胎兒染色體異常的包遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)

胎兒染色體異常的

細(xì)胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)戚慶煒北京協(xié)和醫(yī)院婦產(chǎn)科第1頁，共37頁。簡介(1)中華人民共和國衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)胎兒常見染色體異常與開放性神經(jīng)管缺陷的產(chǎn)前篩查與診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)第1部分：中孕期母血清學(xué)產(chǎn)前篩查第2部分：胎兒常見染色體異常的細(xì)胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)第2頁，共37頁。簡介（2）由衛(wèi)生部醫(yī)療服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)專業(yè)委員會提出并歸口已通過會審及函審將由中華人民共和國衛(wèi)生部批準(zhǔn)本部分主要起草單位中國醫(yī)學(xué)科學(xué)與北京協(xié)和醫(yī)院云南省第一人民醫(yī)院四川大學(xué)華西第二醫(yī)院浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬婦產(chǎn)科醫(yī)院主審：夏家輝，孫念怙主要起草人：邊旭明，朱寶生，劉俊濤，王和，呂時銘，戚慶煒，蔣宇林，馬良坤第3頁，共37頁。法律法規(guī)依據(jù)1994年《中華人民共和國母嬰保健法》1996年《中華人民共和國母音保健法實施辦法》2002年衛(wèi)生部《產(chǎn)前診斷技術(shù)管理辦法》以及七個配套文件有利于上述法律法規(guī)的貫徹執(zhí)行第4頁，共37頁。相關(guān)法規(guī)2006年衛(wèi)生部《醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室管理辦法》2004年國務(wù)院《病原微生物實驗室生物安全管理條例》《中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)法》國務(wù)院《中華人民共和國標(biāo)準(zhǔn)法實施條例》第5頁，共37頁。標(biāo)準(zhǔn)性質(zhì)涉及通用技術(shù)、檢驗標(biāo)準(zhǔn)強制性標(biāo)準(zhǔn)第6頁，共37頁。標(biāo)準(zhǔn)制定的依據(jù)基于中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)院等單位完成的國家十一五攻關(guān)課題“胎兒染色體異常的產(chǎn)前篩查與診斷”結(jié)合衛(wèi)生部全國產(chǎn)前診斷專家組針對產(chǎn)前篩查工作規(guī)范所提出的相關(guān)建議文件參考美國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)會2006年版《臨床遺傳學(xué)實驗室標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范》第7頁，共37頁。標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)容范圍術(shù)語和定義臨床工作產(chǎn)前診斷的實驗室工作產(chǎn)前診斷病例的追蹤和隨訪資料性附錄第8頁，共37頁。范圍規(guī)定了產(chǎn)前診斷的臨床工作、實驗室工作、以及產(chǎn)前診斷病例的追蹤和隨訪標(biāo)準(zhǔn)適用于：已取得產(chǎn)前診斷技術(shù)服務(wù)資質(zhì)的醫(yī)療保健機構(gòu)采用細(xì)胞遺傳學(xué)方法等國家認(rèn)可的相關(guān)技術(shù)對孕婦實施胎兒染色體檢查對胎兒是否患目前細(xì)胞遺傳學(xué)技術(shù)可診斷的染色體積并作出產(chǎn)前診斷第9頁，共37頁。術(shù)語和定義第10頁，共37頁。染色體計數(shù)：在顯微鏡下計數(shù)一定數(shù)量的中期細(xì)胞中具有著絲粒的染色體數(shù)目分析細(xì)胞數(shù)（analyzedcells）在鏡下或計算機處理圖像、或根據(jù)照片對顯帶標(biāo)本中期細(xì)胞中每一條染色體的形態(tài)進(jìn)行分析的細(xì)胞數(shù)量核型分析細(xì)胞數(shù)（keryotypedcells）：根據(jù)ISCN1995或ISCN2005規(guī)則對一個細(xì)胞的染色體照片或者計算機處理圖像進(jìn)行分組、排隊、配對并進(jìn)行形態(tài)分析的細(xì)胞數(shù)量第11頁，共37頁。集落：經(jīng)收獲并染色后貼附在細(xì)胞培養(yǎng)物生長基底上相對聚集的細(xì)胞克隆異?？寺。褐辽儆袃蓚€細(xì)胞含有相同的額外染色體結(jié)構(gòu)異常，或至少有3個細(xì)胞丟失同一號染色體第12頁，共37頁。臨床工作門診工作程序知情同意書的簽署病例資料和樣本采集第13頁，共37頁。門診工作程序（1)由經(jīng)過專門培訓(xùn)的、有資質(zhì)的醫(yī)師承擔(dān)進(jìn)行遺傳咨詢或者婦產(chǎn)科產(chǎn)前咨詢應(yīng)讓孕婦理解采取侵入性取材手術(shù)可能發(fā)生的各種并發(fā)癥的風(fēng)險對于年齡在35歲以上，或者符合其它產(chǎn)前診斷指征的孕婦，均應(yīng)推薦其做產(chǎn)前診斷第14頁，共37頁。門診工作程序（2）細(xì)胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷指征35歲以上的高齡孕婦產(chǎn)前篩查出來的胎兒染色體異常高風(fēng)險的孕婦曾生育過染色體病患兒的孕婦產(chǎn)前B超檢查懷疑胎兒可能有染色體異常的孕婦夫婦一方為染色體異常攜帶者醫(yī)師認(rèn)為有必要進(jìn)行產(chǎn)前診斷的其他情形第15頁，共37頁。門診工作程序（3）介入性產(chǎn)前診斷手術(shù)絨毛取材術(shù)孕10-13周+6羊膜腔穿刺術(shù)孕16-22周+6經(jīng)皮臍血管穿刺術(shù)孕18周之后應(yīng)選擇合適的時期和方法進(jìn)行產(chǎn)前診斷術(shù)前應(yīng)正確掌握產(chǎn)前診斷及取材手術(shù)的適應(yīng)征和禁忌征，并完成必要的檢查第16頁，共37頁。知情同意書的簽署應(yīng)向孕婦說明：細(xì)胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)的局限性即常規(guī)染色體檢查不能：診斷染色體微小結(jié)構(gòu)改變單基因遺傳病多基因遺傳病環(huán)境以及藥物導(dǎo)致的胎兒宮內(nèi)發(fā)育異常如因細(xì)胞培養(yǎng)失敗而無法得到結(jié)果，則有再次取材的可能第17頁，共37頁。產(chǎn)前診斷病歷書寫要求產(chǎn)前診斷病歷保存規(guī)格和期限按照重要技術(shù)檔案保存保存期限至少20年第18頁，共37頁。標(biāo)本采集取材手術(shù)的質(zhì)量控制羊膜腔穿刺術(shù)一次穿刺成功率99%以上術(shù)后一周內(nèi)的胎兒丟失率小于0.5%絨毛取材術(shù)一次穿刺成功率98%以上術(shù)后一周內(nèi)的胎兒丟失率小于1.5%經(jīng)皮臍血管穿刺術(shù)一次穿刺成功率90%以上術(shù)后一周內(nèi)的胎兒丟失率小于2%第19頁，共37頁。產(chǎn)前診斷的實驗室工作標(biāo)本的接收登記細(xì)胞培養(yǎng)外周血淋巴細(xì)胞染色體（植物凝集素刺激）檢查產(chǎn)前診斷實驗室的一般要求羊水細(xì)胞染色體分析絨毛細(xì)胞染色體分析胎兒臍帶血染色體分析細(xì)胞遺傳學(xué)檢查報告產(chǎn)前診斷病歷資料存檔及標(biāo)本保存第20頁，共37頁。細(xì)胞培養(yǎng)一般要求：細(xì)胞接種操作應(yīng)在超凈工作臺進(jìn)行培養(yǎng)箱應(yīng)定期清洗并檢查培養(yǎng)箱每個工作日檢查指示的培養(yǎng)箱內(nèi)溫度和二氧化碳濃度應(yīng)注明最高與最低溫度控制應(yīng)制定并張貼出儀器運行的合理范圍當(dāng)讀數(shù)超過合理范圍時應(yīng)有相應(yīng)處理方案每周檢查儲氣瓶氣體和實驗室空氣濕度第21頁，共37頁。外周血淋巴細(xì)胞染色體（植物血凝刺激）檢查（1）一般要求每份標(biāo)本至少建立兩個獨立的培養(yǎng)系統(tǒng)90%以上的常規(guī)外周血分析應(yīng)在收到標(biāo)本之日起21個工作日之內(nèi)發(fā)出最終書面報告特殊染色和分析可以酌情延遲發(fā)放報告時間有特殊情況時要及時與被檢人和送檢單位取得聯(lián)系每年的診斷失敗率不超過2%第22頁，共37頁。外周血淋巴細(xì)胞染色體（植物血凝刺激）檢查（2）G帶現(xiàn)代染色體標(biāo)本應(yīng)達(dá)到320條帶的分辨率外周血染色體分析標(biāo)準(zhǔn)計數(shù)：至少計數(shù)20個細(xì)胞，記錄任何觀察到的貪色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常。對可能有性染色體異常病例的標(biāo)本，至少計數(shù)30個細(xì)胞。分析：分析5個細(xì)胞，所分析細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到320條帶水平核型分析：2個細(xì)胞，如果標(biāo)本中發(fā)現(xiàn)有一個以上的細(xì)胞克隆，則每個克隆核型分析一個細(xì)胞第23頁，共37頁。產(chǎn)前診斷實驗室的一般要求（1）至少應(yīng)建立兩個獨立的培養(yǎng)系統(tǒng)并分別置于不同的培養(yǎng)箱中除了經(jīng)皮臍血管穿刺獲取的臍血標(biāo)本除外，其他標(biāo)本應(yīng)由備份培養(yǎng)以備進(jìn)一步研究所需如果需要對父母的染色體進(jìn)行分析以助于鑒別胎兒染色體異?；虍悜B(tài)性，應(yīng)由同一個實驗室進(jìn)行上述分析第24頁，共37頁。產(chǎn)前診斷實驗室的一般要求（2）診斷失敗率不應(yīng)超過2%應(yīng)盡可能明確所有診斷失敗的原因診斷失敗的記錄以及相應(yīng)整改措施的記錄至少應(yīng)保存一年除了經(jīng)皮臍血管穿刺獲取的臍血染色體分析，90%以上的最終結(jié)果應(yīng)在從接收到的標(biāo)本之日起28個工作日之內(nèi)完成并發(fā)出正式報告，除非需要進(jìn)行進(jìn)一步的研究第25頁，共37頁。產(chǎn)前診斷實驗室的一般要求（3）不能達(dá)到上述標(biāo)準(zhǔn)的實驗室應(yīng)將標(biāo)本轉(zhuǎn)送到其他實驗室，直至達(dá)到上述要求為止對異常診斷結(jié)果應(yīng)盡可能進(jìn)行細(xì)胞遺傳學(xué)隨訪，以對產(chǎn)前診斷結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)第26頁，共37頁。羊水細(xì)胞染色體分析（1）培養(yǎng)瓶法：計數(shù):至少計數(shù)在2個以上獨立培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中平均分布的20個細(xì)胞，記錄任何觀察到的染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常分析：至少分析在2個以上獨立培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中的5個細(xì)胞，所分析的細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到320條帶水平核型分析：2個細(xì)胞，每個獨立的培養(yǎng)瓶各分析一個細(xì)胞第27頁，共37頁。羊水細(xì)胞培養(yǎng)分析（2）原位法：計數(shù)：至少計數(shù)在2個以上獨立培養(yǎng)的器皿中平均分布的15個細(xì)胞集落中的15個細(xì)胞，一個集落計數(shù)一個細(xì)胞如果沒有15個集落，則至少計數(shù)10個集落中的15個細(xì)胞記錄任何觀察到的染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常分析：至少分析在2個以上獨立培養(yǎng)的培養(yǎng)器皿中的5個細(xì)胞，所分析的細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到320條帶水平核型分析：2個細(xì)胞，共若發(fā)現(xiàn)有一個以上的細(xì)胞克隆，則每個克隆核型分析一個細(xì)胞第28頁，共37頁。絨毛細(xì)胞染色體分析（1）一般要求如果在臨床上采用直接法（未培養(yǎng)）染色體制備，則應(yīng)同時采用培養(yǎng)法（定義為培養(yǎng)時間在48小時以上）染色體制備方法。最終的書面報告應(yīng)包括細(xì)胞培養(yǎng)的方法第29頁，共37頁。絨毛細(xì)胞染色體分析（2）絨毛細(xì)胞染色體分析標(biāo)準(zhǔn)直接法（未培養(yǎng)）染色體制備方法：不建議使用第30頁，共37頁。絨毛細(xì)胞染色體分析（3）培養(yǎng)法：計數(shù)：至少計數(shù)在2個以上獨立培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中獨立分布的20個細(xì)胞，記錄任何觀察到的染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常分析：至少分析在2個以上獨立培養(yǎng)的培養(yǎng)器皿中的5個細(xì)胞，所分析的細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到320條帶水平核型分析：2個細(xì)胞，共若發(fā)現(xiàn)有一個以上的細(xì)胞克隆，則每個克隆核型分析一個細(xì)胞第31頁，共37頁。臍血細(xì)胞染色體分析標(biāo)準(zhǔn)計數(shù)：至少計數(shù)在2個以上獨立培養(yǎng)的培養(yǎng)瓶中平均分布的20個細(xì)胞，記錄任何觀察到的染色體數(shù)目或結(jié)構(gòu)異常分析：至少分析在2個以上獨立培養(yǎng)的培養(yǎng)器皿中的5個細(xì)胞，所分析的細(xì)胞的染色體分辨率應(yīng)達(dá)到相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)。核型分析2個細(xì)胞，如果發(fā)現(xiàn)有一個以上的細(xì)胞克隆，則每個克隆核型分析一個細(xì)胞第32頁，共37頁。細(xì)胞遺傳學(xué)檢查報告（1）細(xì)胞核型分析記錄及染色體異常的命名法：采用ISCN1995或ISCN2000均可最終書面報告應(yīng)包括以下信息：一般信息：患者姓名、年齡、標(biāo)本采集日期、實驗室收到標(biāo)本日期、實驗室編號、標(biāo)本的唯一編號、送檢醫(yī)師的姓名檢查內(nèi)容的報告應(yīng)包括：產(chǎn)前診斷指征；細(xì)胞培養(yǎng)的方法；顯帶方法、染色體分辨率；對所分析細(xì)胞的現(xiàn)行ISCN命名；除非有明確胎兒性別的醫(yī)療指征，不得報告胎兒性別。應(yīng)標(biāo)注實驗室結(jié)果報告的局限性第33頁，共37頁。細(xì)胞遺傳學(xué)檢查報告（2）至少應(yīng)由兩個有資質(zhì)的人員對細(xì)胞進(jìn)行分析和評估對結(jié)果的解釋應(yīng)包括：和臨床信息之間的關(guān)系；對結(jié)果的意義的討論；應(yīng)建議進(jìn)行進(jìn)一步的遺傳咨詢實驗室信息應(yīng)包括：實驗室名稱、技術(shù)人員姓名、簽發(fā)報告的實驗室負(fù)責(zé)人姓名和簽名。對正常核型的報告：按ISCN（1995）或ISCN（2005）書寫和描述，并建議遺傳咨詢第34頁，共37頁。產(chǎn)前診斷病歷資料存檔及標(biāo)本保存產(chǎn)前診斷病歷含術(shù)前相關(guān)檢查登記，知情同意書、細(xì)胞遺傳學(xué)分析實驗記錄合并入病歷中，存入產(chǎn)前診斷檔案保存，保存期限20年以上細(xì)胞培養(yǎng)及染色體標(biāo)本制備的實驗記錄按實驗室工作日志保存檔案，保存期限5年以上用于診斷性實驗的玻片保存期限有限，如果是永久性的顯帶方法（G-,C-,R-帶），玻片宜保存兩年。熒光染色體的染色體玻片的保存時間由實驗室主任決定。各個實驗室應(yīng)制定相應(yīng)的方案以確保在獲得足夠的能夠完成所要求的分析所需的中期分裂相細(xì)胞之前，要保存有部分原始標(biāo)本、細(xì)胞培養(yǎng)物或細(xì)胞沉淀物。每個產(chǎn)前診斷病例至少有2個細(xì)胞的核型圖像照相記錄并永久保存電子版或者相片第35頁，共37頁。產(chǎn)前診斷病例的追蹤和隨訪對產(chǎn)前診斷核型異常的病例應(yīng)進(jìn)行隨訪盡可能了解胎兒的發(fā)育情況和妊娠結(jié)局將隨訪結(jié)果記錄在產(chǎn)前診斷病歷中盡可能明確染色體核型和臨床表現(xiàn)之間的關(guān)系第36頁，共37頁。內(nèi)容梗概胎兒染色體異常的

細(xì)胞遺傳學(xué)產(chǎn)前診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。胎兒常見染色體異常與開放性神經(jīng)管缺陷的產(chǎn)前篩查與診斷技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。參考美國醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)會2006年版《臨床遺傳學(xué)實驗室標(biāo)準(zhǔn)和規(guī)范》。由經(jīng)過專門培訓(xùn)的、有資質(zhì)的醫(yī)師承擔(dān)。進(jìn)行遺傳咨詢或者婦產(chǎn)科產(chǎn)前咨詢。應(yīng)讓孕婦理解采取侵入性取材手術(shù)可能發(fā)生的各種并發(fā)癥的風(fēng)險。產(chǎn)前篩查出來的胎兒染色體異常高風(fēng)險的孕婦。術(shù)前應(yīng)正確掌握產(chǎn)前診斷及取材手術(shù)的適應(yīng)征和禁忌征，并完成必要的檢查。外周血淋巴細(xì)胞染色體（植物血凝刺激）檢查（2）。計數(shù)：至少計數(shù)20個細(xì)胞，記錄任何觀察到的貪色體數(shù)目或