免疫標(biāo)記技術(shù)及分析應(yīng)用

關(guān)于免疫標(biāo)記技術(shù)及分析應(yīng)用第一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日用熒光素、放射性同位素、酶、發(fā)光劑、膠體金或電子致密物質(zhì)等作為示蹤劑，標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行的抗原抗體反應(yīng)。第一節(jié)免疫標(biāo)記技術(shù)第二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日熒光顯微鏡，射線測(cè)量?jī)x，酶標(biāo)檢測(cè)儀，電子顯微鏡和發(fā)光免疫測(cè)定儀等精密儀器，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果直接鏡檢觀察或進(jìn)行自動(dòng)化測(cè)定。第三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日免疫標(biāo)記技術(shù)分類：免疫酶技術(shù)(ng)、放射免疫技術(shù)(pg)、免疫熒光技術(shù)、免疫電鏡技術(shù)、免疫膠體金技術(shù)、發(fā)光免疫測(cè)定。特點(diǎn)：高度靈敏、特異、快速，定性、定量、定位第四頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日反應(yīng)類型實(shí)驗(yàn)技術(shù)結(jié)果判斷標(biāo)記免疫反應(yīng)熒光免疫技術(shù)檢測(cè)熒光現(xiàn)象放射免疫技術(shù)檢測(cè)放射性強(qiáng)度酶免疫技術(shù)檢測(cè)酶底物顯色發(fā)光免疫技術(shù)檢測(cè)發(fā)光強(qiáng)度金免疫技術(shù)檢測(cè)金顆粒沉淀免疫標(biāo)記技術(shù)第五頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日用標(biāo)記物標(biāo)記抗體或抗原進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)借以提高免疫學(xué)診斷的敏感性熒光素：異硫氰酸熒光素（黃綠色熒光）、藻紅蛋白、羅丹明（紅色熒光）放射性同位素：125I、131I酶：辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶免疫熒光檢測(cè)法（IFA）放射免疫檢測(cè)法（RIA）酶免疫檢測(cè)法（EIA）免疫標(biāo)記技術(shù)液相（ELISA）、固相（免疫組化技術(shù)）第六頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日免疫熒光技術(shù)第二節(jié)第七頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日將抗體或抗原標(biāo)記以熒光素，然后與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合，形成的免疫復(fù)合物在一定波長(zhǎng)光的激發(fā)下可產(chǎn)生熒光，借助熒光檢測(cè)儀測(cè)定或定位被檢抗原或抗體。當(dāng)出現(xiàn)熒光時(shí)，表明標(biāo)記抗體存在，相應(yīng)的抗原也存在。第八頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第九頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日抗體的熒光素標(biāo)記標(biāo)記原理：利用抗體蛋白的自由氨基與FITC的異硫氰基在堿性溶液中形成硫碳酰胺鍵，使抗體與FITC結(jié)合成熒光抗體。標(biāo)記方法:

攪拌法：適于標(biāo)記體積較大、蛋白含量較高的抗體。標(biāo)記時(shí)間短，熒光素用量少，但有非特異性染色。

透析法：適于標(biāo)記樣品量少，蛋白含量低的抗體。標(biāo)記比較勻，非特異染色較低。FITC異硫氰酸熒光素第十頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日常用的熒光素返回第十一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日去除游離熒光素及其降解產(chǎn)物：透析或凝膠過濾去除熒光素未結(jié)合和結(jié)合過度的抗體：陰離子交換層析法去除交叉反應(yīng)或非期望抗體：動(dòng)物肝粉吸收或固相抗原吸收熒光抗體的純化第十三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日熒光檢測(cè)儀（1）熒光顯微鏡（2）熒光分光光度計(jì)（3）流式細(xì)胞儀（4）熒光偏振光分析儀第十四頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日熒光顯微鏡

利用一定波長(zhǎng)的激發(fā)光對(duì)樣品進(jìn)行激發(fā)，產(chǎn)生一定波長(zhǎng)的熒光，對(duì)樣品結(jié)構(gòu)或其組分進(jìn)行定性、定位、定量觀察檢測(cè)。

第十五頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日

熒光顯微鏡的種類

透射式

落射式第十六頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日熒光顯微鏡的構(gòu)造吸收濾色鏡激發(fā)濾色鏡分色鏡汞燈第十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日流式細(xì)胞儀第十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日熒光酶標(biāo)儀第十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日（1）直接熒光染色法 將熒光素標(biāo)記在特異性抗體上，直接檢測(cè)抗原。優(yōu)點(diǎn)：簡(jiǎn)單、快速、特異性高。缺點(diǎn)：敏感性差。第二十頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日直接法

間接法

第二十一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第二十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第二十三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日（2）間接熒光染色法 將熒光素標(biāo)記在第二抗體（抗抗體）上或標(biāo)記在SPA上，檢測(cè)與抗原結(jié)合的特異性抗體。第二十四頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日直接法

間接法

第二十五頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第二十六頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日（3）補(bǔ)體熒光染色法 將熒光素標(biāo)記在補(bǔ)體的抗體上（抗C3抗體），檢測(cè)抗原抗體復(fù)合物。第二十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日優(yōu)點(diǎn)：可檢測(cè)所有的抗原抗體系統(tǒng)，具通用性；敏感性高。缺點(diǎn)：操作流程長(zhǎng)、干擾因素多、非特異性熒光多，補(bǔ)體易失活、需新鮮制備不方便。第二十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第二十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第三十頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日免疫酶技術(shù)EnzymeImmunoassay（EIA）第三節(jié)第三十一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日就是將抗原和抗體的特異性免疫反應(yīng)與酶的催化反應(yīng)相結(jié)合而建立的一種免疫檢測(cè)技術(shù)。第三十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日抗原抗體反應(yīng)＋酶催化反應(yīng)肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡、分光光度計(jì)特異、敏感可以在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位，或在μg、甚至ng水平上對(duì)其進(jìn)行定量。第三十三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日將酶分子與抗體或抗抗體分子共價(jià)結(jié)合，酶標(biāo)記抗體可與存在于組織細(xì)胞或吸附于固相載體上的抗原或抗體發(fā)生特異性結(jié)合。滴加底物溶液后，底物可在酶作用下催化底物水解、氧化或還原等反應(yīng)，產(chǎn)生有顏色的物質(zhì)。酶降解底物的量與呈現(xiàn)的顏色成正比。第三十四頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日優(yōu)點(diǎn)：①靈敏度高，特異性強(qiáng)；②可定性、定量檢測(cè)可溶性抗原和抗體，適用于普查；③試劑來源廣，穩(wěn)定，保存時(shí)間長(zhǎng)，且無同位素污染；④結(jié)果可肉眼半定量，也可用儀器定量檢測(cè)，且儀器價(jià)格較低廉，可在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室開展；⑤操作簡(jiǎn)便，易于掌握和使用，且重復(fù)性好；⑥可用于定位組織細(xì)胞上的抗原或抗體成分。第三十五頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日缺點(diǎn)： 標(biāo)記反應(yīng)較難掌握，在操作過程中容易引起酶、抗原或抗體的失活。第三十六頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日一、常用的酶及其底物酶活性高；具有抗原抗體共價(jià)結(jié)合的基團(tuán)；標(biāo)記后不影響酶活性及抗原、抗體反應(yīng)性；產(chǎn)物易判定或測(cè)定；酶活性不受樣品中其他成分的影響（用于均相測(cè)定的酶標(biāo)抗原與抗體結(jié)合后酶活性出現(xiàn)抑制或激活）；無害；穩(wěn)定，價(jià)廉、易得。常用酶底物顯色

辣根過氧化物酶鄰苯二胺、H2O2橙黃色四甲基聯(lián)苯胺、H2O2藍(lán)色

堿性磷酸酶對(duì)硝基苯磷酸酯黃色第三十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第三十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日二、標(biāo)記方法酶結(jié)合物技術(shù)簡(jiǎn)單、產(chǎn)率高；不影響酶和抗體（抗原）的生物活性；所得酶標(biāo)記物穩(wěn)定；較少形成酶與酶、抗體與抗體、抗原與抗原的聚合物。第三十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日戊二醛交聯(lián)法：抗原-戊二醛-酶

改良過碘酸鈉標(biāo)記法：過碘酸鈉氧化酶的羥基為醛基，再與抗體蛋白的氨基結(jié)合。HRP-CH2-NH-IgG

第四十頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日三、酶標(biāo)記物的純化及鑒定1、純化游離酶：增加非特異染色游離抗原（抗體）：競(jìng)爭(zhēng)降低特異性染色葡聚糖凝膠層析法50%飽和硫酸銨沉淀提純法第四十一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日2、鑒定免疫活性鑒定：免疫電泳/雙擴(kuò)/ELISA酶標(biāo)記率測(cè)定：分光光度法第四十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日四、酶標(biāo)儀（酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀）比色測(cè)定波長(zhǎng)、吸光度范圍、光學(xué)系統(tǒng)、檢測(cè)速度、震板功能、溫度控制、定性和定量的軟件，自動(dòng)洗板、溫育、加樣450nm、492nm、620nm、630nm、650nm、405nm第四十三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日返回第四十四頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第四十五頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第四十六頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第四十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日免疫標(biāo)記技術(shù)放射物標(biāo)記技術(shù)酶標(biāo)技術(shù)免疫熒光技術(shù)其他標(biāo)記技術(shù)酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)酶免疫組化技術(shù)雙抗體夾心法競(jìng)爭(zhēng)法雙抗原夾心法間接法雙位一點(diǎn)法ELISA第四十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)ELISAEnzyme-LinkedImmunosorbentAssay第四十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日ELISA基本實(shí)驗(yàn)過程包被：將已知抗原或抗體通過物理吸附到固相載體表面，使抗原或抗體固相化抗原抗體反應(yīng)：先后加入被檢標(biāo)本和酶結(jié)合物，使之與固相抗原或抗體發(fā)生免疫反應(yīng)而被結(jié)合固定酶促反應(yīng)：在反應(yīng)體系中加入酶作用的底物，使發(fā)生酶促反應(yīng)而顯色第五十頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日ELISA原理圖YY

①固相的抗原或抗體（免疫吸附劑）

②酶標(biāo)記的抗原或抗體（標(biāo)記物）③酶作用的底物（顯色劑）Y②酶標(biāo)記的抗原或抗體（標(biāo)記物）第五十一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日固相抗原或抗體1.固相載體的性狀：聚苯乙烯等固相載體2.試劑的配制：所有試劑的配制都用雙蒸水3.包被：(1)包被緩沖液：pH9.6碳酸鹽緩沖液(2)包被的濃度:10μg/ml(3)包被的時(shí)間：4℃過夜或37℃1-3h(4)包被的量：100μl第五十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日酶底物顯色反應(yīng)

測(cè)定波長(zhǎng)

辣根過氧化物酶鄰苯二胺

四甲替聯(lián)苯胺

氨基水楊酸

鄰聯(lián)苯甲胺

2,2‘-連胺基-2(3-乙基-并噻唑啉磺酸-6)銨鹽

橘紅色

黃色

棕色

蘭色

藍(lán)綠色492460449

425

642

堿性磷酸酶

4-硝基酚磷酸鹽(PNP)

萘酚-AS-Mx磷酸鹽+重氮鹽黃色

紅色400

500葡萄糖氧化酶

ABTS+HRP+葡萄糖

葡萄糖+甲硫酚嗪+噻唑蘭黃色

深藍(lán)色405420β-Ｄ－半乳糖苷酶

甲基傘酮基半乳糖苷(4MuG)

硝基酚半乳糖苷(ONPG)熒光

黃色

360,450

420

酶及其底物第五十三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日DNM-9602G酶標(biāo)分析儀DNM-9602標(biāo)配酶標(biāo)分析儀

DNM-9602A酶標(biāo)分析儀酶標(biāo)分析儀測(cè)定OD值第五十四頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日1.直接法2.間接法3.夾心法4.競(jìng)爭(zhēng)法5.捕獲法ELISA種類第五十五頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日1.直接法第五十六頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日directELISA—forAg第五十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日directELISA—forAb返回第五十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日2.間接法+++

間接法是檢測(cè)抗體最常用的方法，其原理為利用酶標(biāo)記的抗抗體以檢測(cè)已與固相結(jié)合的受檢抗體，故稱為間接法。第五十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第六十頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第六十一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日包被固相載體:用已知抗原包被固相載體加待檢標(biāo)本:使相應(yīng)抗體與固相抗原結(jié)合洗滌，除去無關(guān)的物質(zhì)加酶標(biāo)抗抗體:與固相載體上抗原抗體復(fù)合物結(jié)合；洗滌，除去未結(jié)合的酶標(biāo)抗抗體加底物顯色根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量測(cè)定間接法ELISA過程第六十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日3.夾心法：+++雙抗體夾心法雙抗體夾心法是檢測(cè)抗原最常用的方法第六十三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第六十四頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日獲得待分析物的未標(biāo)定抗體將特異性抗體與固相載體連接形成固相抗體洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)加入封閉蛋白溶液以封閉載體表面殘留的蛋白結(jié)合位點(diǎn)洗滌并除去未結(jié)合的封閉蛋白加受檢標(biāo)本（抗原）形成固相抗體－抗原復(fù)合物洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)加酶標(biāo)抗體生成抗體—待測(cè)抗原—酶標(biāo)記抗體的復(fù)合物徹底洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體加底物進(jìn)行酶催化反應(yīng)根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量測(cè)定雙抗體夾心法第六十五頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日雙抗原夾心法原理包被體待測(cè)抗體包被抗原標(biāo)記抗原第六十六頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日雙夾心法返回第六十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日4.競(jìng)爭(zhēng)法第六十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日第六十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日競(jìng)爭(zhēng)法的原理固相支持物表面待測(cè)物包被抗體標(biāo)記抗原此法可用于抗原和半抗原的定量測(cè)定，也可用于測(cè)定抗體。第七十頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日用已知特異性抗體包被固相載體測(cè)定管加待測(cè)抗原和一定量的酶標(biāo)抗原使二者與固相抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合對(duì)照管只加一定量酶標(biāo)抗原與固相抗體直接結(jié)合分別洗滌除去未結(jié)合的成分加底物顯色分別測(cè)定兩管的吸光度值，根據(jù)對(duì)照管與測(cè)定管吸光度值之比，計(jì)算標(biāo)本中待測(cè)抗原含量第七十一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日俘獲抗體（二抗）待測(cè)抗體標(biāo)記抗原包被體5.捕獲法血清中針對(duì)某些抗原的特異性IgM常和特異性IgG同時(shí)存在，后者會(huì)干擾IgM抗體的測(cè)定。因此測(cè)定IgM抗本多用捕獲法第七十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日包被體待測(cè)抗原包被連接物標(biāo)記抗體俘獲抗體特點(diǎn)：所有試劑盒均采用同一包被物和包被工藝第七十三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日（1）將抗人IgM抗體連接在固相載體上，形成固相抗人IgM。洗滌。（2）加入稀釋的血清標(biāo)本：保溫反應(yīng)后血清中的IgM抗體被固相抗體捕獲。洗滌除去其他免疫球蛋白和血清中的雜質(zhì)成分。（3）加入特異性抗原試劑：它只與固相上的特異性IgM結(jié)合。洗滌。（4）加入針對(duì)特異性的酶標(biāo)抗體：使之與結(jié)合在固相上的抗原反應(yīng)結(jié)合。洗滌。（5）加底物顯色：如有顏色顯示，則表示血清標(biāo)本中的特異性IgM抗體存在，是為陽(yáng)性反應(yīng)。捕獲法操作過程第七十四頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日食品中鹽酸克倫特羅的測(cè)定食品中毒素的測(cè)定（主要包括黃曲霉毒素，赭曲霉毒素）食品中有害微生物的快速篩檢（如沙門氏菌）甲胺磷殘留分析甲基對(duì)硫磷殘留分析呋喃丹殘留分析ELISA在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用ELISA用于農(nóng)藥殘留的檢測(cè)第七十五頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日河豚毒素

植物毒素如罌粟鹼、嗎啡、藻類毒素苯并芘

主要有除草劑與殺蟲劑兩大類例如殺暝松（FN）、甲氟磷酸異已酶（SOMAN）、草不綠（Alachor）、西維因（Carbaryl）、多菌靈及克菌丹（Captan）等。農(nóng)藥的檢測(cè)：第七十六頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日ELISA檢測(cè)“非典型肺炎”冠狀病毒ELISA在結(jié)締組織病早期診斷中的應(yīng)用檢測(cè)抗異質(zhì)性胞核核糖蛋白A2（hnRNPA2）/類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（PtA）33抗體ELISA在疾病診斷中的作用ELISA法檢測(cè)幽門螺桿菌抗體第七十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日ELISA試劑盒第七十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日放射免疫分析（radioimmunoassay，RIA）第四節(jié)第七十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日利用放射性同位素標(biāo)記技術(shù)檢測(cè)抗原的技術(shù)靈敏度高，用于檢測(cè)激素等血清中微量物質(zhì)第八十頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日RosalynYalow

（美國(guó)）（1977年獲諾貝爾生理和醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)）“forthedevelopmentofradioimmunoassaysofpeptidehormones”VeteransAdministrationHospital

Bronx,NY,USAb.19211959年，Yalow和Berson首次應(yīng)用放射免疫分析法測(cè)定胰島素第八十一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日與此同時(shí)，Ekins利用競(jìng)爭(zhēng)性蛋白結(jié)合分析技術(shù)測(cè)定甲狀腺素獲得成功開創(chuàng)了生物活性物質(zhì)微量測(cè)定技術(shù)的新時(shí)代，是微量分析方法學(xué)上的一個(gè)突破。第八十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日放射免疫技術(shù)優(yōu)點(diǎn)：①特異性強(qiáng)，即抗原抗體的特異性反應(yīng)；②靈敏度高，結(jié)果精確，檢測(cè)范圍10-910-12g；③操作流程簡(jiǎn)單易行，加樣程序簡(jiǎn)單，測(cè)量和數(shù)據(jù)處理自動(dòng)化；④樣品用量少、一般無需復(fù)雜的提純步驟；⑤應(yīng)用范圍廣泛，尤其是測(cè)量小分子半抗原。缺點(diǎn)：需要昂貴的檢測(cè)儀器；同位素污染。第八十三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日結(jié)合相游離相第八十四頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日免疫膠體金標(biāo)記技術(shù)第五節(jié)第八十五頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日膠體金標(biāo)記技術(shù)以膠體金作為示蹤標(biāo)記物，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)。膠體金顆粒表面帶有較多電荷，用膠體金顆粒標(biāo)記抗體，檢測(cè)組織或細(xì)胞標(biāo)本中的抗原。

第八十六頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日膠體金是由氯金酸在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉和鞣酸等作用下，聚合成特定大小的金顆粒，并由于靜電作用成為一種穩(wěn)定的膠體狀態(tài)，故稱為膠體金。利用它在堿性環(huán)境中帶負(fù)電荷的性質(zhì)，與蛋白質(zhì)分子的正電荷基團(tuán)藉靜電吸引而形成牢固結(jié)合，除抗體蛋白外，膠體金還可與其他多種生物大分子結(jié)合。第八十七頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日吸附在膠體金表面的抗原或抗體能定向?qū)⒛z體金顆粒運(yùn)載到組織或細(xì)胞內(nèi)、固相載體上的相應(yīng)抗體、抗原的位置。由于金顆粒具有高電子密度的特性，這些標(biāo)記物在抗原抗體反應(yīng)處聚集達(dá)到一定密度時(shí)（即金顆粒107個(gè)/mm2），出現(xiàn)肉眼可見的粉紅色斑點(diǎn)。第八十八頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日

膠體金標(biāo)記技術(shù)第八十九頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日膠體金紙條的不同種類第九十頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日層析法技術(shù)優(yōu)勢(shì)：簡(jiǎn)單\現(xiàn)場(chǎng)\快速第九十一頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日試紙條組成結(jié)構(gòu)控制線（C線）第九十二頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日與常規(guī)診斷方法相比：優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)快速：全部檢測(cè)過程僅需5-30分鐘。簡(jiǎn)便：不需其它任何儀器設(shè)備，操作也極其簡(jiǎn)單，無需專業(yè)人員，攜帶方便，可隨時(shí)隨地進(jìn)行。廉價(jià)：?jiǎn)蝹€(gè)測(cè)試條成本極低

可單份檢測(cè)：對(duì)標(biāo)本既能成批檢測(cè)，又可單份檢測(cè)，可立刻拿到結(jié)果，不必等待。

穩(wěn)定性好：金標(biāo)試劑穩(wěn)定，可長(zhǎng)期保存。

檢測(cè)標(biāo)本種類多：在臨床檢測(cè)中，樣品可能有尿、血液、血清、唾液或其他體液。在非臨床檢測(cè)中，樣本可能是由土壤、粉塵、植物或者食品制備的微量溶液。定量問題靈敏度問題第九十三頁(yè)，共一百零二頁(yè)，2022年，8月28日應(yīng)用領(lǐng)域類別應(yīng)用領(lǐng)域檢測(cè)的物質(zhì)人類醫(yī)學(xué)各級(jí)醫(yī)院，血站，CDC，防疫站，診斷中心；家庭自檢；商檢系統(tǒng)；邊檢口岸；公安系統(tǒng)傳染?。ㄒ腋挝屙?xiàng)，HIV,SARS等）標(biāo)志物（AFP、肌鈣蛋白、糞便血紅蛋白等）女性妊娠（hCG(早孕)，LH，F(xiàn)SH)毒品（嗎啡、K粉、搖頭丸、冰毒）農(nóng)牧業(yè)畜牧獸醫(yī)站,商檢系統(tǒng),邊檢口岸，農(nóng)牧類院系和研究所傳染?。ㄇ萘鞲?，獸瘟疫等）病毒（煙草花葉病毒、犬細(xì)小病毒等）環(huán)境