自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理課件

第二章

自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理第二章

自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理1自動生物化學(xué)分析儀的特點:精密度高，功能齊全；可進(jìn)行吸光度、濃度和酶活力的測定，能使用終點法和連續(xù)監(jiān)測法進(jìn)行分析；具有快速、簡便、微量、標(biāo)準(zhǔn)化、樣品和試劑用量低等優(yōu)點。自動生物化學(xué)分析儀的特點:2第一節(jié)自動生物化學(xué)分析儀的類型

第一節(jié)自動生物化學(xué)分析儀的類型3①按反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)可分為連續(xù)流動式、離心式、分立式和干片式四類。②按自動化程度可分為全自動和半自動型。③按同時可測定項目可分為單通道和多通道兩類。④按儀器的復(fù)雜程度及功能可分為小型、中型和大型三類。①按反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)可分為連續(xù)流動式、離心式、分立式和干片式四4一、連續(xù)流動式自動生物化學(xué)分析儀連續(xù)流動式自動生物化學(xué)分析儀是第一代自動分析儀，在測定過程中各待測樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)均在同一管道內(nèi)流動的過程中完成。一、連續(xù)流動式自動生物化學(xué)分析儀5（一）儀器結(jié)構(gòu)儀器主要構(gòu)成部件有：樣品盤、比例泵、混合器、透析器、恒溫器及檢測裝置組成。（一）儀器結(jié)構(gòu)6（二）工作原理在微機控制下，通過比例泵將標(biāo)本和試劑注入到連續(xù)的管道系統(tǒng)中，在一定的溫度下，在管道內(nèi)完成混合，去除干擾物，保溫，比色測定，信號放大，運算處理，最后將結(jié)果顯示并打印出來。（二）工作原理7二、離心式自動生物化學(xué)分析儀離心式生物化學(xué)分析儀是1969年發(fā)展起來的一種機型，它的全部檢驗過程是在一個類似離心機轉(zhuǎn)頭樣的圓盤上完成的。二、離心式自動生物化學(xué)分析儀8（一）儀器結(jié)構(gòu)離心式分析儀由加樣和分析兩個部分組成，加樣部分：包括樣品盤、試劑盤、吸樣臂、試劑臂和電子控制部分等。分析部分：除安裝有特殊的離心轉(zhuǎn)盤外，還有溫控和光學(xué)檢測系統(tǒng)，以及微機信息處理和顯示系統(tǒng)。（一）儀器結(jié)構(gòu)9自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理課件10（二）工作原理先將樣品和試劑分別置于轉(zhuǎn)盤相應(yīng)的凹槽內(nèi)，當(dāng)離心機開動后，受離心力的作用，試劑和樣品相互混合發(fā)生反應(yīng)，經(jīng)適當(dāng)?shù)臅r間后，各樣品最后流入轉(zhuǎn)盤外圈的比色凹槽內(nèi)，通過比色計檢測。（二）工作原理11三、分立式自動生物化學(xué)分析儀分立式自動生物化學(xué)分析儀是目前國內(nèi)外多采用的設(shè)計模式，因具有結(jié)構(gòu)簡單、檢測速度快的特點，新設(shè)計開發(fā)的儀器已少采用連續(xù)流動式和離心式。三、分立式自動生物化學(xué)分析儀12（一）工作原理分立式自動生物化學(xué)分析儀是按人工操作的方式編排程序，并以有序的機械動作代替人工，按程序依次完成各項操作的自動分析儀器。儀器操作過程中的各環(huán)節(jié)用傳送帶連接，按程序依次操作。（一）工作原理13自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理課件14四、干化學(xué)式自動生物化學(xué)分析儀分析儀是采用干化學(xué)(drychemistry)方法，將發(fā)生在液相反應(yīng)物中的反應(yīng)，轉(zhuǎn)移到一個固相載體上，利用分光檢測系統(tǒng)進(jìn)行檢測的一類新型儀器。

四、干化學(xué)式自動生物化學(xué)分析儀15（一）工作原理干化學(xué)分析儀多采用多層薄膜的固相試劑技術(shù)，僅需將樣品加在固相試劑上進(jìn)行測定。（一）工作原理16（二）儀器的類型及特點一種是使用試條的反射光度法系統(tǒng)(reflotronsystem)；另一種是采用膠片涂層技術(shù)的化學(xué)分析系統(tǒng)(vitroschemistrysystem)，它與Reflotron系統(tǒng)的區(qū)別是前者使用試條，后者則使用試劑片或塊狀劑。（二）儀器的類型及特點17第二節(jié)自動生物化學(xué)分析儀性能及評價

第二節(jié)自動生物化學(xué)分析儀性能及評價18一、生物化學(xué)自動分析儀性能（一）自動化程度自動化程度是指儀器能夠獨立完成生物化學(xué)測定操作程序的能力。除此之外，自動化程度還包括其他許多內(nèi)容，如單位時間處理標(biāo)本的能力，可同步分析的項目數(shù)等。一、生物化學(xué)自動分析儀性能19（二）分析效率分析效率是指在測定方法相同的情況下自動生物化學(xué)分析儀的分析速度。分析速度決定于一次測定中可測樣品多少和可測項目的多少。（二）分析效率20（三）應(yīng)用范圍儀器的應(yīng)用范圍是儀器的一個綜合性指標(biāo)，包括儀器所能進(jìn)行的分析方法以及可測定項目的種類，應(yīng)用范圍與儀器的設(shè)計原理及結(jié)構(gòu)有關(guān)。（三）應(yīng)用范圍21（四）精度與準(zhǔn)確度精度和準(zhǔn)確度是自動生物化學(xué)分析儀提供實驗分析結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度的基礎(chǔ)。自動生物化學(xué)分析儀的精度和準(zhǔn)確度取決于儀器各部件的加工精度和精確的工作狀態(tài)。（四）精度與準(zhǔn)確度22（五）其他性能除上述指標(biāo)外，儀器的取液量、最小反應(yīng)液體積和測試速度也是我們評價儀器性能的指標(biāo)。（五）其他性能23二、自動生物化學(xué)分析儀性能評價指標(biāo)常用性能評價指標(biāo)有精密度、波長準(zhǔn)確性、線性以及與其他儀器的相關(guān)性等。二、自動生物化學(xué)分析儀性能評價指標(biāo)24

(一)精密度評價批內(nèi)重復(fù)性：測定批內(nèi)重復(fù)性就是對樣品的某一個或幾個項目各重復(fù)測定20次，計算它的CV值即不精密度，然后與廠家的該項技術(shù)指標(biāo)進(jìn)行比較?？偩芏龋哼x擇某一常用的臨床項目的兩個濃度(有醫(yī)學(xué)決定水平的正常和異常值)，每天做室內(nèi)質(zhì)量控制。然后計算總精密度(ST)。(一)精密度評價25與廠商估計的精密度或臨床要求的精密度比較，將計算好的批內(nèi)精密度和總精密度用χ2檢驗法進(jìn)行比較，若所計算的χ2值小于表中的χ2，則說明所測精密度與廠商估計值無顯著性差異。

與廠商估計的精密度或臨床要求的精密度比較，將計算好的批內(nèi)精密26(二)相關(guān)性不同儀器的測定結(jié)果之間不可避免地存在著一定的差別，為了取得一致的結(jié)果，擁有兩臺儀器以上的實驗室，應(yīng)該進(jìn)行儀器間的校正。在僅有一臺儀器時，為了得到實驗室之間的一致性，也可以用參考實驗室的儀器進(jìn)行校正。(二)相關(guān)性27(三)波長校正波長校正包括線性和準(zhǔn)確性的檢查。線性檢查方法是用系列標(biāo)準(zhǔn)溶液在最大吸收處讀取吸光度，然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或用回歸法計算線性相關(guān)。

(三)波長校正28準(zhǔn)確性檢查的方法有兩種：

①用已知準(zhǔn)確摩爾濃度和摩爾消光系數(shù)(ε)的溶液在其特定波長比色，計算ε=A值／摩爾濃度，然后與標(biāo)準(zhǔn)ε比較。

②與已知準(zhǔn)確波長的儀器比較，如有漂移，應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)男Ｕ?。?zhǔn)確性檢查的方法有兩種：

①用已知準(zhǔn)確摩爾濃度和摩爾消光系數(shù)29第三節(jié)自動生物化學(xué)分析儀常用分析方法第三節(jié)自動生物化學(xué)分析儀常用分析方法30一、分析方法的種類(一)終點分析法(平衡法)終點分析法是基于反應(yīng)達(dá)到平衡時反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特征及其對光吸收強度的大小，對物質(zhì)進(jìn)行定量分析的一類方法，它是實驗室最常用的方法之一。一、分析方法的種類31一點終點法：一點終點法的特點是使用一種或兩種試劑。當(dāng)樣品和試劑混合后，待測物與試劑的物理化學(xué)反應(yīng)達(dá)到終點時，測定吸光度,計算待測物的濃度。該法具有代表性的試驗有：總蛋白、清蛋白、葡萄糖氧化酶法等。一點終點法：一點終點法的特點是使用一種或兩種試劑。當(dāng)樣品和試32兩點終點法：兩點終點法也稱固定時間法，它可以用一種試劑，也可以用兩種試劑。該方法的優(yōu)點是可以消除樣品、試劑的顏色、濁度，以及一些干擾物質(zhì)對測定的干擾。

兩點終點法：兩點終點法也稱固定時間法，它可以用一種試劑，也可33雙波長法：其原理是檢測計在對一待測物進(jìn)行檢測時，同時用兩個波長檢測，用主波長的吸光度減去副波長的吸光度，標(biāo)準(zhǔn)物與待測物同等對待，計算待測物的濃度。雙波長法：其原理是檢測計在對一待測物進(jìn)行檢測時，同時用兩個波34(二)連續(xù)監(jiān)測法測定底物的消耗或產(chǎn)物生成速度的化學(xué)方法稱為連續(xù)監(jiān)測法。它是通過適當(dāng)?shù)膬x器，連續(xù)測定酶促反應(yīng)過程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時間變化的多點數(shù)據(jù)，求出酶反應(yīng)初速度，間接計算酶活性濃度。(二)連續(xù)監(jiān)測法35具體方法有：1．兩點速率法2．多點速率法3．回歸法4．帶速率時間法具體方法有：36

(三)比濁測定法通過檢測物質(zhì)對光的散射或透射強度來測定物質(zhì)的方法稱比濁法。免疫透射比濁法是自動生物化學(xué)分析儀常用方法。目前常用的免疫比濁法主要用于血清特種蛋白的檢測，如載脂蛋白、微量蛋白、急性時相反應(yīng)蛋白、免疫球蛋白以及某些藥物監(jiān)測等。(三)比濁測定法37(四)均相酶免疫分析法該類方法是以生物體內(nèi)某種特異性很強的結(jié)合反應(yīng)作為測定基礎(chǔ)，在結(jié)合反應(yīng)中可將某種參加反應(yīng)的反應(yīng)物用標(biāo)記物加以標(biāo)記。利用酶作標(biāo)記物，以抗原抗體相互結(jié)合的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)的方法稱酶免疫分析法。

(四)均相酶免疫分析法38二、自動生物化學(xué)分析儀實驗參數(shù)的設(shè)置主要包括樣品量、試劑量、測定方法、校正方法、反應(yīng)時間、測定波長和控制因素等。二、自動生物化學(xué)分析儀實驗參數(shù)的設(shè)置39

(一)樣品與試劑量樣品與試劑量的確定一般按照試劑說明書上的比例，并結(jié)合儀器的特性進(jìn)行設(shè)置。儀器的特性有：樣品和試劑的最小加樣量及加量范圍、最小反應(yīng)液的體積等。(一)樣品與試劑量40(二)試劑的選擇單試劑法：在反應(yīng)過程中僅加一次試劑的方法稱單試劑法。其常見的有：①單試劑單波長法：指在選定的溫度和某一特定的波長，讀取反應(yīng)一定時間時的吸光度的方法。這是單試劑法中最常見的方法。(二)試劑的選擇41②單試劑雙波長法：單試劑雙波長法主要是為了消除檢測體系或標(biāo)本的混濁而設(shè)置。自動生物化學(xué)分析儀大部分終點分析均用此法。③標(biāo)本空白法：該法使用單波長或雙波長均可，常用本法來做終點分析。②單試劑雙波長法：單試劑雙波長法主要是為了消除檢測體系或標(biāo)本42雙試劑法:其常見的有:①雙試劑單波長一點法：檢測試劑分成兩部分加入，只讀一次吸光度。②雙試劑二點法：為了去掉標(biāo)本色素、濁度的影響，也可用雙試劑，在加入第一試劑后讀取一次吸光度，再加第二試劑，反應(yīng)一定時間后再讀取一次吸光度，依兩次吸光度之差計算結(jié)果。③雙試劑雙波長法雙試劑法:其常見的有:43(三)測定方法的選擇半自動生物化學(xué)分析儀一般具備其中的一點終點、兩點終點(單試劑)、連續(xù)監(jiān)測法(只能是一種固定方法)。全自動生物化學(xué)分析儀的功能較全面，具有前述的各種方法，可根據(jù)需要進(jìn)行選擇。

(三)測定方法的選擇44(四)波長的選擇單波長：單波長是用一個波長檢測物質(zhì)的光吸收強度的方法。當(dāng)測定體系中含有一種組分或在混合溶液中待測組分的吸收峰與其他共存物質(zhì)的吸收波長無重疊時，可選用。(四)波長的選擇45雙波長：用兩個不同波長檢測。當(dāng)被檢溶液混濁或存在較大的干擾物質(zhì)的光吸收時會出現(xiàn)光散射和非特異性光吸收，從而影響測定結(jié)果的準(zhǔn)確性，此時可用雙波長甚至多波長測定，以提高測定結(jié)果的準(zhǔn)確性。雙波長：用兩個不同波長檢測。當(dāng)被檢溶液混濁或存在較大的干擾物46(五)分析時間的選擇生物化學(xué)反應(yīng)的時間是某一項目所特有的，根據(jù)所采用的測定方法不同而異。反應(yīng)時間應(yīng)根據(jù)試劑說明書或自己試驗觀察，作合理的選擇和設(shè)置。(五)分析時間的選擇47(六)校正方法儀器內(nèi)設(shè)置的校正方法一般包含二點校正、多點校正、線性、非線性(對數(shù)、指數(shù)法、量程法)等。(六)校正方法48三、實驗用水質(zhì)量及生物化學(xué)實驗室條件(一)實驗用水的質(zhì)量生物化學(xué)自動分析儀對水質(zhì)有嚴(yán)格的要求，水的質(zhì)量直接影響到實驗結(jié)果和儀器的使用期限。因此，每個實驗室均應(yīng)有完善的純化水的來源及管理，才能獲取良好的檢驗質(zhì)量。純化水制備常用方法可分三大類：①蒸餾法、②去離子法、③逆滲透法。三、實驗用水質(zhì)量及生物化學(xué)實驗室條件49自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理課件50

臨床實驗室用水一般選用二級，特殊實驗如酶學(xué)測定或科研用水應(yīng)選一級水。三級水則用作儀器、器血經(jīng)自來水沖洗后的再沖洗，但使用一級水的實驗，其器皿的最后沖選仍應(yīng)用一級水。用一級水進(jìn)行的實驗不得用次級水稀釋標(biāo)本和配制標(biāo)準(zhǔn)液。臨床實驗室用水一般選用二級，特殊實驗如酶學(xué)測定或科研51(二)儀器工作環(huán)境的要求生物化學(xué)實驗室的面積要求大于20平方米。儀器要避開化學(xué)腐蝕物品，放置在無灰塵處，并且避免置于出現(xiàn)煙霧和蒸汽的區(qū)域。(二)儀器工作環(huán)境的要求52生物化學(xué)實驗室配套設(shè)施應(yīng)齊全，要求有空調(diào)器和取暖設(shè)施。生物化學(xué)實驗室一般用電量較大，應(yīng)根據(jù)儀器設(shè)備對電源的要求和總負(fù)載量設(shè)置專用電路，避免使用普通照明線路作為儀器室的電源。生物化學(xué)實驗室配套設(shè)施應(yīng)齊全，要求有空調(diào)器和取暖設(shè)施。53小結(jié)

小結(jié)54第二章

自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理第二章

自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理55自動生物化學(xué)分析儀的特點:精密度高，功能齊全；可進(jìn)行吸光度、濃度和酶活力的測定，能使用終點法和連續(xù)監(jiān)測法進(jìn)行分析；具有快速、簡便、微量、標(biāo)準(zhǔn)化、樣品和試劑用量低等優(yōu)點。自動生物化學(xué)分析儀的特點:56第一節(jié)自動生物化學(xué)分析儀的類型

第一節(jié)自動生物化學(xué)分析儀的類型57①按反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)可分為連續(xù)流動式、離心式、分立式和干片式四類。②按自動化程度可分為全自動和半自動型。③按同時可測定項目可分為單通道和多通道兩類。④按儀器的復(fù)雜程度及功能可分為小型、中型和大型三類。①按反應(yīng)裝置的結(jié)構(gòu)可分為連續(xù)流動式、離心式、分立式和干片式四58一、連續(xù)流動式自動生物化學(xué)分析儀連續(xù)流動式自動生物化學(xué)分析儀是第一代自動分析儀，在測定過程中各待測樣品與試劑混合后的化學(xué)反應(yīng)均在同一管道內(nèi)流動的過程中完成。一、連續(xù)流動式自動生物化學(xué)分析儀59（一）儀器結(jié)構(gòu)儀器主要構(gòu)成部件有：樣品盤、比例泵、混合器、透析器、恒溫器及檢測裝置組成。（一）儀器結(jié)構(gòu)60（二）工作原理在微機控制下，通過比例泵將標(biāo)本和試劑注入到連續(xù)的管道系統(tǒng)中，在一定的溫度下，在管道內(nèi)完成混合，去除干擾物，保溫，比色測定，信號放大，運算處理，最后將結(jié)果顯示并打印出來。（二）工作原理61二、離心式自動生物化學(xué)分析儀離心式生物化學(xué)分析儀是1969年發(fā)展起來的一種機型，它的全部檢驗過程是在一個類似離心機轉(zhuǎn)頭樣的圓盤上完成的。二、離心式自動生物化學(xué)分析儀62（一）儀器結(jié)構(gòu)離心式分析儀由加樣和分析兩個部分組成，加樣部分：包括樣品盤、試劑盤、吸樣臂、試劑臂和電子控制部分等。分析部分：除安裝有特殊的離心轉(zhuǎn)盤外，還有溫控和光學(xué)檢測系統(tǒng)，以及微機信息處理和顯示系統(tǒng)。（一）儀器結(jié)構(gòu)63自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理課件64（二）工作原理先將樣品和試劑分別置于轉(zhuǎn)盤相應(yīng)的凹槽內(nèi)，當(dāng)離心機開動后，受離心力的作用，試劑和樣品相互混合發(fā)生反應(yīng)，經(jīng)適當(dāng)?shù)臅r間后，各樣品最后流入轉(zhuǎn)盤外圈的比色凹槽內(nèi)，通過比色計檢測。（二）工作原理65三、分立式自動生物化學(xué)分析儀分立式自動生物化學(xué)分析儀是目前國內(nèi)外多采用的設(shè)計模式，因具有結(jié)構(gòu)簡單、檢測速度快的特點，新設(shè)計開發(fā)的儀器已少采用連續(xù)流動式和離心式。三、分立式自動生物化學(xué)分析儀66（一）工作原理分立式自動生物化學(xué)分析儀是按人工操作的方式編排程序，并以有序的機械動作代替人工，按程序依次完成各項操作的自動分析儀器。儀器操作過程中的各環(huán)節(jié)用傳送帶連接，按程序依次操作。（一）工作原理67自動生物化學(xué)分析儀的應(yīng)用與原理課件68四、干化學(xué)式自動生物化學(xué)分析儀分析儀是采用干化學(xué)(drychemistry)方法，將發(fā)生在液相反應(yīng)物中的反應(yīng)，轉(zhuǎn)移到一個固相載體上，利用分光檢測系統(tǒng)進(jìn)行檢測的一類新型儀器。

四、干化學(xué)式自動生物化學(xué)分析儀69（一）工作原理干化學(xué)分析儀多采用多層薄膜的固相試劑技術(shù)，僅需將樣品加在固相試劑上進(jìn)行測定。（一）工作原理70（二）儀器的類型及特點一種是使用試條的反射光度法系統(tǒng)(reflotronsystem)；另一種是采用膠片涂層技術(shù)的化學(xué)分析系統(tǒng)(vitroschemistrysystem)，它與Reflotron系統(tǒng)的區(qū)別是前者使用試條，后者則使用試劑片或塊狀劑。（二）儀器的類型及特點71第二節(jié)自動生物化學(xué)分析儀性能及評價

第二節(jié)自動生物化學(xué)分析儀性能及評價72一、生物化學(xué)自動分析儀性能（一）自動化程度自動化程度是指儀器能夠獨立完成生物化學(xué)測定操作程序的能力。除此之外，自動化程度還包括其他許多內(nèi)容，如單位時間處理標(biāo)本的能力，可同步分析的項目數(shù)等。一、生物化學(xué)自動分析儀性能73（二）分析效率分析效率是指在測定方法相同的情況下自動生物化學(xué)分析儀的分析速度。分析速度決定于一次測定中可測樣品多少和可測項目的多少。（二）分析效率74（三）應(yīng)用范圍儀器的應(yīng)用范圍是儀器的一個綜合性指標(biāo)，包括儀器所能進(jìn)行的分析方法以及可測定項目的種類，應(yīng)用范圍與儀器的設(shè)計原理及結(jié)構(gòu)有關(guān)。（三）應(yīng)用范圍75（四）精度與準(zhǔn)確度精度和準(zhǔn)確度是自動生物化學(xué)分析儀提供實驗分析結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度的基礎(chǔ)。自動生物化學(xué)分析儀的精度和準(zhǔn)確度取決于儀器各部件的加工精度和精確的工作狀態(tài)。（四）精度與準(zhǔn)確度76（五）其他性能除上述指標(biāo)外，儀器的取液量、最小反應(yīng)液體積和測試速度也是我們評價儀器性能的指標(biāo)。（五）其他性能77二、自動生物化學(xué)分析儀性能評價指標(biāo)常用性能評價指標(biāo)有精密度、波長準(zhǔn)確性、線性以及與其他儀器的相關(guān)性等。二、自動生物化學(xué)分析儀性能評價指標(biāo)78

(一)精密度評價批內(nèi)重復(fù)性：測定批內(nèi)重復(fù)性就是對樣品的某一個或幾個項目各重復(fù)測定20次，計算它的CV值即不精密度，然后與廠家的該項技術(shù)指標(biāo)進(jìn)行比較?？偩芏龋哼x擇某一常用的臨床項目的兩個濃度(有醫(yī)學(xué)決定水平的正常和異常值)，每天做室內(nèi)質(zhì)量控制。然后計算總精密度(ST)。(一)精密度評價79與廠商估計的精密度或臨床要求的精密度比較，將計算好的批內(nèi)精密度和總精密度用χ2檢驗法進(jìn)行比較，若所計算的χ2值小于表中的χ2，則說明所測精密度與廠商估計值無顯著性差異。

與廠商估計的精密度或臨床要求的精密度比較，將計算好的批內(nèi)精密80(二)相關(guān)性不同儀器的測定結(jié)果之間不可避免地存在著一定的差別，為了取得一致的結(jié)果，擁有兩臺儀器以上的實驗室，應(yīng)該進(jìn)行儀器間的校正。在僅有一臺儀器時，為了得到實驗室之間的一致性，也可以用參考實驗室的儀器進(jìn)行校正。(二)相關(guān)性81(三)波長校正波長校正包括線性和準(zhǔn)確性的檢查。線性檢查方法是用系列標(biāo)準(zhǔn)溶液在最大吸收處讀取吸光度，然后繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線或用回歸法計算線性相關(guān)。

(三)波長校正82準(zhǔn)確性檢查的方法有兩種：

①用已知準(zhǔn)確摩爾濃度和摩爾消光系數(shù)(ε)的溶液在其特定波長比色，計算ε=A值／摩爾濃度，然后與標(biāo)準(zhǔn)ε比較。

②與已知準(zhǔn)確波長的儀器比較，如有漂移，應(yīng)進(jìn)行適當(dāng)?shù)男Ｕ?zhǔn)確性檢查的方法有兩種：

①用已知準(zhǔn)確摩爾濃度和摩爾消光系數(shù)83第三節(jié)自動生物化學(xué)分析儀常用分析方法第三節(jié)自動生物化學(xué)分析儀常用分析方法84一、分析方法的種類(一)終點分析法(平衡法)終點分析法是基于反應(yīng)達(dá)到平衡時反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特征及其對光吸收強度的大小，對物質(zhì)進(jìn)行定量分析的一類方法，它是實驗室最常用的方法之一。一、分析方法的種類85一點終點法：一點終點法的特點是使用一種或兩種試劑。當(dāng)樣品和試劑混合后，待測物與試劑的物理化學(xué)反應(yīng)達(dá)到終點時，測定吸光度,計算待測物的濃度。該法具有代表性的試驗有：總蛋白、清蛋白、葡萄糖氧化酶法等。一點終點法：一點終點法的特點是使用一種或兩種試劑。當(dāng)樣品和試86兩點終點法：兩點終點法也稱固定時間法，它可以用一種試劑，也可以用兩種試劑。該方法的優(yōu)點是可以消除樣品、試劑的顏色、濁度，以及一些干擾物質(zhì)對測定的干擾。

兩點終點法：兩點終點法也稱固定時間法，它可以用一種試劑，也可87雙波長法：其原理是檢測計在對一待測物進(jìn)行檢測時，同時用兩個波長檢測，用主波長的吸光度減去副波長的吸光度，標(biāo)準(zhǔn)物與待測物同等對待，計算待測物的濃度。雙波長法：其原理是檢測計在對一待測物進(jìn)行檢測時，同時用兩個波88(二)連續(xù)監(jiān)測法測定底物的消耗或產(chǎn)物生成速度的化學(xué)方法稱為連續(xù)監(jiān)測法。它是通過適當(dāng)?shù)膬x器，連續(xù)測定酶促反應(yīng)過程中某一反應(yīng)產(chǎn)物或底物的濃度隨時間變化的多點數(shù)據(jù)，求出酶反應(yīng)初速度，間接計算酶活性濃度。(二)連續(xù)監(jiān)測法89具體方法有：1．兩點速率法2．多點速率法3．回歸法4．帶速率時間法具體方法有：90

(三)比濁測定法通過檢測物質(zhì)對光的散射或透射強度來測定物質(zhì)的方法稱比濁法。免疫透射比濁法是自動生物化學(xué)分析儀常用方法。目前常用的免疫比濁法主要用于血清特種蛋白的檢測，如載脂蛋白、微量蛋白、急性時相反應(yīng)蛋白、免疫球蛋白以及某些藥物監(jiān)測等。(三)比濁測定法91(四)均相酶免疫分析法該類方法是以生物體內(nèi)某種特異性很強的結(jié)合反應(yīng)作為測定基礎(chǔ)，在結(jié)合反應(yīng)中可將某種參加反應(yīng)的反應(yīng)物用標(biāo)記物加以標(biāo)記。利用酶作標(biāo)記物，以抗原抗體相互結(jié)合的免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)的方法稱酶免疫分析法。

(四)均相酶免疫分析法92二、自動生物化學(xué)分析儀實驗參數(shù)的設(shè)置主要包括樣品量、試劑量、測定方法、校正方法、反應(yīng)時間、測定波長和控制因素等。二、自動生物化學(xué)分析儀實驗參數(shù)的設(shè)置93

(一)樣品與試劑量樣品與試劑量的確定一般按照試劑說明書上的比例，并結(jié)合儀器的特性進(jìn)行設(shè)置。儀器的特性有：樣品和試劑的最小加樣量及加量范圍、最小反應(yīng)液的體積等。(一)樣品與試劑量94(二)試劑的選擇單試劑法：在反應(yīng)過程中僅加一次試劑的方法稱單試劑法。其常見的有：①單試劑單波長法：指在選定的溫度和某一特定的波長，讀取反應(yīng)一定時間時的吸光度的方法。這是單試劑法中最常見的方法。(二)試劑的選擇95②單試劑雙波長法：單試劑雙波長法主要是為了消除檢測體系或標(biāo)本的混濁而設(shè)置。自動生物化學(xué)分析儀大部分終點分析均用此法。③標(biāo)本空白法：該法使用單波長或雙波長均可，常用本法來做終點分析。②單試劑雙波長法：單試劑雙波長法主要是為了消除檢測體系或標(biāo)本96雙試劑法:其常見的有:①雙試劑單波長一點法：檢測試劑分成兩部分加入，只讀一次吸光度。②雙試劑二點法：為了去掉標(biāo)本色素、濁度的影響，也可用雙試劑，在加入第一試劑后讀取一次吸光度，再加第二試劑，反應(yīng)一定時間后再讀取一次吸光度，依兩次吸光度之差計算結(jié)果。③雙試劑雙波長法雙試劑法:其常見的有: