紅辣椒中紅色素的提取

紅辣椒中紅色素的提取實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)從紅辣椒中提取紅色素學(xué)習(xí)薄層層析法和柱層析法及應(yīng)用掌握提取、分離、鑒定天然化合物的方法產(chǎn)品介紹天然紅辣椒中含有辣椒紅色素（簡稱辣椒紅），辣椒素、辣椒油酯等。辣椒紅是辣椒紅素、辣椒玉紅素、。-胡蘿卜素等色素的混合物，為深紅色油狀液體。辣椒紅是食品和化妝品中的天然色素添加劑。其化學(xué)組成為呈深紅色的色素主要是由辣椒紅脂肪酸酯和辣椒玉紅素脂肪酸酯所組成。呈黃色的色素則是P-胡蘿卜素，化學(xué)結(jié)構(gòu)：HO—<CH_I>K^OHfH3,h3h3c—'Oy^%^A^^xA^^x^x^x^^^A^廠十CH3ch3ch3ch3qCH3ch3辣椒紅OR—C—OYCH^0CH3CH3H3C_^^-O—LROY^^x^^^^^^x^x^^^^Ay^F^CH3ch3ch3ch3』CH3CH3辣椒紅的脂肪酸酯（R=3個或更多碳的鏈）另一個具有稍大Rf值的較小紅色斑點(diǎn)，可能是由辣椒玉紅素的脂肪酸酯組成。<^~ch3ch3ch3ch3CH3p-胡蘿卜素實(shí)驗(yàn)原理：色譜法是分離、純化、鑒定有機(jī)化合物的重要方法之一，有著廣泛的用途。色譜法是利用混合物中各組分在某一物質(zhì)中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它親和作用性能的差異，使混合物的溶液流經(jīng)該種物質(zhì)，進(jìn)行反復(fù)的吸附或分配等作用，從而將各組分分開。

流動的混合物稱為流動相；固定的物質(zhì)稱為固定相（可以是固體，也可以是液體）。依據(jù)各組分在固定相中的作用原理不同，可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、排阻色譜等；依據(jù)操作條件的不同，又可分為柱色譜、薄層色譜、紙色譜、氣相色譜、高效液相色譜等。下面著重介紹柱色譜與薄層色譜：柱色譜常用的有吸附色譜和分配色譜兩種。吸附色譜常用氧化鋁和硅膠為吸附劑。分配色譜用硅膠、硅藻土、纖維素等為支持劑，以吸收大量的液體作為固定相。吸附柱色譜通常在玻璃管中填入表面積很大經(jīng)過活化的多孔性或粉狀固體吸附劑。待分離的混合物溶液流過吸附柱時(shí)，各種組分同時(shí)被吸附在柱的上端。當(dāng)洗脫劑流下時(shí)，由于不同化合物吸附力不同，往下洗脫的速度就不同，就會形成不同的層次，即溶質(zhì)在柱中自上而下按吸附力大小形成若干色帶；繼續(xù)加洗脫劑，可將已經(jīng)分開的溶質(zhì)分別從柱上洗出收集；或?qū)⒅?，擠出后按色帶分割開，用溶劑將各色帶中的溶質(zhì)萃取出來。譜帶一斯沙一'一洗脫劑|一胸沙譜帶一斯沙一'一洗脫劑|一胸沙一吸附劑薄層色譜又叫薄板層析，常用TLC表示。是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種重要實(shí)驗(yàn)技術(shù)。屬于固-液吸附層析的類型。通常是把吸附劑放在玻璃板上成為一個薄層，作為固定相，以有機(jī)溶劑作為流動相。實(shí)驗(yàn)時(shí)，把要分離的混合物滴在薄層板的一端，用適當(dāng)?shù)娜軇┱归_。當(dāng)溶劑流經(jīng)吸附劑時(shí)，由于各物質(zhì)被吸附的強(qiáng)弱不同，就以不同的速率隨著溶劑移動。展開一定時(shí)間后，讓溶劑停止流動，混合物中各組分就停留在薄層板上顯示出一個個色斑的色譜圖。若各組分無色，可噴灑一定的顯色劑使之顯色?；旌衔镏懈魑镔|(zhì)在薄板上隨溶劑移動的相對距離稱為比移值（Rf值）。R色斑最高濃度中心至原點(diǎn)中心的距離f展開劑前沿至原點(diǎn)中M的距離溶濟(jì)前沿（a）原板（b）巳展開層析板如上圖中：Rf（化合物1）=30m=°25Rf（化合物2）=|2必=0.70在一定條件下，各物質(zhì)具有一定的Rf值。不同物質(zhì)在相同條件下，具有不同的Rf值。因此，可利用Rf值對物質(zhì)進(jìn)行定性鑒定。但物質(zhì)的Rf值常因吸附劑的種類和活性、薄層的厚度、展開劑及溫度等的不同而異。所以在鑒定樣品時(shí)，常用已知成分作對照試驗(yàn)，在同一個薄層板上進(jìn)行層析，然后通過Rf值的比較，對物質(zhì)作定性鑒定。根據(jù)斑點(diǎn)的面積大小和顏色的深淺的標(biāo)準(zhǔn)物的對照下還可進(jìn)行定量。主要試劑2g紅辣椒，二氯甲烷，乙醇，氯仿，硅膠H（60?200目）。主要儀器圓底燒瓶，燒杯，層析缸，薄層色譜板，層析柱，試管等。實(shí)驗(yàn)流程紅辣椒一二氯甲烷過濾?濾液蒸餾色素混合物薄層色譜分析紅色素

回流20min柱色譜分離實(shí)驗(yàn)步驟1.紅辣椒色素的提取在50mL圓底燒瓶中放入1g紅辣椒和2~3粒沸石，加入15mL二氯甲烷，回流30min，冷卻至室溫，然后過濾除去固體。蒸發(fā)濾液得到色素的一種粗混合物。2.色素的薄層分析把少量粗色素樣品用5滴二氯甲烷溶解在一個小燒杯中，用毛細(xì)管點(diǎn)在準(zhǔn)備好的硅膠G薄板上，用二氯甲烷作為展開劑，在層析缸中進(jìn)行層析，記錄每一點(diǎn)的顏色，并計(jì)算它們的R/值1?2］。3.紅色素的柱層析分離用濕法裝柱。約8g硅膠（60?200目）在適量二氯甲烷中攪勻，裝填到配有玻璃活塞的層析柱中［3］。柱填好后，將二氯甲烷洗脫劑液面降至被蓋硅膠的砂的上表面。將色素的粗混合物溶解在少量二氯甲烷中（約1mL），然后將溶液用滴管加入層析柱。放置色素于柱上后，用約50mL二氯甲烷洗脫色素。收集不同顏色的洗脫組份于小錐形瓶或試管中，當(dāng)?shù)诙M黃色素洗脫后，停止層析。通過薄層層析來檢驗(yàn)柱層析，若沒有得到一個好的分離效果，用同樣的步驟將合并的紅色素組份再進(jìn)行一次柱層析分離。鑒定含有紅色素的組份.然后將主要含有同種組分的每組組份合并。注釋［1］點(diǎn)樣時(shí)，毛細(xì)點(diǎn)樣管剛接觸薄板即可，不然會拖尾，影響分離效果。［2］詳細(xì)操作可參考薄層色譜技術(shù)介紹［3