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文檔簡介

實習(xí)內(nèi)容二滅菌一、實驗?zāi)康耐ㄟ^實際操作，了解消毒和滅菌的常用方法和適用范圍，掌握干熱滅菌和高壓濕熱滅菌的操作方法。二、材料和用具

高壓滅菌鍋、烘箱、培養(yǎng)基、吸管、滅菌水、培養(yǎng)基等。1.器具的消毒:2.工作場所的消毒:3.分離材料的表面消毒:

2.滅菌:應(yīng)用物理的或化學(xué)的方法把材料中或物體上的所有微生物全部殺死。經(jīng)滅菌的物體處于無菌狀態(tài)，如滅菌水、滅菌培養(yǎng)器皿。2.1高溫滅菌2.2過濾滅菌2.3紫外線滅菌2.4電離輻射滅菌2.5化學(xué)滅菌(二)培養(yǎng)基的滅菌滅菌：是指用物理或化學(xué)的方法完全殺死器物表面及其內(nèi)部的所有微生物。消毒：是指消滅器物表面或植物組織表面的某些微生物，而不是消滅所有的微生物。

1.干熱滅菌：(1)將培養(yǎng)皿、吸管等玻璃器皿洗凈干燥后，用舊報紙包好，或裝入特制的鐵筒中(每個吸管用紙包好后裝入鐵筒)，包紙時應(yīng)將吸取的一端放在取時先拆開的一端，以便取用時手勿觸及要求滅菌的一端。

2.濕熱滅菌：使用高壓滅菌鍋，利用高壓來提高蒸汽的溫度，達(dá)到完全滅菌的目的。其操作步驟如下：

(1)關(guān)好排水閥門放入清水至標(biāo)度為止，注意水量一定要加足，否則容易造成事故。

(3)通電加溫，同時打開排氣閥門，排盡鍋內(nèi)的空氣，即閥門沖出的全部是蒸氣時則表示徹底，此時可關(guān)閉排氣閥門，如果過早關(guān)閉閥門，排氣不徹底，也達(dá)不到徹底滅菌的目的。通常先關(guān)閉閥門，當(dāng)壓力表指針升至0.5磅時，打開排氣閥門放氣，降至零點，再關(guān)閉閥門。

(4)壓力表的指針上升時，鍋內(nèi)溫度也逐漸升高，當(dāng)壓力表指針升至0.15磅時，蒸氣溫度相當(dāng)于120℃～121℃(等于一個大氣壓)，此時開始計算滅菌時間，控制熱源，使處于0.1~15磅壓力保持30分鐘，即能達(dá)到完全滅菌的目的，然后停止加溫。

(5)稍微打開一點排氣活門，使鍋內(nèi)蒸汽緩慢排除，然后逐漸開大活門，氣壓徐徐下降，注意勿使排氣過快，否則會使鍋內(nèi)的培養(yǎng)基沸騰而沖脫或沾濕棉花塞，但排氣太慢又使培養(yǎng)基在鍋內(nèi)，受高溫處理時間過長，這樣對培養(yǎng)基也是不利的。一般從排氣到打開鍋蓋以10分鐘左右為好。

(6)當(dāng)壓力表指針降到零、鍋內(nèi)蒸氣完全排盡時，打開鍋蓋取出培養(yǎng)基，如需制備固體斜面培養(yǎng)基時，則應(yīng)趁熱將試管斜放在桌上，上面蓋上

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