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文檔簡介
微生物重點實驗1——實驗1.2培養(yǎng)基的配制學(xué)習(xí)目標:掌握培養(yǎng)基的配制的過程理解無菌操作重要考點3:培養(yǎng)基的配制組內(nèi)合作:1、說出培養(yǎng)基配制流程;2、討論消毒與滅菌的區(qū)別,小結(jié)常用滅菌方法。1、計算2、稱量5、分裝6、滅菌滅菌——高壓滅菌1.05kg/cm2、121℃,15—30min滅菌鍋高壓滅菌作用:殺死所有活的微生物及芽孢(補充:倒“平板”)超凈工作臺7、恒溫培養(yǎng)(恒溫培養(yǎng)箱)(一般需要作無菌檢查)核心:保證無菌操作超凈工作臺超凈工作臺、酒精燈火焰旁操作3、消毒與滅菌的區(qū)別(1)消毒(如巴氏消毒法62℃,30min、酒精擦拭等)僅殺死活的微生物,不能殺死芽孢。(2)滅菌(高壓滅菌1.05kg/cm2、121℃、15-30min;灼燒滅菌、干熱滅菌等)能殺死所有微生物及其芽孢。微生物重點實驗2——微生物的培養(yǎng)掌握劃線法接種方法與作用單個菌體2.特征:大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度等。3.功能:1.定義:補充:菌落鑒定菌種的重要依據(jù)固體培養(yǎng)基上大量繁殖子細胞群體菌落是由單個細胞分裂形成的種群常用工具圖示接種環(huán)玻璃刮鏟微生物(如大腸桿菌)的培養(yǎng):㈠制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基1.計算2.稱量3.熔化4.調(diào)節(jié)pH5.分裝6.滅菌7.恒溫培養(yǎng)枯草桿菌菌落菌落灰白色,較大,邊緣比較粗糙大腸桿菌菌落菌落灰白色,圓形,透明或半透明滕黃八疊球菌菌落菌落黃色,圓形、邊緣光滑問題討論為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)?在劃線操作結(jié)束時,仍然需要灼燒接種環(huán)嗎?為什么?操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了防止接種環(huán)上的微生物污染培養(yǎng)物殺死殘留的菌種,保證使下一次劃線時,菌種直接來源于上次劃線的末端,從而通過劃線次數(shù)的增加,使每次劃線時接種物逐漸稀釋,培養(yǎng)后得到單個菌落。避免接種環(huán)上的細菌污染環(huán)境和感染操作者。Q:為什么劃線法接種能觀察到單個菌落?劃線法接種時,使接種物逐漸稀釋,最后出現(xiàn)單個細菌,培養(yǎng)后出現(xiàn)單個菌落。要獲得單菌落一般選用_______法接種劃線劃線法優(yōu)點:可對微生物進行分離、純化,獲得單一菌落1、鑒別培養(yǎng)基是否被雜菌污染的方法是()A.將未接種的培養(yǎng)基放在實驗桌上培養(yǎng)B.將未接種的培養(yǎng)基放在窗臺上培養(yǎng)C.將未接種的培養(yǎng)基放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)D.將已接種的培養(yǎng)基放在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)C試一試2、要將配制好的培養(yǎng)基進行滅菌,通常采用的方法是()A.灼燒滅菌B.高壓蒸氣滅菌C.干熱滅菌D.煮沸滅菌B4、培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、接種環(huán)、實驗操作者的雙手、空氣、牛奶所采用的滅菌或消毒方法依次是()①化學(xué)消毒②灼燒滅菌③干熱滅菌④紫外線消毒⑤
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