2021-2022學年河北省香河縣高考仿真卷生物試題含解析

2021-2022學年高考生物模擬試卷考生請注意：1．答題前請將考場、試室號、座位號、考生號、姓名寫在試卷密封線內(nèi)，不得在試卷上作任何標記。2．第一部分選擇題每小題選出答案后，需將答案寫在試卷指定的括號內(nèi)，第二部分非選擇題答案寫在試卷題目指定的位置上。3．考生必須保證答題卡的整潔。考試結束后，請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1．某植株的一條染色體發(fā)生缺失，獲得該缺失染色體的花粉不育，缺失染色體上具有紅色顯性基因B，正常染色體上具有白色隱性基因b（見下圖）。如果該植株自交，其后代（所有后代均可以存活）的性狀表現(xiàn)是A．都是白色性狀B．都是紅色性狀C．紅色性狀：白色性狀=1:1D．紅色性狀：白色性狀=3:12．下列生物學實驗相關敘述，正確的是（）A．DNA連接酶和DNA聚合酶均可用來拼接DNA片段B．釀醋是利用有氧條件下，在醋酸桿菌線粒體內(nèi)將糖類和酒精氧化生成醋酸C．探究溫度對酶活性的影響時，需將酶與底物分別在設定的溫度下保溫一段時間D．可利用滅活的農(nóng)桿菌促進小鼠細胞融合，篩選獲得雜種細胞3．不同濃度的生長素影響某植物乙烯生成和成熟葉片脫落的實驗結果如下圖所示。下列有關敘述正確的是（）A．乙烯濃度越高脫落率越高B．脫落率隨生長素濃度達到一定值后不斷降低C．生長素和乙烯對葉片脫落的作用是相互拮抗的D．生產(chǎn)上要噴施高濃度生長素類似物降低脫落率4．吞噬細胞通過胞吞作用攝入胞外抗原，運至溶酶體，溶酶體酶使抗原片段化。用氯化銨和氯喹分別處理吞噬細胞，可以提高溶酶體內(nèi)的pH，使酸性水解酶失活。下表是探究兩種物質(zhì)處理對抗原攝取、分解和傳遞過程影響的實驗結果。下列描述錯誤的是（）組別控制項目對照組觀察結果（%）11mmol/L氯化銨1．1mmol/L氯喹觀察結果（%）抑制率（%）觀察結果（%）抑制率（%）抗原攝取151313151抗原分解2913551452抗原加工前T細胞-吞噬細胞結合7126633157抗原加工后T細胞-吞噬細胞結合8471176124A．抗原傳遞的效率只與抗原原本的空間結構有關B．兩種物質(zhì)處理對抗原的傳遞都能起部分抑制作用C．抗原的分解利于抗原在免疫細胞間的傳遞D．1．lmmol/L氯喹處理對抗原的攝取無影響5．群落最小面積是指基本上能夠表現(xiàn)出群落中所有植物種類的樣方的最小面積。調(diào)查群落豐富度時，通過改變樣方大小確定群落最小面積，進而判斷群落類型，是研究群落的常用方法。如圖為三類群落物種數(shù)目的調(diào)查結果，下列說法正確的是（）A．群落豐富度隨樣方面積的增大而不斷增大B．調(diào)查土壤小動物類群豐富度宜用標志重捕法C．群落最小面積越大的群落，豐富度往往也越大D．宜選用50x50m2群落最小面積調(diào)查常綠闊葉林的豐富度6．冠狀病毒具有包裹在蛋白質(zhì)衣殼外的一層包膜，這層包膜主要來源于宿主細胞膜(磷脂層和膜蛋白)，還含有一些病毒自身的糖蛋白，可與宿主細胞膜融合。下列相關推理錯誤的是（）A．包膜的存在有利于維護病毒結構的完整性，無包膜病毒更容易被滅活B．病毒包膜具有抗原性，可以幫助病毒進入宿主細胞C．冠狀病毒進入宿主細胞的方式與噬菌體是相同的D．子代病毒的形成，需要宿主細胞的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體參與二、綜合題：本大題共4小題7．（9分）某生物小組利用圖1裝置培養(yǎng)某植株幼苗，通過測定不同時段密閉玻璃罩內(nèi)幼苗的O2釋放速率來測量光合速率，結果如圖2所示。請據(jù)圖回答下列問題：（1）植物根尖細胞對培養(yǎng)液中不同無機鹽離子的吸收具有選擇性，吸收速率也不相同，原因是___________________。若用缺鎂的完全培養(yǎng)液培養(yǎng)，葉肉細胞內(nèi)_____合成減少，從而影響植物對光的吸收。（2）在光下，根尖細胞內(nèi)產(chǎn)生[H]的場所有________________。（3）曲線中t1～t4時段，玻璃罩內(nèi)CO2濃度最高點是_____；t4時補充CO2，此時葉綠體內(nèi)C5的含量____。（4）根據(jù)測量結果t4時玻璃罩內(nèi)O2的量與t0時相比增加了256mg，此時植株積累葡萄糖的量為___mg。若t5時溫度升高至35℃，植株光合作用速率的變化是_____（填“升高”、“不變”、“降低”）。8．（10分）谷氨酸是哺乳動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的一種興奮性神經(jīng)遞質(zhì)，在機體調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要作用。（1）谷氨酸是一種含有2個羧基的非必需氨基酸，這2個羧基在其分子結構中的位置是___________。（2）谷氨酸在神經(jīng)元細胞體中生成后，會借助囊泡膜上的谷氨酸轉(zhuǎn)運體逆濃度梯度轉(zhuǎn)運到囊泡中貯存，這種跨膜運輸方式是___________。興奮傳導到神經(jīng)末梢后，神經(jīng)末梢將谷氨酸釋放并作用于突觸后膜，引起下一個神經(jīng)元興奮。該過程完成的信號轉(zhuǎn)換是___________。（3）當谷氨酸過度釋放時會成為一種毒素。一方面它與突觸后膜上的A受體結合，促進___________大量進入細胞內(nèi)，激活了一氧化氮合酶產(chǎn)生過量的一氧化氮（如圖），引起神經(jīng)元嚴重創(chuàng)傷；另一方面它還能引起神經(jīng)與肌膜對鈉離子的通透性___________（填“增高”或“降低”），引發(fā)神經(jīng)肌肉興奮性增強，導致小兒驚厥發(fā)作。若某種藥物可以通過作用于突觸來緩解小兒驚厥，其作用機理可能是___________。9．（10分）植物組織培養(yǎng)與基因工程技術在科學研究和生產(chǎn)實踐中得到了廣泛的應用。為使水稻獲得抗除草劑性狀，科研人員將除草劑草甘膦抗性基因轉(zhuǎn)入水稻植株，獲得抗草甘膦轉(zhuǎn)基因水稻。請回答問題。注：GUS基因表達產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍色（1）將草甘膦抗性基因作為____________，與Ti質(zhì)粒用相同的____________和DNA連接酶處理構建基因表達載體。（2）取某品種水稻的幼胚，先進行____________處理，然后接種到培養(yǎng)基中，水稻幼胚細胞發(fā)生____________形成愈傷組織。培養(yǎng)過程中曾出現(xiàn)下圖所示的不同培養(yǎng)結果，該不同結果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是____________和____________。（3）利用PCR技術，可以鑒定被侵染的愈傷組織中是否含有草甘膦抗性基因。草甘膦抗性基因的部分序列如下：5'—ATGGCT．．．．．．．．．AGGAAC—3'3'—TACCGA．．．．．．．．．TCCTTG—5'根據(jù)上述序列應選擇引物____________（填字母）進行PCR。A．引物：5'-TACCGA-3'B．引物：5'-GTTCCT-3'C．引物：5'-AUGGCU-3'D．引物：5’-ATGGCT-3’（4）除了鑒定愈傷組織中是否含有目的基因以外，還可以利用GUS基因表達產(chǎn)物的鑒定進行圖中的篩選2，以確定目的基因是否____________。兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過細胞的____________過程，獲得轉(zhuǎn)基因水稻。（5）為獲得具有抗除草劑性狀的轉(zhuǎn)基因水稻，還需要在個體水平進行抗性測試。請你設計一個實驗方案，篩選出對草甘膦具有抗性的轉(zhuǎn)基因水稻（只寫出實驗思路即可）。_______________________。10．（10分）蘿卜的蛋白A具有廣泛的抗植物病菌作用，而且對人體沒有影響。我國科學家欲獲得高效表達蛋白A的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌作為微生物農(nóng)藥，做了相關研究。（1）研究者用相同的_________酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒，再將重組質(zhì)粒置于經(jīng)_________處理的大腸桿菌細胞懸液中，獲得轉(zhuǎn)基因大腸桿菌。（2）檢測發(fā)現(xiàn)，轉(zhuǎn)入的蛋白A基因在大腸桿菌細胞中表達效率很低，研究者推測不同生物對密碼子具有不同的偏好，因而設計了與蛋白A基因結合的兩對引物（引物B和C中都替換了一個堿基），并按圖2方式依次進行4次PCR擴增，以得到新的蛋白A基因。①這是一種定點的_________技術。②圖2所示的4次PCR應該分別如何選擇圖1中所示的引物？請?zhí)顚懸韵卤砀瘢ㄈ暨x用該引物劃“√”，若不選用該引物則劃“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者進一步將含有新蛋白A基因的重組質(zhì)粒和_________分別導入大腸桿菌，提取培養(yǎng)液中的蛋白質(zhì)，用_________方法檢測并比較三組受體菌蛋白A的表達產(chǎn)物，判斷新蛋白A基因表達效率是否提高。為檢測表達產(chǎn)物的生物活性，研究者將上述各組表達產(chǎn)物加入到長滿了植物病菌的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時間后，比較_________的大小，以確定表達產(chǎn)物的生物活性大小。（4）作為微生物農(nóng)藥，使用時常噴灑蛋白A基因的發(fā)酵產(chǎn)物而不是轉(zhuǎn)蛋白A基因的大腸桿菌，其優(yōu)點是_________。11．（15分）圖甲是某動物（2n=4）生殖器官內(nèi)細胞分裂的圖象。圖乙為該動物體內(nèi)進行的三個連續(xù)生理過程中細胞內(nèi)染色體組數(shù)的變化，據(jù)圖回答下列問題：（1）該動物性別為_________（雌、雄）性，判斷依據(jù)是_____________________。（2）細胞①名稱是__________，該細胞處于__________（分裂方式及時期），其分裂產(chǎn)生的子細胞是___________________________。（3）C點和F點細胞中染色體組加倍的原因是_________________________。甲圖中①②③細胞分別對應于乙圖中的____________________段。

參考答案一、選擇題：（共6小題，每小題6分，共36分。每小題只有一個選項符合題目要求）1、C【解析】

分析題圖：圖示植株的基因型為Bb，其中紅色顯性基因B在缺失染色體上，白色隱性基因b在正常染色體上，且含有缺失染色體的花粉不育，但含有缺失染色體的卵細胞可育?！驹斀狻吭撝仓戤a(chǎn)生的花粉（雄配子）含有基因B和基因b，由于基因B所在的染色體缺失不育，則可育的花粉中只含有基因b，該植株產(chǎn)生的雌配子含有基因B和基因b，雌雄配子隨機結合，子代基因型為Bb和bb，比例為1:1，表現(xiàn)型為紅色性狀和白色性狀，比例為1:1，C正確。故選C。2、C【解析】

基因工程中連接兩個DNA片段需要使用DNA連接酶，DNA復制時需要使用DNA聚合酶。醋酸桿菌為需氧的原核生物，在有氧條件下可將糖類或酒精氧化生成醋酸。誘導動物細胞融合常用聚乙二醇、滅活的病毒、電激等方法?！驹斀狻緿NA連接酶連接的是兩個DNA片段，而DNA聚合酶連接的是單個的脫氧核糖核苷酸，A錯誤；醋酸桿菌為原核生物，沒有線粒體，B錯誤；探究溫度對酶活性的影響時，需將酶與底物分別在設定的溫度下保溫一段時間，然后再混合，保證反應溫度為預設的溫度，C正確；可利用滅活的病毒促進小鼠細胞融合，篩選獲得雜種細胞，D錯誤。故選C?！军c睛】本題考查考生對教材基礎知識的理解和記憶能力，難度不大。3、B【解析】

分析曲線圖：隨著生長素濃度的升高，乙烯的濃度也不斷提高，成熟葉片的脫落率是先增加后減少；在一定范圍內(nèi)隨著乙烯濃度的升高，脫落率提高，但是超過一定范圍后，隨著乙烯濃度的升高，脫落率逐漸降低?！驹斀狻緼、在一定范圍內(nèi)隨著乙烯濃度的升高，脫落率提高，但是超過一定范圍后，隨著乙烯濃度的升高，脫落率逐漸降低，A錯誤；

B、隨生長素濃度的增加，成熟葉片的脫落率是先增加后減少，即脫落率隨生長素濃度達到一定值后不斷降低，B正確；

C、生長素濃度較低時，隨著生長素濃度的增加，乙烯濃度和葉片脫落率均增加，乙烯與生長素對葉片脫落不是拮抗作用，C錯誤；

D、由圖可知，高濃度生長素可降低成熟葉片脫落率，由于不同器官、幼嫩部位與衰老部位對生長素的敏感程度不同，高濃度的生長素可能降低了成熟葉的脫落率，但有可能提高了幼嫩葉或花的脫落率，此實驗結果不一定適用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)，D錯誤。

故選B。4、A【解析】

免疫是指身體對抗病原體引起的疾病的能力，特異性免疫包含細胞免疫和體液免疫。吞噬細胞能吞噬病原體，并將抗原傳遞給T細胞，T細胞再將抗原傳遞給B細胞，少數(shù)抗原直接刺激B細胞?！驹斀狻緼、抗原能否呈遞與抗原的空間結構有關以及抗原是否被加工有關，A錯誤；B、氯化銨和氯喹處理吞噬細胞，可以提高溶酶體內(nèi)的pH，使酸性水解酶失活，即兩種物質(zhì)處理都能部分抑制抗原加工，B正確；C、抗原加工前和抗原加工后的對照組結果可以看出，抗原的加工利于抗原在免疫細胞間的傳遞，C正確；D、1.lmmol/L氯喹處理抑制率為1，因此對抗原的攝取無影響，D正確。故選A。5、C【解析】

1、物種豐富度：指一個群落或環(huán)境中物種數(shù)目的多寡。2、一般調(diào)查植物和個體小、活動能力小的動物以及蟲卵的種群密度常用的是樣方法，其步驟是確定調(diào)查對象→選取樣方→計數(shù)→計算種群密度。標記重捕法適用于調(diào)查活動能力強、活動范圍大的動物?！驹斀狻緼、在一定范圍內(nèi)，群落豐富度隨樣方面積的增大而不斷增大，超過一定樣方面積后，豐富度不再增加，A錯誤；B、統(tǒng)計熱帶雨林土壤中小動物豐富度用取樣器取樣法，不宜用標志重捕法，B錯誤；C、據(jù)圖分析可知，群落最小面積越大的群落，豐富度往往也越大，C正確；D、宜選用20×20m2群落最小面積調(diào)查常綠闊葉林的豐富度，D錯誤。故選C。6、C【解析】

病毒一般由蛋白質(zhì)外殼和核酸組成，根據(jù)題意可知，冠狀病毒除了具有以上結構外，還具有包裹在蛋白質(zhì)衣殼外的一層包膜，這層包膜主要來源于宿主細胞膜(磷脂層和膜蛋白)，還含有一些病毒自身的糖蛋白，可與宿主細胞膜融合，侵染宿主細胞進行增殖?！驹斀狻緼、根據(jù)以上分析可知，冠狀病毒不僅具有蛋白質(zhì)外殼和核酸，還具有類似于細胞膜的包膜，包膜的存在有利于維護病毒結構的完整性，無包膜保護的病毒更容易被滅活，A正確；B、根據(jù)題意，病毒包膜來源于宿主細胞膜，還含有一些病毒自身的糖蛋白，因此具有抗原性，且利用包膜與宿主細胞的細胞膜融合，可以幫助病毒進入宿主細胞，B正確；C、噬菌體的結構只有蛋白質(zhì)外殼和核酸，沒有包膜結構，通過吸附后將核酸注入宿主細胞，因此二者進入宿主細胞的方式不同，C錯誤；D、子代病毒的形成，需要利用宿主細胞的核糖體合成病毒的蛋白質(zhì)，如膜蛋白和糖蛋白等，因此需要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體的參與，D正確。故選C。二、綜合題：本大題共4小題7、細胞膜上載體的種類和數(shù)量不同葉綠素細胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體t2降低240降低【解析】

（1）植物根尖細胞吸收無機鹽離子的方式是主動運輸，需要載體、消耗能量。由于植物細胞膜上載體的種類和數(shù)量不同，所以植物根尖細胞對培養(yǎng)液中不同無機鹽離子的吸收具有選擇性。鎂是合成葉綠素的必需元素，所以用缺鎂的完全培養(yǎng)液培養(yǎng)，葉肉細胞內(nèi)葉綠素合成減少，從而影響植物對光的吸收。（2）由于根尖細胞內(nèi)沒有葉綠體，所以在光下，根尖細胞也只能進行呼吸作用，因而細胞內(nèi)產(chǎn)生[H]的場所有細胞質(zhì)基質(zhì)和線粒體。（3）曲線中t1～t4時段，玻璃罩內(nèi)CO2濃度最高點和最低點依次是t2和t4。t4時補充CO2，二氧化碳固定加快，五碳化合物的消耗加快，短時間內(nèi)其生成速率不變，最終導致葉綠體內(nèi)C5的含量降低。（4）根據(jù)測量結果t4時玻璃罩內(nèi)O2的量與t0時相比增加了256mg，此時植株積累葡萄糖的量為256÷192×180=240mg。若t5時溫度升高至35℃，由于圖示光合作用的適宜溫度是25℃，所以植株光合作用速率的變化是降低。8、一個羧基與氨基連接在同一個碳原子上（或一個與中心C原子相連），另一個在R基上主動運輸電信號到化學信號到電信號Ca2+增高抑制突觸前膜釋放谷氨酸（或抑制突觸后膜鈉離子內(nèi)流）【解析】

由圖可知，突觸前膜釋放谷氨酸后，谷氨酸可以與突觸后膜上的A受體結合，引起突觸后膜的興奮?！驹斀狻浚?）每個氨基酸的中心碳原子上至少連有一個氨基和一個羧基，若有多余的氨基或羧基應該位于R基上，故谷氨酸的一個羧基與氨基連接在同一個碳原子上（或一個與中心C原子相連），另一個在R基上。（2）谷氨酸在神經(jīng)元細胞體中生成后，會借助囊泡膜上的谷氨酸轉(zhuǎn)運體逆濃度梯度轉(zhuǎn)運到囊泡中貯存，這種跨膜運輸方式需要載體和能量，為主動運輸。興奮傳導到神經(jīng)末梢后，神經(jīng)末梢將谷氨酸釋放并作用于突觸后膜，引起下一個神經(jīng)元興奮。該過程會經(jīng)過電信號→化學信號（谷氨酸）→電信號的轉(zhuǎn)變。（3）谷氨酸可以與突觸后膜上的A受體結合，促進鈣離子大量進入細胞內(nèi)，激活了一氧化氮合酶產(chǎn)生過量的一氧化氮，引起神經(jīng)元嚴重創(chuàng)傷；另一方面它還能引起神經(jīng)與肌膜對鈉離子的通透性增強，鈉離子內(nèi)流增多，引發(fā)神經(jīng)肌肉興奮性增強，導致小兒驚厥發(fā)作。由于小兒驚厥是由于谷氨酸過度釋放引起的，故可以通過藥物抑制突觸前膜釋放谷氨酸。【點睛】興奮在神經(jīng)纖維上以電信號的形式傳導，在突觸部位會經(jīng)過電信號→化學信號→電信號的轉(zhuǎn)化。9、目的基因限制酶消毒脫分化生長素細胞分裂素BD表達再分化選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻，用等量相同濃度的草甘膦農(nóng)藥噴灑，相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后，觀測水稻的生長情況【解析】

1.基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取，②基因表達載體的構建，③將目的基因?qū)胧荏w細胞，④目的基因的檢測與鑒定。2.分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因：DNA分子雜交技術；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA：分子雜交技術；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)：抗原-抗體雜交技術?！驹斀狻浚?）根據(jù)題干信息和圖形分析可知，草甘膦抗性基因為目的基因，將其與Ti質(zhì)粒連接成重組質(zhì)粒（基因表達載體）時需要用同一種限制酶進行切割。（2）取某品種水稻的幼胚，進行植物組織培養(yǎng)時，要注意無菌操作，先將外植體進行消毒，然后接種到培養(yǎng)基中培養(yǎng)，幼胚發(fā)生脫分化形成愈傷組織；圖B和圖C形成的結果不同，是因為培養(yǎng)基中細胞分裂素和生長素的用量不同導致的。（3）根據(jù)題意分析，已知草甘膦抗性基因的部分序列，由于PCR技術中，子鏈合成的方向是從5'到3'，因此應選擇引物BD進行PCR技術。（4）據(jù)圖分析可知，目的基因插入的位置在GUS基因旁邊，而GUS基因表達產(chǎn)物經(jīng)染色能從無色變成藍色，因此可以利用GUS基因表達產(chǎn)物的鑒定進行圖中的篩選2，以確定目的基因是否表達；兩次篩選后得到的轉(zhuǎn)基因愈傷組織經(jīng)過再分化形成胚狀體，進而獲得完整的轉(zhuǎn)基因水稻植株。（5）根據(jù)題意分析，現(xiàn)要從個體水平進行抗性測試，篩選出對草甘膦具有抗性的轉(zhuǎn)基因水稻，則應該對其噴灑草甘膦農(nóng)藥，具體操作如下：首先選取長勢相同的野生型和轉(zhuǎn)基因水稻,然后用等量的相同濃度的草甘膦農(nóng)藥噴灑，并在相同環(huán)境條件下培養(yǎng)一段時間后，通過觀測水稻的生長情況進行篩選?！军c睛】本題主要考查基因工程及其應用、植物組織培養(yǎng)等相關知識，識記和理解目的基因的獲取、表達載體的構建以及目的基因的檢測等知識是解答本題的關鍵。10、限制酶和DNA連接CaCl2基因突變引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重組質(zhì)粒、空質(zhì)粒（pET質(zhì)粒）抗原-抗體雜交抑菌圈對人、畜、農(nóng)作物和自然環(huán)境安全；不會造成基因污染；有效成分純度較高【解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手術刀”——限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）（1）來源：主要是從原核生物中分離純化出來的。（2）功能：能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，因此具有專一性。（3）結果：經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端。2、“分子縫合針”——DNA連接酶（1）兩種DNA連接酶（E?coliDNA連接酶和T4DNA連接酶）的比較：①相同點：都縫合磷酸二酯鍵。②區(qū)別：E?coliDNA連接酶來源于大腸桿菌，只能將雙鏈DNA片段互補的黏性末端之間的磷酸二酯鍵連接起來；而T4DNA連接酶來源于T4噬菌體，可用于連接粘性末端和平末端，但連接效率較低。（2）與DNA聚合酶作用的異同：DNA聚合酶只能將單個核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯鍵．DNA連接酶是連接兩個DNA片段的末端，形成磷酸二酯鍵。3、“分子運輸車”——載體（1）載體具備的條件：①能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存。②具有一至多個限制酶切點，供外源DNA片段插入。③具有標記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。（2）最常用的載體是質(zhì)粒，它是一種裸露的、結構簡單的、獨立于細菌擬核DNA之外，并具有自我復制能力的雙鏈環(huán)狀DNA分子。（3）其它載體：噬菌體的衍生物、動植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的獲取1、目的基因是指：編碼蛋白質(zhì)的結構基因。2、原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反轉(zhuǎn)錄法和化學合成法。3、PCR技術擴增目的基因（1）原理：DNA雙鏈復制（2）過程：第一步：加熱至90～95℃DNA解鏈；第二步：冷卻到55～60℃，引物結合到互補DNA鏈；第三步：加熱至70～75℃，熱穩(wěn)定DNA聚合酶從引物起始互補鏈的合成。第二步：基因表達載體的構建1、目的：使目的基因在受體細胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳至下一代，使目的基因能夠表達和發(fā)揮作用。2、組成：目的基因+啟動子+終止子+標記基因（1）啟動子：是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶識別和結合的部位，能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA，最終獲得所需的蛋白質(zhì)。（2）終止子：也是一段有特殊結構的DNA片段，位于基因的尾端。（3）標記基因的作用：是為了鑒定受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來．常用的標記基因是抗生素抗性基因。第三步：將目的基因?qū)胧荏w細胞1、轉(zhuǎn)化的概念：是目的基因進入受體細胞內(nèi)，并且在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程。2、常用的轉(zhuǎn)化方法：將目的基因?qū)胫参锛毎翰捎米疃嗟姆椒ㄊ寝r(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，其次還有基因槍法和花粉管通道法等。將目的基因?qū)雱游锛毎鹤畛Ｓ玫姆椒ㄊ秋@微注射技術．此方法的受體細胞多是受精卵。將目的基因?qū)胛⑸锛毎涸松镒鳛槭荏w細胞的原因是繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少，最常用的原核細胞是大腸桿菌，其轉(zhuǎn)化方法是：先用Ca2+處理細胞，使其成為感受態(tài)細胞，再將重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下促進感受態(tài)細胞吸收DNA分子，完成轉(zhuǎn)化過程。3、重組細胞導入受體細胞后，篩選含有基因表達載體受體細胞的依據(jù)是標記基因是否表達。第四步：目的基因的檢測和表達1、首先要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子雜交技術。2、其次還要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法是采用用標記的目的基因作探針與mRNA雜交。3、最后檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法是從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì)，用相應的抗體進行抗原——抗體雜交。4、有時還需進行個體生物學水平的鑒定，如轉(zhuǎn)基因抗蟲植物是否出現(xiàn)抗蟲性狀?！驹斀狻浚?）在基因工程中，利用相同的限制酶和DNA連接酶處理蛋白A基因和pET質(zhì)粒，得到重組質(zhì)粒；大腸桿菌作為受體細胞，需要用氯化鈣處理，以便重組質(zhì)粒的導入。（2）①根據(jù)題意和圖示分析，經(jīng)過4次PCR技術后獲得了新的基因，這是一種定點的基因突變技術。②與研究者推測不同生物對密碼子具有不同