第24章.病毒感染的檢查方法和防治原則課件

第二十四章病毒感染的檢查方法與防治原則第一節(jié)病毒感染的檢查方法（一）標(biāo)本的采集與送檢采集急性期標(biāo)本根據(jù)感染性質(zhì)取不同的標(biāo)本標(biāo)本置于病毒轉(zhuǎn)運(yùn)液使用抗生素以抑制標(biāo)本中細(xì)菌或真菌等生長繁殖冷藏保存、快速送檢采集雙份血清（二）病毒的分離培養(yǎng)動(dòng)物接種：尚無敏感細(xì)胞隱性感染、免疫抵抗力、接種量雞胚培養(yǎng)：雞胚對(duì)多種病毒敏感絨毛尿囊膜接種：天花病毒、痘病毒、人類皰疹病毒尿囊腔接種：流感病毒、腮腺炎病毒羊膜腔接種：流感病毒卵黃囊接種：嗜神經(jīng)病毒細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)原代細(xì)胞有限細(xì)胞系連續(xù)(或無限)細(xì)胞系懸浮型細(xì)胞貼附型細(xì)胞二倍體細(xì)胞異倍體/非整倍體細(xì)胞細(xì)胞病變紅細(xì)胞吸附病毒干擾作用細(xì)胞代謝的改變Vero細(xì)胞，EV71MRC-5細(xì)胞，CoxA16Hep-2細(xì)胞，腺病毒病毒形態(tài)學(xué)檢查病毒抗原檢測免疫學(xué)標(biāo)記技術(shù)蛋白印跡技術(shù)血凝抑制試驗(yàn)病毒核酸檢測病毒形態(tài)學(xué)檢查病毒抗原檢測病毒核酸檢測核酸擴(kuò)增技術(shù)核酸雜交技術(shù)基因芯片技術(shù)基因測序技術(shù)TaqMan探針法CYBRGreen染料法病毒形態(tài)學(xué)檢查病毒抗原檢測病毒核酸檢測核酸擴(kuò)增技術(shù)核酸雜交技術(shù)基因芯片技術(shù)基因測序技術(shù)（四）病毒數(shù)量與感染性測定50%組織細(xì)胞感染量(TCID50)空斑形成試驗(yàn)(plaqueformationtest)有感染性的病毒經(jīng)適當(dāng)稀釋后接種于單層細(xì)胞，經(jīng)一定時(shí)間培養(yǎng)后，覆蓋薄層未凝固的瓊脂于細(xì)胞上，待其凝固后繼續(xù)培養(yǎng)，由于單個(gè)病毒的復(fù)制增殖使局部單層細(xì)胞脫落，此即空斑，經(jīng)染色后空斑可用肉眼觀察空斑形成單位(plaqueformationunit,PFU)計(jì)算空斑數(shù)可推算出樣品中活病毒的數(shù)量(pfu/ml)紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)/血凝試驗(yàn)（五）病毒感染的血清學(xué)診斷中和試驗(yàn)(neutralizationtest)血凝抑制試驗(yàn)(hemagglutinationinhibitiontest,HI)ELISA、IFA第二節(jié)病毒感染的特異性預(yù)防（一）人工主動(dòng)免疫常用生物制品滅活疫苗減毒活疫苗亞單位疫苗基因工程疫苗重組載體疫苗核酸疫苗（二）人工被動(dòng)免疫常用生物制品免疫球蛋白血清丙種球蛋白特異性免疫球蛋白細(xì)胞免疫制劑細(xì)胞因子第三節(jié)病毒感染的治療抗病毒化學(xué)制劑核苷類藥物：碘苷/皰疹凈、阿昔洛韋/無環(huán)鳥苷、阿糖腺苷、齊多夫定、雙脫氧肌苷、雙脫氧胞苷、dTC、拉米夫定、利巴韋林/病毒唑抑制病毒基因復(fù)制模擬核苷成分摻入病毒基因組競爭病毒復(fù)制酶抑制病毒基因轉(zhuǎn)錄非核苷類反轉(zhuǎn)錄酶抑制劑：柰韋拉平、吡啶酮蛋白酶抑制劑：沙奎那韋、茚地那韋、利托那韋其他：金剛烷胺、甲基金剛烷胺；磷甲酸鈉干擾素和干擾素誘生劑IFN干擾素誘生劑多聚肌苷酸和多聚胞啶酸