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微柱凝膠法血型鑒定操作規(guī)程微柱凝膠法血型鑒定操作規(guī)程微柱凝膠法血型鑒定操作規(guī)程xxx公司微柱凝膠法血型鑒定操作規(guī)程文件編號:文件日期:修訂次數(shù):第1.0次更改批準(zhǔn)審核制定方案設(shè)計,管理制度微柱凝膠法1標(biāo)本:EDTA-K2抗凝血2原理:人紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體發(fā)生特異性免疫反應(yīng)(其本質(zhì)為血凝反應(yīng));檢測系統(tǒng)是在微柱中(載體)裝有的介質(zhì)凝膠;凝膠間隙具有分子篩作用。凝集的紅細(xì)胞(結(jié)合的)被留在微柱上面成帶狀或凝集顆粒散布凝膠中間。未凝集的紅細(xì)胞(即未結(jié)合、游離的)通過離心后沉入微柱的底部;微柱凝膠中所含的特異性單克隆抗A、抗B試劑檢測紅細(xì)胞上相應(yīng)的血型抗原,從而鑒定紅細(xì)胞的血型。
3操作:在A1孔懸空加入50ul標(biāo)準(zhǔn)A1紅細(xì)胞,在B孔懸空加入50ul標(biāo)準(zhǔn)B紅細(xì)胞,再在兩孔中各加入50ul樣品血漿。在A、B、D、C、E、Ctrl六個孔內(nèi)分別懸空加入
5%病人紅細(xì)胞懸液10ul將卡放到戴安娜專用離心機(jī)中離心9分鐘離心結(jié)束后在白色背景前觀察結(jié)果4結(jié)果判斷:A孔陽性B孔陰性為A型;A孔陰性B孔陽性為B型;A孔陰性B孔陰性為O型;A孔陽性B孔陽性為AB型。凝集強(qiáng)度描述陰性100%(全部)的紅細(xì)胞沉在微管的底部+/-100%(全部)的紅細(xì)胞沉在微管的下端1/3之內(nèi)1+80%(大部分)的紅細(xì)胞沉在微管的下端2/3之內(nèi)2+80%(大部分)的紅細(xì)胞沉在微管的上端2/3之內(nèi)3+80%(大部分)的紅細(xì)胞沉在微管的上端1/3之內(nèi)4+凝集的細(xì)胞處于微管的頂部DP(雙群)紅細(xì)胞同時位于微管上部和微管底部H(溶血)微管中液體出現(xiàn)透明紅色5.注意事項嚴(yán)格按操作規(guī)程操作,認(rèn)真核對標(biāo)本并作好標(biāo)記。
應(yīng)先加紅細(xì)胞懸液,然后再加血漿。
為了防止冷凝集現(xiàn)象的干擾,一般應(yīng)在室溫下進(jìn)行試驗。嚴(yán)格控制離心速度和時間,防止假陽性或假陰性結(jié)果。未用的微柱凝膠免疫檢測卡應(yīng)入室溫保存,用完后放4℃冰箱保存1周。
判斷結(jié)果后應(yīng)仔細(xì)核對,記錄,避免筆誤。6.方法評價卡式
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