)出現(xiàn)一些特殊的體積很大的,包括多線(xiàn)和燈刷染色多線(xiàn)來(lái)源于核內(nèi)有絲,核內(nèi)DNA多次而細(xì)胞不,產(chǎn)生的子并行排列,且體細(xì)胞內(nèi)同源染色體配對(duì),緊密結(jié)合在一起從而染色質(zhì)纖維的進(jìn)一步聚縮,形成體積很大的多線(xiàn),多線(xiàn)化細(xì)胞處于間期,并且體積也相應(yīng)增大。果蠅的唾腺細(xì)胞是典型的多線(xiàn)細(xì)胞。多線(xiàn)上有一系列交替分布的帶和間脹泡是活躍轉(zhuǎn)錄的形態(tài)學(xué)標(biāo)志。燈刷幾乎普遍存在于動(dòng)物界的細(xì)胞中,其中兩棲類(lèi)細(xì)胞最為典型。燈刷是細(xì)胞進(jìn)行減數(shù)第一次時(shí)停留在雙線(xiàn)期的,它是一個(gè)二價(jià)體,包含4條染色單體,聯(lián)會(huì)還未解除,可見(jiàn)幾交叉。由染色粒軸絲和兩側(cè)伸出的相似側(cè)環(huán)構(gòu)成。燈刷的形態(tài)與發(fā)生過(guò)程中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的儲(chǔ)備是密切相關(guān)大白紙形成核糖白復(fù)合物,組成環(huán)周?chē)幕|(zhì),環(huán)的粗細(xì)變化表示基質(zhì)的厚薄和轉(zhuǎn)錄RNA的長(zhǎng)短。720053#——細(xì)胞周期受到哪些細(xì)胞內(nèi)因子的調(diào)控,調(diào)控機(jī)理如何,哪些環(huán)境因子將對(duì)細(xì)胞周期產(chǎn)生重要Cyclin周期蛋白不僅僅起激活CDK的作用,還決定了CDK前進(jìn)。分為G1型、G1/SSM4段約100白框,介導(dǎo)周期蛋白與CDK合。cyclinDCDK4CDK6cyclinECDK2E-CDK2為S啟動(dòng)所必需,E-CDK2p107E2F復(fù)合物后,CDK2催化p107磷酸化,使p107失去抑制作用,E2F的作用被顯示出來(lái),促進(jìn)有關(guān)的轉(zhuǎn)錄,促使細(xì)胞周期由G1期向S期轉(zhuǎn)化;E-CDK2還直接參與了中心體的起始調(diào)控。cyclinA的開(kāi)始于G1/S,與CDK2S期cycinACDK2是S要的CDK激酶位于NA心使DNA因子F-A酸并后的性強(qiáng)在G2-M期ccliccli,與CK1CDK11磷酸導(dǎo)致集核層白酸促核膜;蛋磷化促核仁;p6-c白酸,促-abl上,導(dǎo)致cyclinB和cyclinA(proteasome)降解,CDK1被CDK1白質(zhì)去磷酸化,細(xì)胞周期便從M離子輻射、化學(xué)物質(zhì)作用、、溫度變化、pH變化等。離子輻射對(duì)細(xì)胞最直接的影響之一是DNA損傷,DNA其他調(diào)節(jié)因素的變化,改變細(xì)胞周期進(jìn)程。也是影響細(xì)胞周期進(jìn)程的主要因一,有的能快速抑制細(xì)胞周期,有的則可以誘導(dǎo)細(xì)胞轉(zhuǎn)化和,使整個(gè)細(xì)胞周期進(jìn)程發(fā)生改變。PCC試驗(yàn)中,當(dāng)M期細(xì)胞與S期細(xì)胞融合后,出現(xiàn)早熟凝集(prematurechromosomecondensation)現(xiàn)象。S期PCC在光學(xué)顯微鏡下呈現(xiàn)粉末狀,因DNA由多個(gè)部位開(kāi)始。因?yàn)镸期細(xì)胞具有某種促進(jìn)細(xì)胞進(jìn)行分裂的因子,即成熟促進(jìn)因子(maturationpromotingfactor,MPF)。MPF32KD45KD兩種蛋白組成,二者結(jié)合可使多種蛋白質(zhì)磷酸化。P32CDC2的同源物,P45是cyclinB的同源物,CDC2與細(xì)胞周期蛋白結(jié)合才具有激酶的活性,稱(chēng)為細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶(cyclin-dependentkinase,CDK),因此CDC2又被稱(chēng)為CDK1,激活的CDK1可將靶蛋白磷酸化而產(chǎn)生相應(yīng)的生理效應(yīng),如將核纖層蛋白磷酸化導(dǎo)致核纖層、核膜,將H1磷酸化 胞質(zhì)開(kāi)始于細(xì)胞后期,整個(gè)過(guò)程包括4個(gè)步驟:溝位置的確立,肌動(dòng)蛋白和收縮環(huán)形成,收縮環(huán)收縮,收縮環(huán)處細(xì)胞膜融合并形成兩個(gè)子細(xì)胞。敲除了某,紡錘體將拉向兩極,但胞質(zhì)不,可能4個(gè)環(huán)節(jié)中的任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問(wèn)題,最有可能是肌動(dòng)蛋白無(wú)法,收縮環(huán)無(wú)法形成,也有可能收縮環(huán)無(wú)法完成收縮,racE在收縮環(huán)收縮和細(xì)胞膜融合過(guò)程中起重要作用。11、20084G1、G1/S、S、G2/MG1期cyclinD表達(dá),并與CDK4、CDK6結(jié)合,使下游的蛋白質(zhì)如Rb磷酸化,磷酸化的Rb出轉(zhuǎn)錄因子E2F,促進(jìn)許多的轉(zhuǎn)錄,如編碼cyclinE、A和CDK1的。細(xì)胞周期被阻隔在G1期主要的生化事件包括:DNA損傷,相關(guān)的周期蛋白沒(méi)有,轉(zhuǎn)錄因子沒(méi)有等。在G1-S,cyclinE與CDK2結(jié)合,促進(jìn)細(xì)胞通過(guò)G1/S限制點(diǎn)而進(jìn)入SG1/S檢驗(yàn)點(diǎn):在酵母中稱(chēng)start點(diǎn),在哺乳動(dòng)物中稱(chēng)R點(diǎn)(restrictionpoint),控制細(xì)胞由狀態(tài)的G1進(jìn)入DNA期,細(xì)胞周期被阻隔在G1-S期主要的生化事件包括:cyclinE與CDK2合,DNA無(wú)法開(kāi)始S期:cyclinA-CDK2是S期主要的CDK激酶,位于DNA中心,使DNA因子RF-A磷酸化并使后者的活性增強(qiáng)。受阻事件:DNA沒(méi)有完成。在G2-M,cyclinA、cyclinBCDK1CDK1H1不能磷酸化導(dǎo)致不能凝縮,核纖層蛋白不能磷酸化使核膜不能等12 13 2009問(wèn)答 2009問(wèn)答3#-----通常情況下,如果未在赤道板排列整齊的話(huà),細(xì)胞就不能完成中期3、20042#——簡(jiǎn)述磷酸酰肌醇信號(hào)通路的途徑、特點(diǎn)、主要下游事件和生理功能參考:P237-2414、20061#——真核細(xì)胞中為何以游離Ca2,而不是以Na(P238-5、2006述1#——細(xì)胞信號(hào)傳遞中有哪些正、負(fù)反饋機(jī)制來(lái)調(diào)控信號(hào)放大及信號(hào)終止(P255-6、2007簡(jiǎn)3#——?jiǎng)游矬w內(nèi)細(xì)胞外空間通常已有大量的Ca2,為何肌肉細(xì)胞中在肌質(zhì)網(wǎng)內(nèi)仍高濃度的(P140-參考:膜上的受體相互識(shí)別與結(jié)合,開(kāi)啟K生動(dòng)作電位,所以無(wú)法產(chǎn)生動(dòng)作。9、2008述2#RTK-Ras能參考:P237-24110、2009問(wèn)答 1、2002述2#——以動(dòng)物細(xì)胞從胞外選擇性攝取低密度脂蛋LDL(或稱(chēng)籠形)蛋白協(xié)同:動(dòng)物小腸細(xì)胞對(duì)對(duì)葡萄糖的吸收伴隨著Na+的進(jìn)入,細(xì)胞內(nèi)的Na+離子又被鈉鉀泵泵出細(xì)胞外,細(xì)胞內(nèi)始終保持較低的鈉離子濃度,形成電化學(xué)梯度,協(xié)同(cotransport)是一類(lèi)靠間接提供能量完成的主動(dòng)方物細(xì)胞中常常利用膜兩側(cè)Na+濃度梯度來(lái)驅(qū)動(dòng),一般發(fā)生在血液中葡萄糖濃度較低的情況。參考:三類(lèi)具有代表性的衣被蛋白,即:籠形蛋白(clathrin)、COPI和COPII,個(gè)介導(dǎo)不同的途徑籠形蛋白衣被小泡是最早發(fā)現(xiàn)的衣被小泡,介導(dǎo)高爾基體到內(nèi)體、溶酶體、植物液泡的,以及質(zhì)膜到內(nèi)膜區(qū)隔的膜泡?;\形蛋白分子由3個(gè)重鏈和3個(gè)輕鏈組成,形成一個(gè)具有3個(gè)曲臂的形狀(triskelion)。許多籠形蛋白的曲4種不同類(lèi)型的銜接蛋白,可分別結(jié)合不同類(lèi)型的受體,形成不同性質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)小泡,如AP1參與高爾基體→內(nèi)體的、AP2參與質(zhì)膜→內(nèi)體的、AP3參與高爾基體→溶酶體的。當(dāng)籠形蛋白衣被小泡形成時(shí),可溶性蛋白動(dòng)力素(dynamin)成一圈圍繞在芽的頸部,將小泡柄部的膜盡可能地拉近(1.5nm),從而導(dǎo)致膜融合,掐斷(pinchoff)衣被小泡。動(dòng)力素是一種GTP酶,調(diào)節(jié)小泡以出芽形式脫離膜的速率。動(dòng)力素可以召集其它可溶性蛋白在小泡的頸部,通過(guò)改變膜的形狀和膜脂的組成,促使小跑頸部的膜融合,形成衣被小泡。當(dāng)衣被小泡從膜上后,衣被很快就,屬于hsp70的一種分子伴侶(molecularchrone)充當(dāng)衣被的ATP酶,一種輔蛋白(auxillin)可以激活這種ATP酶。(二)COPI負(fù)責(zé)回收、轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)逃逸蛋白(escdproteins)返回內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。起初發(fā)現(xiàn)于高爾基體碎片,在含有ATP的溶液中溫育時(shí),能形成非籠形蛋白包被的小泡。進(jìn)一步的研究發(fā)現(xiàn)這種衣被蛋白復(fù)合體包含多達(dá)7種肽鏈。留蛋白排斥在外,例些駐留蛋白參與形成大的復(fù)合物,因而不能被包裝在出芽形成的轉(zhuǎn)運(yùn)泡中,結(jié)果被保留下內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的正常駐留蛋白,不管在腔中還是在膜上,它們?cè)贑端含有一段回收信號(hào)序列(retrievalsignals),如果它們被意外地逃逸進(jìn)入轉(zhuǎn)運(yùn)泡從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)運(yùn)至高爾基體ciscis面的膜結(jié)合受體蛋白將識(shí)別并結(jié)合逃逸蛋白的回收信號(hào),形成COPI衣被小泡將它們返回內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中的蛋白,如蛋白二硫鍵異構(gòu)酶和協(xié)助折疊的分子伴侶,均具有典型的回收信號(hào)Lys-Asp-Glu-Leu(KDEL)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜蛋白(如SRP受體)在C端有一個(gè)不同的回收信號(hào),通常是Lys-Lys-X-X(KK:任意氨基酸),同樣可保證它們的回收。COPI衣被小泡還可以介導(dǎo)高爾基體不同區(qū)域間的蛋白質(zhì)介導(dǎo)從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)到高爾基體的物質(zhì)。COPII衣被由多種蛋白質(zhì)構(gòu)成,其中Sar1GTP酶與Sec23/Sec24復(fù)合體結(jié)合在一起,形成緊緊包圍著膜的一層衣被,Sec13/Sec31復(fù)合體形成覆蓋在的一層衣被,Sec16推測(cè)可能是一COPII衣被小泡形成與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的特殊部位,稱(chēng)為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)出口(exitsites),這些部位沒(méi)有核糖體,由交織在一起的蛋白通過(guò)受體與COPII衣被結(jié)合,這些受體在完成轉(zhuǎn)運(yùn)后,通過(guò)COPI衣被小泡返回內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。G蛋白偶聯(lián)受體(膜蛋白):蛋白起始后轉(zhuǎn)移至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上形成7次跨膜蛋白結(jié)構(gòu),通過(guò)酸性磷酸酶(溶酶體蛋白):蛋白起始后轉(zhuǎn)移至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)完成后,通過(guò)COPII轉(zhuǎn)運(yùn)小泡轉(zhuǎn)運(yùn)至高爾基體進(jìn)行糖基化修飾和分選,在M6P酶體酶的識(shí)別序列導(dǎo)向下進(jìn)入溶酶體內(nèi)。核糖體蛋白:在核仁內(nèi),到細(xì)胞至內(nèi)進(jìn)行組5、2005論述1#——為什么在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上進(jìn)行共轉(zhuǎn)移的信號(hào)肽僅為一段導(dǎo)向信號(hào)序列,而粒體和葉綠體膜上后(溶酶體的發(fā)生有關(guān)一部分含有M6P標(biāo)志的溶酶體酶會(huì)通過(guò)小泡直接到細(xì)胞外,在細(xì)胞質(zhì)膜上存在依賴(lài)與鈣離子的M6P受體,它可與胞外的溶酶體酶結(jié)合,在網(wǎng)格蛋白協(xié)助下通過(guò)受體介導(dǎo)的胞吞作用,將酶送至前溶M6P受體可返回細(xì)7、2006論述4#——簡(jiǎn)述膜泡的主要類(lèi)型(包括有被小泡和其它形式的小泡)及各類(lèi)型膜泡的結(jié)構(gòu)、途徑與8、007論述1泛素由6于真細(xì)胞故名素。價(jià)合素蛋質(zhì)蛋白體別降,細(xì)胞內(nèi)短蛋和一些異常蛋降的普途徑素當(dāng)?shù)氨淮輾У腟蛋白酶是一大型蛋酶可泛化蛋(t-tvtgy泛素激活酶水解P通過(guò)其活性位置的半胱氨酸殘基與泛素的羧基末端形成高能硫酯鍵而激活泛素,然后1將泛素交給9、2008簡(jiǎn)1#——在物質(zhì)跨膜中,協(xié)助擴(kuò)散和主動(dòng)有何異同在質(zhì)膜上的NG蛋白偶聯(lián)受體(膜蛋白):蛋白起始后轉(zhuǎn)移至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上形成7次跨膜蛋白結(jié)構(gòu),通過(guò)、2、20032#/20064#——植物細(xì)胞中既然有葉綠體這種產(chǎn)能細(xì)胞器,為什么還必須有線(xiàn)粒體存在?3、2003簡(jiǎn)3#——為什么凡是蛋白質(zhì)旺盛的細(xì)胞中核仁都明顯偏大4、2003簡(jiǎn)4#——核糖體的大小亞單位在蛋白質(zhì)過(guò)程前后的裝配和解離有何生物學(xué)意義核糖體的結(jié)構(gòu)與功能P3125、2003述3#6、2005簡(jiǎn)2#——用劇烈勻漿法分離獲得的葉綠體,可在光誘導(dǎo)下產(chǎn)生ATP和NH,但不能固定CO2,試推7、2005簡(jiǎn)4#——在某些生物發(fā)育的特定時(shí)期,一些細(xì)胞中的形態(tài)會(huì)發(fā)生巨大變化,簡(jiǎn)述這些的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其功能()8、2005論述4#——概述真核生物核組和細(xì)胞質(zhì)組的主要特征以及它們?cè)诩?xì)胞功能上的協(xié)調(diào)核 :核組9、2006論述2#——細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的某些蛋白可轉(zhuǎn)移入線(xiàn)粒體功能部位,這一現(xiàn)象支持哪種關(guān)于半自主性細(xì)胞器的學(xué)說(shuō)?為什么?(線(xiàn)粒體共生P242)8、20071#——為什么真核細(xì)胞被剔除細(xì)胞核后不能長(zhǎng)期生存,而原核細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核卻能正常生存和繁殖(細(xì)胞核P379、20072#——簡(jiǎn)述中心體的結(jié)構(gòu)和功能(1、20022#/20044#——體外培養(yǎng)的癌細(xì)胞為什么能懸浮培養(yǎng),而正常細(xì)胞卻只能貼壁培養(yǎng)化和轉(zhuǎn)移三大特點(diǎn),在體外培養(yǎng)時(shí)貼壁性下降,失去接觸抑制,培養(yǎng)時(shí)對(duì)依賴(lài)性降低可以懸浮培養(yǎng)。2、20025#——腫瘤細(xì)胞與同類(lèi)型組織正常細(xì)胞融合而成的雜交細(xì)胞,會(huì)出現(xiàn)什么細(xì)胞生理變化,為什么?①具有無(wú)限增殖的潛能②在體外培養(yǎng)時(shí)貼壁性下降③失去接觸抑制④培養(yǎng)時(shí)對(duì)依賴(lài)性降低3、2006簡(jiǎn)3#——人類(lèi)許多患者(約30%)是與ras(編碼Ras蛋白)突變有關(guān),試分析其機(jī)作為原癌的ras被激活以后就變成有活性的癌.ras激活的方式有3種:點(diǎn)突變,大量表達(dá),及轉(zhuǎn)位.其中ras被激活最常見(jiàn)的方式就是點(diǎn)突變,多發(fā)生在N端第12,13和61子,其中又以12子突變最常見(jiàn),而且多為GGT突變成GTT.不同突變位點(diǎn)對(duì)P21的活化機(jī)制不同,第12子突變可以減P21內(nèi)在的GTP酶活性,并使細(xì)胞凋亡減少,細(xì)胞間接觸抑制減弱;第61子突變可削弱GAP對(duì)P21的內(nèi)在酶活性,并可減弱GAP與P21結(jié)合的穩(wěn)定性ras突變的機(jī)ras激活構(gòu)成癌,其表達(dá)產(chǎn)物Ras蛋白發(fā)生構(gòu)型改變,功能也隨之改變,與GDP的結(jié)合能力減弱,和GTP結(jié)

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