抗腫瘤藥物的作用機(jī)制

抗腫瘤藥物細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制幾乎所有的腫瘤細(xì)胞都具有一個(gè)共同的特點(diǎn)，即與細(xì)胞增殖有關(guān)的基因被開啟或激活，而與細(xì)胞分化有關(guān)的基因被關(guān)閉或抑制，從而使腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)為不受機(jī)體約束的無限增殖狀態(tài)。從細(xì)胞生物學(xué)角度，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化，抑制腫瘤細(xì)胞增殖或者導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡的藥物均可發(fā)揮抗腫瘤作用。生化作用機(jī)制（1）影響核酸生物合成：①阻止葉酸輔酶形成；②阻止嘌吟類核苷酸形成；③阻止嘧啶類核苷酸形成；④阻止核苷酸聚合；（2）破壞DNA結(jié)構(gòu)和功能；（3）抑制轉(zhuǎn)錄過程阻止RNA合成；（4）影響蛋白質(zhì)合成與功能：影響紡錘絲形成；干擾核蛋白體功能；干擾氨基酸供應(yīng)；（5）影響體內(nèi)激素平衡。烷化劑烷化劑可以進(jìn)一步分為：氮芥類：均有活躍的雙氯乙基集團(tuán)，比較重要的有氮芥、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺（CTX）、異環(huán)磷酰胺（IFO）等。其中環(huán)磷酰胺為潛伏化藥物需要活化才能起作用。目前臨床廣泛用于治療淋巴瘤、白血病、多發(fā)性骨髓瘤，對(duì)乳腺癌、肺癌等也有一定的療效。該藥除具有骨髓抑制、脫發(fā)、消化道反應(yīng)，還可以引起充血性膀胱炎，病人出現(xiàn)血尿，臨床在使用此藥時(shí)應(yīng)鼓勵(lì)病人多飲水，達(dá)到水化利尿，減少充血性膀胱炎的發(fā)生。還可以配合應(yīng)用尿路保護(hù)劑美斯納。亞硝脲類：最早的結(jié)構(gòu)是N-甲基亞硝脲（MNU）。以后，合成了加入氯乙集團(tuán)的系列化合物，其中臨床有效的有ACNU、BCNU、CCNU、甲基CCNU等，鏈氮霉素均曾進(jìn)入臨床，但目前已不用。其中ACNU、BCNU、CCNU、能通過血腦屏障，臨床用于腦瘤及顱內(nèi)轉(zhuǎn)移瘤的治療。主要不良反應(yīng)是消化道反應(yīng)及遲發(fā)性的骨髓抑制，應(yīng)注意對(duì)血象的觀測(cè)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)給予處理。乙烯亞胺類：在研究氮芥作用的過程中，發(fā)現(xiàn)氮芥是以乙烯亞胺形式發(fā)揮烷化作用的，因此，合成了2,4,6-三乙烯亞胺三嗪化合物（TEM），并證明在臨床具有抗腫瘤效應(yīng)，但目前在臨床應(yīng)用的只有塞替派。此藥用于治療卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌，不良反應(yīng)主要為骨髓抑制，注意對(duì)血象定期監(jiān)測(cè)。甲烷磺酸酯類:為根據(jù)交叉鍵聯(lián)系之復(fù)合成的系列化合物，目前臨床常用的只有白消安（馬利蘭）。臨床上主要用于慢性粒細(xì)胞白血病，主要不良反應(yīng)是消化道反應(yīng)及骨髓抑制，個(gè)別病人可引起纖維化為嚴(yán)重的不良反應(yīng)。遇到這種情況應(yīng)立即停藥，更換其它藥物。其他：具有烷化作用的有達(dá)卡巴嗪（DTIC）、甲基芐肼（PCZ）六甲嘧胺（HHN）等。環(huán)氧化合物，由于嚴(yán)重不良反應(yīng)目前已被淘汰。抗代謝藥物抗代謝類藥物作用于核酸合成過程中不同的環(huán)節(jié)，按其作用可分為以下幾類藥物：胸苷酸合成酶抑制劑：氟尿嘧啶（5-FU）、呋喃氟尿嘧啶（FT-207）、二喃氟啶（雙呋啶FD-1）、優(yōu)氟泰（UFT）、氟鐵龍（5-DFUR）。抗腫瘤作用主要由于其代謝活化物氟尿嘧啶脫氧核苷酸干擾了脫氧尿嘧啶苷酸向脫氧胸腺嘧啶核苷酸轉(zhuǎn)變，因而影響了DNA的合成，經(jīng)過四十年的臨床應(yīng)用，成為臨床上常用的抗腫瘤藥物，成為治療肺癌、乳腺癌、消化道癌癥的基本藥物。不良反應(yīng)比較遲緩，用藥6-7天出現(xiàn)消化道粘膜損傷，例如：口腔潰瘍、食欲不振、惡心、嘔吐、腹瀉等，一周以后引起骨髓抑制。而連續(xù)96小時(shí)以上粘腺炎則成為其主要毒性反應(yīng)。臨床上如長(zhǎng)時(shí)間連續(xù)點(diǎn)滴此類藥物應(yīng)做好病人的口腔護(hù)理，教會(huì)病人自己學(xué)會(huì)口腔清潔的方法，預(yù)防嚴(yán)重的粘膜炎發(fā)生。二氫葉酸還原酶抑制劑：甲氨喋吟（MTX）、氨喋吟（白血寧）等。它們具有對(duì)二氫葉酸還原酶抑制作用，應(yīng)用甲酰四氫葉酸（CF）解救MTX的毒性后，較大地增加MTX的劑量。它對(duì)治療成骨肉瘤和頭頸腫瘤以及某些免疫性疾病有效。其不良反應(yīng)可引起嚴(yán)重的口腔炎、潰瘍性胃炎、出血性腸炎、甚至腸穿孔而死亡；骨髓抑制與劑量和給藥方案有關(guān)。臨床上應(yīng)做好病人的口腔護(hù)理，認(rèn)真觀察病人有無腸穿孔等嚴(yán)重的不良反應(yīng)的發(fā)生，及時(shí)報(bào)告醫(yī)生，做好搶救準(zhǔn)備。DNA多聚酶抑制劑：阿糖胞苷（Ara-c）、環(huán)胞苷，氯環(huán)胞苷，它們?cè)隗w內(nèi)變成阿糖胞苷三磷酸（Ara-CTP）后發(fā)揮作用，此反應(yīng)由脫氧胞苷激酶催化。在白血病細(xì)胞及淋巴細(xì)胞中此激酶的含量較高，故它對(duì)白血病有選擇作用，對(duì)DNA多聚酶有強(qiáng)大的抑制作用，而影響DNA的復(fù)制。一般劑量可以引起骨髓抑制、惡心、嘔吐等不良反應(yīng)但較輕，高劑量時(shí)有嚴(yán)重的骨髓抑制如白細(xì)胞、血小板降低和貧血，明顯的惡心、嘔吐、嚴(yán)重的腹瀉，護(hù)士應(yīng)根據(jù)病人出現(xiàn)的不良反應(yīng)的類型做好病人的相應(yīng)的護(hù)理。如做好預(yù)防感染、出血、腹瀉的護(hù)理，減少不良反應(yīng)帶來的并發(fā)癥。核苷酸還原酶抑制劑：羥基脲（HU）、肌苷二醛（inosinedialdehyde）、腺苷二醛（adenosinediialde-hgde）、胍唑（guanazole）,包括胞苷酸、鳥苷酸、腺苷酸、胸苷酸還原成相應(yīng)的脫氧核苷酸，最終阻止DNA的合成，通過抑制核酸還原酶的抑制。臨床用于治療慢性粒細(xì)胞白血病、惡性黑色素瘤、乳腺癌、頭頸部癌、腸癌、對(duì)銀屑病也有效。不良反應(yīng)主要為骨髓抑制。臨床上應(yīng)注意對(duì)血象的監(jiān)測(cè)，預(yù)防感染。嘌吟核苷酸合成抑制劑：6-巰嘌吟（6-MP）為嘌吟類衍生物，由于6-GMP對(duì)鳥苷酸激酶有親和能力，故6-TG最后可以取代鳥嘌吟，摻入到核酸中去。它可以抑制嘌吟合成中的反應(yīng)。臨床用于治療白血病，也可作為免疫抑制劑，用于腎病綜合征、器官移植、紅斑狼瘡。主要不良反應(yīng)是骨髓抑制和消化道反應(yīng)外還可以引起高尿酸血癥，用藥后要充分水化及堿化尿液，減少高尿酸血癥的發(fā)生。抗腫瘤抗生素抗腫瘤抗生素是由微生物產(chǎn)生的具有抗腫瘤活性的化學(xué)物質(zhì)，是在抗感染抗生素研究基礎(chǔ)上發(fā)展起來，在尋找抗結(jié)核藥發(fā)現(xiàn)了放線菌素D（ACD）。ACD是第五個(gè)發(fā)現(xiàn)的有效抗腫瘤藥物，也是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的抗腫瘤抗生素。作用機(jī)理采用不同機(jī)制影響DNA、RNA及蛋白質(zhì)的生物合成，使細(xì)胞發(fā)生變異，影響細(xì)胞分裂，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。分為以下幾類藥物：蒽環(huán)類抗腫瘤抗生素：阿霉素（ADM）、柔紅霉素（DNR）、表阿霉素（EPI或E-ADM）、米托蒽醍（MTT、DHAD）、毗喃阿霉素（THP）。作用機(jī)制有與DNA結(jié)合；自由基的生成；與金屬離子結(jié)合；與細(xì)胞膜結(jié)合。對(duì)幾乎70%實(shí)體瘤有效，如乳腺癌、惡性淋巴瘤、肺癌、急性白血病等；但其心臟毒性和骨髓抑制成為限制劑量提高的主要因素，故臨床上應(yīng)用時(shí)注意做好心臟的監(jiān)護(hù)，預(yù)防心力衰竭的發(fā)生。此藥外滲引起組織潰瘍壞死，臨床使用時(shí)注意靜脈的選擇，加藥時(shí)護(hù)士要守候在床旁，保證藥物順利走完，發(fā)現(xiàn)藥物外滲及時(shí)停藥拔針，給與局部封閉，金黃散中藥外敷，減輕組織壞死程度。放線菌素類抗腫瘤抗生素：放線菌素D（ACD）。作用機(jī)制是抑制RNA的合成。靜脈注射時(shí)可引起靜脈炎，漏出血管外可能導(dǎo)致組織壞死。用藥注意事項(xiàng)同阿霉素。博萊霉素類抗腫瘤抗生素：博萊霉素（爭(zhēng)光霉素）平陽霉素（A5）?？梢鹌つw反應(yīng)，表現(xiàn)為色素沉著、皮炎、角化增后、皮疹等。還可引起肺組織的纖維化，用藥期間應(yīng)注意檢查肺部，如肺底有啰音應(yīng)停藥。絲裂霉素類抗腫瘤抗生素：絲裂霉素A、絲裂霉素B、絲裂霉素C（MMC）。作用機(jī)制是與DNA形成雙鏈間或鏈內(nèi)交叉連結(jié)，從而抑制DNA合成。另外，MMC導(dǎo)致的氧自由基曾加也可能與抗腫瘤活性有關(guān)。此藥不良反應(yīng)有骨髓抑制，主要表現(xiàn)為血小板下降，用藥時(shí)加強(qiáng)對(duì)血象的監(jiān)測(cè)。藥物外滲可引起組織潰瘍壞死，用藥注意事項(xiàng)同阿霉素。光輝霉素類抗腫瘤抗生素：光輝霉素（MTH）、橄欖霉素。作用機(jī)制是與DNA結(jié)合，。抑制DNA依賴性RNA聚合酶，從而抑制RNA的合成。尚能阻斷藥理劑量維生素D的升血鈣作用，并能抑制甲狀腺對(duì)破骨細(xì)胞的作用。主要用于睪丸胚胎癌。其他抗腫瘤抗生素：鏈脲霉素（STT）。作用機(jī)制是能抑制DNA合成，并能抑制嘧啶核苷代謝和糖原異生的某些關(guān)鍵酶。臨床主要用于惡性淋巴瘤、急、慢性淋巴細(xì)胞白血病和腎母細(xì)胞瘤等。主要副作用為骨髓抑制，臨床應(yīng)用時(shí)注意定期對(duì)血象的監(jiān)測(cè)?？鼓[瘤植物藥抗腫瘤植物藥指來源于植物的具有抗腫瘤作用的藥物，其有效成分中以生物堿占多數(shù)，作用機(jī)制可歸為以下三類：用于微管和微管蛋白:長(zhǎng)春堿和紫杉類。長(zhǎng)春花堿（VLB）、長(zhǎng)春新堿（VCR）、長(zhǎng)春花堿酰胺（VDS）、去甲長(zhǎng)春花堿（NVB）、紫杉醇（PTX）、泰索帝。抑制微管蛋白的聚合，而妨礙紡錘體微管的形成，使有絲分裂停止于中期；也可作用于細(xì)胞膜，干擾細(xì)胞膜對(duì)氨基酸的轉(zhuǎn)運(yùn)，使蛋白質(zhì)的合成受抑，從而導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡?？沽鲎V廣，主要用于各種實(shí)體瘤的治療。長(zhǎng)春堿類藥物的不良反應(yīng)為血液毒性、消化道反應(yīng)惡心嘔吐、周圍神經(jīng)毒性表現(xiàn)指（趾）尖麻木，四肢疼痛，肌肉震顫，腱反射消失；在應(yīng)用過程中注意觀察，可以用一些營養(yǎng)神經(jīng)的藥物。還可以引起局部刺激，出現(xiàn)組織壞死，在使用過程同阿霉素。紫杉類藥物主要不良反應(yīng)是過敏反應(yīng)，在用藥前先詢問有無過敏史，服用抗過敏藥物預(yù)防過敏反應(yīng)的發(fā)生，使用中慢滴3-4小時(shí)，同時(shí)認(rèn)真觀察生命體征，注意有無過敏反應(yīng)，發(fā)現(xiàn)過敏反應(yīng)立即停藥。輸紫杉醇時(shí)應(yīng)使用聚丙烯輸液器，不可使用聚乙烯輸液器。用于拓?fù)洚悩?gòu)酶：喜樹堿和鬼臼毒類。喜樹堿（CPT）、羥基喜樹堿（HCPT）、鬼臼乙叉甙（足葉乙甙，VP-16）。干擾DNA的復(fù)制。臨床用于膀胱癌、大腸癌、原發(fā)性肝癌等很有效。不良反應(yīng)主要為消化道反應(yīng)，表現(xiàn)惡心、嘔吐、腹瀉等。做好消化道反應(yīng)的處理。抑制腫瘤細(xì)胞DNA合成：三尖杉酯堿和靛玉紅。用于治療血液病，如急、慢性粒細(xì)胞白血病。不良反應(yīng)有輕微的消化道反應(yīng)如惡心、嘔吐；血液毒性表現(xiàn)為全血細(xì)胞下降，注意對(duì)血象的監(jiān)測(cè)。其他抗腫瘤藥物（主要為鉑類抗腫瘤藥物）作用靶點(diǎn)是增殖細(xì)胞的DNA，有類似烷化劑雙功能集團(tuán)的作用，可以和細(xì)胞內(nèi)的堿基結(jié)合，使DNA分子鏈內(nèi)和鏈間交叉鍵聯(lián)，因而失去功能不能復(fù)制。高濃度時(shí)也抑制RNA及蛋白質(zhì)的合成。包括順鉑（DDP）、卡鉑（CBP）、草酸鉑（奧沙利鉑，L-OHP）?？沽鲎V廣，適用于多數(shù)實(shí)體瘤，如睪丸腫瘤、乳腺癌、頭頸部癌、卵巢癌、骨肉瘤等；還可以聯(lián)合用藥作為黑色素瘤、甲狀腺癌、非小細(xì)胞肺癌、食道癌、肝癌、膀胱癌等首選藥物。順鉑（DDP）主要不良反應(yīng)為嚴(yán)重的消化道反應(yīng)、腎臟毒性、其次還有骨髓移植、聽神經(jīng)毒性，均與使用劑量有關(guān)。在用藥前先檢查腎臟功能及聽力，并注意鼓勵(lì)病人多飲水或輸液強(qiáng)迫利尿。對(duì)于嚴(yán)重的消化道反應(yīng)惡心、嘔吐應(yīng)給于高效的止吐藥物，并做好病人的飲食宣教，以少食多餐、清淡飲食為主;卡鉑（CBP）克服了順鉑（DDP）消化道不良反應(yīng)，但骨髓抑制較重，而且禁用NS，應(yīng)使用GS，否則會(huì)引起比順鉑（DDP）更嚴(yán)重的腎臟毒性反應(yīng)；草酸鉑主要不良反應(yīng)為外周神經(jīng)毒性，表現(xiàn)為遇冷神經(jīng)痙攣，所以病人在用藥后一周內(nèi)忌冷，以防喉痙攣引起窒息的嚴(yán)重并發(fā)癥的發(fā)生。激素類激素治療目前已成為腫瘤治療的重要手段，主要用于治療乳腺癌和前列腺癌。激素治療有效的先決條件是腫瘤細(xì)胞上具有激素受體，并且腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)和繁殖在一定程度上仍受激素控制，通過改變機(jī)體激素水平，有效的控制腫瘤生長(zhǎng)。來源于中醫(yī)血液病網(wǎng)轉(zhuǎn)載請(qǐng)注明出處網(wǎng)址：undefined1、分子腫瘤學(xué)概述1）惡性腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)特性惡性腫瘤的發(fā)生是長(zhǎng)期困擾生物學(xué)家和臨床醫(yī)學(xué)家的巨大難題，攻克惡性腫瘤這個(gè)堡壘更是我們?cè)谙乱皇兰o(jì)面臨的巨大挑戰(zhàn)。對(duì)惡性腫瘤的認(rèn)識(shí)來自于對(duì)腫瘤細(xì)胞表型的觀察和對(duì)惡性腫瘤患者病程及其轉(zhuǎn)歸的了解。人們最早觀察到的，最引人注目的異于正常細(xì)胞的腫瘤細(xì)胞表型是其極強(qiáng)的，似乎是無限的增殖能力，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過正常細(xì)胞。這種增殖能力使腫瘤細(xì)胞數(shù)目在很短時(shí)間內(nèi)就能成倍增加，并在患者體內(nèi)形成瘤塊，這種增殖能力本身就使腫瘤細(xì)胞相對(duì)正常細(xì)胞具有壓倒的優(yōu)勢(shì)。不過，各個(gè)腫瘤細(xì)胞的增殖能力并不相同。其次，腫瘤細(xì)胞往往比相應(yīng)的正常細(xì)胞更幼稚，處于更原始的分化階段。所以，隨著腫瘤細(xì)胞的大量增殖，這種原始或幼稚細(xì)胞便大量積聚。第三，腫瘤細(xì)胞的壽命比正常細(xì)胞長(zhǎng)。正常細(xì)胞都有一定的壽命，壽命終結(jié)時(shí)細(xì)胞會(huì)自行死亡而在體內(nèi)被清除，但腫瘤細(xì)胞卻發(fā)生不死化，不能自行衰老消亡。第四，腫瘤細(xì)胞不但在原發(fā)灶之處不斷增殖形成團(tuán)塊，還很容易從團(tuán)塊脫落而遷徙到遠(yuǎn)處，再固定在遠(yuǎn)處增殖形成新的團(tuán)塊。而正常細(xì)胞與組織粘附很牢，除非衰老死亡，一般不會(huì)脫落而遷徙到遠(yuǎn)處。無疑，惡性腫瘤主要是由于細(xì)胞增殖，分化，衰老，死亡等方面行為的異常和失衡所致腫瘤細(xì)胞的克隆性生長(zhǎng)造成的。2）惡性腫瘤是一種分子病腫瘤細(xì)胞的這些不同于正常細(xì)胞的表型是僅僅反映細(xì)胞表面的行為不同，還是有更深刻的原因呢？在未能更深入了解腫瘤發(fā)生機(jī)理以前是不能回答這一問題的。不過，以下線索和證據(jù)提示惡性腫瘤可能是由深層次基因改變所造成的。這些包括1，腫瘤易感性具有家族遺傳傾向，如視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤，乳腺癌，大腸癌等，2，多種致癌因素，如病毒，電離輻射，化學(xué)劑等，都引致基因改變。3,多種與細(xì)胞基本生命活動(dòng)有關(guān)的基因的改變都會(huì)使細(xì)胞發(fā)生一系列變化引致腫瘤。4,許多腫瘤的發(fā)生率往往隨著年齡增長(zhǎng)和遺傳穩(wěn)定性的降低而增長(zhǎng)。5，許多腫瘤細(xì)胞克隆具有特征的染色體改變。6，以NIH3T3為模型，通過轉(zhuǎn)基因進(jìn)行的惡性轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)可使細(xì)胞不死化而惡性轉(zhuǎn)化。隨著近代分子生物學(xué)理論和實(shí)驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展并應(yīng)用于腫瘤研究，使對(duì)腫瘤發(fā)生機(jī)理的研究全面深入到分子水平，從而建立了分子腫瘤學(xué)。分子腫瘤學(xué)的研究結(jié)果表明惡性腫瘤是涉及基因改變的疾病。腫瘤細(xì)胞與正常組織細(xì)胞之間絕非僅有表面行為的不同，而具有基因水平的本質(zhì)的不同。這一認(rèn)識(shí)為對(duì)腫瘤發(fā)生機(jī)理的研究，對(duì)腫瘤的診斷，治療和預(yù)防起到革命性的重大的推動(dòng)作用。也使我們對(duì)正常細(xì)胞的增殖，分化，衰老和死亡的發(fā)生及調(diào)控機(jī)理等重要理論問題的認(rèn)識(shí)得到極大的深化。上述腫瘤細(xì)胞各種表型的改變都由基因改變所致，都具有其分子基礎(chǔ)。下面做較詳細(xì)的介紹。2、逆轉(zhuǎn)錄病毒和癌基因1）逆轉(zhuǎn)錄病毒的生活史和病毒癌基因V-onc的發(fā)現(xiàn)對(duì)腫瘤發(fā)生機(jī)理的進(jìn)一步深刻認(rèn)識(shí)始于80年代初癌基因的發(fā)現(xiàn)，而癌基因這一概念又來自對(duì)逆轉(zhuǎn)錄病毒的致癌作用的研究。所以我們先從逆轉(zhuǎn)錄病毒談起。逆轉(zhuǎn)錄病毒先前在轉(zhuǎn)基因載體的部分已經(jīng)提過，其分子結(jié)構(gòu)主要是5'gag-pol-env-3'。其中g(shù)ag編碼病毒核心蛋白，env編碼病毒的外套蛋白，pol則編碼病毒的DNA合成酶，即逆轉(zhuǎn)錄酶。，而是病毒顆粒的包裝信號(hào)。這些成分是使病毒能維持正常生命和完成以下正常生活史的基本結(jié)構(gòu)。逆轉(zhuǎn)錄病毒首先必須通過宿主細(xì)胞表面的受體感染宿主細(xì)胞而進(jìn)入細(xì)胞。在宿主細(xì)胞內(nèi)應(yīng)用自身的逆轉(zhuǎn)錄酶將自身RNA逆轉(zhuǎn)成雙鏈cDNA并隨機(jī)整合到宿主細(xì)胞基因組DNA中，原來病毒RNA兩端的序列被復(fù)制成“長(zhǎng)末端重復(fù)序列”（LTR）°5'-LTR中含有轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)子，增強(qiáng)子或PolyA信號(hào)添加序列。這種結(jié)構(gòu)稱為原病毒。原病毒隨著宿主細(xì)胞分裂傳遞給子代細(xì)胞，形成縱向傳播。另一方面，原病毒可以用自身的LTR為啟動(dòng)子進(jìn)行轉(zhuǎn)錄而表達(dá)，或隨著宿主細(xì)胞內(nèi)相鄰基因的表達(dá)而表達(dá)。合成出相應(yīng)的病毒結(jié)構(gòu)蛋白，再組裝成新的病毒顆粒，通過出芽釋放到細(xì)胞外，再感染鄰近其他細(xì)胞，實(shí)行橫向傳播。由外部環(huán)境感染細(xì)胞的病毒稱為外源性逆轉(zhuǎn)錄病毒，而存在于宿主細(xì)胞DNA內(nèi)傳給子細(xì)胞的病毒稱為內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒。內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒在宿主細(xì)胞內(nèi)一般沒有高度表達(dá)，也不致病。早在1911年P(guān)eytonRous就發(fā)現(xiàn)一種鳥類的肉瘤病毒可以使雞患白血病。隨著對(duì)病毒分子結(jié)構(gòu)和功能認(rèn)識(shí)的深入，以后又發(fā)現(xiàn)其它一些病毒，特別是逆轉(zhuǎn)錄病毒與致癌，特別是在某些動(dòng)物中致癌相關(guān)。近年又發(fā)現(xiàn)某些人類腫瘤，如成人T淋巴細(xì)胞性白血病中存在病毒的證據(jù)，更促進(jìn)了腫瘤的病毒病因?qū)W研究。根據(jù)逆轉(zhuǎn)錄病毒的致癌特征，可以總的分為急性轉(zhuǎn)化病毒（快病毒）和慢性轉(zhuǎn)化病毒（慢病毒）?？觳《局掳┛欤〝?shù)天到數(shù)周），其結(jié)構(gòu)中除病毒必要結(jié)構(gòu)基因外還有外加基因，具有快速體外惡性轉(zhuǎn)化能力。正是這外加基因的存在與病毒快速體外惡性轉(zhuǎn)化能力密切相關(guān)。慢病毒則一般致癌較慢，需半年至數(shù)年，在體外不能惡性轉(zhuǎn)化。1976年在鳥類的肉瘤病毒（ASV）中首次發(fā)現(xiàn)，除了gag-pol-env外還有一個(gè)外加基因，定名為V-src.V-src.位于gag-pol-env的下游，并不破壞這些基本結(jié)構(gòu)基因。因此ASV能獨(dú)立正常復(fù)制，又具有惡性轉(zhuǎn)化能力。此后相繼在許多快病毒中發(fā)現(xiàn)都有類似的惡性轉(zhuǎn)化基因。這種病毒中的與惡性轉(zhuǎn)化能力密切相關(guān)的基因即為V-onc。典型的存在于病毒結(jié)構(gòu)中的V-onc可位于病毒結(jié)構(gòu)基因的V上游，下游或插于其間，并往往取代部分的病毒結(jié)構(gòu)基因從而使病毒復(fù)制功能缺陷。因此這些病毒復(fù)制需要另一個(gè)輔助病毒來提供必要的蛋白質(zhì)和酶。綜上所述，所謂癌基因V-onc就是指一類基因，其編碼的蛋白質(zhì)促使細(xì)胞失去生長(zhǎng)控制而轉(zhuǎn)化呈惡性表型。V-onc的惡性轉(zhuǎn)化有組織特異性，即需針對(duì)一定的靶細(xì)胞，如纖維母細(xì)胞，造血細(xì)胞，淋巴細(xì)胞，髓細(xì)胞，成紅細(xì)胞，上皮細(xì)胞等。這些V-onc有V-Src,V-myc,V-myb,V-erb（A,B）,V-ras,V-abl,V-fes等，目前已超過100種，許多都是逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組的一部分，但只有十余種與人類的腫瘤密切相關(guān)，最常見的如V-ras。它們的蛋白質(zhì)產(chǎn)物及其活性都已明確，也都在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)成功地獲得了基因克隆片段。2）原癌基因C-onc及其與病毒癌基因V-onc的關(guān)系以V-onc克隆片段為探針與來自腫瘤組織或正常組織細(xì)胞DNA進(jìn)行分子雜交，理應(yīng)與腫瘤組織DNA有雜交信號(hào)。然而結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不但腫瘤組織DNA可顯出信號(hào)，正常組織細(xì)胞DNA也能顯出信號(hào)，提示正常組織細(xì)胞DNA中存在有與V-onc同源的序列。因這些序列存在于細(xì)胞中，故稱為原癌基因C-onc或protooncogene。為何與V-onc同源的C-onc并未使正常組織細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化？為什么V-onc同源的序列會(huì)存在于正常組織細(xì)胞內(nèi)，C-onc與V-onc之間又是什么關(guān)系呢？研究表明與V-onc同源的C-onc原先就是正常組織細(xì)胞DNA的一部分，當(dāng)病毒感染細(xì)胞后整合到細(xì)胞C-onc序列相鄰的基因組DNA中，病毒由LTR驅(qū)動(dòng)再表達(dá)時(shí)由病毒俘獲C-onc后包裝到病毒顆粒中而成為V-onc。因而C-onc雖與V-onc同源，但C-onc含有外顯子和內(nèi)含子部分而V-onc只有外顯子序列。在生物進(jìn)化過程中C-onc是非常保守的，提示它實(shí)際上是一系列與細(xì)胞基本的生命活動(dòng)有關(guān)的基因，在正常細(xì)胞的生存，生長(zhǎng)，發(fā)育，分化等生命活動(dòng)中起著重要的，必不可少的作用。事實(shí)證明C-onc在正常細(xì)胞中一般表達(dá)很低，本身并不致癌，并不賦予細(xì)胞惡性表型。應(yīng)用現(xiàn)代分子遺傳學(xué)方法，原位雜交技術(shù)可將C-onc都在染色體上定位，如C-myc（8q24）,C-myb（6q22）,c-mos（8q22）,C-abl（9q34）,C-rasH（11q13）,C-fes（15q24）,C-erbB（7p）,C-ets1（11q）,C-fos（14q）,等。越來越多的C-onc的異常與特定的腫瘤之間顯示出特定關(guān)系，如C-myb與白血病，淋巴瘤和卵巢癌，C-myc與Burkitt淋巴瘤，肺癌，乳腺癌和宮頸癌，C-abl與慢性粒細(xì)胞性白血病，C-rasH與腸癌，胰癌和肺癌，C-gip與卵巢癌和腎上腺癌，C-gsp與垂體腺癌和甲狀腺癌，C-ret與甲狀腺癌等。根據(jù)它們的正常定位位置及其在病理狀態(tài)時(shí)的位置改變可以推測(cè)其功能。原癌基因C-onc與某些腫瘤間的特定關(guān)系為研究腫瘤發(fā)生的分子機(jī)理提供了線索。除了早期由V-onc發(fā)現(xiàn)腫瘤細(xì)胞中的同源序列C-onc外，以后更多的與特定鐘瘤相關(guān)的癌基因多通過體外惡性轉(zhuǎn)化檢測(cè)的實(shí)驗(yàn)方法找到。此種方法的原理如下：以NIH3T3細(xì)胞為惡性轉(zhuǎn)化的靶細(xì)胞，將從某種腫瘤細(xì)胞提取的DNA轉(zhuǎn)導(dǎo)入NIH3T3細(xì)胞。NIH3T3是一株小鼠纖維母細(xì)胞，它雖然在體外可以無限傳代，但它仍有生長(zhǎng)的接觸抑制，因此并非惡性腫瘤細(xì)胞。當(dāng)細(xì)胞被腫瘤細(xì)胞DNA轉(zhuǎn)導(dǎo)后，部分靶細(xì)胞被惡性轉(zhuǎn)化，失去接觸抑制而在培養(yǎng)皿中形成惡性轉(zhuǎn)化灶。將惡性轉(zhuǎn)化灶中的細(xì)胞吸出再提取DNA，即富集了具惡性轉(zhuǎn)化能力的人腫瘤細(xì)胞DNA。將此DNA再次轉(zhuǎn)導(dǎo)NIH3T3細(xì)胞，獲得第二輪惡性轉(zhuǎn)化灶。經(jīng)數(shù)輪轉(zhuǎn)化所得的惡性轉(zhuǎn)化灶中NIH3T3細(xì)胞的DNA含有大大富集的具惡性轉(zhuǎn)化能力的人腫瘤細(xì)胞DNA。此時(shí)用某種人類特有的高度重復(fù)DNA序列，如Alu序列為探針，與上述最后所得的惡性轉(zhuǎn)化灶中NIH3T3細(xì)胞的DNA文庫雜交，就可從小鼠DNA中區(qū)分并分離出這種人腫瘤細(xì)胞的未知惡性轉(zhuǎn)化基因克隆，即與此種人腫瘤相關(guān)的新的C-onc3、原癌基因被異常激活的機(jī)理與腫瘤發(fā)生的相關(guān)性既然原癌基因C-onc本身并不致癌，那么它與惡性腫瘤的發(fā)生有什么關(guān)系？它在惡性腫瘤發(fā)生過程中起什么作用？為什么有些慢病毒并不含有V-onc卻也能起惡性轉(zhuǎn)化作用呢？應(yīng)用不同實(shí)驗(yàn)體系的大量研究結(jié)果表明，在惡性腫瘤細(xì)胞中的原癌基因C-onc是不正常的，是被異常激活的。所謂異常激活是指這些基因的表達(dá)在質(zhì)和量的方面都發(fā)生異常改變。值得注意的是在C-onc的等位基因中只要一個(gè)發(fā)生改變即可發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化，因此可以認(rèn)為C-onc在致癌過程中起顯性正調(diào)控作用。其次，C-onc的異常改變都發(fā)生在體細(xì)胞，即腫瘤細(xì)胞中，而不發(fā)生在胚系細(xì)胞中，即腫瘤的個(gè)體中這一C-onc的異常并非來源于遺傳，這一點(diǎn)與后面要提及的抑癌基因是不同的。下面概括地介紹一下C-onc被異常激活的各種可能的機(jī)理并由此推測(cè)與腫瘤發(fā)生的關(guān)系。1）病毒的啟動(dòng)子插入不含V-onc的ALV感染宿主后經(jīng)過較長(zhǎng)潛伏期會(huì)誘發(fā)雞的淋巴瘤。在所有被惡性轉(zhuǎn)化的細(xì)胞DNA中都含有ALV原病毒的序列，并都位于第八對(duì)染色體C-myc的上游處。與正常雞的體細(xì)胞相比，被惡轉(zhuǎn)細(xì)胞有一種mRNA明顯增多，此mRNA含有ALV原病毒的5'-LTR和C-myc的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。由此可以可以推斷ALV插入C-myc上游，其原病毒的5'-LTR起了啟動(dòng)子的作用，異常激活C-myc，使之表達(dá)提高了30-100倍，從而導(dǎo)致雞淋巴瘤。以后發(fā)現(xiàn)，ALV原病毒插入位置可以在C-myc上游，下游或較遠(yuǎn)的地方，都可異常激活C-myc而致癌?；蛲蛔?982年11月美國兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室分別報(bào)告在人膀胱瘤細(xì)胞株T24,EJ中發(fā)現(xiàn)V-rasH的同源序列C-rasH，C-rasH的序列與正常C-rasH相比，在第一外顯子的12密碼子由GGC/Glycine點(diǎn)突變成GTC/Valine,因而使其蛋白質(zhì)產(chǎn)物P21也發(fā)生了改變。這種點(diǎn)突變?cè)诮Y(jié)腸癌，肺癌細(xì)胞株中也存在。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)點(diǎn)突變的C-rasH表達(dá)大大提高，且表達(dá)的是異常的產(chǎn)物，提示C-rasH的點(diǎn)突變是異常激活的關(guān)鍵，是細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化的重要環(huán)節(jié)。卵巢癌和腎上腺癌中的C-gip，垂體腺癌和甲狀腺癌中的C-gsp以及甲狀腺和泌尿生殖道腫瘤中的N-ras都有基因點(diǎn)突變?；驍U(kuò)增腫瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞相比，往往可見一種染色體的改變，即腫瘤細(xì)胞染色體的某些部位有較強(qiáng)的均勻染色區(qū)(HSR)。HSR范圍內(nèi)某些基因拷貝數(shù)大大增加。如在結(jié)腸癌，小細(xì)胞肺癌和神經(jīng)母細(xì)胞瘤中都有HSR，其范圍內(nèi)與myc同源的序列擴(kuò)增100多倍，其轉(zhuǎn)錄的RNA也高與正常數(shù)十倍。另外鱗狀細(xì)胞癌中的C-erbB，胃癌，乳腺癌和卵巢癌中的C-neu，肺癌中的L-myc都有基因擴(kuò)增，提示C-onc拷貝的擴(kuò)增使其過度表達(dá)?；蛑嘏旁S多惡性腫瘤都有特定的染色體異常，即所謂標(biāo)記染色體，在這些腫瘤細(xì)胞中往往可見特有的染色體缺失或易位。根據(jù)C-onc的染色體定位，很容易了解染色體易位使C-onc的一部分序列位置轉(zhuǎn)移。在新的染色體環(huán)境中形成C-onc基因重排。在原來正常環(huán)境下不表達(dá)或表達(dá)很低的C-onc，在新位置新環(huán)境中就可被激活；此外，由于染色體易位時(shí)發(fā)生的斷裂點(diǎn)往往在某C-onc的中間，使斷裂點(diǎn)遠(yuǎn)端移位重排后在新位置與其它基因的部分形成融合基因。這種融合基因表達(dá)的蛋白質(zhì)產(chǎn)物與原來正常的產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)和功能就完全不同了。上述這種由于染色體易位所致的基因重排和融合基因形成可能是腫瘤發(fā)生的重要機(jī)理之一。支持以上假說的最典型的例子是Burkitt淋巴瘤。在Burkitt淋巴瘤細(xì)胞中最常見的標(biāo)記染色體是t(8;14),t(2;8),和t(8;22)染色體易位。這些易位的斷裂點(diǎn)使分別位于14q32的IgH,2p12的Ig?，22q11的Ig?和8q24的C-myc基因之間發(fā)生重排，使C-myc置于Ig重鏈或輕鏈基因啟動(dòng)子調(diào)控下被激活而使C-myc表達(dá)水平明顯提高。另一個(gè)典型例子是慢粒白血病中t(9;22)(9q34;22q11)染色體易位使位于9q34的C-abl基因轉(zhuǎn)移到第22對(duì)染色體上重排形成bcr-abl融合基因.使表達(dá)增高，蛋白質(zhì)產(chǎn)物由P145變成P210，其絡(luò)氨酸激酶活性大為增加?；蛑g的相互作用許多腫瘤細(xì)胞中往往有不止一種C-onc表達(dá)異常。提示腫瘤的形成可能并非單一C-onc的異常激活即可湊效，而需幾種C-onc改變的協(xié)同完成。很可能一種C-onc的異常激活觸發(fā)一系列其它C-onc的活化，從而達(dá)到最終致癌。例如對(duì)大鼠胚胎纖維母細(xì)胞為靶細(xì)胞的DNA轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中，單一的C-myc和C-ras分別都不能使之惡轉(zhuǎn)，而兩者同時(shí)加入靶細(xì)胞中即可產(chǎn)生惡性轉(zhuǎn)化灶。又如NIH3T3細(xì)胞靜止或被阻于G1時(shí)，C-myc表達(dá)很低，此時(shí)加入C-sis蛋白質(zhì)同源物PDGF，就使C-myc表達(dá)大增，提示C-sis蛋白質(zhì)產(chǎn)物會(huì)激活C-myc。兩者在惡性轉(zhuǎn)化中可有序貫的協(xié)同作用。6）基因表達(dá)的表觀遺傳學(xué)監(jiān)督（epigeneticsurveillance）機(jī)制的異常隨著分子生物學(xué)進(jìn)入后人類基因組時(shí)代，也即功能基因組時(shí)代，通過對(duì)全基因組范圍對(duì)基因表達(dá)過程的審視近年來形成了“表觀遺傳學(xué)”調(diào)控的概念。認(rèn)識(shí)到影響基因是否能正確有效表達(dá)不僅是基因本身的結(jié)構(gòu)序列的正確和完整等這些“有形的因素”，更有賴于基因周圍的環(huán)境，空間構(gòu)型及與其他分子間的相互作用等“無形的因素”，也即表觀遺傳學(xué)機(jī)理。目前認(rèn)識(shí)到的最重要的調(diào)控基因表達(dá)的表觀遺傳學(xué)機(jī)理包括DNA上特定部位的甲基化，染色質(zhì)中組蛋白的乙酰化和微小RNA介導(dǎo)的基因靜息（genesilencing）等。這些因素影響到基因在正確的時(shí)間和空間，恰當(dāng)?shù)乇磉_(dá)。如果這些機(jī)制發(fā)生異常和缺陷，難以實(shí)行表觀遺傳學(xué)的監(jiān)督也會(huì)使正常細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化概率大大增加，目前已在許多腫瘤細(xì)胞中獲得證據(jù)。以上所歸納的各種C-onc被異常激活的致癌機(jī)理都有各自的實(shí)驗(yàn)依據(jù)和證明，因此都在一定程度上較令人信服地闡明了腫瘤形成的可能機(jī)理。但是應(yīng)該記住這些假說都是建立在各自特定的實(shí)驗(yàn)體系上的，有其局限性，因此在分析某種特定腫瘤形成過程時(shí)，不應(yīng)以偏蓋全，將任何一種機(jī)理套用或推廣到所有的腫瘤。實(shí)際上許多腫瘤形成過程往往可通過各種機(jī)理共同實(shí)現(xiàn)。值得注意的是，C-onc的異常激活是指在基因表達(dá)產(chǎn)物的質(zhì)，量，穩(wěn)定性和表達(dá)的時(shí)空等多方面的改變，而某種腫瘤中C-onc表達(dá)的改變可能側(cè)重在一個(gè)方面或幾個(gè)方面。所以C-onc的異常激活本身就是非常復(fù)雜的。此外，除了C-onc以外，還有其它機(jī)理參與致癌過程，如下面要談到的抑癌基因。4、原癌基因的分類異?；罨脑┗虻闹掳┳饔檬峭ㄟ^其蛋白質(zhì)產(chǎn)物來實(shí)現(xiàn)的。根據(jù)其蛋白質(zhì)產(chǎn)物（癌蛋白）的活性，功能，分布可以將原癌基因大致加以分類。1，癌蛋白與生長(zhǎng)因子同源：如最早于1983年發(fā)現(xiàn)C-sis（22q11）的蛋白質(zhì)產(chǎn)物與血液中的PDGF同源，又如Kst-1/K-fgf產(chǎn)物與Angiogenesis生長(zhǎng)因子同源。這類癌蛋白位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，并分泌到細(xì)胞外?？赡芡ㄟ^自分泌的直接作用刺激細(xì)胞不斷增殖。2，癌蛋白與生長(zhǎng)因子受體同源或相同：如erb-B與EGFR,c-fms與CSF-MR,c-kit與SCFR,還有C-neu,c-trk,c-ret,c-sea等.此類原癌基因結(jié)構(gòu)都包括配體結(jié)合區(qū)，跨膜區(qū)和胞質(zhì)內(nèi)催化結(jié)構(gòu)區(qū)。催化活性多為tyrosine激酶.原癌基因的異?；罨辜?xì)胞表面受體增多，在無配體刺激下受體分子可發(fā)生二聚化并激活激酶而致癌。3,癌蛋白為細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的具蛋白激酶活性的信號(hào)轉(zhuǎn)遞物質(zhì)：這類基因包括C-src,C-raf-1,c-abl,c-mos,C-fes,pim-1,C-fgr,C-Ick,C-yes等.它們的蛋白質(zhì)產(chǎn)物都有胞質(zhì)內(nèi)蛋白激酶活性，大多數(shù)酶具有tyrosine激酶活性，其胞質(zhì)內(nèi)的催化結(jié)構(gòu)區(qū)相互同源。如C-src蛋白，其激酶的底物包括許多其它信號(hào)轉(zhuǎn)遞蛋白，控制細(xì)胞骨架構(gòu)型的蛋白和細(xì)胞粘附相關(guān)蛋白。少數(shù)酶為Serine/Threonine激酶活性，如C-raf-1。這類基因的突變等改變影響激酶的負(fù)調(diào)控區(qū)段，使其激酶活性持續(xù)強(qiáng)勁，不斷使底物磷酸化，將刺激信號(hào)轉(zhuǎn)遞到細(xì)胞中樞而致癌。癌蛋白為G蛋白，原癌基因是GTP-結(jié)合蛋白基因，如H-,K-N-ras,C-gip2,C-gsp。它們的蛋白產(chǎn)物與GTP結(jié)合而使GTP變成GDP的過程，將細(xì)胞膜表面配體的信號(hào)，如生長(zhǎng)因子，激素或神經(jīng)遞質(zhì)作用的信號(hào)轉(zhuǎn)遞到細(xì)胞內(nèi)的效應(yīng)器，如腺苷酸環(huán)化酶和磷酸酯酶C。GTP轉(zhuǎn)變成GDP的過程涉及與GAP（GTP活化蛋白）的結(jié)合。由點(diǎn)突變或擴(kuò)增而激活的H-，K-N-ras基因產(chǎn)物P21會(huì)改變GAP與GTP的結(jié)合以及GTP酶之活性，從而影響GTP變成GDP的過程，使所轉(zhuǎn)遞到細(xì)胞內(nèi)的效應(yīng)器的信號(hào)刺激大為延長(zhǎng)而致癌。5，最大一組原癌基因癌蛋白是轉(zhuǎn)錄調(diào)控物質(zhì)：如C-erbA,C-ets-1,C-ets-2,C-fos,C-jun,C-myc,C-myb,C-rel,C-ski,L-myc,N-myc,Hox11,lyt-10,Tal-1,E2A,PBX-1,Ttg-1,2,rhom-2.。這些基因都含有DNA結(jié)合和蛋白質(zhì)結(jié)合的功能結(jié)構(gòu)區(qū)，其蛋白質(zhì)能與DNA相結(jié)合或與其它蛋白質(zhì)結(jié)合成異二聚體再與DNA結(jié)合，調(diào)控下游靶基因的轉(zhuǎn)錄，在接受到細(xì)胞增殖或分化信號(hào)后這些基因的轉(zhuǎn)錄受到精確調(diào)控，從而對(duì)細(xì)胞增殖，分化等基本活動(dòng)發(fā)生影響。例如C-myc就是調(diào)控細(xì)胞增殖或分化狀況的基本基因，C-myc的異常高表達(dá)使細(xì)胞持續(xù)增殖而不能進(jìn)入終末分化。從而致癌。這些癌蛋白均分布于細(xì)胞核內(nèi)，被認(rèn)為本身就是轉(zhuǎn)錄因子。6,bcl-2是僅發(fā)現(xiàn)的調(diào)控細(xì)胞程序化死亡的癌基因，其蛋白質(zhì)作用于線粒體內(nèi)膜，能阻止細(xì)胞發(fā)生凋亡而死亡，延長(zhǎng)細(xì)胞生命期。雖然這本身并非致癌，但可為其它癌基因使細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化提供條件和增加機(jī)會(huì)°bcl-2蛋白的作用在基因剔除小鼠中表現(xiàn)為淋巴系統(tǒng)由廣泛凋亡所致的萎縮，而在濾泡性B淋巴瘤中bcl-2由于基因重排而被異常激活。5、抑癌基因及抑癌基因的致癌機(jī)理1）抑癌基因及其與腫瘤發(fā)生的相關(guān)性在癌基因的致癌作用以外，稍后又發(fā)現(xiàn)了另一類與腫瘤發(fā)生相關(guān)的基因一抑癌基因.抑癌基因在細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過程中的作用與癌基因的顯性正調(diào)控正好相反，起著顯性負(fù)調(diào)控的作用。即抑癌基因的存在抑制著惡性表型的出現(xiàn)，而抑癌基因中的一個(gè)等位位點(diǎn)丟失并不會(huì)出現(xiàn)惡性表型，必須抑癌基因的兩個(gè)等位位點(diǎn)都喪失功能，細(xì)胞才會(huì)惡性轉(zhuǎn)化。抑癌基因的發(fā)現(xiàn)和抑癌基因的概念最初是由腫瘤細(xì)胞與非腫瘤細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)中觀察到的現(xiàn)象所提示的。腫瘤細(xì)胞與非腫瘤細(xì)胞融合后的第一代子代細(xì)胞是含有四倍體的非腫瘤細(xì)胞，不表現(xiàn)惡性表型。但四倍體細(xì)胞并不穩(wěn)定。第一代子細(xì)胞分裂成下一代細(xì)胞過程中，來自非腫瘤細(xì)胞的正常染色體會(huì)逐漸丟失。隨著正常染色體的逐步丟失，惡性表型逐步出現(xiàn)。對(duì)此過程的仔細(xì)分析表明某一正常染色體的存在可以抑制某種惡性表型出現(xiàn)。再經(jīng)過更仔細(xì)地檢測(cè)可將抑制某種惡性表型的功能進(jìn)一步落實(shí)到一條正常染色體的某一區(qū)帶，這樣就逐漸認(rèn)識(shí)到此區(qū)帶內(nèi)存在著能抑制惡性表型的抑癌基因。近年發(fā)明出雜合性丟失（LOH）的檢測(cè)方法來發(fā)現(xiàn)新的抑癌基因。其原理是利用疑為缺失區(qū)段周邊或區(qū)段內(nèi)的微衛(wèi)星標(biāo)記設(shè)計(jì)多對(duì)引物對(duì)待檢腫瘤組織細(xì)胞和正常對(duì)照細(xì)胞基因組DNA先分別進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增，再將產(chǎn)物分別用各微衛(wèi)星標(biāo)記的單對(duì)引物進(jìn)行PCR，電泳顯示PCR產(chǎn)物后，分別比較各微衛(wèi)星標(biāo)記的單對(duì)引物擴(kuò)增出等位基因位點(diǎn)的大小和產(chǎn)物的多少。如所用單對(duì)引物能擴(kuò)增出相同產(chǎn)量但大小不同的PCR產(chǎn)物，便能區(qū)分出等位基因位點(diǎn)上的差異，即證實(shí)其雜合性。反之，則為純合性。通過反復(fù)仔細(xì)比較腫瘤細(xì)胞和正常細(xì)胞之間某一位點(diǎn)的雜合狀態(tài)的變化，分析出是否有基因丟失。目前發(fā)現(xiàn)人類幾乎所有常見的腫瘤都伴有一種或多種抑癌基因丟失或突變，抑癌基因的單位點(diǎn)丟失或失活形成遺傳性腫瘤高發(fā)家族，但其個(gè)體還并非就發(fā)生惡性腫瘤。至今約十余種抑癌基因肯定能抑制特定的人類腫瘤。這些抑癌基因包括APC，DCC（與大腸癌有關(guān)），NF1，NF2（與神經(jīng)纖維瘤，腦膜瘤有關(guān)），P53（與多種實(shí)體瘤有關(guān)），Rb（與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤有關(guān)），RET（與甲狀腺癌有關(guān)），VHL（與腎癌有關(guān)），WT-1（與腎母細(xì)胞瘤有關(guān)）等。其中某些已被確認(rèn)是多種不同腫瘤發(fā)生的共同原因，而另一些只在特定腫瘤發(fā)生的過程中起作用。認(rèn)識(shí)抑癌基因在腫瘤發(fā)生過程中的重要性為對(duì)腫瘤的防治研究打開了新領(lǐng)域。今后幾年中，新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因還將不斷增多。2）幾種抑癌基因簡(jiǎn)介Rb基因Rb基因（13q14）是第一個(gè)發(fā)現(xiàn)并被徹底研究的抑癌基因。首先發(fā)現(xiàn)它與兒童視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)生相關(guān)。故稱為視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤易感基因。視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的發(fā)病有明顯的兩種流行病學(xué)態(tài)勢(shì)，在某些家族中非常高發(fā)而在普通人群中也有散發(fā)的病例。這提示這種腫瘤具有遺傳傾向。對(duì)家族性患兒的染色體檢查發(fā)現(xiàn)在其瘤細(xì)胞和其他正常體細(xì)胞的第13對(duì)染色體的一條上長(zhǎng)臂有一小段丟失，表明這一染色體異常是由父母的一方遺傳的，且似乎為顯性遺傳。丟失的與視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤發(fā)病密切相關(guān)的基因稱為Rb基因°Rb基因單位點(diǎn)丟失或失活形成遺傳性視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤高發(fā)家族。然而，Rb遺傳的性狀并非腫瘤本身，而是發(fā)生腫瘤的高危（或易感）狀態(tài)。事實(shí)上在具染色體異常的家族中約10%個(gè)體一生中并不發(fā)病，而散發(fā)病例的正常體細(xì)胞中也并無染色體丟失。1971年美國德州大學(xué)的AlfredKnudson發(fā)現(xiàn)視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤患者Rb的兩個(gè)等位基因位點(diǎn)都丟失或突變了。提示必須喪失功能才會(huì)發(fā)生視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤，這就解釋了遺傳性易感家族中已有一個(gè)Rb拷貝丟失，使另一拷貝一旦再丟失或突變因而發(fā)生視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤的概率大大高于Rb兩個(gè)等位基因都正常的普通人群。Rb的兩個(gè)等位基因位點(diǎn)都突變還多見于骨肉瘤，乳腺癌，前列腺癌，膀胱癌，肺癌等。如將具正常功能的Rb（野生型）導(dǎo)入腫瘤細(xì)胞足以抑制惡性表型，說明Rb基因的失活在腫瘤發(fā)生機(jī)理中起的重要作用。Rb基因通過其蛋白R(shí)b-1的磷酸化調(diào)控細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞周期，從而控制細(xì)胞的生長(zhǎng)。P53基因P53（17p13.1）可能是所有人類基因組成分中對(duì)腫瘤發(fā)生起最大作用的基因。早先P53曾被認(rèn)為是顯性癌基因。自1990年發(fā)現(xiàn)它的缺失會(huì)遺傳給子代形成遺傳性腫瘤高發(fā)家族，即Li-Fraumanisyndrom。此家族個(gè)體高發(fā)肉瘤，乳腺癌，大腸癌和白血病。因?yàn)榍∪鏡b，再獲得另一個(gè)P53等位基因突變而完全喪失功能即發(fā)生惡性腫瘤。約60-70%人類惡性腫瘤中發(fā)現(xiàn)P53的兩個(gè)等位位點(diǎn)有突變或缺失，90%突變發(fā)生在DNA結(jié)合區(qū)域的120-290密碼子，絕大多數(shù)突變是無意突變。P53基因突變的腫瘤往往惡性度較高，較易侵襲周圍組織或向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，因而預(yù)后較差。至今已從各中惡性腫瘤標(biāo)本中檢測(cè)出逾千種P53的突變。很明顯，P53基因功能的完全失活是腫瘤細(xì)胞進(jìn)展到完全惡性的重要一步，而只要氨基酸序列很小的變化就會(huì)靈敏地影響其正常功能。野生型P53能抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)。它通過P21基因抑制Cdk對(duì)細(xì)胞在細(xì)胞周期中由G進(jìn)入S期起監(jiān)控作用，使DNA受放射損傷的細(xì)胞在修復(fù)前不能進(jìn)入、期復(fù)制。P53并能直接刺激DNA的修復(fù)過程。P53還可促使細(xì)胞凋亡。野生型P53通過其下游蛋白質(zhì)產(chǎn)物P21WAF1/C下調(diào)BCL-2而上調(diào)BAX，促進(jìn)細(xì)胞凋亡過程。因而向丟失P53雙等位基因的腫瘤細(xì)胞中導(dǎo)入野生型P53就會(huì)使腫瘤細(xì)胞凋亡。大量的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，包括基因剔除動(dòng)物模型說明P53并不影響調(diào)控正常的細(xì)胞生長(zhǎng)，分裂和分化的過程，去P53動(dòng)物雖可正常出生，但很快出現(xiàn)染色體改變并產(chǎn)生腫瘤。最近發(fā)現(xiàn)被P53調(diào)控的下游基因還有許多，如MDM2,thrombospondinI,IGF-BP3,周期素G和GADD45等，都與腫瘤形成的各種機(jī)制相關(guān)，P53處于細(xì)胞周期調(diào)控的中心位置。因此，人們把P53基因看作保護(hù)人類基因組穩(wěn)定的衛(wèi)士。在不少腫瘤細(xì)胞中P53和Rb基因都有突變而失活，提示在腫瘤形成過程中兩者可有協(xié)同作用。WT1基因腎母細(xì)胞瘤是主要累及泌尿生殖道的兒童實(shí)體瘤，往往伴有幾種遺傳性綜合征。因而具有家族遺傳高發(fā)的特征。近年從家族患者細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)并克隆了腎母細(xì)胞瘤易感基因WT1(11p13)，并認(rèn)定為是又一種抑癌基因。腫瘤細(xì)胞中WT1的突變表明WT1蛋白功能的失活可致兒童腎母細(xì)胞瘤。WT1蛋白為含有四個(gè)鋅指結(jié)構(gòu)域的鋅指蛋白而起轉(zhuǎn)錄因子的作用。由于WT1基因中在第五外顯子及第三和第四鋅指結(jié)構(gòu)域之間各有一個(gè)變更剪切位點(diǎn)，其蛋白質(zhì)可有四種同源異構(gòu)體，+KTS/+17aa型為最多的一種，它們均能與DNA結(jié)合調(diào)控下游靶基因的轉(zhuǎn)錄，如抑制PDGFA鏈，IGF-II,EGFR和WT1基因自身的轉(zhuǎn)錄。但某些情況也可促進(jìn)轉(zhuǎn)錄。這可能因?yàn)閃T1調(diào)控下游靶基因轉(zhuǎn)錄過程中還有其它因子參與，因而WT1抑制下游靶基因轉(zhuǎn)錄或促進(jìn)轉(zhuǎn)錄，還要看與其它因子的相互作用而定。WT1在內(nèi)胚頁來源的細(xì)胞中有低表達(dá)，在某些腫瘤細(xì)胞中發(fā)生突變且表達(dá)增高，如腎母細(xì)胞瘤，白血病等，但多為腫瘤細(xì)胞株，其致癌機(jī)理不詳。但從許多實(shí)驗(yàn)結(jié)果看，腫瘤形成可與WT1突變有關(guān)，不過，WT1突變本身尚不足以發(fā)生腫瘤。DCC基因和其它抑癌基因DCC(18q21),APC(5q21)。近年發(fā)現(xiàn)大腸癌或大腸腺瘤樣息肉增生癥與一些基因改變相關(guān)。其中70%以上患者有DCC(18q21),APC兩種抑癌基因的突變。大腸腺瘤樣息肉增生癥是一種家族遺傳病，患病個(gè)體腸璧上皮細(xì)胞長(zhǎng)出大量癌前息肉，如不切除，息肉內(nèi)細(xì)胞極易轉(zhuǎn)變成完全惡性細(xì)胞?；颊呒?xì)胞第五對(duì)染色體有一小段缺失，后將該段定位為抑癌基因APC。由遺傳具有一個(gè)APC等位基因丟失者，如第二個(gè)等位基因再失活就會(huì)失去保護(hù)而發(fā)生大腸腺瘤樣息肉增生。不過息肉細(xì)胞進(jìn)一步變成侵襲性和轉(zhuǎn)移能力很強(qiáng)的惡性細(xì)胞可能還需發(fā)生外加的基因突變，如P53。婦女乳腺癌的約5%也具有明顯的家族性高發(fā)特征，這種易感性可從某基因異常的遺傳來追蹤。1994年確認(rèn)BRCA1(17q21)和BRCA2(13q12-13)是與遺傳性高發(fā)乳腺癌相關(guān)的基因，它們與卵巢癌的發(fā)生也緊密相關(guān)。BRCA1和BRCA2基因產(chǎn)物多肽含鋅指結(jié)構(gòu)，提示它們編碼的蛋白是以轉(zhuǎn)錄因子起作用的。BRCA1和BRCA2一般也被認(rèn)為是抑癌基因，因?yàn)槿橄侔└甙l(fā)家族遺傳有一個(gè)等位基因缺陷或缺失，但必須另一等位基因也失活才會(huì)真正發(fā)生腫瘤。與其它抑癌基因不同的是在散發(fā)的乳腺癌中，這兩個(gè)基因似乎均無突變，原因尚不清楚。其它還有NF-1(17q11.2).失活可致神經(jīng)纖維增生癥，以及抑制細(xì)胞周期進(jìn)程的CDI.如P15,P16,P27和具去磷酸酶活性的PTEN都被認(rèn)為起抑癌基因的作用。6、惡性腫瘤中抑癌基因改變的分子流行病學(xué)從上述抑癌基因致癌的機(jī)理得知任何影響人類基因組穩(wěn)定性而增加基因突變機(jī)率的因素都會(huì)增加腫瘤的易感程度，或稱高發(fā)程度。人類細(xì)胞DNA復(fù)制過程中可能整合錯(cuò)誤的核苷酸，但旋即會(huì)被選擇性地從新生DNA鏈中移除，從而防止子代細(xì)胞出現(xiàn)基因突變，這機(jī)理稱為錯(cuò)配修復(fù)(Mismatchrepair).錯(cuò)配修復(fù)過程由專司識(shí)別錯(cuò)配核苷酸，移除錯(cuò)配核苷酸和正確互補(bǔ)核苷酸取代的幾種蛋白質(zhì)共同完成。若是其中任何蛋白質(zhì)基因有缺陷，細(xì)胞出現(xiàn)基因突變機(jī)率就會(huì)增大，惡變的危險(xiǎn)也就大為增加。錯(cuò)配修復(fù)基因缺陷與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)的首例證據(jù)是1993年在遺傳性非息肉性大腸癌(Hereditarynonpolyposiscoloncancer,HNPCC)患者中發(fā)現(xiàn)的。與HNPCC相關(guān)的缺陷基因在普通人群中占0.5%,而在大腸癌中占15%?；颊吣[瘤細(xì)胞與自身正常細(xì)胞之間存在著微衛(wèi)星序列長(zhǎng)度的差異，表明微衛(wèi)星序列復(fù)制過程中的錯(cuò)誤可造成新生DNA鏈含有額外多加的核苷酸或與模板互補(bǔ)片段之間位置的錯(cuò)位，在新生DNA鏈上多出一個(gè)襻。而這襻本應(yīng)被功能正常的錯(cuò)配修復(fù)基因識(shí)別切除的。這些證據(jù)提示錯(cuò)配修復(fù)系統(tǒng)的缺陷與此遺傳性腫瘤高發(fā)有關(guān)。體外實(shí)驗(yàn)證明HNPCC患者細(xì)胞的任一錯(cuò)配修復(fù)基因都有突變或缺失，使之不能及時(shí)切除修復(fù)單鏈DNA的錯(cuò)配襻。這類細(xì)胞將更易積累起繼發(fā)的基因突變，包括抑癌基因的突變。至于為何錯(cuò)配修復(fù)基因缺陷特別使HNPCC易感尚不得而知。目前所知的錯(cuò)配修復(fù)基因主要有hMSH2,hMLH1,hPMS1和hPMS2等。為了識(shí)別和發(fā)現(xiàn)環(huán)境致癌因素和腫瘤高危程度，以便及早采取防治對(duì)策，對(duì)腫瘤形成危險(xiǎn)程度的判定傳統(tǒng)上主要依靠經(jīng)典的流行病學(xué)，潛在致癌劑對(duì)動(dòng)物模型的慢性致瘤生物學(xué)檢測(cè)以及基于這些數(shù)據(jù)所建立的數(shù)學(xué)模型。但因?yàn)橹掳┑牟±磉^程極為復(fù)雜，不同致癌劑代謝和DNA修復(fù)能力各不相同，各種種系動(dòng)物基因組穩(wěn)定性以及對(duì)腫瘤的遺傳易感程度也有很大差異，所以腫瘤發(fā)生危險(xiǎn)程度的分析極其困難。當(dāng)今由于上述對(duì)腫瘤分子機(jī)理的深入認(rèn)識(shí)和檢測(cè)手段的進(jìn)步，人們已逐漸將傳統(tǒng)的流行病學(xué)與分子生物學(xué)和體內(nèi)或體外的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ脱芯糠椒ńY(jié)合起來對(duì)人群或個(gè)體做腫瘤易感程度分析。從基因與環(huán)境的相互作用這一根本層面考慮問題。此處環(huán)境主要指外部環(huán)境，但也要考慮細(xì)胞微環(huán)境內(nèi)源性致癌劑，例如慢性感染長(zhǎng)期產(chǎn)生的自由基積聚。力圖應(yīng)用這種分子流行病學(xué)的檢測(cè)手段改進(jìn)對(duì)腫瘤發(fā)生危險(xiǎn)程度的分析和預(yù)測(cè)。基于對(duì)基因組穩(wěn)定性和抑癌基因突變與腫瘤發(fā)生相關(guān)性的認(rèn)識(shí)，最近有學(xué)者根據(jù)控制細(xì)胞增殖和保持細(xì)胞基因組穩(wěn)定的功能提出了守門基因(gatekeepergene)和看護(hù)基因(caretakergene)的概念。前者如大腸上皮細(xì)胞的APC和-catenin基因，腎上皮細(xì)胞的Rb基因，神經(jīng)許旺氏細(xì)胞的NF1基因和腎細(xì)胞的VHL(3q25)基因，它們的突變失活被認(rèn)為直接與腫瘤細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過程的啟動(dòng)相關(guān)。后者如錯(cuò)配修復(fù)基因hMSH2,hMLH1和乳腺細(xì)胞的BRCA1和BRCA2基因，它們一般只保持細(xì)胞基因組穩(wěn)定性而與細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過程的啟動(dòng)不直接相關(guān)。分子流行病學(xué)的研究表明胚原細(xì)胞具看護(hù)基因遺傳性突變的個(gè)體與具有守門基因遺傳性突變的個(gè)體相比，其腫瘤發(fā)生的危險(xiǎn)性較小。因?yàn)榫哂锌醋o(hù)基因突變的個(gè)體尚需三個(gè)以上其它體細(xì)胞突變才會(huì)啟動(dòng)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化過程，而具有守門基因突變的個(gè)體只需一個(gè)外加體細(xì)胞突變就成。顯然，各種腫瘤發(fā)生過程中，相關(guān)抑癌基因突變的發(fā)生具有一定譜系分布態(tài)勢(shì)。所發(fā)現(xiàn)的不同抑癌基因突變不但代表致癌劑與不同個(gè)體細(xì)胞DNA，以及DNA修復(fù)系統(tǒng)的相互作用，還反映了這些抑癌基因突變賦予癌前細(xì)胞或癌細(xì)胞在生長(zhǎng)和生存上的選擇性優(yōu)勢(shì)。最常見的抑癌基因突變是無義突變，缺失和外源序列插入，造成基因蛋白質(zhì)產(chǎn)物的缺如或失活。所以，這類是失功能突變。誤義突變則最常見于P53,造成抑癌基因失活而同時(shí)獲得癌基因活性，因?yàn)楦淖兞说腜53蛋白對(duì)下游基因轉(zhuǎn)錄的調(diào)控作用也改變了，所以這種P53雙重功能突變?cè)谌祟惸[瘤中發(fā)生率最高。7、其它腫瘤惡性表型相關(guān)基因腫瘤細(xì)胞的其它重要惡性表型還包括不同程度高于正常細(xì)胞的對(duì)周圍組織的侵襲和向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移能力，包括遷徙和粘附錨著能力；以及抵抗和耐受不利環(huán)境壓力，保護(hù)自身的能力。這些惡性表型的分子機(jī)理雖然不一定是腫瘤發(fā)生的直接原因，但與腫瘤發(fā)生密切相關(guān)。特別是這些惡性表型都使腫瘤細(xì)胞變得更為頑劣，嚴(yán)重影響對(duì)腫瘤的臨床療效和預(yù)后，所以有必要著重研究它們發(fā)生的分子機(jī)理。下面簡(jiǎn)單介紹與腫瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移相關(guān)的基因和分子機(jī)理以及腫瘤細(xì)胞對(duì)細(xì)胞毒性藥物耐藥的分子機(jī)理。腫瘤細(xì)胞向鄰近組織的侵襲和向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的過程是細(xì)胞表面與周圍環(huán)境相互作用的多步驟的復(fù)雜過程。腫瘤細(xì)胞必須打破腫瘤團(tuán)塊的完整性，脫離腫瘤細(xì)胞群體，突破細(xì)胞外基質(zhì)網(wǎng)絡(luò)或間質(zhì)細(xì)胞的包圍，穿透基底膜進(jìn)入血管或淋巴管從而參加循環(huán)。在循環(huán)中腫瘤細(xì)胞必須保持存活并遷移到遠(yuǎn)處器官。在新環(huán)境中，腫瘤細(xì)胞需要能粘附錨著于小血管或淋巴管內(nèi)皮并穿透游走出內(nèi)皮層到達(dá)組織內(nèi)的新址，重新增殖形成新的腫瘤細(xì)胞群體。顯然，這一過程還與腫瘤團(tuán)塊內(nèi)的新生毛細(xì)血管網(wǎng)形成是否活躍有關(guān)。因?yàn)橹挥忻?xì)血管網(wǎng)不斷生成并深入腫瘤團(tuán)塊內(nèi)，腫瘤細(xì)胞才能進(jìn)入血管或淋巴管。各個(gè)步驟都需要各種相應(yīng)的細(xì)胞表面分子，如某些受體及其配體的作用，分泌特殊功能的降解酶，如蛋白水解酶以及刺激細(xì)胞移動(dòng)速度的細(xì)胞因子等。因而每個(gè)步驟都受多種相關(guān)基因的影響和調(diào)控，這些基因主要有基質(zhì)金屬蛋白酶家族(MMP)，包括膠原酶(collagenases)，溶基質(zhì)酶(Stromelysins)和明膠酶(gelatinases)，尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)，鈣蛋白基因；某些癌基因和抑癌基因，如myc,H-ras,erbB-2,P53等；以及一些抑制腫瘤轉(zhuǎn)移的基因，如nm23,TIMP，CD44/CD44R和WDNM2基因等。腫瘤細(xì)胞耐藥實(shí)際是在正常細(xì)胞自我保護(hù)的機(jī)制上形成的，涉及細(xì)胞毒性藥物與腫瘤細(xì)胞相互作用過程中的一系列步驟，這些步驟包括藥物進(jìn)入細(xì)胞，在細(xì)胞內(nèi)的轉(zhuǎn)運(yùn)，分布，代謝，靶向作用，以及細(xì)胞受損后自我修復(fù)和細(xì)胞對(duì)損傷感知而啟動(dòng)定向凋亡的能力等。各步驟的運(yùn)行都由各自不同的酶參與。因而編碼這些酶的基因改變往往影響這些環(huán)節(jié)，從而構(gòu)成人類腫瘤細(xì)胞臨床耐藥的分子機(jī)理。例如最多被認(rèn)識(shí)的多藥耐藥基因MDR-1(7q21)和多藥耐藥相關(guān)蛋白基因MRP(16p13)分別編碼兩種位于細(xì)胞膜上的ATP能量依賴性泵分子，它們能在ATP驅(qū)動(dòng)下將進(jìn)入細(xì)胞的各種化學(xué)結(jié)構(gòu)的細(xì)胞毒性藥物泵出細(xì)胞外，使胞內(nèi)藥物濃度不能達(dá)到效應(yīng)濃度從而保護(hù)細(xì)胞免受破壞。谷胱甘肽轉(zhuǎn)硫酶(GST)同功酶涉及藥物的體內(nèi)解毒和排出。又如，許多藥物作用的細(xì)胞致死靶分子(如拓?fù)涿?的結(jié)構(gòu)可以發(fā)生改變，從而躲避和逃脫藥物的攻擊，拓?fù)涿高€影響細(xì)胞DNA修復(fù)能力而使細(xì)胞獲得耐藥表型。最后，藥物殺滅腫瘤細(xì)胞很大程度上有賴于啟動(dòng)細(xì)胞的凋亡，因而編碼傳導(dǎo)細(xì)胞凋亡信號(hào)通路上的許多基因，如正性調(diào)控的C-myc,P53,Bax,Bcl-土，ICE,Fas/APO-1基因和負(fù)性調(diào)控的Bcl-2,Bcl-XL基因等都可影響腫瘤細(xì)胞對(duì)細(xì)胞毒性藥物的敏感性。此外，應(yīng)激狀態(tài)下保護(hù)細(xì)胞的熱震蕩蛋白(HSP)在使細(xì)胞耐受溫度的同時(shí)也使細(xì)胞交叉耐藥。8、從分子水平認(rèn)識(shí)惡性腫瘤的發(fā)生過程為普查，預(yù)防和診治提供理論依據(jù)以上分別從不同方面，即正(促使細(xì)胞惡轉(zhuǎn))反(抑制細(xì)胞惡轉(zhuǎn))兩方面以及其它相關(guān)方面介紹了導(dǎo)致惡性腫瘤發(fā)生的各種可能的機(jī)理。但在介紹時(shí)都是以單一因素與某些腫瘤的惡性表型相關(guān)，由此出發(fā)提出假說的。在實(shí)際腫瘤發(fā)生的過程中，絕非如此簡(jiǎn)單。一般惡性腫瘤發(fā)生都須經(jīng)過一個(gè)較長(zhǎng)的過程，有所謂“二次打擊”學(xué)說，大致可分為起始(Initiation),積累(Accumulation)和促進(jìn)(Promotion)三個(gè)階段，最終造成腫瘤細(xì)胞的克隆性生長(zhǎng)。在這過程中，上述三方面的因素，即抑癌基因失活，原癌基因C-onc被異常激活以及細(xì)胞凋亡機(jī)理通道的紊亂的共同作用，最終形成了具有充分惡性表型的腫瘤細(xì)胞。抑癌基因單等位位點(diǎn)的失活往往使細(xì)胞失去自我保護(hù)機(jī)制而易于惡性轉(zhuǎn)化，細(xì)胞凋亡受抑使細(xì)胞不死化，增加了細(xì)胞受外因進(jìn)一步作用的機(jī)會(huì)，加上外因的作用使原癌基因C-onc被異常激活，最終導(dǎo)致細(xì)胞的惡性轉(zhuǎn)化。此外，不應(yīng)忘記，機(jī)體與惡性細(xì)胞的相互作用，主要是免疫監(jiān)控系統(tǒng)會(huì)及時(shí)發(fā)現(xiàn)并消滅惡性轉(zhuǎn)化細(xì)胞，所以腫瘤細(xì)胞必須逃脫機(jī)體免疫監(jiān)控系統(tǒng)才得以存活和立足。近來，有人認(rèn)為在惡性腫瘤發(fā)生的過程中，有眾多具有如此不同功能的基因發(fā)生改變，僅僅將它們分成癌基因和抑癌基因兩種類型是很不夠的，因?yàn)檫@不能恰當(dāng)?shù)刂该髅總€(gè)具體基因在致癌過程中所起的作用。為此建議，將這許多基因分成兩大功能范疇，一是控制細(xì)胞內(nèi)調(diào)節(jié)圈的，另一類是影響細(xì)胞表面和細(xì)胞外功能的。前者又分成四種：1，在細(xì)胞對(duì)外界生長(zhǎng)因子反應(yīng)過程中起作用的，如編碼生長(zhǎng)因子，生長(zhǎng)因子受體，傳遞信號(hào)的蛋白激酶和調(diào)控下游基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄因子的基因。2,涉及DNA復(fù)制和修復(fù)的基因。3,調(diào)控細(xì)胞周期的基因。4,決定細(xì)胞命運(yùn)，如分化，衰老或凋亡的基因。這樣，許多癌基因就屬于第一種，許多抑癌基因?qū)儆诘谌N。后一大功能范疇主要指影響細(xì)胞與細(xì)胞外間質(zhì)或相鄰細(xì)胞相互作用的基因，包括各種細(xì)胞表面蛋白質(zhì)，粘附分子，細(xì)胞外蛋白酶和血管生成因子。這種分類法也不是絕對(duì)的，某些基因的功能是跨種類或跨范疇的，也可視細(xì)胞的不同而發(fā)揮不同范疇的功能。最近，分屬前一功能范疇的第1和第3類的蛋白激酶(PKC)和周期素D1基因改變也被發(fā)現(xiàn)與惡性腫瘤發(fā)生過程相關(guān)。隨著當(dāng)前人類基因組研究完成了全基因組的測(cè)序而進(jìn)入功能基因組時(shí)代，為我們研究惡性腫瘤的發(fā)生提供了一個(gè)在全基因組范圍內(nèi)篩查(Genome-widescreen)的舞臺(tái)。不同人群的個(gè)體對(duì)惡性腫瘤的易感性不同是由于基因的遺傳多態(tài)性所致。單核苷酸多態(tài)性SNP(singlenucleotidepolymorphism)是人類長(zhǎng)期進(jìn)化過程中環(huán)境選擇的結(jié)果，作為功能基因組學(xué)的重要內(nèi)容，是疾病遺傳易感性的分子基礎(chǔ)，已成為第三代分子遺傳標(biāo)記，也是研究惡性腫瘤遺傳易感性的重要策略。SNP具有標(biāo)記密度高，穩(wěn)定，易于檢測(cè)的優(yōu)勢(shì)，發(fā)生在重要基因結(jié)構(gòu)中的SNP導(dǎo)致個(gè)體對(duì)環(huán)境因素特別敏感，因此SNP與腫瘤的遺傳易感性，腫瘤的預(yù)后和對(duì)化療藥物的敏感性都有密切的關(guān)系，揭示SNP與腫瘤發(fā)生發(fā)展的關(guān)系是目前國際研究的前沿，以SNP為基本研究策略正在建立有效的腫瘤預(yù)警系統(tǒng)新方法。認(rèn)識(shí)惡性腫瘤發(fā)生的分子機(jī)理不但有重大的理論意義，更顯示了巨大的實(shí)踐意義。已從單純的實(shí)驗(yàn)室研究進(jìn)駐到病房患者的床前（fromthebenchtothebedside）,為我們攻克惡性腫瘤堡壘提供了各種強(qiáng)有力的武器。應(yīng)用分子流行病學(xué)的調(diào)查分析方法可以發(fā)現(xiàn)腫瘤高發(fā)人群并對(duì)這一群體中的個(gè)人提供腫瘤發(fā)生危險(xiǎn)性的咨詢，使之及早警惕防范，勤做檢查，及時(shí)治療而免于危及生命。應(yīng)用極其靈敏的分子生物學(xué)方法可對(duì)腫瘤患者做出早期診斷，深入鑒別腫瘤類型和亞型，監(jiān)控治療效果和病情轉(zhuǎn)歸，預(yù)測(cè)疾病預(yù)后和復(fù)發(fā)的可能性，大大提高診斷水平。在治療方面，對(duì)惡性腫瘤發(fā)生分子機(jī)理的認(rèn)識(shí)更打開了極為廣闊的應(yīng)用前景。隨著認(rèn)識(shí)的不斷擴(kuò)展和深入，越來越多的只在腫瘤細(xì)胞特有的基因及其蛋白質(zhì)改變被發(fā)現(xiàn)，為我們?cè)O(shè)計(jì)新的治療方案和策略提供了靶分子。針對(duì)這些靶分子設(shè)計(jì)的新藥物，制劑和方法將具有高度的特異性，只對(duì)腫瘤細(xì)胞起作用而不損害正常細(xì)胞，因而顯著提高療效。這種所謂基因治療為最后征服惡性腫瘤提供了希望的曙光。20世紀(jì)后期近30年以來癌癥發(fā)病一直呈上升的趨勢(shì)，急&據(jù)世界衛(wèi)生組織（WHO）報(bào)告，1990年全球癌癥新發(fā)病例數(shù)約807萬，比1975年的517萬增加了37.4%。而1997年全球的癌癥死亡數(shù)約620萬，并且按目前的趨勢(shì)預(yù)測(cè)，至2020年隨著世界人口達(dá)80億，將有2000萬新發(fā)癌癥病例，其中死亡人數(shù)將達(dá)1200萬，且其中絕大部分將發(fā)生在發(fā)展中國家。根據(jù)1973~1975及1990~1992兩次全國范圍內(nèi)的死因調(diào)查，近20年期間，惡性腫瘤在死因中的構(gòu)成比，也自12.6%升至17.9%。惡性腫瘤的死亡率在此近20年期間呈上升趨勢(shì)，共增長(zhǎng)了29.4%，消除年齡構(gòu)成不同的影響，增長(zhǎng)率為11.6%。而且在此期間，我國主要惡性腫瘤的瘤譜也有變化，宮頸癌、鼻咽癌及食管癌都呈下降趨勢(shì)，其中，以宮頸癌死亡率的下降最為顯著，下降了64個(gè)百分點(diǎn)。而其他多種癌癥均呈上升趨勢(shì)，以肺癌、肺癌和胃癌為最甚，其增加的死亡率分別依次為147.4、62.4、及28.8個(gè)百分點(diǎn)。胃癌、肝癌、肺癌及食管癌仍是死因中最主要的4種惡性腫瘤，占全部惡性腫瘤死亡的74.3%。由于我國幅員廣闊，各地生活環(huán)境及習(xí)慣均有差異，因此各種腫瘤的發(fā)病及死亡在各不同地區(qū)及城鄉(xiāng)之間均不盡相同，具有各自不同的流行特點(diǎn)，試以我國死亡率最高的胃癌為例，20年來城市中胃癌的死亡率下降4.79%，而農(nóng)村中的胃癌死亡率上升了4.99%（這或許是將賁門癌劃歸胃癌所致）。再以與食物及營養(yǎng)明顯有關(guān)的乳腺癌及結(jié)腸癌為例，從調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，近20年間城市和農(nóng)村女性乳腺癌的調(diào)整死亡率分別下降了5.2%和12.2%，結(jié)、直腸癌的調(diào)整死亡率，在城市中僅上升3.6%，而鄉(xiāng)村下降了5.2%。但據(jù)上海及北京兩大城市的統(tǒng)計(jì)資料，近10余年來，結(jié)腸癌及乳腺癌的發(fā)病率逐年均以2.4%的速度較快增長(zhǎng)，結(jié)腸癌已成為居男性第四位的常見腫瘤。由于近年來診斷水平有較大的提高，而該兩腫瘤的預(yù)后又較好，療效有較大提高，所以僅根據(jù)死亡率已不能正確反映我國惡性腫瘤的動(dòng)態(tài)變化，而應(yīng)有更多的省市實(shí)施腫瘤發(fā)病登記制度，盼醫(yī)療保險(xiǎn)制度的推行，將有助于此一工作的開展。21世紀(jì)我國癌癥的發(fā)病趨勢(shì)如何？下降抑或上升？可以預(yù)言，在今后的二、三十年內(nèi)，將是發(fā)病及死亡率繼續(xù)上升的趨勢(shì)。原因是多方面的：人口老齡化：我國近半世紀(jì)來，隨著急性傳染病的被控制，人口平均壽命也自1949年前的35歲增至1957年的57歲，以后逐年有所增長(zhǎng)，至1997年已達(dá)70.8歲（男68.7,女73.0）。癌癥的發(fā)病及死亡也隨著人口的老齡化及人們的不良生活習(xí)慣及環(huán)境的污染而有所增加，其死亡率占疾病死亡譜的順位，也已自50年前的第9位，升至1957年的第7位，及90年代以來的第2位，甚至在某些城市已居首位。吸煙導(dǎo)致癌癥發(fā)病上升現(xiàn)今約1/3癌癥的發(fā)生與吸煙有關(guān)，美國男性1950年時(shí)已達(dá)到每日吸煙10支的暴露量，而中國男性在1952年時(shí)每日僅平均吸煙1支，直至1992年才達(dá)到每日10支的暴露量。另有估計(jì)，35~69歲因吸煙引起的死亡比，美國1950年為12%,1990年升至33%，而中國則在1990年時(shí)為12%，要到2030年才達(dá)到33%，因此中國人群不論是吸煙的暴露量，或是因吸煙導(dǎo)致的總死亡比，均較美國晚40年。以90年代初我國與美、俄、法等男性肺癌死亡率（1/10萬）相比較，分別依次為24.0、57.2、72.5、47.3，中國顯然較低。由于吸煙對(duì)肺癌人群歸因危險(xiǎn)度為75%（男），尤其80年代以后農(nóng)村男性吸煙量急驟增加，甚至某些地區(qū)已超過城市，更以50歲以下的各年齡組為甚，考慮到吸煙者的比例及吸煙人群的暴露量，對(duì)全人口肺癌的延遲效應(yīng)，以肺癌為主與吸煙有關(guān)的癌癥將在今后30年內(nèi)會(huì)大幅度增加。生活方式城市化的影響隨著我國經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們的生活方式及膳食結(jié)構(gòu)也均在發(fā)生很大的變化，尤以城市為甚。根據(jù)北京市的調(diào)查，糧、薯、豆類在食物結(jié)構(gòu)中的比例，已自1962年的66.3%降至1992年的34.9%，而動(dòng)物及油脂類，在此30年期間也相應(yīng)的有明顯增加，自2.8%升至23.1%，脂肪攝入量則自31.3克升至87.2克，提供熱量的比例也由原14.9%增達(dá)31.5%，而全國平均的脂肪攝入量為58.3克，遠(yuǎn)較北京為低。城市與農(nóng)村不同的乳癌及結(jié)腸癌發(fā)病率，以及城市中此兩種癌癥發(fā)病的急驟上升顯然均與此有關(guān)。我國乳癌目前的年死亡率（1/10萬）僅3.5，而美、德均已達(dá)33.7及44.2，遠(yuǎn)較我國為高，隨著農(nóng)村城市化的趨勢(shì)，乳癌的死亡率也將會(huì)增加。工業(yè)化進(jìn)程導(dǎo)致瘤譜改變我們?cè)賹⑽覈行园┌Y的死亡率（1/10萬）與工業(yè)化國家作一比較，試以1992年為例，我國為134.9，日、美、俄、法、德分別為234.2、221.5、238.6、307.6及273.4,均明顯的高于我國。因此，隨著我國工業(yè)化的進(jìn)程，如不采取措施，癌癥的死亡率也將會(huì)隨之而上升。而且還應(yīng)指出的是目前我國癌癥的瘤譜與西方國家有很大不同，但也已出現(xiàn)隨著生活方式、飲食結(jié)構(gòu)以及生存環(huán)境的演變，瘤譜也正在出現(xiàn)逐漸西方化的變化?？梢灶A(yù)測(cè)在今后二、三十年期間，胃癌及肝癌的發(fā)病率雖會(huì)緩慢下降，但將仍維持較高水平，食管癌及宮頸癌的發(fā)病率將會(huì)逐漸下降，而且幅度會(huì)較大。肺癌的發(fā)病率在全國范圍內(nèi)將繼續(xù)急劇上升，在近期內(nèi)將成為我國發(fā)病率及死亡率最高的惡性腫瘤。而大城市及沿海經(jīng)濟(jì)發(fā)達(dá)地區(qū)的乳癌及結(jié)腸癌也會(huì)有大幅度增加，成為該地區(qū)的主要腫瘤。其他如胰腺癌及前列腺癌的發(fā)病率也將會(huì)出現(xiàn)上升的趨勢(shì)。目前臨床常用抗腫瘤藥物有60多種，由于療效不夠突出，毒副反應(yīng)較大，一直希望有新一代更好的藥品問世。提高抗腫瘤藥物的靶向性，高度選擇地打擊腫瘤細(xì)胞而不傷害正常組織。這是當(dāng)今迫切需要解決的科學(xué)命題。近年來此方面出現(xiàn)了突破性的進(jìn)展，令人鼓舞。從抗腫瘤藥物靶向治療的角度看，對(duì)靶向有不同層次的理解，把藥物定向地輸入到腫瘤發(fā)生的部位，臨床上巳采用的介入治療，就是將抗癌藥物直接注入腫瘤發(fā)生的靶器官，以消除癌塊，這是器官水平的靶向治療，亦稱為被動(dòng)靶向治療。第二個(gè)層次是利用腫瘤細(xì)胞攝取或代謝等生物學(xué)上的特點(diǎn)，將藥物定位到要?dú)哪[瘤細(xì)胞上，即細(xì)胞靶向，它帶有主動(dòng)定向的性質(zhì)。如利用瘤細(xì)胞抗原性質(zhì)的差異，制備單克隆抗體(單抗)與毒素、核素或抗癌物的偶聯(lián)物，定向地積聚在腫瘤細(xì)胞上，進(jìn)行殺傷。第三個(gè)層次是分子靶向，是利用瘤細(xì)胞與正常細(xì)胞之間分子生物學(xué)上的差異，包括基因、酶、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞周期、細(xì)胞融合、吞飲及代謝上的不同特性，將抗癌藥定位到靶細(xì)胞的生物大分子或小分子上，抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)增殖，最后使其死亡。上述三個(gè)層次的靶向治療，近年均有長(zhǎng)足的進(jìn)步。除靶向研究以外，各類藥物的藥理，藥代及臨床應(yīng)用等方面亦有不少新的發(fā)現(xiàn)。本文擬對(duì)一些重要的進(jìn)展加以介紹，以供參考。1微管抑制劑臨床上常用的微管抑制劑，有長(zhǎng)春堿類藥、秋水仙類藥。近年常用的紫杉醇(Taxol)和紫杉特爾(Taxotere)亦作用于癌細(xì)胞絲狀分裂時(shí)的微管上，它們的作用位點(diǎn)與前述二類藥不同，主要作用于伊微管蛋白的N-末端31位氨基酸和217-231氨基酸殘基上，使具有可逆變化的微管不能解聚，阻止絲狀分裂，最后導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡。臨床上用Taxol和Taxotere治療乳腺癌和卵巢癌，取得了良好的效果，由于它們的作用靶點(diǎn)有所不同，在療效和毒性表現(xiàn)上亦有區(qū)別。2拓?fù)涿窱(TopoI)和拓?fù)涿窱I(TopoII)的抑制劑二十世紀(jì)八十年代發(fā)現(xiàn)喜樹堿類藥能選擇地作用于TopoI，此酶對(duì)DNA空間構(gòu)型、復(fù)制、重組、轉(zhuǎn)錄及有絲分裂等過程具有十分重要的功能。喜樹堿(CPT)、羥基喜樹堿(HCPT)、喜樹堿-11(CPT-11，Irinotecan)、拓?fù)涮乜?Topotecan，TPT)、魯比特康(Rubitecan)、高喜樹堿(Homocamptothecin)等均能與TopoI及DNA形成三重復(fù)合物，使DNA單鏈斷裂及雙鏈斷裂，誘導(dǎo)癌細(xì)胞凋亡。它們與DNA結(jié)合的位點(diǎn)牽涉到幾個(gè)關(guān)鍵性的氨基酸即Tyr723、Arg488、Arg590、Lys532、His652，它們是TopoI的活性位點(diǎn)，也即是藥物的作用靶點(diǎn)。喜樹堿類藥的抗癌譜較廣，對(duì)人腸癌、胃癌、卵巢癌、肺癌等均有明顯療效。新近發(fā)現(xiàn)的魯比特康對(duì)晚期胰腺癌亦有作用，以每天口服1.5mg/m2劑量連用5天的方案治療，巳證明有效，引起人們重視。我國學(xué)者應(yīng)用HCPT與其他化療藥物組成新的聯(lián)合化療方案，使療效提高，值得加強(qiáng)此方面的研究。上海藥物所研究創(chuàng)制的沙爾威辛(Salvicine)是從藥用植物南鼠尾草中分離提取的單體，再經(jīng)化學(xué)修飾后的新抗癌物質(zhì)，為二萜醌類化合物，具有對(duì)拓?fù)涿窱I的抑制作用。目前正在臨床試用中。3單抗藥物1997年?1998年美國FDA批準(zhǔn)Rituxan(Mabthera)和Herceptin二種單抗藥物進(jìn)入臨床試用，引起很大轟動(dòng)。Rituxan是針對(duì)B淋巴細(xì)胞CD20抗原的單克隆抗體，能誘導(dǎo)淋巴瘤細(xì)胞凋亡，對(duì)非何杰金淋巴瘤的功效顯著，對(duì)化療無效和復(fù)發(fā)的病例能取得40%以上的有效率。Herceptin是針對(duì)HER-2/neu基因過度表達(dá)的癌細(xì)胞的單抗藥，對(duì)乳腺癌的治療效果較好，與化療藥合用能增強(qiáng)療效，使患者生存期延長(zhǎng)。2000年Mylotarg問世，它是針對(duì)CD33的單抗與抗生素分子結(jié)合，對(duì)急性髓細(xì)胞白血病有效。2001年歐州出現(xiàn)的單抗新藥Campth-IH是針對(duì)慢性淋巴白血病CD52抗原的抗體藥物，對(duì)慢淋的療效較好。2002-2003年又相繼研究成功Zevalin和Bexxer二種單抗新藥，它們分別與放射性核素釔90(Y90)和碘131(I131)結(jié)合，利用單抗和放射線對(duì)癌細(xì)胞的雙重殺傷，對(duì)B細(xì)胞非何杰金淋巴病有更好的治療效果。數(shù)年來單抗藥物的不斷出現(xiàn)，給腫瘤病人的治療增加了不少新的強(qiáng)有力的手段。4反義藥物此類藥是利用基因工程技術(shù)制備反義寡核苷酸，其長(zhǎng)度一般為13?25個(gè)核苷酸，有特異的順序，與過度表達(dá)的癌基因或突變基因結(jié)合，抑制其表達(dá)，以影響腫瘤的生長(zhǎng)增殖達(dá)到治療的目的?，F(xiàn)在研究的反義藥物是與mRNA雜交，影響核糖體的裝配，抑制mRNA的功能，進(jìn)而影響蛋白的轉(zhuǎn)譯過程。RNaseH酶能識(shí)別mRNA——寡核苷酸復(fù)合體，使復(fù)合體解離，再與其他RNA結(jié)合，繼續(xù)影響蛋白轉(zhuǎn)譯及拼接等功能，反義藥物對(duì)RNaseH酶亦產(chǎn)生影響。美國FDA于1998年批準(zhǔn)的第一個(gè)反義藥物Formivirsen，對(duì)巨細(xì)胞病毒感染的視網(wǎng)膜炎有效，能抑制病毒的復(fù)制。新藥G3139能與Bcl2蛋白的mRNA結(jié)合，Bcl2在黑色素瘤和非B細(xì)胞惡性淋巴瘤中高表達(dá)。G3139靜脈或皮下注射(0.6?6.5mg/Kg)合用dacarbazine治療黑色素瘤患者14例，使平均存活期延長(zhǎng)到12個(gè)月以上，比對(duì)照組病人6?9個(gè)月有明顯增加，使瘤中Bcl2蛋白表達(dá)下降。將G3139與多西紫杉醇(docetaxel)合用治療乳腺癌，與米托蒽醌合用治療前列腺癌的研究仍在繼續(xù)進(jìn)行。應(yīng)用反義寡核苷酸ISIS3521治療低分化淋巴瘤，每日靜脈注射0.5?3mg/Kg，連續(xù)3周停藥1周，顯示出一定苗頭，其作用點(diǎn)是針對(duì)蛋白激酶PKCa。將此藥與卡鉑或紫杉醇合用，治療24例非小細(xì)胞肺癌，能使患者中位生存期顯著延長(zhǎng)，副反應(yīng)較輕，出現(xiàn)輕度的中性粒細(xì)胞和血小板減少。在臨床上試用的新藥還有ISIS5132、MG98和GEM231等。反義寡核苷酸的作用靶點(diǎn)有多種，目前較重視針對(duì)過度表達(dá)的Survivin(能抗凋亡)和熱震蕩蛋白H70、H27(在腫瘤中過度表達(dá))。其他方面的進(jìn)展仍很多，應(yīng)加以重視。5抑制血管生成的藥物腫瘤生長(zhǎng)必須有足夠的血液供應(yīng)，新的血管生成必不可少。在癌發(fā)展和轉(zhuǎn)移的過程中新的血管生長(zhǎng)是必要的條件。新的血管生成涉及到多種環(huán)節(jié)，例如在血管內(nèi)皮基底膜降解時(shí)金屬蛋白酶活性增加。血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，重建新生血管及形成新的基底膜時(shí)有許多生長(zhǎng)調(diào)節(jié)因子參與，包括纖維生成因子(FGF)、血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)、血小板源性生長(zhǎng)因子(PDGF)、血管生成素(Angiogenin)及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF)。它們能促進(jìn)新生血管的生成，使DNA合成增加。另有一些調(diào)節(jié)因子能抑制血管內(nèi)皮的生長(zhǎng)，如血管抑素、內(nèi)皮抑素、干擾素a和干擾素y等。針對(duì)上述不同的環(huán)節(jié)及有關(guān)靶點(diǎn)，巳研發(fā)出多種血管生成抑制劑，例如對(duì)金屬蛋白酶有抑制作用的Marimastat，抑制血管內(nèi)皮生長(zhǎng)的內(nèi)皮抑素Endostatin，抑制整合蛋白識(shí)別的Vitaxin抗體及非特異性抑制劑反應(yīng)停等。此類新藥進(jìn)入臨床試用的巳有數(shù)十種，對(duì)多種腫瘤及腫瘤轉(zhuǎn)移顯示出治療效果，它們與常用抗癌藥合用時(shí)能提高療效。但其確切療效仍需臨床驗(yàn)證的最后報(bào)告。2003年獲準(zhǔn)生產(chǎn)的Avastin(Bevacizumab)是針對(duì)VEGF的單抗，與CPT—II及5FU/LV合用治療晚期結(jié)直腸癌，有效率可達(dá)45%，引起人們高度重視。由于抗血管生成藥物屬于細(xì)胞抑制型藥物，與細(xì)胞毒藥物不同，設(shè)計(jì)抗血管生成藥物的臨床試驗(yàn)時(shí)應(yīng)注意區(qū)別于細(xì)胞毒類藥物。大部分抗血管生成藥物不具備劑量依賴性，其療效顯現(xiàn)較慢，所以使用接近MTD的劑量并無必要，應(yīng)該使用小劑量。不宜簡(jiǎn)單地用腫瘤大小變化作為決定能否進(jìn)入田期臨床的標(biāo)準(zhǔn)，而用存活時(shí)間和病情穩(wěn)定時(shí)間作為評(píng)價(jià)其療效的指標(biāo)可能更合理。很多學(xué)者建議應(yīng)該盡快建立專門針對(duì)血管生成抑制劑的療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，也就是以其各自相應(yīng)的作用機(jī)制相關(guān)的生物學(xué)效應(yīng)作為療效指標(biāo)的重要組成部分。例如，對(duì)于MMP抑制劑，可以檢測(cè)病人體液中MMP活性。也可以取病人的血液樣本到體外相應(yīng)的血管生成模型上檢測(cè)有關(guān)指標(biāo)，應(yīng)用MRI等技術(shù)監(jiān)測(cè)治療過程中病人腫瘤內(nèi)血管結(jié)構(gòu)、血流的變化等等。II期臨床還涉及到病例選擇的問題。對(duì)于細(xì)胞毒藥物往往選擇腫瘤塊較大的病人，以有利于療效評(píng)價(jià)，但對(duì)于抗血管生成藥物，選擇的病例的瘤體積不應(yīng)太大，或者先經(jīng)其他療法使瘤體積減小后再進(jìn)行這類藥物的臨床試驗(yàn)。另外，有不少學(xué)者認(rèn)為在有些情況下抗血管生成藥物可以由I期臨床試驗(yàn)直接進(jìn)入111期。6抗信號(hào)藥抗信號(hào)藥物是干擾癌變的分子演變過程，包括影響信號(hào)蛋白的突變及與配基受體結(jié)合異常及有關(guān)酶功能的變化。它們應(yīng)較作用于癌變后繼發(fā)事件的藥物，更具選擇性和更有效。近年來，研究蛋白酪氨酸激酶(PTK)、蛋白激酶(PKC)及法尼基轉(zhuǎn)移酶(ftase)的抑制劑，取得了突破性的進(jìn)展。發(fā)現(xiàn)格列衛(wèi)(Gleevec，ST1571)對(duì)慢粒白血病有非常顯著的療效，緩解率在90%以上。它能抑制細(xì)胞膜表面上皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)酪氨酸激酶的活性，能作用于PDGF-R、Abl-有關(guān)的酪氨酸激酶，抑制ATP催化作用，影響信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，使癌細(xì)胞凋亡。在慢粒白血病的費(fèi)城(ph)染色體中存在Bcr-Abl基因異常，Gleevec對(duì)此有選擇性作用，認(rèn)為是其主要的分子靶點(diǎn)，它對(duì)胃腸道基質(zhì)肉瘤也有效(20%?54%)。由于EGFR在許多腫瘤中呈高表達(dá)，EGFR(erB-1)受體在膜外有配體結(jié)合區(qū)，膜內(nèi)有酪氨酸激酶區(qū)，受體與配體結(jié)合后，激發(fā)信號(hào)轉(zhuǎn)遞，會(huì)產(chǎn)生影響腫瘤細(xì)胞殖增、周期運(yùn)行及誘導(dǎo)凋亡等的作用。巳證明一些小分子EGFR-TK抑制劑如Irea(ZD-1839)對(duì)前列腺癌及晚期乳癌有效，為ZENICACO研發(fā)，亦抑制Her-2neu的高表達(dá)，與Herceptin合用能提高