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化學(xué)發(fā)光免疫分析 Luminescence特敏特自發(fā)時,出的能量表現(xiàn)為“光”的發(fā)光類化學(xué)發(fā)生物發(fā)光照發(fā)LuminescenceLuminescenceFluorescence TimeresolvedFluorescenceImmunoassayTR–FluorescencePolarizationImmunoassayChemiluminescenceImmunoassay發(fā)光酶免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分析電化學(xué)發(fā)光免疫分析光激化學(xué)發(fā)光免疫分析問題一:發(fā)光酶免疫分析酶免疫分析酶聯(lián)免疫吸附試enzyme-linkedimmunosorbent標記分離方固相吸附分離(96T-化學(xué)發(fā)光酶免疫分析/酶促發(fā)光免疫分與“酶聯(lián)免疫吸附試驗”相標記物相同、檢測步驟類發(fā)光底物 烷化學(xué)發(fā)光酶免疫分析/酶促發(fā)光免疫分技術(shù)性提高分析敏感度(光信號與ELISA類操作方96-T發(fā)光酶免疫分析辣根過氧化物酶(3-氨基苯二甲酰肼)及其衍對-羥基苯乙酸激發(fā)后激發(fā)后發(fā)射熒3發(fā)光酶免疫分析堿性磷酸酶發(fā)光底酶聯(lián)免疫法-優(yōu)適合批量操作(快技術(shù)要求和實驗條酶聯(lián)免疫法-不酶不穩(wěn)定性(同步標準曲線/函數(shù)手工加樣帶來溫育時間分離洗滌過程繁瑣(影響精密度分析敏感度(灰區(qū)標本
微孔板內(nèi)壁面積-固相抗體量-鉤狀效應(yīng)- 結(jié)ELISA(不足圖:依次加樣導(dǎo)致溫育時間誤 圖:勾狀效應(yīng)與反應(yīng)速問題二:化學(xué)發(fā)光免疫分析化學(xué)發(fā)光免疫分基本特直接化學(xué)發(fā)光免疫分標記物:吖啶直接化學(xué)發(fā)光免疫分發(fā)光反pH直接化學(xué)發(fā)光免疫分標記物:吖啶優(yōu)點:標記物穩(wěn)定,發(fā)光反應(yīng)簡主要試 直接化學(xué)發(fā)光免疫分分離洗滌電化學(xué)發(fā)光免疫標記物:三聯(lián)吡電化學(xué)發(fā)光免疫分析標記物:三聯(lián)吡電標記物性質(zhì)穩(wěn) 能力 電極 面主要試電化學(xué)發(fā)光免疫分析電化學(xué)發(fā)光免疫分析標記免疫分析定量標準曲線(數(shù)學(xué)函數(shù)發(fā)光免疫分析 ”校標記免疫分析定量內(nèi)置“函數(shù)”方游離標記物和結(jié)合標記洗滌分離BriefAlphaScreen?AlphaLISA?(PerkinLuminescenceOxygenChannelLightInitiatedChemiluminescent新型化學(xué)發(fā)光免疫分光激化學(xué)發(fā)光分無分離洗滌過均相免疫分新穎標記方納米微球-發(fā)光/感光物基于能量轉(zhuǎn)移的化學(xué)發(fā)光過發(fā)光體發(fā)光微球接受能受體微球感光微球提供能供體微球感光微球與發(fā)光感光微球外層涂布感光物質(zhì)(感光微球與發(fā)光發(fā)光微球接受活性氧能量發(fā)生氧化反 紫外銪接受紫外光誘導(dǎo)熒光信號(615光光激化學(xué)發(fā)光過340-350nmO2680光信號(615圖:級聯(lián)光化學(xué)反應(yīng)示意雙抗體夾心分析圖:基于抗原-抗體結(jié)合能量轉(zhuǎn)移示意實例-1:乙型肝炎表面抗原(HBs-試劑(雙抗體夾心模式 感光微球溶液(增強液/通用液實例-1:乙型肝炎表面抗原(HBs-過程簡抗原-生物素-額外試劑(洗液)分析平臺--光激化學(xué)發(fā)光分析LICA-500(速度低故無污光激化學(xué)發(fā)光分析集多種技術(shù)的優(yōu)秀性獨特信號(能量轉(zhuǎn)移免洗納米固相材料(懸浮性能-動力學(xué)-三 生物素-親和素系統(tǒng)(放大效應(yīng)-空間位阻新型化學(xué)發(fā)光免疫分析特點一新型化學(xué)發(fā)光免疫分析特點一均相發(fā)光免疫分析:無洗滌分離過
易操作低故 新型化學(xué)發(fā)光免疫分析特點二新穎標記方式:納米微球-發(fā)光物質(zhì)/感光免對抗原/新型化學(xué)發(fā)光免疫分析特點三二甲基噻
分析敏阿托,百億億分之新型化學(xué)發(fā)光免疫分析特點三新型化學(xué)發(fā)光免疫分析光激化學(xué)發(fā)光分加樣體積精175μlCV25μlCV1.98%(溫浴區(qū)溫度精度(0.02機械臂-化學(xué)發(fā)三
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