肺部感染的實驗室檢查演示教學(xué)課件

肺部感染的實驗室檢查第二軍醫(yī)大學(xué)長征醫(yī)院全軍臨床免疫研究所仲人前1肺部感染的實驗室檢查第二軍醫(yī)大學(xué)長征醫(yī)院仲人前1肺部感染的臨床特點

肺部感染的發(fā)生過程

肺部感染實驗室檢查

實驗室檢查質(zhì)量保證報告提綱2肺部感染的臨床特點

肺部感染的發(fā)生過程

肺部感染實驗室檢查

肺部感染的臨床特點肺部感染臨床癥狀相似，以咳嗽、咳痰為主感染的病原體繁多，不同年齡，不同季節(jié)，不同環(huán)境，不同基礎(chǔ)疾病感染的病原體不同針對不同的病原體應(yīng)采取針對性的治療方法3肺部感染的臨床特點肺部感染臨床癥狀相似，以咳嗽、咳痰為主3肺部感染的發(fā)生過程遺傳因素環(huán)境因素免疫因素肺部感染病原體4肺部感染的發(fā)生過程遺傳因素環(huán)境因素免疫因素肺部感染病原體4病原體感染的易感基因AdrianVSHill,

PhilTransRSocB(2012)367,840–8495病原體感染的易感基因AdrianVSHill,Phil肺部感染的環(huán)境因素生物燃料吸煙空氣污染濫用抗生素免疫抑制劑氣候變化RobertJ.Laumbach,JAllergyClinImmunol.2012January;129(1):3–13JoonYoungSong.JKoreanMedSci2013;28:4-156肺部感染的環(huán)境因素生物燃料RobertJ.LaumbaEffectofcigarettesmokeoninflammationJ.Lee,JDentRes.2012;91(2):142–1497Effectofcigarettesmokeoni肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithelialcellsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:7913928肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithel肺部感染的免疫因素EpithelialcellproducedchemokinesandcytokinesagainstbacteriainfectionsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:7913929肺部感染的免疫因素Epithelialcellprodu肺部感染常見病原體類型細(xì)菌性肺炎如肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷白桿菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌、埃希大腸桿菌、結(jié)核桿菌等真菌性肺炎如白念珠菌、曲霉菌、放射菌等病毒性肺炎如冠狀病毒、腺病毒、流感病毒、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒等非典型性肺炎如軍團菌、支原體和衣原體等其它病原體所致的肺炎如立克次體、弓形蟲、原蟲、寄生蟲如肺包蟲、肺吸蟲、肺血吸蟲）等10肺部感染常見病原體類型細(xì)菌性肺炎如肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈英國肺炎病原體病原體占肺炎病因%臨床表現(xiàn)肺炎鏈球菌50社區(qū)、既往健康肺炎支原體6同上流感病毒A5同上流感嗜血桿菌5基礎(chǔ)肺?。篊OPD肺炎衣原體5社區(qū)獲得性肺炎鸚鵡熱衣原體3接觸鳥類金黃色葡萄球菌2兒童、毒品、流感病毒相關(guān)軍團菌2公共場所爆發(fā)、散發(fā)、地方流行伯納特立克次體1屠宰場和皮革工人銅綠<1囊性纖維化卡氏肺孢子菌<1AIDS、淋巴瘤、白血病、使用細(xì)胞毒藥物及糖皮質(zhì)激素衣氏放線菌星型諾卡菌CMV、煙曲霉、厭氧菌<1吸入性肺炎、酗酒、手術(shù)后未分離到病原菌2011英國肺炎病原體病原體占肺炎病因%臨床表現(xiàn)肺炎鏈球菌50社區(qū)、肺部感染的實驗室檢查1、根據(jù)檢驗常規(guī)初步判定是否感染2、根據(jù)感染部位推測可能的病原體3、根據(jù)感染人群推測可能的病原體4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測方法12肺部感染的實驗室檢查1、根據(jù)檢驗常規(guī)初步判定是否感染12肺部感染的實驗室檢查1、根據(jù)檢驗常規(guī)初步判定是否感染血常規(guī)CRPPCT內(nèi)毒素G試驗，GM試驗13肺部感染的實驗室檢查1、根據(jù)檢驗常規(guī)初步判定是否感染13血常規(guī)檢查14血常規(guī)檢查14CRP（CreactiveProtein）與肺炎鏈球菌C多糖體反應(yīng)是一種重要的急性時相反應(yīng)蛋白血清CRP由肝臟合成,半衰期19小時IL-1、IL-6、TNF是其最重要的調(diào)節(jié)因子15CRP（CreactiveProtein）與肺炎鏈球菌DiagnosticaccuracyofCRPincombinationwithIL-6andIL-8NoraHofer,Neonatology2012;102:25–3616DiagnosticaccuracyofCRPinPCT（procalcitonin）Procalcitonin（降鈣素原）由細(xì)菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)產(chǎn)生升高：嚴(yán)重細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭不升高：自身免疫、過敏和病毒感染不升高：局部有限的細(xì)菌感染、輕微感染和慢性炎癥17PCT（procalcitonin）ProcalcitoPCTastoGuideAntibioticTherapyin

AdultPatientswithRespiratoryTractInfectionsDavidN.Gilbert,ClinicalInfectiousDiseases2011;52(S4):S346–S35018PCTastoGuideAntibioticTheG試驗G試驗檢測的是真菌的細(xì)胞壁成分---(1,3)-β-D-葡聚糖，人體的吞噬細(xì)胞吞噬真菌后，能持續(xù)釋放該物質(zhì)，使血液及體液中含量增高（淺部真菌感染無類似現(xiàn)象）。

1-3-β-D-葡聚糖可特異性激活鱟（Limulus）變形細(xì)胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故稱G試驗。適用于除隱球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等）外的所有深部真菌感染的早期診斷，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能確定菌種。以下情況可出現(xiàn)假陽性：（1）使用纖維素膜進行血透，標(biāo)本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料；（2）靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）鏈球菌血癥；（4）操作者處理標(biāo)本時存在污染。（5）另外，使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進入血液等也可能造成假陽性，食用菌類，如蘑菇等食物可以導(dǎo)致假陽性。19G試驗G試驗檢測的是真菌的細(xì)胞壁成分---(1,3)-β-DGM試驗GM試驗檢測的是半乳甘露聚糖（galactomannan)，曲霉菌特有的細(xì)胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖殘基，菌絲生長時，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原。主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷，GM釋放量與菌量成正比，可以反映感染程度。連續(xù)檢測GM可作為治療療效的監(jiān)測。在造血干細(xì)胞移植患者中的診斷敏感性高。以下情況可出現(xiàn)假陽性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生兒和兒童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情況可出現(xiàn)假陰性：（1）釋放入血循環(huán)中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持續(xù)存在而是會很快清除；（2）以前使用了抗真菌藥物；（3）病情不嚴(yán)重；（4）非粒細(xì)胞缺乏的患者。20GM試驗GM試驗檢測的是半乳甘露聚糖（galactomann病原學(xué)診斷2、根據(jù)感染部位推測可能的病原體感染類型病原菌類別咽炎/扁桃體炎A群C群和G群鏈球菌★，壞死梭桿菌，淋病奈瑟菌，肺炎衣原體，白喉棒狀桿菌，潰瘍棒狀桿菌，肺炎支原體，溶血性隱秘桿菌鼻竇炎肺炎鏈球菌★，流感嗜血桿菌★，金黃色葡萄球菌，卡他莫拉菌，混合厭氧菌和嗜氧菌感染，A群鏈球菌，肺炎嗜披衣菌，綠膿桿菌及其他革蘭陰性桿菌會厭炎化膿性鏈球菌★，肺炎鏈球菌★，金黃色葡萄球菌，流感嗜血桿菌支氣管炎百日咳鮑特菌★，肺炎支原體，肺炎衣原體，卡他莫拉菌，流感嗜血桿菌，銅綠假單胞菌，肺炎鏈球菌膿胸金黃色葡萄球菌★，肺炎鏈球菌★，A群鏈球菌，脆弱擬桿菌，肺炎克雷伯菌及其它腸桿菌菌，放線菌，奴卡氏菌，結(jié)核分枝桿菌及其它菌種肺炎肺炎鏈球菌★，肺炎克雷伯菌★，大腸埃希菌★，銅綠假單胞菌★，鮑曼不動桿菌★，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌★，卡氏肺孢子菌★，流感嗜血桿菌，卡他莫拉菌，軍團菌，肺炎支原體，沙眼衣原體，肺炎衣原體，金黃色葡萄球菌，嗜麥芽窄食單胞菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，曲霉菌4．肺部特殊病原體感染：鼠疫耶爾森菌，放線菌，炭疽桿菌，球孢子菌，組織胞漿菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隱球菌，洋蔥伯克霍氏菌，馬紅球菌，立克次體21病原學(xué)診斷2、根據(jù)感染部位推測可能的病原體感染類型病原菌類別病原學(xué)診斷3、根據(jù)感染人群推測可能的病原體社區(qū)獲得性感染：肺炎鏈球菌★，流感嗜血桿菌，卡他莫拉菌，軍團菌，肺炎支原體，沙眼衣原體，肺炎衣原體，金黃色葡萄球菌醫(yī)院獲得性感染：肺炎克雷伯菌★，大腸埃希菌★，銅綠假單胞菌★，鮑曼不動桿菌★，嗜麥芽窄食單胞菌，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌★免疫缺陷患者感染：卡氏肺孢子菌★，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，曲霉菌肺部特殊病原體感染：鼠疫耶爾森菌，放線菌，炭疽桿菌，球孢子菌，組織胞漿菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隱球菌，洋蔥伯克霍氏菌，馬紅球菌，立克次體22病原學(xué)診斷3、根據(jù)感染人群推測可能的病原體22CAP、HAP的發(fā)病時間和病原體構(gòu)成48h≤HAP早期<5天肺炎鏈球菌流感嗜血桿菌HAP中期≥5天HAP晚期MSSAorMRSA腸桿菌屬肺炎克雷伯菌,大腸桿菌綠膿桿菌不動桿菌屬嗜麥芽窄食假單胞菌35101520CAP<48h主要致病菌多為非多重耐藥菌，預(yù)后好肺炎支原體G＋菌為主,G－菌比例較早發(fā)性HAP低20入院時間（天）多為多重耐藥菌株ATS.AmJRespirCritCareMed.2005;171.388–41嗜肺軍團菌23CAP、HAP的發(fā)病時間和病原體構(gòu)成48h≤HAP早期<5病原學(xué)診斷4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測方法培養(yǎng)： 細(xì)菌、真菌染色鏡檢： 結(jié)核分枝桿菌、真菌、肺孢子菌病原體鑒定： 生化鑒定、質(zhì)譜分析（布魯克、梅里埃）抗原檢測： 肺炎鏈球菌（尿抗原）、軍團菌（尿抗菌）、 病毒、支原體、衣原體、真菌抗體檢測： 立克次體、軍團菌PCR： 所有病原菌，尤其是難培養(yǎng)的細(xì)菌和病毒細(xì)胞因子檢測：INF-γ24病原學(xué)診斷4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測方法24培養(yǎng)基的選擇增菌培養(yǎng)基：肉湯、堿性蛋白胨水基礎(chǔ)培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂、M-H瓊脂選擇培養(yǎng)基：麥康凱瓊脂、SS瓊脂鑒別培養(yǎng)基：膽汁七葉苷瓊脂厭氧培養(yǎng)基：厭氧血平板接種方法肉湯增菌：血液、腦脊液等蛋白胨水增菌：糞便（弧菌）平板劃線接種：其他標(biāo)本（四區(qū)劃線法）25培養(yǎng)基的選擇接種方法25染色鏡檢直接鏡檢：濕片法或懸滴法，觀察細(xì)菌動力革蘭染色鏡檢：陽性（紫色）、陰性（紅色）抗酸染色鏡檢：抗酸菌（紅色）其它染色鏡檢：a.莢膜

b.鞭毛

c.異染顆粒26染色鏡檢直接鏡檢：濕片法或懸滴法，觀察細(xì)菌動力26流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌27流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌27六胺銀染色（肺孢子菌）PAS染色（肺諾卡菌）肺活檢組織抗酸桿菌28六胺銀染色（肺孢子菌）PAS染色（肺諾卡菌）肺活檢組織抗酸桿生化鑒定利用細(xì)菌可以分解、發(fā)酵不同的底物： 葡萄糖、乳糖等糖類，氨基酸、鹽類等產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物的特性： 酸性、堿性、產(chǎn)氣等等29生化鑒定利用細(xì)菌可以分解、發(fā)酵不同的底物：29質(zhì)譜與傳統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀的區(qū)別質(zhì)譜儀傳統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀鑒定方法MALDI-TOF傳統(tǒng)微生物形態(tài)學(xué)、細(xì)菌生理生化特點操作流程直接細(xì)菌涂布標(biāo)本板上，加上基質(zhì)，上機細(xì)菌涂片、手工生化、比濁、上機鑒定板種類一種五種鑒定時間數(shù)分鐘12-24h菌種常見細(xì)菌、分支桿菌、絲狀真菌常見細(xì)菌成本25元55元30質(zhì)譜與傳統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀的區(qū)別質(zhì)譜儀傳統(tǒng)細(xì)菌鑒定儀鑒定方法MAL抗原抗體檢測31抗原抗體檢測31分子診斷定性PCR

實時熒光定量PCR

多指標(biāo)檢測平臺32分子診斷定性PCR32呼吸道感染常見病原體及檢測方法肺炎病原體分子診斷平臺BhatN，UseandEvaluationofMolecularDiagnosticsforPneumoniaEtiologyStudies.ClinicalInfectiousDiseases2012;54(S2):S153–833呼吸道感染常見病原體及檢測方法肺炎病原體分子診斷平臺Bhat肺炎病原體分子診斷平臺的條件可滿足條件必要條件可檢測到變異的目標(biāo)病原體可檢測到目標(biāo)病原體簡易使用、流程和空間具有高分析敏感性和特異性報告時間快速具有高臨床敏感性和特異性整個處理過程包含核算抽提能處理不同呼吸道樣本小樣本量也可檢測明確樣本采集要求有效期長且室溫保存內(nèi)含質(zhì)控品及質(zhì)控程序可提供定量或半定量結(jié)果提供必要的維護經(jīng)認(rèn)證機構(gòu)注冊具有可接收的發(fā)展時間框架有合理價格34肺炎病原體分子診斷平臺的條件可滿足條件必要條件可檢測到變異的Antigen-specificTcellsLiuHY,HepatobiliaryPancreatDisInt2006;5(1):129-13235Antigen-specificTcellsLiuHY3636實驗室檢查的質(zhì)量保證分析前影響因素分析中影響因素分析后影響因素37實驗室檢查的質(zhì)量保證分析前影響因素分析中影響因素分Reviewoflaboratoryerrors38Reviewoflaboratoryerrors38BoniniP，Errorsinlaboratorymedicine.ClinChem2002;48(5):69139BoniniP，Errorsinlaboratory溝通與合作非常重要正確的臨床思維是指導(dǎo)選擇適當(dāng)?shù)呐R床檢驗方法的前提尋找病原體源頭所在、多方協(xié)作、傾力尋找“對癥”治療沒有最好的藥物，只有最正確的選擇臨床療效是最高的肯定和獎勵病原菌越來越刁鉆，每一個患者都是一本書，我們從中學(xué)到知識，獲得樂趣40溝通與合作非常重要正確的臨床思維40謝謝!41謝謝!41肺部感染的實驗室檢查第二軍醫(yī)大學(xué)長征醫(yī)院全軍臨床免疫研究所仲人前42肺部感染的實驗室檢查第二軍醫(yī)大學(xué)長征醫(yī)院仲人前1肺部感染的臨床特點

肺部感染的發(fā)生過程

肺部感染實驗室檢查

實驗室檢查質(zhì)量保證報告提綱43肺部感染的臨床特點

肺部感染的發(fā)生過程

肺部感染實驗室檢查

肺部感染的臨床特點肺部感染臨床癥狀相似，以咳嗽、咳痰為主感染的病原體繁多，不同年齡，不同季節(jié)，不同環(huán)境，不同基礎(chǔ)疾病感染的病原體不同針對不同的病原體應(yīng)采取針對性的治療方法44肺部感染的臨床特點肺部感染臨床癥狀相似，以咳嗽、咳痰為主3肺部感染的發(fā)生過程遺傳因素環(huán)境因素免疫因素肺部感染病原體45肺部感染的發(fā)生過程遺傳因素環(huán)境因素免疫因素肺部感染病原體4病原體感染的易感基因AdrianVSHill,

PhilTransRSocB(2012)367,840–84946病原體感染的易感基因AdrianVSHill,Phil肺部感染的環(huán)境因素生物燃料吸煙空氣污染濫用抗生素免疫抑制劑氣候變化RobertJ.Laumbach,JAllergyClinImmunol.2012January;129(1):3–13JoonYoungSong.JKoreanMedSci2013;28:4-1547肺部感染的環(huán)境因素生物燃料RobertJ.LaumbaEffectofcigarettesmokeoninflammationJ.Lee,JDentRes.2012;91(2):142–14948Effectofcigarettesmokeoni肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithelialcellsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:79139249肺部感染的免疫因素TLRonairwayepithel肺部感染的免疫因素EpithelialcellproducedchemokinesandcytokinesagainstbacteriainfectionsYongLi,ClinDevImmunol.2012;2012:79139250肺部感染的免疫因素Epithelialcellprodu肺部感染常見病原體類型細(xì)菌性肺炎如肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎克雷白桿菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌、埃希大腸桿菌、結(jié)核桿菌等真菌性肺炎如白念珠菌、曲霉菌、放射菌等病毒性肺炎如冠狀病毒、腺病毒、流感病毒、巨細(xì)胞病毒、單純皰疹病毒等非典型性肺炎如軍團菌、支原體和衣原體等其它病原體所致的肺炎如立克次體、弓形蟲、原蟲、寄生蟲如肺包蟲、肺吸蟲、肺血吸蟲）等51肺部感染常見病原體類型細(xì)菌性肺炎如肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈英國肺炎病原體病原體占肺炎病因%臨床表現(xiàn)肺炎鏈球菌50社區(qū)、既往健康肺炎支原體6同上流感病毒A5同上流感嗜血桿菌5基礎(chǔ)肺?。篊OPD肺炎衣原體5社區(qū)獲得性肺炎鸚鵡熱衣原體3接觸鳥類金黃色葡萄球菌2兒童、毒品、流感病毒相關(guān)軍團菌2公共場所爆發(fā)、散發(fā)、地方流行伯納特立克次體1屠宰場和皮革工人銅綠<1囊性纖維化卡氏肺孢子菌<1AIDS、淋巴瘤、白血病、使用細(xì)胞毒藥物及糖皮質(zhì)激素衣氏放線菌星型諾卡菌CMV、煙曲霉、厭氧菌<1吸入性肺炎、酗酒、手術(shù)后未分離到病原菌2052英國肺炎病原體病原體占肺炎病因%臨床表現(xiàn)肺炎鏈球菌50社區(qū)、肺部感染的實驗室檢查1、根據(jù)檢驗常規(guī)初步判定是否感染2、根據(jù)感染部位推測可能的病原體3、根據(jù)感染人群推測可能的病原體4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測方法53肺部感染的實驗室檢查1、根據(jù)檢驗常規(guī)初步判定是否感染12肺部感染的實驗室檢查1、根據(jù)檢驗常規(guī)初步判定是否感染血常規(guī)CRPPCT內(nèi)毒素G試驗，GM試驗54肺部感染的實驗室檢查1、根據(jù)檢驗常規(guī)初步判定是否感染13血常規(guī)檢查55血常規(guī)檢查14CRP（CreactiveProtein）與肺炎鏈球菌C多糖體反應(yīng)是一種重要的急性時相反應(yīng)蛋白血清CRP由肝臟合成,半衰期19小時IL-1、IL-6、TNF是其最重要的調(diào)節(jié)因子56CRP（CreactiveProtein）與肺炎鏈球菌DiagnosticaccuracyofCRPincombinationwithIL-6andIL-8NoraHofer,Neonatology2012;102:25–3657DiagnosticaccuracyofCRPinPCT（procalcitonin）Procalcitonin（降鈣素原）由細(xì)菌內(nèi)毒素誘導(dǎo)產(chǎn)生升高：嚴(yán)重細(xì)菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭不升高：自身免疫、過敏和病毒感染不升高：局部有限的細(xì)菌感染、輕微感染和慢性炎癥58PCT（procalcitonin）ProcalcitoPCTastoGuideAntibioticTherapyin

AdultPatientswithRespiratoryTractInfectionsDavidN.Gilbert,ClinicalInfectiousDiseases2011;52(S4):S346–S35059PCTastoGuideAntibioticTheG試驗G試驗檢測的是真菌的細(xì)胞壁成分---(1,3)-β-D-葡聚糖，人體的吞噬細(xì)胞吞噬真菌后，能持續(xù)釋放該物質(zhì)，使血液及體液中含量增高（淺部真菌感染無類似現(xiàn)象）。

1-3-β-D-葡聚糖可特異性激活鱟（Limulus）變形細(xì)胞裂解物中的G因子，引起裂解物凝固，故稱G試驗。適用于除隱球菌和接合菌（包括毛霉菌、根霉菌等）外的所有深部真菌感染的早期診斷，尤其是念珠菌和曲霉菌，但不能確定菌種。以下情況可出現(xiàn)假陽性：（1）使用纖維素膜進行血透，標(biāo)本或患者暴露于紗布或其他含有葡聚糖的材料；（2）靜脈輸注免疫球蛋白、白蛋白、凝血因子或血液制品；（3）鏈球菌血癥；（4）操作者處理標(biāo)本時存在污染。（5）另外，使用多糖類抗癌藥物、放化療造成的粘膜損傷導(dǎo)致食物中的葡聚糖或定植的念珠菌經(jīng)胃腸道進入血液等也可能造成假陽性，食用菌類，如蘑菇等食物可以導(dǎo)致假陽性。60G試驗G試驗檢測的是真菌的細(xì)胞壁成分---(1,3)-β-DGM試驗GM試驗檢測的是半乳甘露聚糖（galactomannan)，曲霉菌特有的細(xì)胞壁多糖成分是β（1-5）呋喃半乳糖殘基，菌絲生長時，半乳甘露聚糖從薄弱的菌絲頂端釋放，是最早釋放的抗原。主要適于侵襲性曲霉菌感染的早期診斷，GM釋放量與菌量成正比，可以反映感染程度。連續(xù)檢測GM可作為治療療效的監(jiān)測。在造血干細(xì)胞移植患者中的診斷敏感性高。以下情況可出現(xiàn)假陽性：（1）使用使用半合成青霉素尤其是哌拉西林/他唑巴坦；（2）新生兒和兒童；（3）血液透析；（4）自身免疫性肝炎等；（5）食用可能含有GM的牛奶等高蛋白食物和污染的大米等。以下情況可出現(xiàn)假陰性：（1）釋放入血循環(huán)中的曲霉GM（包括甘露聚糖）并不持續(xù)存在而是會很快清除；（2）以前使用了抗真菌藥物；（3）病情不嚴(yán)重；（4）非粒細(xì)胞缺乏的患者。61GM試驗GM試驗檢測的是半乳甘露聚糖（galactomann病原學(xué)診斷2、根據(jù)感染部位推測可能的病原體感染類型病原菌類別咽炎/扁桃體炎A群C群和G群鏈球菌★，壞死梭桿菌，淋病奈瑟菌，肺炎衣原體，白喉棒狀桿菌，潰瘍棒狀桿菌，肺炎支原體，溶血性隱秘桿菌鼻竇炎肺炎鏈球菌★，流感嗜血桿菌★，金黃色葡萄球菌，卡他莫拉菌，混合厭氧菌和嗜氧菌感染，A群鏈球菌，肺炎嗜披衣菌，綠膿桿菌及其他革蘭陰性桿菌會厭炎化膿性鏈球菌★，肺炎鏈球菌★，金黃色葡萄球菌，流感嗜血桿菌支氣管炎百日咳鮑特菌★，肺炎支原體，肺炎衣原體，卡他莫拉菌，流感嗜血桿菌，銅綠假單胞菌，肺炎鏈球菌膿胸金黃色葡萄球菌★，肺炎鏈球菌★，A群鏈球菌，脆弱擬桿菌，肺炎克雷伯菌及其它腸桿菌菌，放線菌，奴卡氏菌，結(jié)核分枝桿菌及其它菌種肺炎肺炎鏈球菌★，肺炎克雷伯菌★，大腸埃希菌★，銅綠假單胞菌★，鮑曼不動桿菌★，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌★，卡氏肺孢子菌★，流感嗜血桿菌，卡他莫拉菌，軍團菌，肺炎支原體，沙眼衣原體，肺炎衣原體，金黃色葡萄球菌，嗜麥芽窄食單胞菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，曲霉菌4．肺部特殊病原體感染：鼠疫耶爾森菌，放線菌，炭疽桿菌，球孢子菌，組織胞漿菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隱球菌，洋蔥伯克霍氏菌，馬紅球菌，立克次體62病原學(xué)診斷2、根據(jù)感染部位推測可能的病原體感染類型病原菌類別病原學(xué)診斷3、根據(jù)感染人群推測可能的病原體社區(qū)獲得性感染：肺炎鏈球菌★，流感嗜血桿菌，卡他莫拉菌，軍團菌，肺炎支原體，沙眼衣原體，肺炎衣原體，金黃色葡萄球菌醫(yī)院獲得性感染：肺炎克雷伯菌★，大腸埃希菌★，銅綠假單胞菌★，鮑曼不動桿菌★，嗜麥芽窄食單胞菌，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌★免疫缺陷患者感染：卡氏肺孢子菌★，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，曲霉菌肺部特殊病原體感染：鼠疫耶爾森菌，放線菌，炭疽桿菌，球孢子菌，組織胞漿菌，結(jié)核分支桿菌，奴卡菌，弗朗西斯菌，隱球菌，洋蔥伯克霍氏菌，馬紅球菌，立克次體63病原學(xué)診斷3、根據(jù)感染人群推測可能的病原體22CAP、HAP的發(fā)病時間和病原體構(gòu)成48h≤HAP早期<5天肺炎鏈球菌流感嗜血桿菌HAP中期≥5天HAP晚期MSSAorMRSA腸桿菌屬肺炎克雷伯菌,大腸桿菌綠膿桿菌不動桿菌屬嗜麥芽窄食假單胞菌35101520CAP<48h主要致病菌多為非多重耐藥菌，預(yù)后好肺炎支原體G＋菌為主,G－菌比例較早發(fā)性HAP低20入院時間（天）多為多重耐藥菌株ATS.AmJRespirCritCareMed.2005;171.388–41嗜肺軍團菌64CAP、HAP的發(fā)病時間和病原體構(gòu)成48h≤HAP早期<5病原學(xué)診斷4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測方法培養(yǎng)： 細(xì)菌、真菌染色鏡檢： 結(jié)核分枝桿菌、真菌、肺孢子菌病原體鑒定： 生化鑒定、質(zhì)譜分析（布魯克、梅里埃）抗原檢測： 肺炎鏈球菌（尿抗原）、軍團菌（尿抗菌）、 病毒、支原體、衣原體、真菌抗體檢測： 立克次體、軍團菌PCR： 所有病原菌，尤其是難培養(yǎng)的細(xì)菌和病毒細(xì)胞因子檢測：INF-γ65病原學(xué)診斷4、根據(jù)可能的病原體選擇檢測方法24培養(yǎng)基的選擇增菌培養(yǎng)基：肉湯、堿性蛋白胨水基礎(chǔ)培養(yǎng)基：營養(yǎng)瓊脂、M-H瓊脂選擇培養(yǎng)基：麥康凱瓊脂、SS瓊脂鑒別培養(yǎng)基：膽汁七葉苷瓊脂厭氧培養(yǎng)基：厭氧血平板接種方法肉湯增菌：血液、腦脊液等蛋白胨水增菌：糞便（弧菌）平板劃線接種：其他標(biāo)本（四區(qū)劃線法）66培養(yǎng)基的選擇接種方法25染色鏡檢直接鏡檢：濕片法或懸滴法，觀察細(xì)菌動力革蘭染色鏡檢：陽性（紫色）、陰性（紅色）抗酸染色鏡檢：抗酸菌（紅色）其它染色鏡檢：a.莢膜

b.鞭毛

c.異染顆粒67染色鏡檢直接鏡檢：濕片法或懸滴法，觀察細(xì)菌動力26流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌68流感嗜血桿菌肺炎克雷伯菌27六胺銀染色（肺孢子菌）PAS染色（肺諾卡菌）肺活檢組織抗酸桿菌69六胺銀染色（肺孢子菌）PAS染色（肺諾卡菌）肺活檢組織抗酸桿生化鑒定利用細(xì)菌可以分解、發(fā)酵不同的底物： 葡萄糖、乳糖等糖類，