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文檔簡介

2021-2022學年高考生物模擬試卷注意事項:1.答卷前,考生務必將自己的姓名、準考證號、考場號和座位號填寫在試題卷和答題卡上。用2B鉛筆將試卷類型(B)填涂在答題卡相應位置上。將條形碼粘貼在答題卡右上角"條形碼粘貼處"。2.作答選擇題時,選出每小題答案后,用2B鉛筆把答題卡上對應題目選項的答案信息點涂黑;如需改動,用橡皮擦干凈后,再選涂其他答案。答案不能答在試題卷上。3.非選擇題必須用黑色字跡的鋼筆或簽字筆作答,答案必須寫在答題卡各題目指定區(qū)域內相應位置上;如需改動,先劃掉原來的答案,然后再寫上新答案;不準使用鉛筆和涂改液。不按以上要求作答無效。4.考生必須保證答題卡的整潔??荚嚱Y束后,請將本試卷和答題卡一并交回。一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1.在“制作并觀察植物細胞有絲分裂的臨時裝片”活動中,觀察到不同分裂時期的細胞如圖所示:下列敘述錯誤的是A.裝片制作過程中需用清水漂洗已解離的根尖便于染色B.觀察過程中先用低倍鏡找到分生區(qū)細胞再換用高倍鏡C.圖甲細胞所處時期發(fā)生DNA復制及相關蛋白質的合成D.圖丙細胞中的染色體數(shù)目比圖乙細胞中的增加了一倍2.植物葉片衰老時,在葉柄基部先形成離層(圖甲),而后從植物體上脫落。細胞內的乙烯濃度升高可激活控制酶X的基因表達,合成的酶X分泌到細胞膜外分解細胞壁,從而形成離層??茖W研究發(fā)現(xiàn),葉柄離層細胞兩側的生長素濃度與葉片脫落的關系如圖乙所示。下列相關說法,錯誤的是()A.葉柄基部離層的形成與乙烯濃度密切相關B.酶X最可能是纖維素酶或果膠酶C.近基端生長素濃度大于遠基端時,葉片加速脫落D.葉面噴施生長素一定不影響其葉片脫落3.下列是應用同位素示蹤法進行的幾種研究,其中錯誤的是()A.用放射性同位素標記某種氨基酸進行示蹤,可得出分泌蛋白合成、加工和分泌的途徑B.用單細胞綠藻做14CO2示蹤實驗,不同時間點對放射性碳進行分析可得出暗反應的途徑C.給予某人131I通過測定甲狀腺的放射性可以反映甲狀腺的功能狀態(tài)D.將某噬箘體的DNA和蛋白質分別用32P和35S標記進而證明DNA是遺傳物質4.研究發(fā)現(xiàn),與正常女性相比,Turner綜合征患者(女性)易患血友病(伴Ⅹ染色體隱性遺傳病),據(jù)此可推測Turner綜合征患者體內可能()A.多一條X染色體B.少一條X染色體C.血小板凝集成團D.紅細胞凝集成團5.對下列三個分泌唾液的過程的分析錯誤的是()①一個從沒有吃過梅子的人,吃到梅子時會分泌唾液;②多次吃過梅子的人,當他看到梅子的時候,也會分泌唾液;③“談梅生津”指人沒吃到也沒看到,只是聽他人講梅子就分泌唾液。A.①②③過程都屬于反射,都需要完整的反射弧參與B.①②③過程的效應器都包括唾液腺,但三者的感受器不同C.聽覺中樞和語言中樞參與了③過程的調節(jié)D.反應過程中發(fā)生Na+內流,使興奮部位神經(jīng)纖維膜內側Na+濃度高于膜外側6.下列關于高中生物教材實驗的敘述正確的是()A.花生子葉薄片用蘇丹Ⅲ染液染色前,需用50%的酒精洗去雜質B.探究酶的專一性實驗中,自變量可以是酶的種類或底物的種類C.光合色素提取實驗中,葉片研磨時應加入二氧化硅以防止色素被破壞D.驗證活細胞吸收物質的選擇性實驗中,未煮過的玉米籽粒不會被紅墨水染色7.在農業(yè)生產中,選擇合適的育種方法,能有效改良作物品質,提高產量。下列有關作物育種的說法正確的是A.通過雜交育種,能從純合低產不抗病的品種中選出高產抗病的新品種B.誘變育種能誘發(fā)突變,所以可在較短的時間內獲得大量純合變異類型C.利用單倍體育種可獲得正常生殖的純合個體,明顯縮短了育種的年限D.人工誘導染色體數(shù)目加倍最常用的方法是低溫處理萌發(fā)的種子或幼苗8.(10分)多酶片是一種促消化的藥品,主要成分是胰蛋白酶、胃蛋白酶。多酶片還具有分解脂質的功效,加速膽固醇的酯化從而降低血液中的膽固醇含量。下列說法合理的是()A.多酶片應整顆服用,防止唾液淀粉酶對多酶片水解B.胃蛋白酶在腸道中把蛋白質水解成多肽C.膽固醇是動物細胞膜的重要成分之一D.人體小腸黏膜可通過主動運輸?shù)姆绞轿找鹊鞍酌付?、非選擇題9.(10分)圖甲是某草原生態(tài)系統(tǒng)中碳循環(huán)模式圖,圖中A、B、C、D表示生態(tài)系統(tǒng)的成分,①②③為特定的生理過程,圖乙表示該系統(tǒng)中部分生物間的食物關系。請據(jù)圖分析回答:(1)圖乙中的生物對應圖甲中的___________(用字母表示),在①、③過程中碳以___________形式進行循環(huán)。(2)如要調查該生態(tài)系統(tǒng)中蒲公英的種群密度,通常采用_____________法。(3)圖乙中,若鼠和昆蟲糞便中的能量為M,呼吸作用消耗的能量為R,用于自身生長、發(fā)育和繁殖等生命活動的能量為N,則圖中第二營養(yǎng)級的同化量可表示為_____________。(4)該草原曾發(fā)生過火災,但此后又慢慢恢復,從生態(tài)系統(tǒng)的角度分析,這體現(xiàn)了生態(tài)系統(tǒng)具有自我調節(jié)能力,這種能力的大小主要取決于_____________。10.(14分)家蠶細胞具有高效表達外源基因的能力。科學家將人干擾素基因導入家蠶細胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥?;卮鹣铝邢嚓P問題:(1)進行轉基因操作前,需將獲得的幼蠶組織先剪碎,并用_____酶短時處理幼蠶組織,以便獲得單個細胞作為受體細胞。(2)在培養(yǎng)獲得單個細胞時,為避免雜菌污染,除進行一系列無菌處理外,還應在培養(yǎng)液中添加一定量的_______________。培養(yǎng)家蠶細胞時,細胞會產生貼壁生長和_______現(xiàn)象,通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中,這樣可以________________,增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量,也有利于空氣交換。(3)將干擾素基因導入培養(yǎng)的家蠶細胞時,需要載體協(xié)助,而載體一般不選擇_______(填“噬菌體”或“昆蟲病毒”),原因是_____________________________________________。(4)若要檢測干擾素基因在家蠶細胞中是否表達,采用的技術有__________和___________________。11.(14分)癌細胞表面蛋白“PDL-1”與T細胞表面蛋白“PD-1”特異性結合后,可抑制T細胞活性并啟動其凋亡,導致腫瘤細胞發(fā)生免疫“逃逸”。研究者對“PD-1”基因進行克隆、表達及生物學活性鑒定,為制備抗體打基礎。研究中所用引物α和β堿基序列見圖1、幾種常用限制酶名稱及識別序列與酶切位點見圖2:α鏈:5'-TCACTCGAGACCATGCAGATCCCACAGGCGCCC-3'β鏈:5'-CTCGAATTCTCAGAGGGGCCAAGAGCAGTG-3'圖1(1)首先提取細胞中的mRNA反轉錄生成____________________作為模板;設計含有不同的限制酶切點的α和β序列為引物,通過____________________技術擴增目的基因。(2)選用圖1中的兩種名稱分別為____________________的限制酶將“pIRES2-EGFP質?!陛d體進行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構建表達載體。該表達載體的組成,除了目的基因、標記基因抗卡那霉素基因外,還必須具有____________________等。(3)而后一定溫度下,與經(jīng)過處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有_____________培養(yǎng)基中,可篩選出已經(jīng)完成轉化的大腸桿菌,繼續(xù)培養(yǎng)該種大腸桿菌以擴增重組DNA。(4)將擴增后的“pIRES2-EGFP載體/PD-1重組DNA”轉入可高度表達外源基因的原代293T細胞。一段時間后,為確定PD-1基因是否表達,檢測細胞膜表面是否具有____________________。為判斷其是否具有生物學活性和功能,則可裂解293T細胞,提取該物質看能否與____________________發(fā)生結合,從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。研究中還會有一步驟,只將“pIRES2-EGFP載體”轉入293T細胞,其目的是_________________________。12.瘦素是一種蛋白質類激素,可作用于下丘腦,調節(jié)人的食欲,其作用機理如圖所示。X、Y、Z代表信號分子,請據(jù)圖分析回答:(1)瘦素合成后,以________的方式分泌出細胞,通過_________運輸至下丘腦,并與靶細胞上的___________結合。(2)人體內脂肪含量偏高時,瘦素釋放量增加,使神經(jīng)元A興奮,神經(jīng)元B抑制,此時神經(jīng)元A膜外的電位為________,信號分子X與Y的比值增加,同時信號分子Z的釋放減少,從而使飽中樞興奮、饑中樞抑制,降低人的食欲。大多數(shù)肥胖者食欲失去控制而檢測發(fā)現(xiàn)其血液中瘦素水平?jīng)]有降低,出現(xiàn)這種情況最可能的原因是_______________________________。(3)當人體大量進食后,胰島素的分泌量___________,促進細胞吸收葡萄糖并將其轉變?yōu)橹?。?jù)此判斷,當瘦素對胰島素的分泌具有___________作用時,才可維持體內脂肪含量的相對穩(wěn)定。(4)飲水不足會使下丘腦分泌的___________激素增加,同時使興奮傳到________,使人主動飲水。某些肥胖患者自身抗體會攻擊神經(jīng)元A上的瘦素受體,這種病在免疫學上稱為________。

參考答案一、選擇題(本大題共7小題,每小題6分,共42分。)1、C【解析】

分析題圖可得,甲圖為植物有絲分裂前期的細胞,乙圖為植物有絲分裂中期的細胞,丙圖為植物有絲分裂后期的細胞,丁圖為植物有絲分裂末期的細胞。【詳解】裝片在制作時需要先用鹽酸解離,而因為染色用的染色劑為堿性,因此在染色前需要用清水漂洗以防止解離液和染色劑中和導致染色效果降低,A選項正確;觀察過程需要從低倍鏡開始,找到分生區(qū)細胞后再換高倍鏡觀察,B選項正確;圖甲為有絲分裂前期的細胞,正在處于核膜消失,形成染色體的階段,已經(jīng)完成了染色體的復制和相關蛋白質的合成,C選項錯誤;圖乙為有絲分裂中期的細胞,染色體數(shù)與普通體細胞相等,丙圖為有絲分裂后期的細胞,由于著絲粒斷裂,使染色體暫時加倍,故圖丙細胞中的染色體數(shù)目比圖乙細胞中的增加了一倍,D選項正確。故錯誤的選項選擇C。2、D【解析】

題意分析:乙烯濃度升高激活控制酶X合成的基因的表達,即乙烯促進了酶X的合成,酶X分泌到細胞外分解細胞壁,從而形成離層;圖乙分析可知,當近基端生長素濃度大于遠基端生長素濃度時,葉片加速脫落,當近基端生長素濃度小于遠基端生長素濃度時,葉片不脫落?!驹斀狻緼、分析題意可知,葉柄基部離層的形成與乙烯濃度密切相關,A正確;B、根據(jù)酶X能分解細胞壁,而細胞壁的成分是纖維素和果膠,可推測酶X最可能是纖維素酶或果膠酶,B正確;C、由圖乙結果可知,當近基端生長素濃度大于遠基端時,葉片加速脫落,C正確;D、由乙圖可知,生長素與離層的形成有關,故此可知葉面噴施生長素應該會影響其葉片脫落,D錯誤。故選D。3、D【解析】

同位素標記法也叫同位素示蹤法,同位素可用于追蹤物質的運行和變化規(guī)律。在生物學研究中,用于研究分泌蛋白的合成過程、噬菌體侵染細菌的實驗、光合作用過程中水的來源和二氧化碳的轉移途徑等方面?!驹斀狻緼、用放射性同位素標記某種氨基酸進行示蹤,可得出分泌蛋白合成、加工和分泌的途徑,即核糖體→內質網(wǎng)→高爾基體→細胞膜,A正確;B、用單細胞綠藻做14CO2示蹤實驗,不同時間點對放射性碳分析可得出暗反應的途徑是14CO2→14C3→(14CH2O),B正確;

C、I是合成甲狀腺細胞甲狀腺激素的原料,給予某人131I,通過測定甲狀腺激素的放射性可以反映甲狀腺的功能狀態(tài),C正確;

D、噬菌體侵染細菌實驗中分別用32P標記DNA、35S標記蛋白質的噬菌體去侵染細菌,觀察子代噬菌體的放射性,證明了DNA是遺傳物質,D錯誤。

故選D。4、B【解析】

染色體數(shù)目變異的基本類型:(1)細胞內的個別染色體增加或減少,如21三體綜合征,患者比正常人多了一條21號染色體。(2)細胞內的染色體數(shù)目以染色體組的形式增加或減少?!驹斀狻垦巡榘閄隱性遺傳病,正常情況下,女性患者需要滿足兩條X染色體上都是隱性基因時才患病,而Turner綜合征的女性患者更容易患血友病,說明很有可能是少一條X染色體,B正確,故選B。5、D【解析】

根據(jù)反射形成的過程可將其分為兩類:簡單反射(非條件反射)和復雜反射(條件反射)。(1)簡單反射(非條件反射)簡單反射是指生來就有的先天性反射,如縮手反射、眨眼反射、排尿反射和膝跳反射等,它是一種比較低級的神經(jīng)活動,由大腦皮層以下的神經(jīng)中樞(如脊髓、腦干)參與即可完成。(2)復雜反射(條件反射)復雜反射是人出生以后在生活過程中逐漸形成的后天性反射,復雜反射(條件反射)是在非條件反射的基礎上,經(jīng)過一定的過程,在大腦皮層的參與下形成的,因此,復雜反射(條件反射)是一種高級的神經(jīng)活動,而且是高級神經(jīng)活動的基本方式?!驹斀狻緼、①是生來就有的,是非條件反射,②③是后天形成的,是條件反射,反射活動都需要完整的反射弧參與,A正確;B、三個分泌唾液的過程的效應器都包括唾液腺,①過程刺激種類是味覺,感受器在舌尖,②過程刺激種類是視覺刺激,③過程刺激種類是聽覺,B正確:C、聽覺中樞和語言中樞參與了“談梅生津”分泌唾液的調節(jié)過程,C正確;D、興奮時,細胞膜對Na+的通透性增加,Na+內流,使興奮部位膜內側陽離子濃度高于膜外側,但鈉離子濃度還是細胞外高于細胞內,D錯誤。故選D?!军c睛】本題需要考生分析出三個過程反射的種類,結合興奮在神經(jīng)纖維上的傳導過程和神經(jīng)中樞的分級調節(jié)進行解答。6、B【解析】

1、脂肪需要使用蘇丹Ⅲ(蘇丹Ⅳ)染色,使用酒精洗去浮色以后在顯微鏡下觀察,可以看到橘黃色(紅色)的脂肪顆粒。2、提取綠葉中色素時,需要加入無水乙醇(丙酮)、SiO2、CaCO3,其中無水乙醇(丙酮)的作用是提取色素,SiO2的作用是使研磨更充分,CaCO3的作用是防止色素被破壞?!驹斀狻緼、花生子葉薄片用蘇丹Ⅲ染液染色后,需用50%的酒精洗去雜質,A錯誤;B、探究酶的專一性實驗中,自變量可以是酶的種類也可以是底物的種類,B正確;C、光合色素提取實驗中,葉片研磨時應加入碳酸鈣以防止色素被破壞,C錯誤;D、先縱切玉米籽粒,在用紅墨水染色,沖洗后觀察其顏色變化,胚乳細胞是死細胞,煮過的玉米胚乳與未煮過的均被染成紅色,D錯誤。故選B。7、C【解析】雜交育種是將兩個或多個品種的優(yōu)良性狀通過交配集中在一起,再經(jīng)過選擇和培育,獲得新品種的方法。純合低產不抗病的品種中沒有與高產、抗病相關的基因,所以不可能通過雜交育種從純合低產不抗病的品種中選出高產抗病的新品種,A項錯誤;誘變育種與自然突變相比提高了突變頻率,能在較短的時間內獲得較多的優(yōu)良變異類型,但由于基因突變具有低頻性和不定向性的特點,所以這些變異類型一般都是雜合的,需要通過自交獲得純合子,B項錯誤;單倍體育種過程中,常采用花藥(花粉)離體培養(yǎng)的方法來獲得單倍體植株,然后經(jīng)過人工誘導使染色體數(shù)目加倍,重新恢復到正常植株的染色體數(shù)目。因此用這種方法培育得到的植株,不僅能夠正常生殖,而且每對染色體上的成對的基因都是純合的,明顯縮短了育種的年限,C項正確;人工誘導染色體數(shù)目加倍的方法很多,目前最常用而且最有效的方法,是用秋水仙素來處理萌發(fā)的種子或幼苗,D項錯誤?!军c睛】本題考查作物育種的相關知識,意在考查學生的識記能力和判斷能力。解題的關鍵是要熟練掌握誘變育種、雜交育種、單倍體育種的原理、方法、優(yōu)缺點和典例。8、C【解析】

“多酶片”的雙層結構應是依據(jù)“藥物先進入胃,然后才進入小腸”來設計的,外層含有胃蛋白酶,內層含有胰蛋白酶、胰淀粉酶等,使其中各種酶能緩慢地釋放出來發(fā)揮作用。據(jù)此分析解答?!驹斀狻緼.多酶片應整顆服用,防止胃酸對多酶片的破壞,A錯誤;B.胃蛋白酶在胃中把蛋白質水解成多肽,B錯誤;C.膽固醇是動物細胞膜的重要成分之一,C正確;D.胰蛋白酶屬于大分子物質,不可通過主動運輸?shù)姆绞轿眨珼錯誤。故選C。二、非選擇題9、BD樣方營養(yǎng)結構的復雜程度【解析】

1.生態(tài)系統(tǒng)的結構包括生態(tài)系統(tǒng)的組成成分和營養(yǎng)結構,組成成分又包括非生物的物質和能量,生產者、消費者和分解者,營養(yǎng)結構就是指食物鏈和食物網(wǎng)。生產者主要指綠色植物和化能合成作用的生物,消費者主要指動物,分解者指營腐生生活的微生物和動物。2.動物的同化量等于攝入量減去糞便中的能量即糞便量,各級動物的同化量的去向包括呼吸作用的消耗和用于生長、發(fā)育與繁殖的能量。用于生長發(fā)育和繁殖的能量的去向包括流向下一營養(yǎng)級的能量、流向分解者的能量和未被利用的能量。題圖分析,圖中A、B、C、D依次表示非生物的物質和能量、消費者、分解者、生產者;①②③依次表示光合作用、攝食、分解者的分解作用。圖乙表示該生態(tài)系統(tǒng)中的部分食物網(wǎng)?!驹斀狻浚?)食物網(wǎng)是由生產者和消費者組成的,因此圖乙中的生物包括生產者和消費者,即圖甲中的DB,在①、③過程中碳以形式在無機環(huán)境和生物群落之間進行循環(huán)。(2)調查植物的種群數(shù)量通常用的方法是樣方法,因此要調查該生態(tài)系統(tǒng)中蒲公英的種群密度,要采用樣方法進行。(3)圖乙中,鼠和昆蟲都為第二營養(yǎng)級,其糞便中的能量屬于生產者植物的同化量,即M包含在植物同化量中,根據(jù)分析可知第二營養(yǎng)級的同化量等于第二營養(yǎng)級生物的呼吸作用消耗和第二營養(yǎng)生物用于自身生長、發(fā)育和繁殖的能量,因此,第二營養(yǎng)級的同化量可表示N+R。(4)該草原曾發(fā)生過火災,但此后又慢慢恢復,這說明生態(tài)系統(tǒng)具有自我調節(jié)能力,一般來講,生態(tài)系統(tǒng)的成分越單純,營養(yǎng)結構越簡單,自我調節(jié)能力就越弱,反之,就越強,因此,該能力的大小與生態(tài)系統(tǒng)中營養(yǎng)結構的復雜程度有關。【點睛】熟知生態(tài)系統(tǒng)的結構與功能是解答本題的關鍵,掌握能量流動的過程是解答本題的另一關鍵!解答本題還需要明確自我調節(jié)能力的含義及其影響因素。10、胰蛋白酶抗生素接觸抑制增大細胞貼壁生長的附著面積噬菌體噬菌體的宿主細胞是細菌而不是家蠶分子雜交技術抗原—抗體雜交技術【解析】

1、動物細胞培養(yǎng)的條件:(1)無菌、無毒的環(huán)境:①消毒、滅菌;②添加一定量的抗生素;③定期更換培養(yǎng)液,以清除代謝廢物。(2)營養(yǎng)物質:糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等,還需加入血清、血漿等天然物質。(3)溫度和PH:36.5℃±0.5℃;適宜的pH:7.2~7.4。(4)氣體環(huán)境:95%空氣(細胞代謝必需的)和5%的CO2(維持培養(yǎng)液的PH)。2、細胞的接觸抑制:細胞表面相互接觸時,細胞就會停止分裂增殖。【詳解】(1)要將動物組織細胞分散開需要用胰蛋白酶(或膠原蛋白酶)酶短時處理動物組織。(2)在培養(yǎng)動物細胞時,為避免雜菌污染,除進行一系列無菌處理外,還應在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素,以防培養(yǎng)過程中的污染。利用生物反應器培養(yǎng)家蠶細胞時,貼滿瓶壁的細胞會產生接觸抑制現(xiàn)象。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應器中,這樣可以增大細胞貼壁生長的附著面積,從而增加培養(yǎng)的細胞數(shù)量,也有利于氣體交換。(3)若將干擾素基因導入培養(yǎng)的家蠶細胞時,需要載體協(xié)助,而載體一般不選擇噬菌體,原因是噬菌體的宿主細胞是細菌而不是家蠶。(4)基因的表達過程包括轉錄和翻譯,因此若要檢測某基因是否表達,可檢測表達過程中的產物mRNA和蛋白質。因此,若要檢測干擾素基因在家蠶細胞中是否表達,采用的技術有分子雜交技術和抗原—抗體雜交技術。【點睛】本題考查基因工程和動物細胞培養(yǎng)的相關知識,要求考生識記PCR技術的條件;識記動物細胞培養(yǎng)的條件,能結合所學的知識準確答題。11、cDNAPCRXhoIEoRI啟動子、終止子、復制原點卡那霉素PD-1蛋白PDL-1或答PD-1抗體作為對照【解析】

基因工程技術的基本步驟:(1)目的基因的獲取:方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術擴增和人工合成。(2)基因表達載體的構建:是基因工程的核心步驟,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。(3)將目的基因導入受體細胞:根據(jù)受體細胞不同,導入的方法也不一樣。將目的基因導入植物細胞的方法有農桿菌轉化法、基因槍法和花粉管通道法;將目的基因導入動物細胞最有效的方法是顯微注射法;將目的基因導入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。(4)目的基因的檢測與鑒定:分子水平上的檢測:①檢測轉基因生物染色體的DNA是否插入目的基因采用DNA分子雜交技術;②檢測目的基因是否轉錄出了mRNA采用分子雜交技術;③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質采用抗原—抗體雜交技術。個體水平上的鑒定:抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等?!驹斀狻浚?)基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫(cDNA)。其中基因組文庫包含某種生物所有的基因,而部分基因文庫只包含某種生物的部分基因,可以mRNA為模板反轉錄形成cDNA;由于PCR技術利用的是DNA分子復制的原理,所以用該cDNA進行PCR技術擴增短時間內可以獲得大量的目的基因。(2)分析圖1中堿基序列,α鏈上有“—CTCGAC—”識別序列,β鏈上有“—GAATTC—”堿基識別序列,與圖2中XhoI限制酶和EoRI限制酶的識別序列相同。故選用XhoI限制酶和EoRI限制酶將“pIRES2-EGFP質?!陛d體進行雙切,再用DNA連接酶將其與目的基因拼接,構建基因表達載體?;虮磉_載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子、終止子、復制原點等。(3)根據(jù)第(2)題可知,基因表達載體上的標記基因是卡那霉素抗性基因,因此一定溫度下,與經(jīng)過Ca2+處理的感受態(tài)大腸桿菌混合培養(yǎng)在含有卡那霉素的培養(yǎng)基,可篩選出已經(jīng)完成轉化的大腸桿菌。(4)基因表達的產物是蛋白質,一段時間后,為確定PD-1基因是否表達,可以檢測細胞膜表面是否具有PD-1基因表達的PD-1蛋白。為判斷其是否具有生物學活性和功能,可采用抗原—抗體雜交技術,即從裂解293T細胞中,提取PD-1蛋白看能否與PDL-1發(fā)生結合,從而阻斷“PD-1與PDL-1信號通路”。為了增加實驗的可信度,還需要設置對照實驗,只將“pIRES2-EGFP載體”轉入293T細胞,因為不含PD-1基因,所以“PD-1與PDL-1信號通路”不會阻斷?!军c睛】題考查基因工程

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