結(jié)核感染T細(xì)胞檢測 呼吸科課件

結(jié)核感染T細(xì)胞檢測

臨床應(yīng)用北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司市場部李靈利結(jié)核感染T細(xì)胞檢測

臨床應(yīng)用1contents目錄1.結(jié)核病的診斷現(xiàn)狀2.TB-IGRA產(chǎn)品介紹3.TB-IGRA的臨床應(yīng)用4.TB-IGRA檢測方法及結(jié)果解釋contents目錄1.結(jié)核病的診斷現(xiàn)狀2.TB-IGR23結(jié)核病現(xiàn)狀結(jié)核病(tuberculosis)是由結(jié)核分枝桿菌(tuberclebacillus)引起的一種慢性肉芽腫性炎。以肺結(jié)核最常見，死亡人數(shù)僅次于艾滋病。也可見于全身各器官。肺外結(jié)核占整個發(fā)病率的10%-20%，死亡率占結(jié)核病全部死亡率的14.1%-17.6%。全世界約三分之一的人群感染，《2014年全球結(jié)核病報告》顯示：2013年有900萬新發(fā)病例，150萬人死亡。中國是結(jié)核病高發(fā)區(qū)，發(fā)病數(shù)居全球第二，現(xiàn)有600萬活動性肺結(jié)核，且患者人數(shù)逐年增加，始終位居全國甲乙類傳染病的前列。電鏡下的結(jié)核桿菌3結(jié)核病現(xiàn)狀結(jié)核病(tuberculosis)是由結(jié)核分枝桿3結(jié)核發(fā)病機理LTBI結(jié)核分枝桿菌（MTB）暴露感染自愈90%不發(fā)展為結(jié)核病Latency2-5%疾病進展1%活動性結(jié)核病細(xì)菌全部被清除一直存在活菌需預(yù)防性服藥不需要預(yù)防性服藥Latency潛伏9%復(fù)燃注：感染后發(fā)病與否和機體易感性有關(guān)！5-10%HIV>10%治愈活動性結(jié)核：

發(fā)病狀態(tài)潛伏性結(jié)核感染（LTBI）：是宿主感染結(jié)核桿菌后尚未發(fā)病的一種特殊狀態(tài)未根治結(jié)核發(fā)病機理LTBI結(jié)核分枝桿菌（MTB）暴露感染自愈90%4COPD合并肺結(jié)核的特點結(jié)核癥狀不典型老年男性為多，男性為女性7倍之多痰結(jié)核菌檢查涂片或培養(yǎng)陽性率70%PPD呈呈陰性或弱陽，結(jié)核抗體亦呈陰性或陽性X線胸片不典型，類似于一般炎癥而常被誤診對COPD合并肺結(jié)核診斷的延誤，導(dǎo)致治療不及時，易造成：肺部病灶痰菌量增加，傳染性擴大病人體質(zhì)進一步消耗，抗結(jié)核藥物耐受能力差，不良反應(yīng)加大免疫力進一步下降，痰菌陰轉(zhuǎn)率降低，耐藥菌增加病情迅速惡化，甚至危及生命，死亡率增加尹洪云，許家璉.慢性阻塞性肺病與肺結(jié)核的關(guān)系.中國臨床醫(yī)生.2004年第32卷第8期

COPD合并肺結(jié)核的特點對COPD合并肺結(jié)核診斷的延誤，導(dǎo)致5矽肺患者易發(fā)生并發(fā)癥,并發(fā)癥會促使矽肺病情的進展、惡化、影響預(yù)后,也是造成矽肺患者死亡的重要原因。1990年至2010年共收治矽肺450例,發(fā)生并發(fā)癥310例,已死亡140例,全部死于并發(fā)癥。潘宏偉.矽肺患者的死亡原因分析.中國實用醫(yī)藥.2010年12月第5卷第36期大量流行病學(xué)資料發(fā)現(xiàn)，矽肺患者合并結(jié)核發(fā)生率為10%~30%。矽肺患者的肺結(jié)核患病率為全國平均肺結(jié)核患病率的3.16~28倍。矽肺患者易發(fā)生并發(fā)癥,并發(fā)癥會促使矽肺病情的進展、惡化、影6潛伏性結(jié)核感染的診斷皮膚結(jié)核菌素試驗（TST）≥10mmγ干擾素釋放試驗（IGRAs）潛伏性結(jié)核感染

免疫學(xué)檢測陽性，顯示結(jié)核感染體內(nèi)有活的結(jié)核分枝桿菌，但非活動型無疾病和癥狀不傳播給他人給予藥物，防止發(fā)展為活動性結(jié)核結(jié)核診斷方法活動性結(jié)核結(jié)核診斷影像學(xué)方法細(xì)菌學(xué)方法病理學(xué)方法免疫學(xué)方法有臨床癥狀或影像學(xué)改變具傳染性主要的傳播源需及時治療潛伏性結(jié)核感染的診斷潛伏性結(jié)核感染結(jié)核診斷方法活動性結(jié)核結(jié)核7APCTcellTB-IGRA方法介紹細(xì)胞因子活化/細(xì)胞因子細(xì)胞因子ELISAELISPOT流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞因子活化標(biāo)志物IGRAsIFN-g

releaseassayTNFaIFNgCK體外刺激：RD1抗原原理:機體內(nèi)被結(jié)核菌抗原致敏的效應(yīng)T細(xì)胞，在體外受到相同抗原的刺激（在APC輔助下）后，會分泌大量IFN-

γ(細(xì)胞因子)。通過IFN-

γ的檢測，判斷結(jié)核感染情況。APCTcellTB-IGRA方法介紹細(xì)胞因子活化/細(xì)胞因8TB-IGRA產(chǎn)品特性高靈敏度，檢出率90%以上高特異性RD1區(qū)編碼的ESAT-6和CFP-10兩個特異性抗原全血樣本，體外檢測采用外周血樣本，取樣方便，可檢測所有結(jié)核感染；體外抗原刺激保證安全性定量考察ELISA檢測平臺定量考察效應(yīng)T細(xì)胞受刺激后γ-干擾素釋放總量TNFaIFNgCKTB-IGRA產(chǎn)品特性高靈敏度，檢出率90%以上TNFaI9國內(nèi)外相關(guān)研究TB-IGRA快速簡便，是一種值得推廣的檢測方法：張華，黃圣文，羅振元.結(jié)核分枝桿菌r-干擾素體外釋放定量試驗診斷結(jié)核感染的臨床應(yīng)用.中華醫(yī)學(xué)院感染學(xué)雜志2009年第19卷第14期國內(nèi)外相關(guān)研究TB-IGRA快速簡便，是一種值得推廣的檢測方10國內(nèi)外相關(guān)研究國內(nèi)文章sensitivity結(jié)核分枝桿菌γ-干擾素體外釋放定量試驗診斷結(jié)核感染的臨床應(yīng)用90.24%（74/82）TB-IGRA與TST檢測菌培陽性肺結(jié)核患者比較80.3%（118/147)γ-干擾素釋放試驗診斷結(jié)核分枝桿菌感染的臨床意義88.64%（39/45）結(jié)核分枝桿菌相關(guān)γ-干擾素體外釋放試驗在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價值90.7%（243/268）兩種結(jié)核分枝桿菌相關(guān)γ-干擾素定量檢測試劑盒檢測結(jié)核分枝桿菌感染結(jié)果比較研究90.9%（290/319）體外釋放酶聯(lián)免疫法檢測結(jié)核桿菌γ-干擾素的實驗研究89.11%（90/101）干擾素釋放酶聯(lián)免疫法（TB-IGRA）用于檢測結(jié)核分枝桿菌的優(yōu)越性96.12%(99/103)體外γ-干擾素檢測結(jié)核分枝桿菌不同方法的應(yīng)用價值比較90.1%(308/342干擾素體外釋放酶聯(lián)免疫法在結(jié)核潛伏感染診斷中的價值88.6%(39/44)國外同類試劑優(yōu)勢AThree-WayComparisonofTuberculinSkinTesting,QuantiFERON-TBGoldandT-SPOT.TBinChildrenLatentTB檢出高PositiveTuberculinSkinTestorInterferon-GammaReleaseAssayinPatientswithRadiographicLesionsSuggestingOldHealedTuberculosisLatentTB檢出高Estimatingdiagnosticaccuracyoftestsforlatenttuberculosisinfectionwithoutagoldstandardamonghealthcareworkers特異性93.6%ClinicalUtilityofInterferonGammaAssayintheDiagnosisofTuberculosis靈敏度>90%,特異性>97%國內(nèi)外相關(guān)研究國內(nèi)文章sensitivity結(jié)核分枝桿菌γ-11廖明等對比了血IGRA、TST、抗酸桿菌、結(jié)核抗體在SCTB中的檢測性能：敏感度分別為94.4%、52.8%、38.9%、41.7%；陰性預(yù)測值分別為91.7%、52.8%、48.8%、55.3%廖明，胡克.臨床肺科雜志.2014年9月第19卷第9期IGRA在矽肺合并結(jié)核病中的應(yīng)用廖明等對比了血IGRA、TST、抗酸桿菌、結(jié)核抗體在SCTB12臨床應(yīng)用案例肺結(jié)核輔助診斷：某院呼吸科病人，男臨床癥狀：發(fā)熱1周，咳嗽檢測結(jié)果：TB-IgG(-)，TB-IGRA（+）T-N的值是21.5pg/ml結(jié)果分析：TB-IgG靈敏度低，易漏檢。臨床診斷：肺結(jié)核備注：2011年，WHO建議不再使用結(jié)核抗體檢測結(jié)核感染臨床應(yīng)用案例肺結(jié)核輔助診斷：13肺外結(jié)核輔助診斷：某院感染科，女，75歲

臨床癥狀：發(fā)熱數(shù)日，胸痛，干咳檢測結(jié)果：X射線胸腔積液影像，積液涂片（-）、積液培養(yǎng)（-）、TB-IGRA

T-N

350pg/ml，積液單核細(xì)胞增多，血沉快結(jié)果分析：對于肺外結(jié)核的診斷，涂片與培養(yǎng)的陽性率極低，TB-IGRA（+），結(jié)合其他非特異輔助指標(biāo)可明確診斷肺外結(jié)核。臨床診斷：結(jié)核性胸膜炎臨床應(yīng)用案例肺外結(jié)核輔助診斷：臨床應(yīng)用案例14IGRA方法輔助診斷結(jié)核性胸膜炎：天津市海河醫(yī)院，124例受試者，包括健康對照者30名、初診結(jié)核性胸膜炎患者37例、惡性胸腔積液患者32例、非結(jié)核性胸膜炎患者25例。結(jié)論：用IGRA方法對結(jié)核性胸膜炎診斷的敏感性、特異性和診斷準(zhǔn)確率分別為91.9％、90.6％、91.3％，優(yōu)于ADA和TB-Ab。杜巖青檢驗醫(yī)學(xué)

2012年12月第27卷第12期IGRA方法輔助診斷結(jié)核性胸膜炎：杜巖青檢驗醫(yī)學(xué)2015臨床應(yīng)用案例肺炎與肺結(jié)核的鑒別診斷：某醫(yī)院呼吸內(nèi)科，男，59歲臨床癥狀：肺部有積水，高燒發(fā)熱，初步認(rèn)定肺炎，抗生素治療1周不見效果，高度懷疑結(jié)核。檢測結(jié)果：痰涂片（-），結(jié)核抗體（-），TB-IGRA（-）結(jié)果分析：傳統(tǒng)結(jié)核檢測檢出率在20%-40%，靈敏度低。IGRA檢出率在90％以上，陰性排除意義高于涂片和抗體。患者繼續(xù)用藥3周，病情好轉(zhuǎn)。臨床診斷：肺炎臨床應(yīng)用案例肺炎與肺結(jié)核的鑒別診斷：1617MTB與其他桿菌感染的鑒別診斷：某院呼吸內(nèi)科病人，男臨床癥狀：發(fā)熱、咳嗽、咳痰、呼吸困難，乏力，多汗，關(guān)節(jié)疼痛檢測結(jié)果：痰涂片（-），菌培（-），肺部X射線可見肺結(jié)節(jié)，胸腔積液診斷過程：該院診斷為結(jié)核但治療無好轉(zhuǎn)，患者轉(zhuǎn)院檢測IGRAs（-），試管凝集實驗++，布病抗體++，確診布氏桿菌感染，與該院打官司勝訴。結(jié)果分析：由于痰涂片和菌培檢出率低，陰性也未能引起重視，只憑X片和癥狀診斷為結(jié)核并治療。治療無效后，病人轉(zhuǎn)院，檢測IGRAs陰性，考慮排除結(jié)核，且病人為牧民，確診布氏桿菌病。官司敗訴后，該院才開始重視IGRAs檢測。最終確診：布氏桿菌病臨床應(yīng)用案例17MTB與其他桿菌感染的鑒別診斷：臨床應(yīng)用案例17MTB與NTM的鑒別診斷：某院感染科病人，男臨床癥狀：發(fā)熱1周，咳嗽，少量痰檢測結(jié)果：兩次痰涂片（+），兩次TB-IGRA（-），肺部X射線無異常，后經(jīng)菌培鑒定為菌培（-）結(jié)果分析：痰涂片不能區(qū)分非結(jié)核分枝桿菌，造成假陽性，而TB-IGRA與菌培結(jié)果相符，對結(jié)核分枝桿菌有很好的特異性。臨床診斷：鳥型分枝桿菌感染臨床應(yīng)用案例MTB與NTM的鑒別診斷：臨床應(yīng)用案例1819NTM（非結(jié)核分枝桿菌）比例增高2000年全國流調(diào)分離的抗酸桿菌菌株中，NTM菌株占11.1%

，其中90%為非結(jié)核分枝桿菌肺病。NTM肺病的臨床表現(xiàn)與結(jié)核病相似，

既可有全身中毒癥狀，亦有局部損害表現(xiàn)。但癥狀和體征缺乏特異性，20%-50%的病人無明顯癥狀，除非做菌型鑒定，憑臨床表現(xiàn)難與肺結(jié)核病相鑒別。PPD試驗：弱陽性多見，但不能鑒別MTB和NTM感染。

細(xì)菌學(xué)檢查：常規(guī)痰涂片無法鑒別MTB和NTM。培養(yǎng)特性：固體培養(yǎng)基上，NTM菌落常光滑，部分菌落有色素產(chǎn)生，生長迅速，且在含PNB(對硝基苯甲酸)和含TCH(噻吩二羧酸肼)選擇性培養(yǎng)基上均可生長，而結(jié)核分枝桿菌只在TCH選擇性培養(yǎng)基上生長。19NTM（非結(jié)核分枝桿菌）比例增高2000年全國流調(diào)分離

使用抗TNF藥物前排查結(jié)核的意義06.16.201120發(fā)病率/100.000患者/年DixonWGetal.AnnRheumDis2010;69:522–528.Tubachetal.Arthritis&Rheum2009;60:1884-1894發(fā)病率/100.000患者/年使用抗TNF藥物前排查結(jié)核的意義06.16.201潛伏性感染監(jiān)控某中學(xué)高三年級小規(guī)模結(jié)核爆發(fā)初始病例1例（7班）6月初第一批疫情5例（7班）8-9月第二批疫情10例（8例7班）9月對師生采血進行IGRA檢測IGRA陽性者進行預(yù)防性服藥疫情控制自行住院全年級師生胸透，胸透陰影預(yù)防性服藥全年級師生PPD試驗疫情發(fā)展階段結(jié)核病例及分布疫情時間疫情初處理√一起小規(guī)模結(jié)核暴發(fā)流行的調(diào)查與控制×潛伏性感染監(jiān)控某中學(xué)高三年級小規(guī)模結(jié)核爆發(fā)初始病例1例（7班21潛伏性感染流調(diào)結(jié)果2010年流調(diào)發(fā)現(xiàn)的1301例結(jié)核感染者中，有癥狀者740例(56.9%)，無癥狀者561例（43.1%）。有癥狀結(jié)核病患者中，60歲及以上年齡組比例高，為60.2%有癥狀就診的346例肺結(jié)核患者，只有124例患者（35.8%）被診斷為肺結(jié)核，其次為氣管炎（18.8%）和感冒（16.5%）等Age（years）WithoutsymptomWithsymptomTotalNo.%No.%No.%15～5930846.235853.8666100.0≥6025339.838260.2635100.0Total56143.174056.91301100.0潛伏性感染流調(diào)結(jié)果2010年流調(diào)發(fā)現(xiàn)的1301例結(jié)核感染者中22潛伏性感染、抗結(jié)核治療監(jiān)控定量檢測γ干擾素釋放強度，可用于持續(xù)監(jiān)控：潛伏性感染國內(nèi)潛伏性感染人群占結(jié)核感染人群40%以上；無干預(yù)情況下2年內(nèi)發(fā)展成活動性結(jié)核的比例為5%-10%；使用IGRAs可以有效發(fā)現(xiàn)潛伏性感染，通過定量檢測IGRAs強度，可以監(jiān)控病人病情發(fā)展?fàn)顟B(tài)，防治潛伏性感染發(fā)展成為活動性結(jié)核?？菇Y(jié)核治療耐藥結(jié)核比例逐漸增加，主要由于抗結(jié)核治療不規(guī)范；TB-IGRA具有寬泛的γ干擾素定量量程，可跟蹤抗結(jié)核治療效果，為臨床治療方案調(diào)整做參考。潛伏性感染、抗結(jié)核治療監(jiān)控定量檢測γ干擾素釋放強度，可用于持23Kobashi等利用IGRA對50例結(jié)核患者的治療進行追蹤檢測：治療開始后，結(jié)核患者中IGRA的敏感性和反應(yīng)強度均有明顯的下降趨勢抗結(jié)核治療效果輔助評估Kobashi等利用IGRA對50例結(jié)核患者的治療進行追蹤檢24綜上，TB-IGRA：高特異性，高靈敏性，體外，全血，定量檢測應(yīng)用方向：肺結(jié)核輔助診斷肺外結(jié)核輔助診斷結(jié)核感染排查潛伏性感染監(jiān)控，抗結(jié)核治療追蹤TB-IGRA的臨床應(yīng)用綜上，TB-IGRA：TB-IGRA的臨床應(yīng)用25TB-IGRA在呼吸科應(yīng)用匯總肺結(jié)核的輔助診斷，尤其是細(xì)菌學(xué)檢測陰性的肺結(jié)核的輔助診斷：TB-IGRA從細(xì)胞水平上檢測結(jié)核感染，檢出率高，早期感染即可檢出，實現(xiàn)早診斷早治療。肺外結(jié)核的輔助診斷：TB-IGRA取靜脈血進行檢測，克服肺外結(jié)核患者痰樣找不到結(jié)核菌，病灶部位取樣難的問題。呼吸系統(tǒng)疾病與結(jié)核的鑒別診斷：發(fā)熱、咳嗽、咳痰>2周；咯血；胸痛等癥狀疑似結(jié)核，胸片/CT不能明確診斷者；抗炎治療治療效果不佳患者的結(jié)核排查，陰性結(jié)果在很大程度上可以排除結(jié)核。TB-IGRA在呼吸科應(yīng)用匯總肺結(jié)核的輔助診斷，尤其是細(xì)菌學(xué)262周以上不明原因發(fā)熱病人的結(jié)核感染排查：有研究發(fā)現(xiàn)其中20%是結(jié)核引起的，大部分是肺外結(jié)核。高危人群的結(jié)核感染篩查：如使用生物制劑/免疫抑制劑、大劑量激素患者，HIV患者，糖尿病患者，血液病和癌癥放化療之前患者進行結(jié)核篩查，以防陳舊性結(jié)核、潛伏性結(jié)核爆發(fā)以及近期結(jié)核感染?？菇Y(jié)核治療效果跟蹤以及潛伏性結(jié)核定期監(jiān)控：TB-IGRA結(jié)果是一個定量值，活動性結(jié)核患者隨治療進行陽性強度降低甚至轉(zhuǎn)陰；潛伏感染患者若發(fā)生陽性強度明顯升高，有發(fā)展成活動性結(jié)核風(fēng)險。流調(diào)顯示有85%～90%新診斷的活動性肺結(jié)核由潛伏性結(jié)核演變而來。2周以上不明原因發(fā)熱病人的結(jié)核感染排查：有研究發(fā)現(xiàn)其中20%27已有25個國家發(fā)布了IGRAs應(yīng)用指南：

美國、加拿大、英國、巴西、法國、西班牙、意大利、德國、澳大利亞、葡萄牙、愛爾蘭、瑞士、丹麥、挪威、芬蘭、捷克、斯洛伐克、波蘭、保加利亞、克羅地亞、沙特、奧地利、南韓、日本、中國

潛伏性感染和活動性結(jié)核的輔助診斷（美國CDC，英國NICE，中國）

疑似結(jié)核的輔助診斷，陰性結(jié)果排除感染（中國）在所有人群中可以完全代替PPD試驗（美國CDC，日本厚生省）

接受抗TNF-a治療前必須用IGRA進行結(jié)核桿菌感染的篩查，PPD篩查不再使用（瑞士衛(wèi)生署和肺科協(xié)會）

兩個國際組織WHO、ECDC也發(fā)布了應(yīng)用指南。萬泰TB-IGRA試劑是“中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)—結(jié)核分枝桿菌γ-干擾素體外檢測方法”中唯一提到的結(jié)核檢測試劑。已有25個國家發(fā)布了IGRAs應(yīng)用指南：

美國28結(jié)核感染T細(xì)胞檢測呼吸科課件292013年6月2013年6月30萬泰TB-IGRA北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司國家傳染病診斷試劑與疫苗工程技術(shù)研究中心廈門大學(xué)研制歷經(jīng)6年，2012年4月獲得SFDA認(rèn)證國食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2012第3400557號萬泰TB-IGRA北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司國家傳染病診斷31TB-IGRA檢測方法TB-IGRA檢測方法32陰性對照管N陽性對照管P檢測管T培養(yǎng)液無刺激原培養(yǎng)液刺激抗原培養(yǎng)液PHATB特異性刺激抗原（RD1區(qū)：ESAT-6、CFP-10）無刺激效應(yīng)非特異性刺激抗原（PHA）評估γ-IFN升高水平評估γ-IFN本底水平評估T淋巴細(xì)胞活性ELISA定量分析陰性對照管N陽性對照管P檢測管T培養(yǎng)液培養(yǎng)液培養(yǎng)液TB特異性33TB-IGRA結(jié)果判定T：測試培養(yǎng)管（T）含量值N：本底對照培養(yǎng)管（N）含量值P：陽性對照培養(yǎng)管（P）含量值

NP-NT-N結(jié)果判定結(jié)果解釋≤400任何值≥14且≥N/4陽性感染結(jié)核分枝桿菌（結(jié)核活動期感染、潛伏感染）≥20<14或<N/4陰性未感染結(jié)核分枝桿菌<20<14或<N/4不確定不能確定是否感染結(jié)核分枝桿菌>400任何值任何值不確定TB-IGRA結(jié)果判定T：測試培養(yǎng)管（T）含量值NP-NT-34TB-IGRA結(jié)果判定TB-IGRA結(jié)果判定35TB-IGRA檢驗報告單TB-IGRA檢驗報告單36TB-IGRA注意事項采血管推薦使用BD或GreinerBio-One肝素鋰采血管，內(nèi)毒素最少，對結(jié)果影響最小采血到分裝不超過4小時，避免混血激烈/溶血等病人情況

免疫系統(tǒng)異?；颊邫z出效果受限不能嚴(yán)格區(qū)分活動或潛伏無癥狀陽性的處理

依據(jù)下一步治療和病人意愿做預(yù)防性治療不確定結(jié)果的原因

免疫系統(tǒng)異常患者容易因免疫力低下或γ干擾素本底過高造成無法判斷TB-IGRA注意事項采血管推薦使用BD或GreinerB37TB-IGRA的臨床參考涂片菌培TB-IGRA肺結(jié)核影像學(xué)指征疑似肺結(jié)核臨床癥狀臨床指導(dǎo)意義+/-

+++

+/-活動性肺結(jié)核，有強傳染性，建議治療+/-

++

-

+/-活動性肺結(jié)核，建議治療

--

+

++

活動性肺結(jié)核，建議治療--

+

+-既往肺結(jié)核恢復(fù)期，建議跟蹤觀察

--

+

-

-潛伏性結(jié)核；如有肺外結(jié)核癥狀則為肺外結(jié)核；罕見分枝桿菌感染+

+

-

+/-+/-

CD4細(xì)胞水平低下的活動性結(jié)核患者，建議治療+

-

-

+/-

+/-

非結(jié)核分枝桿菌感染者-

-

-

+

+肺部其他疾病，排除肺結(jié)核

TB-IGRA的臨床參考涂片菌培TB-IGRA肺結(jié)核影像學(xué)指38萬泰TB-IGRA檢測試劑盒的優(yōu)勢

高靈敏度：肺內(nèi)、肺外結(jié)核輔助診斷，尤其可用于涂/菌陰肺結(jié)核的輔助診斷；高特異性：排除卡介苗及非結(jié)核分枝桿菌的干擾，降低假陽性；體外全血檢測：有效檢出肺外結(jié)核，并發(fā)現(xiàn)早期感染者；定量分析：可進行療效的輔助評估；采用酶免平臺，具有高通量檢測能力，簡便快捷，無需對技術(shù)人員進行專業(yè)培訓(xùn)。萬泰TB-IGRA檢測試劑盒的優(yōu)勢

高靈敏度：39感謝您的關(guān)注！感謝您的關(guān)注！40結(jié)核感染T細(xì)胞檢測

臨床應(yīng)用北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司市場部李靈利結(jié)核感染T細(xì)胞檢測

臨床應(yīng)用41contents目錄1.結(jié)核病的診斷現(xiàn)狀2.TB-IGRA產(chǎn)品介紹3.TB-IGRA的臨床應(yīng)用4.TB-IGRA檢測方法及結(jié)果解釋contents目錄1.結(jié)核病的診斷現(xiàn)狀2.TB-IGR4243結(jié)核病現(xiàn)狀結(jié)核病(tuberculosis)是由結(jié)核分枝桿菌(tuberclebacillus)引起的一種慢性肉芽腫性炎。以肺結(jié)核最常見，死亡人數(shù)僅次于艾滋病。也可見于全身各器官。肺外結(jié)核占整個發(fā)病率的10%-20%，死亡率占結(jié)核病全部死亡率的14.1%-17.6%。全世界約三分之一的人群感染，《2014年全球結(jié)核病報告》顯示：2013年有900萬新發(fā)病例，150萬人死亡。中國是結(jié)核病高發(fā)區(qū)，發(fā)病數(shù)居全球第二，現(xiàn)有600萬活動性肺結(jié)核，且患者人數(shù)逐年增加，始終位居全國甲乙類傳染病的前列。電鏡下的結(jié)核桿菌3結(jié)核病現(xiàn)狀結(jié)核病(tuberculosis)是由結(jié)核分枝桿43結(jié)核發(fā)病機理LTBI結(jié)核分枝桿菌（MTB）暴露感染自愈90%不發(fā)展為結(jié)核病Latency2-5%疾病進展1%活動性結(jié)核病細(xì)菌全部被清除一直存在活菌需預(yù)防性服藥不需要預(yù)防性服藥Latency潛伏9%復(fù)燃注：感染后發(fā)病與否和機體易感性有關(guān)！5-10%HIV>10%治愈活動性結(jié)核：

發(fā)病狀態(tài)潛伏性結(jié)核感染（LTBI）：是宿主感染結(jié)核桿菌后尚未發(fā)病的一種特殊狀態(tài)未根治結(jié)核發(fā)病機理LTBI結(jié)核分枝桿菌（MTB）暴露感染自愈90%44COPD合并肺結(jié)核的特點結(jié)核癥狀不典型老年男性為多，男性為女性7倍之多痰結(jié)核菌檢查涂片或培養(yǎng)陽性率70%PPD呈呈陰性或弱陽，結(jié)核抗體亦呈陰性或陽性X線胸片不典型，類似于一般炎癥而常被誤診對COPD合并肺結(jié)核診斷的延誤，導(dǎo)致治療不及時，易造成：肺部病灶痰菌量增加，傳染性擴大病人體質(zhì)進一步消耗，抗結(jié)核藥物耐受能力差，不良反應(yīng)加大免疫力進一步下降，痰菌陰轉(zhuǎn)率降低，耐藥菌增加病情迅速惡化，甚至危及生命，死亡率增加尹洪云，許家璉.慢性阻塞性肺病與肺結(jié)核的關(guān)系.中國臨床醫(yī)生.2004年第32卷第8期

COPD合并肺結(jié)核的特點對COPD合并肺結(jié)核診斷的延誤，導(dǎo)致45矽肺患者易發(fā)生并發(fā)癥,并發(fā)癥會促使矽肺病情的進展、惡化、影響預(yù)后,也是造成矽肺患者死亡的重要原因。1990年至2010年共收治矽肺450例,發(fā)生并發(fā)癥310例,已死亡140例,全部死于并發(fā)癥。潘宏偉.矽肺患者的死亡原因分析.中國實用醫(yī)藥.2010年12月第5卷第36期大量流行病學(xué)資料發(fā)現(xiàn)，矽肺患者合并結(jié)核發(fā)生率為10%~30%。矽肺患者的肺結(jié)核患病率為全國平均肺結(jié)核患病率的3.16~28倍。矽肺患者易發(fā)生并發(fā)癥,并發(fā)癥會促使矽肺病情的進展、惡化、影46潛伏性結(jié)核感染的診斷皮膚結(jié)核菌素試驗（TST）≥10mmγ干擾素釋放試驗（IGRAs）潛伏性結(jié)核感染

免疫學(xué)檢測陽性，顯示結(jié)核感染體內(nèi)有活的結(jié)核分枝桿菌，但非活動型無疾病和癥狀不傳播給他人給予藥物，防止發(fā)展為活動性結(jié)核結(jié)核診斷方法活動性結(jié)核結(jié)核診斷影像學(xué)方法細(xì)菌學(xué)方法病理學(xué)方法免疫學(xué)方法有臨床癥狀或影像學(xué)改變具傳染性主要的傳播源需及時治療潛伏性結(jié)核感染的診斷潛伏性結(jié)核感染結(jié)核診斷方法活動性結(jié)核結(jié)核47APCTcellTB-IGRA方法介紹細(xì)胞因子活化/細(xì)胞因子細(xì)胞因子ELISAELISPOT流式細(xì)胞術(shù)細(xì)胞因子活化標(biāo)志物IGRAsIFN-g

releaseassayTNFaIFNgCK體外刺激：RD1抗原原理:機體內(nèi)被結(jié)核菌抗原致敏的效應(yīng)T細(xì)胞，在體外受到相同抗原的刺激（在APC輔助下）后，會分泌大量IFN-

γ(細(xì)胞因子)。通過IFN-

γ的檢測，判斷結(jié)核感染情況。APCTcellTB-IGRA方法介紹細(xì)胞因子活化/細(xì)胞因48TB-IGRA產(chǎn)品特性高靈敏度，檢出率90%以上高特異性RD1區(qū)編碼的ESAT-6和CFP-10兩個特異性抗原全血樣本，體外檢測采用外周血樣本，取樣方便，可檢測所有結(jié)核感染；體外抗原刺激保證安全性定量考察ELISA檢測平臺定量考察效應(yīng)T細(xì)胞受刺激后γ-干擾素釋放總量TNFaIFNgCKTB-IGRA產(chǎn)品特性高靈敏度，檢出率90%以上TNFaI49國內(nèi)外相關(guān)研究TB-IGRA快速簡便，是一種值得推廣的檢測方法：張華，黃圣文，羅振元.結(jié)核分枝桿菌r-干擾素體外釋放定量試驗診斷結(jié)核感染的臨床應(yīng)用.中華醫(yī)學(xué)院感染學(xué)雜志2009年第19卷第14期國內(nèi)外相關(guān)研究TB-IGRA快速簡便，是一種值得推廣的檢測方50國內(nèi)外相關(guān)研究國內(nèi)文章sensitivity結(jié)核分枝桿菌γ-干擾素體外釋放定量試驗診斷結(jié)核感染的臨床應(yīng)用90.24%（74/82）TB-IGRA與TST檢測菌培陽性肺結(jié)核患者比較80.3%（118/147)γ-干擾素釋放試驗診斷結(jié)核分枝桿菌感染的臨床意義88.64%（39/45）結(jié)核分枝桿菌相關(guān)γ-干擾素體外釋放試驗在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用價值90.7%（243/268）兩種結(jié)核分枝桿菌相關(guān)γ-干擾素定量檢測試劑盒檢測結(jié)核分枝桿菌感染結(jié)果比較研究90.9%（290/319）體外釋放酶聯(lián)免疫法檢測結(jié)核桿菌γ-干擾素的實驗研究89.11%（90/101）干擾素釋放酶聯(lián)免疫法（TB-IGRA）用于檢測結(jié)核分枝桿菌的優(yōu)越性96.12%(99/103)體外γ-干擾素檢測結(jié)核分枝桿菌不同方法的應(yīng)用價值比較90.1%(308/342干擾素體外釋放酶聯(lián)免疫法在結(jié)核潛伏感染診斷中的價值88.6%(39/44)國外同類試劑優(yōu)勢AThree-WayComparisonofTuberculinSkinTesting,QuantiFERON-TBGoldandT-SPOT.TBinChildrenLatentTB檢出高PositiveTuberculinSkinTestorInterferon-GammaReleaseAssayinPatientswithRadiographicLesionsSuggestingOldHealedTuberculosisLatentTB檢出高Estimatingdiagnosticaccuracyoftestsforlatenttuberculosisinfectionwithoutagoldstandardamonghealthcareworkers特異性93.6%ClinicalUtilityofInterferonGammaAssayintheDiagnosisofTuberculosis靈敏度>90%,特異性>97%國內(nèi)外相關(guān)研究國內(nèi)文章sensitivity結(jié)核分枝桿菌γ-51廖明等對比了血IGRA、TST、抗酸桿菌、結(jié)核抗體在SCTB中的檢測性能：敏感度分別為94.4%、52.8%、38.9%、41.7%；陰性預(yù)測值分別為91.7%、52.8%、48.8%、55.3%廖明，胡克.臨床肺科雜志.2014年9月第19卷第9期IGRA在矽肺合并結(jié)核病中的應(yīng)用廖明等對比了血IGRA、TST、抗酸桿菌、結(jié)核抗體在SCTB52臨床應(yīng)用案例肺結(jié)核輔助診斷：某院呼吸科病人，男臨床癥狀：發(fā)熱1周，咳嗽檢測結(jié)果：TB-IgG(-)，TB-IGRA（+）T-N的值是21.5pg/ml結(jié)果分析：TB-IgG靈敏度低，易漏檢。臨床診斷：肺結(jié)核備注：2011年，WHO建議不再使用結(jié)核抗體檢測結(jié)核感染臨床應(yīng)用案例肺結(jié)核輔助診斷：53肺外結(jié)核輔助診斷：某院感染科，女，75歲

臨床癥狀：發(fā)熱數(shù)日，胸痛，干咳檢測結(jié)果：X射線胸腔積液影像，積液涂片（-）、積液培養(yǎng)（-）、TB-IGRA

T-N

350pg/ml，積液單核細(xì)胞增多，血沉快結(jié)果分析：對于肺外結(jié)核的診斷，涂片與培養(yǎng)的陽性率極低，TB-IGRA（+），結(jié)合其他非特異輔助指標(biāo)可明確診斷肺外結(jié)核。臨床診斷：結(jié)核性胸膜炎臨床應(yīng)用案例肺外結(jié)核輔助診斷：臨床應(yīng)用案例54IGRA方法輔助診斷結(jié)核性胸膜炎：天津市海河醫(yī)院，124例受試者，包括健康對照者30名、初診結(jié)核性胸膜炎患者37例、惡性胸腔積液患者32例、非結(jié)核性胸膜炎患者25例。結(jié)論：用IGRA方法對結(jié)核性胸膜炎診斷的敏感性、特異性和診斷準(zhǔn)確率分別為91.9％、90.6％、91.3％，優(yōu)于ADA和TB-Ab。杜巖青檢驗醫(yī)學(xué)

2012年12月第27卷第12期IGRA方法輔助診斷結(jié)核性胸膜炎：杜巖青檢驗醫(yī)學(xué)2055臨床應(yīng)用案例肺炎與肺結(jié)核的鑒別診斷：某醫(yī)院呼吸內(nèi)科，男，59歲臨床癥狀：肺部有積水，高燒發(fā)熱，初步認(rèn)定肺炎，抗生素治療1周不見效果，高度懷疑結(jié)核。檢測結(jié)果：痰涂片（-），結(jié)核抗體（-），TB-IGRA（-）結(jié)果分析：傳統(tǒng)結(jié)核檢測檢出率在20%-40%，靈敏度低。IGRA檢出率在90％以上，陰性排除意義高于涂片和抗體。患者繼續(xù)用藥3周，病情好轉(zhuǎn)。臨床診斷：肺炎臨床應(yīng)用案例肺炎與肺結(jié)核的鑒別診斷：5657MTB與其他桿菌感染的鑒別診斷：某院呼吸內(nèi)科病人，男臨床癥狀：發(fā)熱、咳嗽、咳痰、呼吸困難，乏力，多汗，關(guān)節(jié)疼痛檢測結(jié)果：痰涂片（-），菌培（-），肺部X射線可見肺結(jié)節(jié)，胸腔積液診斷過程：該院診斷為結(jié)核但治療無好轉(zhuǎn)，患者轉(zhuǎn)院檢測IGRAs（-），試管凝集實驗++，布病抗體++，確診布氏桿菌感染，與該院打官司勝訴。結(jié)果分析：由于痰涂片和菌培檢出率低，陰性也未能引起重視，只憑X片和癥狀診斷為結(jié)核并治療。治療無效后，病人轉(zhuǎn)院，檢測IGRAs陰性，考慮排除結(jié)核，且病人為牧民，確診布氏桿菌病。官司敗訴后，該院才開始重視IGRAs檢測。最終確診：布氏桿菌病臨床應(yīng)用案例17MTB與其他桿菌感染的鑒別診斷：臨床應(yīng)用案例57MTB與NTM的鑒別診斷：某院感染科病人，男臨床癥狀：發(fā)熱1周，咳嗽，少量痰檢測結(jié)果：兩次痰涂片（+），兩次TB-IGRA（-），肺部X射線無異常，后經(jīng)菌培鑒定為菌培（-）結(jié)果分析：痰涂片不能區(qū)分非結(jié)核分枝桿菌，造成假陽性，而TB-IGRA與菌培結(jié)果相符，對結(jié)核分枝桿菌有很好的特異性。臨床診斷：鳥型分枝桿菌感染臨床應(yīng)用案例MTB與NTM的鑒別診斷：臨床應(yīng)用案例5859NTM（非結(jié)核分枝桿菌）比例增高2000年全國流調(diào)分離的抗酸桿菌菌株中，NTM菌株占11.1%

，其中90%為非結(jié)核分枝桿菌肺病。NTM肺病的臨床表現(xiàn)與結(jié)核病相似，

既可有全身中毒癥狀，亦有局部損害表現(xiàn)。但癥狀和體征缺乏特異性，20%-50%的病人無明顯癥狀，除非做菌型鑒定，憑臨床表現(xiàn)難與肺結(jié)核病相鑒別。PPD試驗：弱陽性多見，但不能鑒別MTB和NTM感染。

細(xì)菌學(xué)檢查：常規(guī)痰涂片無法鑒別MTB和NTM。培養(yǎng)特性：固體培養(yǎng)基上，NTM菌落常光滑，部分菌落有色素產(chǎn)生，生長迅速，且在含PNB(對硝基苯甲酸)和含TCH(噻吩二羧酸肼)選擇性培養(yǎng)基上均可生長，而結(jié)核分枝桿菌只在TCH選擇性培養(yǎng)基上生長。19NTM（非結(jié)核分枝桿菌）比例增高2000年全國流調(diào)分離

使用抗TNF藥物前排查結(jié)核的意義06.16.201160發(fā)病率/100.000患者/年DixonWGetal.AnnRheumDis2010;69:522–528.Tubachetal.Arthritis&Rheum2009;60:1884-1894發(fā)病率/100.000患者/年使用抗TNF藥物前排查結(jié)核的意義06.16.201潛伏性感染監(jiān)控某中學(xué)高三年級小規(guī)模結(jié)核爆發(fā)初始病例1例（7班）6月初第一批疫情5例（7班）8-9月第二批疫情10例（8例7班）9月對師生采血進行IGRA檢測IGRA陽性者進行預(yù)防性服藥疫情控制自行住院全年級師生胸透，胸透陰影預(yù)防性服藥全年級師生PPD試驗疫情發(fā)展階段結(jié)核病例及分布疫情時間疫情初處理√一起小規(guī)模結(jié)核暴發(fā)流行的調(diào)查與控制×潛伏性感染監(jiān)控某中學(xué)高三年級小規(guī)模結(jié)核爆發(fā)初始病例1例（7班61潛伏性感染流調(diào)結(jié)果2010年流調(diào)發(fā)現(xiàn)的1301例結(jié)核感染者中，有癥狀者740例(56.9%)，無癥狀者561例（43.1%）。有癥狀結(jié)核病患者中，60歲及以上年齡組比例高，為60.2%有癥狀就診的346例肺結(jié)核患者，只有124例患者（35.8%）被診斷為肺結(jié)核，其次為氣管炎（18.8%）和感冒（16.5%）等Age（years）WithoutsymptomWithsymptomTotalNo.%No.%No.%15～5930846.235853.8666100.0≥6025339.838260.2635100.0Total56143.174056.91301100.0潛伏性感染流調(diào)結(jié)果2010年流調(diào)發(fā)現(xiàn)的1301例結(jié)核感染者中62潛伏性感染、抗結(jié)核治療監(jiān)控定量檢測γ干擾素釋放強度，可用于持續(xù)監(jiān)控：潛伏性感染國內(nèi)潛伏性感染人群占結(jié)核感染人群40%以上；無干預(yù)情況下2年內(nèi)發(fā)展成活動性結(jié)核的比例為5%-10%；使用IGRAs可以有效發(fā)現(xiàn)潛伏性感染，通過定量檢測IGRAs強度，可以監(jiān)控病人病情發(fā)展?fàn)顟B(tài)，防治潛伏性感染發(fā)展成為活動性結(jié)核。抗結(jié)核治療耐藥結(jié)核比例逐漸增加，主要由于抗結(jié)核治療不規(guī)范；TB-IGRA具有寬泛的γ干擾素定量量程，可跟蹤抗結(jié)核治療效果，為臨床治療方案調(diào)整做參考。潛伏性感染、抗結(jié)核治療監(jiān)控定量檢測γ干擾素釋放強度，可用于持63Kobashi等利用IGRA對50例結(jié)核患者的治療進行追蹤檢測：治療開始后，結(jié)核患者中IGRA的敏感性和反應(yīng)強度均有明顯的下降趨勢抗結(jié)核治療效果輔助評估Kobashi等利用IGRA對50例結(jié)核患者的治療進行追蹤檢64綜上，TB-IGRA：高特異性，高靈敏性，體外，全血，定量檢測應(yīng)用方向：肺結(jié)核輔助診斷肺外結(jié)核輔助診斷結(jié)核感染排查潛伏性感染監(jiān)控，抗結(jié)核治療追蹤TB-IGRA的臨床應(yīng)用綜上，TB-IGRA：TB-IGRA的臨床應(yīng)用65TB-IGRA在呼吸科應(yīng)用匯總肺結(jié)核的輔助診斷，尤其是細(xì)菌學(xué)檢測陰性的肺結(jié)核的輔助診斷：TB-IGRA從細(xì)胞水平上檢測結(jié)核感染，檢出率高，早期感染即可檢出，實現(xiàn)早診斷早治療。肺外結(jié)核的輔助診斷：TB-IGRA取靜脈血進行檢測，克服肺外結(jié)核患者痰樣找不到結(jié)核菌，病灶部位取樣難的問題。呼吸系統(tǒng)疾病與結(jié)核的鑒別診斷：發(fā)熱、咳嗽、咳痰>2周；咯血；胸痛等癥狀疑似結(jié)核，胸片/CT不能明確診斷者；抗炎治療治療效果不佳患者的結(jié)核排查，陰性結(jié)果在很大程度上可以排除結(jié)核。TB-IGRA在呼吸科應(yīng)用匯總肺結(jié)核的輔助診斷，尤其是細(xì)菌學(xué)662周以上不明原因發(fā)熱病人的結(jié)核感染排查：有研究發(fā)現(xiàn)其中20%是結(jié)核引起的，大部分是肺外結(jié)核。高危人群的結(jié)核感染篩查：如使用生物制劑/免疫抑制劑、大劑量激素患者，HIV患者，糖尿病患者，血液病和癌癥放化療之前患者進行結(jié)核篩查，以防陳舊性結(jié)核、潛伏性結(jié)核爆發(fā)以及近期結(jié)核感染。抗結(jié)核治療效果跟蹤以及潛伏性結(jié)核定期監(jiān)控：TB-IGRA結(jié)果是一個定量值，活動性結(jié)核患者隨治療進行陽性強度降低甚至轉(zhuǎn)陰；潛伏感染患者若發(fā)生陽性強度明顯升高，有發(fā)展成活動性結(jié)核風(fēng)險。流調(diào)顯示有85%～90%新診斷的活動性肺結(jié)核由潛伏性結(jié)核演變而來。2周以上不明原因發(fā)熱病人的結(jié)核感染排查：有研究發(fā)現(xiàn)其中20%67已有25個國家發(fā)布了IGRAs應(yīng)用指南：

美國、加拿大、英國、巴西、法國、西班牙、意大利、德國、澳大利亞、葡萄牙、愛爾蘭、瑞士、丹麥、挪威、芬蘭、捷克、斯洛伐克、波蘭、保加利亞、克羅地亞、沙特、奧地利、南韓、日本、中國

潛伏性感染和活