D-10糖化血紅蛋白A1c測定儀操作規(guī)程

D-10糖化血紅蛋白A1c測定儀操作規(guī)程離子交換高效液相色譜法（HPLC）法儀器型號：Bio-RadD10安裝日期：1．目的：D-10糖化血紅蛋白A1c測定儀用于報告?zhèn)€體EDTA抗凝靜脈全血樣本的糖化血紅蛋白A1c的實驗結(jié)果，用于個體糖尿病輔助診斷和治療監(jiān)測。2． 原理：D-10糖化血紅蛋白A1c測定儀是臺式儀器，應(yīng)用離子交換高效液相色譜法（HPLC）對人全血糖化血紅蛋白A1C的自動化和準(zhǔn)確的測定。標(biāo)本可被自動稀釋后注入分析柱。D-10糖化血紅蛋白A1c測定儀將預(yù)先編程設(shè)置的由低到高離子濃度的緩沖液注入系統(tǒng)，在這一過程中，血紅蛋白經(jīng)和分析柱中偶聯(lián)離子結(jié)合的程度大小達(dá)到分離。處理好的樣本自動被注入分析通路，分離的血紅蛋白隨后在流經(jīng)光感測量計時，測量其在415nm的光吸收情況。D-10糖化血紅蛋白A1c測定儀臨床數(shù)據(jù)處理軟件(CDM)將每次分析過程中收集到的數(shù)據(jù)還原。此間要經(jīng)過兩個水平的計算。通過微積分計算得出分析結(jié)果和分析圖譜，面積計算使用了指數(shù)模式的高斯對數(shù)（EMG），這樣計算已經(jīng)排除了可變部分的血紅蛋白A1C和氨基甲酰血紅蛋等干擾成分。D-10糖化血紅蛋白A1c測定儀可從全血管中自動吸取標(biāo)本，隨后進(jìn)行稀釋和分析，每個樣本在3分鐘內(nèi)即可完成測定。3．儀器使用環(huán)境：1．無塵、換氣良好的環(huán)境。2．避免陽光直接照射。3．室內(nèi)相對濕度20~80%4．電源電壓變動在220V±10V之內(nèi)5．有保護(hù)性接地4．安全條款：1．使用對人體有危險或發(fā)生感染的樣品時，請使用橡膠手套，不要直接接觸。如操作人員直接被污染時，用大量的水沖洗、消毒，必要時應(yīng)及時看醫(yī)生。儀器污染時應(yīng)隨時清洗干凈且消毒。2．儀器上面和周圍不要放置或使用易燃、易爆物品，避免引起火災(zāi)、爆炸。3．儀器的操作、保養(yǎng)按規(guī)定程序進(jìn)行。5．標(biāo)準(zhǔn)操作過程5.1開機(jī)程序：確認(rèn)試劑量和打印紙充足，廢液桶倒空打開儀器左側(cè)下部的電源開關(guān)儀器自檢后自動進(jìn)入睡眠（Sleep）狀態(tài)5.2 運(yùn)行前檢查1）檢查緩沖液和洗液/稀釋液的液面水平2）檢查廢液桶3）檢查分析柱的測試數(shù) (LotInfo)4）檢查泵壓力波動 (Maintain/StartPump)，壓力應(yīng)波動在5%之間5）檢查管路的連接處有無漏液6）檢查打印紙5.3關(guān)機(jī)程序如系統(tǒng)處于Standby狀態(tài)，從Run菜單中選擇Sleep，經(jīng)過5分鐘狀態(tài)轉(zhuǎn)換，儀器進(jìn)入Sleep狀態(tài)；如系統(tǒng)已經(jīng)處于Sleep狀態(tài)，直接執(zhí)行下步操作點(diǎn)擊Run菜單中ShutDown當(dāng)出現(xiàn)小月亮圖標(biāo)<Itissafenowshutdown>后，關(guān)掉電源開關(guān)注:建議儀器在不使用時保持sleep狀態(tài)，并且盡量避免在Running狀態(tài)突然關(guān)機(jī)下列情況建議關(guān)機(jī)：當(dāng)更換系統(tǒng)零件時當(dāng)將系統(tǒng)移動到新位置時當(dāng)實驗室斷電時5.4常規(guī)病人樣本操作5.4.1病人樣本要求：1)2ml，EDTA抗凝全血；2)室溫穩(wěn)定3天，2-8oC可保存7天；3)如果樣本量不足2ml，需要手工進(jìn)行樣本預(yù)稀釋。5.4.1常規(guī)樣本操作1）如系統(tǒng)處于Sleep狀態(tài)，點(diǎn)擊運(yùn)行（Run）菜單下的StartUp,儀器經(jīng)過5分鐘預(yù)熱后進(jìn)入等待（Standby）狀態(tài)2）樣品管排列樣本數(shù)樣本1低值QC2高值QC3toN病人樣本樣品管:按照編號順序?qū)⒃紭颖竟軘[放在樣本架上預(yù)稀釋樣本和質(zhì)控:5ul全血+1.5mLWash/Diluent試劑.質(zhì)控放在帶條形碼的白色套管內(nèi),確認(rèn)磁鐵面向后3）從右側(cè)門插入樣品架（注意軌道）4）當(dāng)條形碼掃描后，待右側(cè)出現(xiàn)<Edit>，手工輸入樣本號5）點(diǎn)<Start>開始6）待實驗結(jié)束后，儀器自動進(jìn)入Standby狀態(tài)7）如果30分鐘內(nèi)沒有新的實驗運(yùn)行，儀器自動進(jìn)入Sleep狀態(tài)5.5樣本結(jié)果的LIS在Setting/LIS菜單中，選擇aftereachrun。每一測試后樣本結(jié)果自動傳入LIS5.6 典型圖譜的解釋A0，非糖化成分可變A1c，中間產(chǎn)物A1cA1a和A1b，小成分的血紅蛋白總的峰面積，范圍100-400A1c結(jié)果6．安裝一個新的試劑盒6.1UpdateKit1）在軟驅(qū)中插入更新試劑盒軟盤。2）選擇LOTINFO菜單。在LOTINFO界面，按更新試劑盒按紐<UpdateKit>。3）按現(xiàn)在更新按紐<UpdateNow>。4）更新完成，在LOTINFO菜單按打印按紐為你的實驗室記錄進(jìn)行試劑盒信息硬拷貝。5）從軟驅(qū)中退出更新試劑盒軟盤（此步必須做）檢查校正品的數(shù)值與校正品試劑盒內(nèi)的黃色卡片上的NGSP水平值是否相符6.2 安裝新試劑在緩沖液和稀釋液使用前應(yīng)使之達(dá)到室溫，液體與室溫溫差在4°C以內(nèi)，防止產(chǎn)生氣泡。1）證實系統(tǒng)處于Sleep狀態(tài)，從試劑瓶上松開瓶帽并小心地將長試劑管線垂直拿出試劑瓶。2）撤出空瓶并將其放在一邊。3）去除新試劑瓶的瓶帽。將帽擰緊在空瓶上并將空瓶合適地處理。4）將新瓶放在試劑瓶隔間。將試劑管線放入新瓶。擰緊試劑瓶帽。5）在合適的批號信息<LOTINFO>界面上為替換的緩沖液或清洗/稀釋溶劑重新設(shè)定注射數(shù)。6）不同批號的試劑不要混用。7）每200人份更換緩沖液1時，需要將Buffer1水平數(shù)Reset到200（測試）或2000（ml）。Buffer1水平數(shù)Reset到200或2000的操作如下：<LOTINFO>界面/Buffer1/點(diǎn)擊Level后的數(shù)字/出現(xiàn)Reset到200或2000的界面/OK注意：當(dāng)更換試劑盒程序（UpdateKit）被執(zhí)行時不需要手工重新設(shè)定注射數(shù)。6.3 安裝新分析柱1）證實系統(tǒng)是處于睡眠狀態(tài)?？墒褂?lt;Run>界面將系統(tǒng)處于睡眠狀態(tài)。2）打開D-10前下方黑色面板。將位于右側(cè)的黑色分析柱加熱器拉開。蓋必須被完全地打開以便于從加熱器中去除或安裝分析柱支持器。注意：當(dāng)分析柱被取出時，少量的液體將從試管中滴出。在藍(lán)色支持器下方放一塊紙巾來吸收任何下滴的液體。3）將藍(lán)色支持器取出，將舊分析柱從支持器上去除并將其合適地處理。9）從新分析柱中去除末端綠色帽并注意使分析柱上的流向箭頭和藍(lán)色支持器上的箭頭在同一個方向。將新分析柱完全地插入支持器直到分析柱的左端和支持器的左端持平。假如分析柱不能合適的插入，支持器就不能被安放到加熱器。4）將流向標(biāo)簽面向前，將支持器放入后關(guān)上蓋。5）在睡眠狀態(tài)下執(zhí)行一次系統(tǒng)沖洗（Maintain/systemflush）6.4 試劑制備全血Primer的復(fù)溶:加入1ml蒸餾水，輕輕顛倒混勻，室溫靜置10分鐘后使用。溶好的全血Primer4C可保存21天。校正品的復(fù)溶：加入7ml冷的校正緩沖液/水平，混勻，室溫靜置10分鐘后使用。溶好的校正品4C可保存1周。質(zhì)控品的復(fù)溶：加入0.5ml蒸餾水/水平，室溫靜置10分鐘后輕輕混勻后分裝。20ul/支，-20C或-70C可保存3個月。6.5 新分析柱的灌注（每400人份操作）在樣本架的1號位置放置帶條形碼Primer的白色套管1.5ml紫蓋的小樣品管中倒入全部1ml全血Primer后放入白色套管按照正確地方向?qū)⒃摌颖炯軓挠覀?cè)小門插入，注意此時條形碼必須面朝后待Primer在<Run>界面屏幕上出現(xiàn)后，點(diǎn)<Start>開始。運(yùn)行Primer程序大概需要13分鐘運(yùn)行完成后，點(diǎn)擊<Eject>退出樣本架注意：Primer程序完成后沒有HbA1c實驗結(jié)果6.6 新分析柱的校正（每400人份操作）在樣本架的1和2號位置放置帶條形碼Cal1和Cal2的白色套管，3和4號位置放置帶條形碼CTRL和CTRH的白色套管相應(yīng)紫蓋的小樣品管中倒入適量的1號和2號校正液后放入白色套管，在紫蓋的小樣品管中按照1:300的比例稀釋質(zhì)控品(5ul質(zhì)控品加入1.5mlwash/dilutionreagent）按照正確地方向?qū)⒃摌颖炯軓挠覀?cè)小門插入，注意此時條形碼必須面朝后待Cal1和Cal2，CTRL和CTRH在<Run>界面屏幕上出現(xiàn)后，點(diǎn)<Start>開始。如校正通過則在打印報告的下方提示CalibrationPassed。察看質(zhì)控值是否在控儀器保養(yǎng)（詳細(xì)內(nèi)容請看儀器說明書）7.1每日保養(yǎng):-檢查每瓶試劑和廢液瓶的液面：必要時更換和倒空-檢查打印紙數(shù)量：必要時更換-清潔樣品架-察看系統(tǒng)壓力，如不穩(wěn)定需手動排氣泡1）從<MAINTAIN>界面，緩沖液2設(shè)為50%，流速為1.5ml/min；按<StartPump>按紐。監(jiān)測系統(tǒng)壓力3到4分鐘。假如壓力波動不超過5%，記錄系統(tǒng)壓力在日期日志上。假如壓力波動超過5%,這可能提示在檢查閥門中存在氣泡。2）按stoppump來關(guān)閉泵。注意：下來的一步使用紙巾來吸收頂端插口的溶液。3）取50mL注射器并將其放入泵下部的插口中。逆時針轉(zhuǎn)一圈半打開插口。慢慢的回抽注射器抽出大約15mL的緩沖液。將插口順時針旋緊，從插口中取出注射器并趕出空氣。重新將注射器放回插口并逆時針轉(zhuǎn)一圈半打開插口，同時將泵頂端的插口旋松。緩慢的推注射器使試劑從頂端流出，大約要從注射器中推出10mL的溶液。不要使用注射器中最后幾毫升的溶液以免重新加入額外的氣泡。4）關(guān)閉泵插口并取出注射器。重新連接頂端的連接，用手牢固地擰緊。從MAINTAIN界面重復(fù)步驟1。監(jiān)測壓力輸出和監(jiān)測器記錄值5分鐘。在這5分鐘內(nèi)，檢查泵連接以察看是否有漏液。5）假如壓力波動超過5%，重復(fù)上述步驟。假如壓力繼續(xù)波動，請聯(lián)系技術(shù)服務(wù)部門尋求技術(shù)支持。7.2每/