輸血科相關檢測項目工作模式的探討

輸血科相關檢測工程工作形式的討論〔〕:

摘要：目的討論輸血科相關檢測工程的工作形式。方法使用傳統(tǒng)試管法、手工加樣微柱凝膠法及全自動血型儀進展檢測血型鑒定，不規(guī)那么抗體篩查，穿插配血實驗，并記錄不同標本所耗時間；3種實驗方法對860份標本進展不規(guī)那么抗體篩查實驗，對1334份標本進展穿插配血實驗，分析3種實驗方法敏感度、特異度、陽性率及診斷符合率。結果3種實驗方法檢測30個標本之內，試管法所用時間最少，全自動血型儀用時最長,差異均具有統(tǒng)計學意義〔P

1資料與方法

1.1標本來源

2022年11月1日至2022年12月1日本院所有手術及臨床治療用血患者標本，EDTA-K2抗凝3mL，獻血者標本來自廣州軍區(qū)血液中心。

1.2儀器

美國BIO-RADIH-1000全自動血型及配血儀，BIO-RADID-Incubator37SⅠ，BIO-RADID-Centrifuge12SⅡ,日本SUBOTAKA-2200離心機，飛鴿TDL-60B低速臺式離心機,37℃恒溫水浴箱。

1.3試劑

BIO-RAD公司/LISS/Coombs低離子抗人球蛋白卡〔Lot：50531.09.03〕、ABO血型正/反定型和RhD血型檢測卡〔Lot：50093.73.02〕、抗體挑選細胞〔Lot：45330.19.1〕；抗A抗B血型定型試劑〔單克隆抗體Lot：20220608〕、人ABO血型反定型紅細胞試劑盒〔Lot：20225341〕、RhD〔IgM〕血型定型試劑〔單克隆抗體Lot：20221810〕上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司，凝聚胺試劑BaSo〔Lot：116111〕珠海貝索生物技術。

1.4實驗分組

按照檢測方法的不同，本實驗分為3組，分別為A組：試管法；B組：手工加樣檢測卡法；C組：儀器法。

1.5檢測方法

1.5.1血型檢測A組

試管法：按照?輸血技術手冊?指導標準操作【1】；B組：手工加樣ABO檢測卡：按照試劑說明書操作步驟操作；C組：儀器法：應用1H-1000全自動血型儀對血標本按儀器操作說明進展全自動加樣判讀結果。3種方法同時記錄操作時間。

1.5.2不規(guī)那么抗體挑選A組

凝聚胺試管法：標本與抗體篩查試管對應標記，在3支標有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號試管中加受檢者血清〔漿〕2滴，再分別參加對應編號的標準抗體挑選細胞1滴，再加低離子介質0.8mL，混合后靜置1min。再各加1滴凝聚胺，3400rpm，離心15s，倒掉上清液，輕輕搖動試管，目測紅細胞有無凝集，最后加1滴假凝集去除液，并輕輕混合，觀察結果。假設在1min內凝集散開，代表是由凝聚胺引起的非特異性聚集，不規(guī)那么抗體挑選結果陰性；假設凝聚不散開不規(guī)那么抗體挑選結果陽性。B組：手工加樣微柱凝膠法：將標本與抗體篩查卡對應標記，各卡分別參加不規(guī)那么抗體篩查Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ號細胞25l，再分別參加受檢者血漿25l，然后放置于37℃孵育箱孵育15min后，用BIO-RADID-Centrifuge12SⅡ離心機離心10min，觀察結果。C組：儀器法：應用1H-1000全自動血型儀對血標本按儀器操作說明進展全自動加樣并判讀結果。

1.5.3穿插配血A組

凝聚胺穿插配血法〔試管法〕主側加樣方法：在1支試管中參加患者血清2滴及獻血員3-5%的紅細胞懸液1滴。次側加樣方法：在另1支試管中參加獻血員血清2滴及患者3-5%的紅細胞懸液1滴。用3400rpm，離心15s后觀察有無凝集；混勻并且在各管中參加低離子介質溶液約0.8mL，混勻后靜置1min。再參加聚凝胺試劑1滴，用3400rpm，離心15s；倒掉上清液不要瀝干，輕輕搖動試管，觀察有無紅細胞凝集；在各試管參加假凝集去除液1滴，輕輕搖動試管并同時觀察結果，假設在1min內凝集散開，代表是由凝聚胺引起的非特異性聚集，配血結果相合；假設凝聚不散開那么為紅細胞抗原抗體結合的特異性反響，配血結果不相合。B組:手工加樣微柱凝膠穿插配血法：在微柱凝膠卡上對應標記每個病人的主次側，主側孔中分別參加50l獻血員紅細胞懸液〔1%〕，25l患者血清，次測孔中參加50l患者紅細胞懸液〔1%〕，25l獻血員血清，BIO-RADID-Incubator37SⅠ孵育15min，ID-Centrifuge12SⅡ離心機離心10min，判讀結果并記錄。C組：儀器法：應用1H-1000全自動血型儀對血標本按儀器操作說明進展全自動加樣并判讀結果。

1.6統(tǒng)計學處理

采用SPSS20.0軟件進展數據分析，組間數據處理使用單因素方差分析，P

2.23種檢測體系不規(guī)那么抗體篩查統(tǒng)計結果對照

324份血型鑒定的標本，3種實驗方法試驗結果完全相符。860份抗體篩查標本，試管法檢測陽性率為0.35%，手工加樣微柱凝膠法檢測陽性率0.47%，IH-1000檢測陽性率為2.50%；21份例抗篩結果可疑，報告形式有"？";、"＋／－";、"DP";、"WF";或"WD";，3種實驗方法符合率為99.6%。結果不一致使用抗人球蛋白實驗加以認證，詳細結果見表4。

2.33種檢測體系穿插配血統(tǒng)計結果對照

1334份穿插配血結果為：試管法5例不相容，手工加樣微柱凝膠法16例不相容，儀器法〔IH-1000〕36例不相容，結果不一致使用抗人球蛋白實驗加以認證，差異無統(tǒng)計學意義〔P>0.05〕。

3討論

ABO血型鑒定在臨床輸血工作中占有極其重要的地位，ABO定型錯誤將嚴重影響輸血工作的正常開展，只有ABO血型鑒定正確才能保障輸血的有效性和平安性。而不規(guī)那么抗體是指抗A和抗B以外的血型抗體【2】，輸入不規(guī)那么抗體對應抗原陽性的血液后可能會引起嚴重的輸血反響或者輸血無效，因此不規(guī)那么抗體篩查已經是臨床輸血前和產前檢查非常重要的一個檢測工程，穿插配血試驗是在血型鑒定的根底上，進一步檢測受血者和供血者之間是否存在血型不合的抗原抗體反響，以保證受血者的輸血平安。

本實驗采用了傳染試管法、手工加樣微柱凝膠法及全自動血型儀進展檢測[3-6]，從結果可以看出，3種實驗方法在標本30個以下時，凝聚胺試管法所用時間最短，比擬適宜急診情況，全自動血型儀所需時間最長，但是時間趨勢上面可以發(fā)現隨著檢測標本的增加，試管法所需時間變化增加較快，而微柱凝膠手工加樣及全自動血型儀所需時間變化較小，這主要與操作步驟及檢測原理有關。我們推測當標本量到達一定數量時，儀器法檢測可能在時間方面可以具有一定的優(yōu)勢，比擬適宜擇期手術預備血的情況。此次結果說明用全自動血型儀進展穿插配血雖然敏感度較高，但容易導致假陽性結果的出現，必須用經典抗人球法進展復查，而聚凝胺法敏感性較差。我們分析導致全自動儀器在實驗中出現假陽性的原因主要與標本和微柱凝膠卡自身情況有關[7，8]，儀器操作要求標本至少為3mL，獻血員標本要求血漿上清必須清澈，血漿中沒有異常增高的蛋白、白細胞以及血脂，不能有纖維蛋白和血塊等情況存在，而對于凝膠卡來說，假設出現裂卡、凝膠枯槁、卡中含氣泡、卡封閉不嚴等顯現都會影響結果的準確性，此外對與判讀結果中出"？";、"＋/－";、"WF";或"WD";反響格局，主要與儀器廠家設定的判斷標準過高有關。因此，我們建議假設儀器配血結果顯示弱陽性，建議用抗球蛋白試管法進展復查，防止產生假陽性的配血結果。

通過實驗及實際操作使用分析比照發(fā)現，IH-1000全自動血型儀及其使用技術在臨床輸血工作中顯示了較大的應用前景。因其標準化操作，可以在一定程度上防止人為過失，進步輸血質量，而且其結果可以永久保存便于查閱，可以一定程度上彌補傳統(tǒng)方法的缺乏，但是因其實驗所耗時間長，加上較高的假陽性率，在急診輸血的處理上沒有明顯的優(yōu)勢，所以IH-1000全自動血型儀及其使用技術與傳統(tǒng)方法的結合使用是輸血科工作較好的選擇形式。

參考文獻

【1】將光明,王保龍,完曉菊,等.全自動微柱玻璃珠技術進步血型相容性檢測效能[J].中國實驗血液學雜志,2022,19(4):1048-1052.

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【4】將光明,王保龍,完曉菊,等.全自動微柱玻璃珠技術進步血型相容性檢測效能[J].中國實驗血液學雜志,2022,(19)4:1048-1052.

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【6】王敏,王保龍,姚萍,等.全自動血型儀在輸血前檢查中的應用[J]