2023屆大連育明中學(xué)高三最后一模生物試題（含答案解析）

2023學(xué)年高考生物模擬試卷注意事項(xiàng)：1．答卷前，考生務(wù)必將自己的姓名、準(zhǔn)考證號(hào)填寫在答題卡上。2．回答選擇題時(shí)，選出每小題答案后，用鉛筆把答題卡上對(duì)應(yīng)題目的答案標(biāo)號(hào)涂黑，如需改動(dòng)，用橡皮擦干凈后，再選涂其它答案標(biāo)號(hào)?；卮鸱沁x擇題時(shí)，將答案寫在答題卡上，寫在本試卷上無效。3．考試結(jié)束后，將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1．利用競(jìng)爭(zhēng)酶聯(lián)免疫檢測(cè)技術(shù)，檢測(cè)抗蟲棉中Bt抗蟲蛋白表達(dá)量，原理如下圖所示。檢測(cè)之前，將“目的蛋白”的特異性抗體固定在支持物上，待測(cè)樣本中的抗原和酶標(biāo)記抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合固相抗體，標(biāo)記抗原的酶可催化顏色反應(yīng)。下列說法錯(cuò)誤的是A．檢測(cè)過程中待測(cè)抗原和酶標(biāo)記抗原均為Bt抗蟲蛋白B．需設(shè)置僅有酶標(biāo)記抗原或者僅有待測(cè)抗原的兩組對(duì)照C．實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組加入底物的量及顯色時(shí)間必須一致D．反應(yīng)體系中藍(lán)色越深說明待測(cè)樣品Bt蛋白含量越高2．下列關(guān)于細(xì)胞內(nèi)核酸的說法，正確的是（）A．真核細(xì)胞內(nèi)DNA和RNA的合成都在細(xì)胞核內(nèi)完成B．mRNA和tRNA均為單鏈不含氫鍵C．DNA聚合酶可以與RNA結(jié)合并催化轉(zhuǎn)錄過程D．核酸的多樣性決定了蛋白質(zhì)的多樣性3．下列關(guān)于細(xì)胞的物質(zhì)輸入和輸出的說法，錯(cuò)誤的是A．同一種物質(zhì)進(jìn)入不同細(xì)胞的跨膜運(yùn)輸方式不一定相同B．置于清水中一段時(shí)間后的洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞不再吸水與細(xì)胞壁的作用有關(guān)C．胞吞和胞吐只是大分子物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的方式D．無機(jī)鹽離子的跨膜運(yùn)輸不一定需要消耗能量4．在細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)計(jì)數(shù)的是（）A．各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)B．合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的細(xì)菌數(shù)C．各個(gè)稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)D．合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)5．很多實(shí)驗(yàn)中必須先制作玻片標(biāo)本，然后在顯微鏡下觀察。下面的實(shí)驗(yàn)步驟錯(cuò)誤的是A．脂肪鑒定：切取花生子葉薄片→染色→去浮色→制片→觀察B．有絲分裂觀察：解離根尖→染色→漂洗→制片→觀察C．質(zhì)壁分離觀察：撕取紫色洋蔥鱗片葉表皮→制片→觀察→滴加蔗糖溶液觀察D．葉綠體觀察：取黑藻小葉→制片→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察6．某同學(xué)將一定量的某種動(dòng)物的提取液（A）注射到實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)，注射后若干天，未見小鼠出現(xiàn)明顯的異常表現(xiàn)。將小鼠分成兩組，一組注射少量的A，小鼠很快發(fā)生了呼吸困難等癥狀；另一組注射生理鹽水，未見小鼠有異常表現(xiàn)。對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠在第二次注射A后的表現(xiàn)，下列解釋合理的是A．提取液中含有胰島素，導(dǎo)致小鼠血糖濃度降低B．提取液中含有乙酰膽堿，使小鼠骨骼肌活動(dòng)減弱C．提取液中含有過敏原，引起小鼠發(fā)生了過敏反應(yīng)D．提取液中含有呼吸抑制劑，可快速作用于小鼠呼吸系統(tǒng)二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）稻瘟病是水稻最重要的病害之一，為達(dá)到防治目的，科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了抗稻瘟病水稻品種。回答下列問題：（1）通過RT-PCR技術(shù)以抗稻瘟病基因的RNA為模板擴(kuò)增出cDNA。在PCR過程中，兩個(gè)引物是_____酶的結(jié)合位點(diǎn)；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，可能出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)，其原因是_____。（2）利用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是_____，為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是_____。（3）基因工程中，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入植物細(xì)胞采用最多的方法是_____，導(dǎo)入動(dòng)物受精卵采用的方法是_____。（4）若要檢測(cè)抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，可采用的分子水平的檢測(cè)方法是_____。8．（10分）科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對(duì)CO2的親和力，利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請(qǐng)回答下列問題：（1）PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于___________________（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體，常用________________將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞，還需用到植物細(xì)胞工程中的________________技術(shù)，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。（2）PCR過程所依據(jù)的原理是____________。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入____個(gè)引物。（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為_____________?？蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是_______________________。（4）另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中，經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是____A．選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)B．采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)C．人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。?，可以獲得多個(gè)具有外源基因的后代9．（10分）植物組織培養(yǎng)與基因工程技術(shù)在科學(xué)研究和生產(chǎn)實(shí)踐中得到了廣泛的應(yīng)用。為使水稻獲得抗除草劑性狀，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株，獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。請(qǐng)回答問題。注：GUS基因表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍(lán)色（1）將草甘膦抗性基因作為____________，與Ti質(zhì)粒用相同的____________和DNA連接酶處理構(gòu)建基因表達(dá)載體。（2）取某品種水稻的幼胚，先進(jìn)行____________處理，然后接種到培養(yǎng)基中，水稻幼胚細(xì)胞發(fā)生____________形成愈傷組織。培養(yǎng)過程中曾出現(xiàn)下圖所示的不同培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是____________和____________。（3）利用PCR技術(shù)，可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：5'—ATGGCT．．．．．．．．．AGGAAC—3'3'—TACCGA．．．．．．．．．TCCTTG—5'根據(jù)上述序列應(yīng)選擇引物____________（填字母）進(jìn)行PCR。A．引物：5'-TACCGA-3'B．引物：5'-GTTCCT-3'C．引物：5'-AUGGCU-3'D．引物：5’-ATGGCT-3’（4）除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外，還可以利用GUS基因表達(dá)產(chǎn)物的鑒定進(jìn)行圖中的篩選2，以確定目的基因是否____________。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細(xì)胞的____________過程，獲得轉(zhuǎn)基因水稻。（5）為獲得具有抗除草劑性狀的轉(zhuǎn)基因水稻，還需要在個(gè)體水平進(jìn)行抗性測(cè)試。請(qǐng)你設(shè)計(jì)一個(gè)實(shí)驗(yàn)方案，篩選出對(duì)草甘膦具有抗性的轉(zhuǎn)基因水稻（只寫出實(shí)驗(yàn)思路即可）。_______________________。10．（10分）鼠尾藻是一種著生在礁石上的大型海洋褐藻，可作為海參的優(yōu)質(zhì)飼料。鼠尾藻枝條中上部的葉片較窄，稱之狹葉；而枝條下部的葉片較寬，稱之闊葉。新生出闊葉顏色呈淺黃色，而進(jìn)入繁殖期時(shí)闊葉呈深褐色。研究人員在溫度18℃（鼠尾藻光合作用最適溫度）等適宜條件下測(cè)定葉片的各項(xiàng)數(shù)據(jù)如下表。葉片光補(bǔ)償點(diǎn)(μmo1.m2-.s-1)光飽和點(diǎn)(μmo1.m-2.s-1)葉綠素a(mg.g-1)最大凈光合速率(nmolO2.g-1min-1)新生闊葉16.6164.10.371017.3繁殖期闊葉15.1266.00.731913.5狹葉25.6344.00.541058.2（1）據(jù)表分析，鼠尾藻從生長(zhǎng)期進(jìn)入繁殖期時(shí)，闊葉的光合作用強(qiáng)度_____，其內(nèi)在原因之一是葉片的___________________。（2）依據(jù)表中_____的變化，可推知鼠尾藻狹葉比闊葉更適應(yīng)_________（弱光強(qiáng)光）條件，這與狹葉著生在枝條中上部，海水退潮時(shí)會(huì)暴露于空氣中的特點(diǎn)相適應(yīng)。（3）新生闊葉顏色呈淺黃色，欲確定其所含色素的種類，可用_________提取葉片的色素，然后用層析液分離，并觀察濾紙條上色素帶的_____。（4）將新生闊葉由溫度18℃移至26℃（為呼吸的最適溫度）下，其光補(bǔ)償點(diǎn)將_____（增大/不變/減小）。故在南方高溫環(huán)境下，需考慮控制適宜的溫度及光照強(qiáng)度等條件以利于鼠尾藻的養(yǎng)殖。11．（15分）圖1是某植物葉肉細(xì)胞氧氣釋放速率變化曲線；圖2是該植物體內(nèi)某代謝過程；圖3是在夏季晴朗白天，該綠色植物在3塊含水量不同的土壤中種植時(shí)，光合速率的變化曲線圖，請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：（1）圖1中，葉肉細(xì)胞中有[H]產(chǎn)生的是__________點(diǎn)；B點(diǎn)時(shí)該植物體內(nèi)光合作用速率_________（填＞、＜或=）呼吸作用速率，此時(shí)葉肉細(xì)胞產(chǎn)生O2的移動(dòng)方向______。（2）圖1中C點(diǎn)時(shí)導(dǎo)致甲、乙兩曲線不同的原因最可能是_________________。（3）圖3中，________曲線對(duì)應(yīng)的土壤中含水最少；該曲線10-12時(shí)的時(shí)間段內(nèi)，該植物體內(nèi)對(duì)應(yīng)圖2中G與F的含量變化是_____________________。

2023學(xué)年模擬測(cè)試卷參考答案（含詳細(xì)解析）一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個(gè)選項(xiàng)符合題目要求）1、D【答案解析】

結(jié)合題意和題圖可知：（1）待測(cè)抗原，能與固相支持物上的特異性抗體結(jié)合，但不能發(fā)生顏色反應(yīng)；（2）酶標(biāo)記抗原也能與固相支持物上的特異性抗體結(jié)合，但因有酶的存在，故能發(fā)生顏色反應(yīng)（白色變?yōu)樗{(lán)色）；（3）由于待測(cè)抗原與酶標(biāo)記抗原同時(shí)與固相支持物上的特異性抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合，若藍(lán)色產(chǎn)物越多，說明酶標(biāo)記抗原越多，則待測(cè)抗原少；反之亦然?！绢}目詳解】A、基因工程中常常用抗原-抗體雜交技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)入基因的的表達(dá)的蛋白質(zhì)量，而題中待測(cè)抗原和酶標(biāo)記抗原都能與特定抗體結(jié)合，故檢測(cè)過程中待測(cè)抗原和酶標(biāo)記抗原均為Bt抗蟲蛋白，A正確；B、為了通過顏色反應(yīng)區(qū)分待測(cè)抗原和酶標(biāo)記抗原的多少，需設(shè)置僅有酶標(biāo)記抗原或者僅有待測(cè)抗原的兩組對(duì)照，B正確；C、實(shí)驗(yàn)中需要控制無關(guān)變量，所以實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組加入底物的量及顯色時(shí)間必須一致，C正確；D、分析示意圖，反應(yīng)體系中藍(lán)色越深說明待測(cè)樣品酶標(biāo)記抗原含量越高，D錯(cuò)誤。故選D?！敬鸢更c(diǎn)睛】注意：待測(cè)抗原和酶標(biāo)記抗原都屬于Bt抗蟲蛋白，都能與固相支持物上的特異性抗體結(jié)合，二者的區(qū)別就是能否催化顏色反應(yīng)。2、D【答案解析】

1、核酸是遺傳信息的攜帶者，是一切生物的遺傳物質(zhì)，在生物體的遺傳、變異和蛋白質(zhì)的生物合成中具有重要作用；細(xì)胞中的核酸根據(jù)所含五碳糖的不同分為DNA（脫氧核糖核酸）和RNA（核糖核酸）兩種，構(gòu)成DNA與RNA的基本單位分別是脫氧核苷酸和核糖核苷酸，每個(gè)脫氧核苷酸分子是由一分子磷酸、一分子脫氧核糖和一分子含氮堿基形成，每個(gè)核糖核苷酸分子是由一分子磷酸、一分子核糖和一分子含氮堿基形成。2、構(gòu)成蛋白質(zhì)的基本單位是氨基酸，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)多樣性的直接原因與構(gòu)成蛋白質(zhì)的氨基酸的種類、數(shù)目、排列順序和肽鏈盤曲折疊形成的蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)千差萬別有關(guān)。【題目詳解】A、真核細(xì)胞的線粒體和葉綠體中都有環(huán)狀的DNA，都可以進(jìn)行復(fù)制和轉(zhuǎn)錄，所以DNA和RNA的合成不一定都在細(xì)胞核里進(jìn)行，A錯(cuò)誤；B、tRNA為三葉草形狀，部分區(qū)域堿基互補(bǔ)配對(duì)形成雙鏈結(jié)構(gòu)，含有氫鍵，B錯(cuò)誤；C、DNA聚合酶與DNA結(jié)合并催化DNA的復(fù)制過程，RNA聚合酶與DNA結(jié)合并催化轉(zhuǎn)錄過程，C錯(cuò)誤；D、蛋白質(zhì)是基因表達(dá)的結(jié)果，其多樣性取決于核酸的多樣性，D正確。故選D。3、C【答案解析】

細(xì)胞膜具有控制物質(zhì)進(jìn)出的功能，小分子、離子進(jìn)出細(xì)胞膜的方式包括主動(dòng)運(yùn)輸和被動(dòng)運(yùn)輸，主動(dòng)運(yùn)輸是逆濃度梯度運(yùn)輸，需要消耗能量，被動(dòng)運(yùn)輸是順濃度梯度運(yùn)輸，不需要消耗能量；細(xì)胞膜運(yùn)輸物質(zhì)的功能具有選擇性，細(xì)胞膜的選擇透過性與細(xì)胞膜上載體蛋白的種類和數(shù)量有關(guān)，載體蛋白運(yùn)輸物質(zhì)具有專一性；大分子物質(zhì)出入細(xì)胞膜的方式是胞吞和胞吐，需要消耗能量，依賴于細(xì)胞膜的流動(dòng)性特點(diǎn)。【題目詳解】同一種物質(zhì)進(jìn)出不同細(xì)胞的方式可能不同,如葡萄糖進(jìn)入紅細(xì)胞是協(xié)助擴(kuò)散,進(jìn)入小腸絨毛上皮細(xì)胞是主動(dòng)運(yùn)輸,A正確；置于清水中的洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞，會(huì)出現(xiàn)滲透吸水，但受到細(xì)胞壁的限制，細(xì)胞吸水一段時(shí)間后將不再吸水，B正確；小分子物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞的方式也可能是胞吐和胞吞,如神經(jīng)遞質(zhì),C錯(cuò)誤；無機(jī)鹽離子進(jìn)入細(xì)胞的方式也可能是協(xié)助擴(kuò)散,如神經(jīng)纖維興奮時(shí),鈉離子通過通道蛋白進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)屬于協(xié)助擴(kuò)散,不需要消耗能量，D正確。綜上，本題答案為C。4、D【答案解析】

微生物的研究通常包含微生物的獲得、分離純化、培養(yǎng)以及保存等。單菌落分離法包含劃線分離法和涂布分離法，常用于分離獲得單菌落。稀釋平板計(jì)數(shù)是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的單個(gè)菌落，即是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成這一培養(yǎng)特征設(shè)計(jì)的計(jì)數(shù)方法，即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。計(jì)數(shù)時(shí)，首先將待測(cè)樣品制成均勻的系列稀釋液，盡量使樣品中的微生物細(xì)胞分散開，使成單個(gè)細(xì)胞存在（否則一個(gè)菌落就不只是代表一個(gè)細(xì)胞），再取一定稀釋度、一定量的稀釋液接種到平板中，使其均勻分布于平板中的培養(yǎng)基內(nèi)。經(jīng)培養(yǎng)后，由單個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)繁殖形成菌落，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目，即可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)。此法所計(jì)算的菌數(shù)是培養(yǎng)基上長(zhǎng)出來的菌落數(shù)，故又稱活菌計(jì)數(shù)。【題目詳解】在細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行不同程度的稀釋，計(jì)算培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，太多菌落可能堆集成一個(gè)，太少不利于統(tǒng)計(jì)，因此選擇合理稀釋度樣品的培養(yǎng)基上的菌落數(shù)進(jìn)行計(jì)數(shù)。故選D。5、B【答案解析】

A、脂肪鑒定：切取花生子葉薄片→染色→去浮色→制片→觀察，A正確；

B、有絲分裂觀察：解離根尖→漂洗→染色→制片→觀察，B錯(cuò)誤；

C、質(zhì)壁分離觀察：撕取紫色洋蔥鱗片葉表皮→制片→觀察→滴加蔗糖溶液觀察，C正確；

D、葉綠體觀察：取黑藻小葉→制片→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察，D正確。6、C【答案解析】

AC、一定量的某種動(dòng)物的提取液（A）注射到實(shí)驗(yàn)小鼠體內(nèi)，注射后若干天，未見小鼠出現(xiàn)明顯的異常表現(xiàn)。分組后一組再注射少量的A，小鼠表現(xiàn)為呼吸困難等癥狀，另一組注射生理鹽水，未見小鼠有異常表現(xiàn)，說明提取液中含有過敏原，引起小鼠發(fā)生過敏反應(yīng)，而不是胰島素作用的結(jié)果，A錯(cuò)誤、C正確；B、呼吸中樞位于腦干中，而不是神經(jīng)遞質(zhì)的作用，B錯(cuò)誤；D、呼吸抑制劑是作用于細(xì)胞呼吸，而不是作用于小鼠呼吸系統(tǒng)，D錯(cuò)誤。故選C?！敬鸢更c(diǎn)睛】對(duì)于過敏反應(yīng)的考查，要求考生掌握過敏反應(yīng)是再次接觸相同過敏原時(shí)。機(jī)體才會(huì)發(fā)生過敏反應(yīng)是解題的關(guān)鍵。二、綜合題：本大題共4小題7、熱穩(wěn)定DNA聚合DNA分子含有內(nèi)含子非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補(bǔ)的堿基序列X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少自連農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射法抗原-抗體雜交【答案解析】

1、有關(guān)PCR技術(shù)的相關(guān)知識(shí)：（1）概念：PCR全稱為聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一項(xiàng)在生物體外復(fù)制特定DNA的核酸合成技術(shù)。（2）原理：DNA復(fù)制。（3）前提條件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一對(duì)引物。（4）過程：①高溫變性：DNA解旋過程；②低溫復(fù)性：引物結(jié)合到互補(bǔ)鏈DNA上；③中溫延伸：合成子鏈。PCR擴(kuò)增中雙鏈DNA解開不需要解旋酶，高溫條件下氫鍵可自動(dòng)解開。2、基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）在PCR過程中，兩個(gè)引物是熱穩(wěn)定DNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)；用cDNA單鏈與該抗性水稻植株的單鏈DNA進(jìn)行分子雜交，由于DNA分子含有內(nèi)含子、非編碼區(qū)等序列，mRNA分子中沒有相應(yīng)互補(bǔ)的堿基序列，因此逆轉(zhuǎn)錄形成的cDNA中缺少該序列，所以出現(xiàn)游離的單鏈區(qū)。（2）用PCR技術(shù)擴(kuò)增X基因時(shí)，設(shè)計(jì)兩種引物的堿基序列的主要依據(jù)是X基因兩端的部分脫氧核苷酸序列，為了便于擴(kuò)增后的X基因與質(zhì)粒連接，常在兩條引物上設(shè)計(jì)加入不同的限制酶酶切位點(diǎn)，主要目的是使X基因能定向插入表達(dá)載體，減少酶切產(chǎn)物自身環(huán)化。（3）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，農(nóng)桿菌能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物，將質(zhì)粒上的T-DNA轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞。將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞常用顯微注射法，這也是將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法。（4）若要檢測(cè)抗稻瘟病基因是否翻譯出相應(yīng)蛋白質(zhì)，分子水平上可采用抗原-抗體雜交法進(jìn)行檢測(cè)?！敬鸢更c(diǎn)睛】本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)問題，識(shí)記PCR技術(shù)的原理和過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題。8、蛋白質(zhì)工程農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法植物組織培養(yǎng)DNA雙鏈復(fù)制211-2轉(zhuǎn)化所轉(zhuǎn)的基因未成功導(dǎo)入或?qū)氲幕蛭茨軠?zhǔn)確表達(dá)B【答案解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原——抗體雜交技術(shù)；個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?！绢}目詳解】（1）根據(jù)題干可知：利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因可知，PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程；將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；將轉(zhuǎn)基因細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。

（2）PCR過程所依據(jù)的原理是DNA雙鏈復(fù)制；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增，若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次，則需要在緩沖液中至少加入211-2個(gè)引物。（3）目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi)，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為轉(zhuǎn)化；培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是所轉(zhuǎn)的基因未成功導(dǎo)入或?qū)氲幕蛭茨軠?zhǔn)確表達(dá)。（4）A、選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)，A正確；

B、采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，檢測(cè)目的基因是否表達(dá)應(yīng)該采用抗原——抗體雜交技術(shù)，B錯(cuò)誤；

C、人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá)，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用，C正確；

D、將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植（克?。梢垣@得多個(gè)具有外源基因的后代，D正確。

故選B?！敬鸢更c(diǎn)睛】易錯(cuò)點(diǎn)：基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。?）基因表達(dá)載體的構(gòu)建（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定。9、目的基因限制酶消毒脫分化生長(zhǎng)素細(xì)胞分裂素BD表達(dá)再分化選取長(zhǎng)勢(shì)相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻，用等量相同濃度的草甘膦農(nóng)藥噴灑，相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，觀測(cè)水稻的生長(zhǎng)情況【答案解析】

1.基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取，②基因表達(dá)載體的構(gòu)建，③將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞，④目的基因的檢測(cè)與鑒定。2.分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術(shù)?！绢}目詳解】（1）根據(jù)題干信息和圖形分析可知，草甘膦抗性基因?yàn)槟康幕颍瑢⑵渑cTi質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒（基因表達(dá)載體）時(shí)需要用同一種限制酶進(jìn)行切割。（2）取某品種水稻的幼胚，進(jìn)行植物組織培養(yǎng)時(shí)，要注意無菌操作，先將外植體進(jìn)行消毒，然后接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng)，幼胚發(fā)生脫分化形成愈傷組織；圖B和圖C形成的結(jié)果不同，是因?yàn)榕囵B(yǎng)基中細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素的用量不同導(dǎo)致的。（3）根據(jù)題意分析，已知草甘膦抗性基因的部分序列，由于PCR技術(shù)中，子鏈合成的方向是從5'到3'，因此應(yīng)選擇引物BD進(jìn)行PCR技術(shù)。（4）據(jù)圖分析可知，目的基因插入的位置在GUS基因旁邊，而GUS基因表達(dá)產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍(lán)色，因此可以利用GUS基因表達(dá)產(chǎn)物的鑒定進(jìn)行圖中的篩選2，以確定目的基因是否表達(dá)；兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過再分化形成胚狀體，進(jìn)而獲得完整的轉(zhuǎn)基因水稻植株。（5）根據(jù)題意分析，現(xiàn)要從個(gè)體水平進(jìn)行抗性測(cè)試，篩選出對(duì)草甘膦具有抗性的轉(zhuǎn)基因水稻，則應(yīng)該對(duì)其噴灑草甘膦農(nóng)藥，具體操作如下：首先選取長(zhǎng)勢(shì)相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,然后用等量的相同濃度的草甘膦農(nóng)藥噴灑，并在相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，通過觀測(cè)水稻的生長(zhǎng)情況進(jìn)行篩選。【答案點(diǎn)睛】本題主要考查基因工程及其應(yīng)用、植物組織培養(yǎng)等相關(guān)知識(shí)，識(shí)記和理解目的基因的獲取、表達(dá)載體的構(gòu)建以及目的基因的檢測(cè)等知識(shí)是解答本題的關(guān)鍵。10、增大葉綠素a增多光補(bǔ)償點(diǎn)（或光飽和點(diǎn)）強(qiáng)光無水乙醇（或丙酮或有機(jī)溶劑）數(shù)目（或顏色或分布）增大【答案解析】

根據(jù)表格分析，狹葉的光補(bǔ)償點(diǎn)和光飽和點(diǎn)最高，繁殖期闊葉的葉綠素含量和最大凈光合速率最高；新生出的闊葉顏色呈淺黃色，而進(jìn)入繁殖期時(shí)闊葉呈深褐色，葉綠素a增多，吸收光能增多，光合作用強(qiáng)度增大；曲線圖表示在適宜溫度條件下鼠尾藻凈光合速率與環(huán)境因素之間的關(guān)系，A點(diǎn)的限制因素是光照