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關(guān)于光學(xué)顯微鏡的構(gòu)造和使用第一頁,共十八頁,2022年,8月28日一、目的要求1.熟悉光學(xué)顯微鏡各部分的結(jié)構(gòu)和用途,掌握顯微鏡維護(hù)的基本知識。2.初步掌握低倍鏡、高倍鏡和油鏡的使用方法。第二頁,共十八頁,2022年,8月28日二、實(shí)驗(yàn)用品和材料
1.字母裝片、動物血細(xì)胞裝片。2.顯微鏡、擦鏡紙、載玻片、抹布、香柏油、二甲苯。第三頁,共十八頁,2022年,8月28日三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容(一)顯微鏡的構(gòu)造
顯微鏡的種類很多,常用的是復(fù)式顯微鏡,由3個(gè)主要部分構(gòu)成:①機(jī)械部分;②光學(xué)部分;③照明部分。第四頁,共十八頁,2022年,8月28日1.機(jī)械部分(1)鏡座:顯微鏡的基座,支撐著整個(gè)鏡體,起穩(wěn)固作用。(2)鏡柱:垂直于鏡座上的短柱,用以支持鏡臂。(3)傾斜關(guān)節(jié):鏡柱與鏡臂間的活動關(guān)節(jié),可使鏡臂傾斜,以利觀察。(4)鏡臂:鏡柱上方呈弓形結(jié)構(gòu)的部分。(5)調(diào)節(jié)器:鏡柱兩側(cè)兩對齒輪,較大的稱粗調(diào)節(jié)器,較小的稱細(xì)調(diào)節(jié)器,轉(zhuǎn)動時(shí)能使鏡筒上下移動用來調(diào)節(jié)焦距。(6)鏡筒:位于鏡臂前方,上端裝置目鏡,下端連接物鏡轉(zhuǎn)換器。(7)物鏡轉(zhuǎn)換器:又稱旋轉(zhuǎn)盤,位于鏡筒下端的一個(gè)可旋轉(zhuǎn)的凹形圓盤。一般裝有2~4個(gè)放大倍數(shù)不同的物鏡。(8)載物臺:鏡臂下面的平臺,用以承放玻片標(biāo)本。其中央有一圓形的通光孔,光線可通過它由下向上反射。(9)標(biāo)本推進(jìn)器:位于鏡臺的后方或側(cè)面邊緣,連一可動弧形彈簧夾。其下方一側(cè)有兩個(gè)旋鈕,轉(zhuǎn)動旋鈕可調(diào)節(jié)推進(jìn)器,使玻片標(biāo)本前后或左右移動。第五頁,共十八頁,2022年,8月28日2.照明部分(1)照明裝置:即光源,位于底座,開關(guān)在底座一側(cè),旁邊有旋鈕可以調(diào)節(jié)燈光的明暗。(2)聚光器:在載物臺下方,作用是聚焦光線,增強(qiáng)視野的亮度,聚光器的一側(cè)有一個(gè)螺旋,旋動它可升降聚光鏡,上升時(shí)可增強(qiáng)反射光,反之可減弱。(3)光圈:聚光器下方的圓環(huán)結(jié)構(gòu),為多片半圓形的薄金屬片疊合而成。圓環(huán)外緣有一小柄,撥動它能使金屬薄片分開或合攏,用以控制光線的強(qiáng)弱。第六頁,共十八頁,2022年,8月28日3.光學(xué)部分(1)目鏡:裝在鏡筒的上端。放大倍數(shù)有5~25倍等數(shù)種,“5×”即標(biāo)志5倍,“10×”即10倍。(2)
物鏡:嵌裝在旋轉(zhuǎn)盤上,一般分低倍鏡、高倍鏡和油鏡三種。其上刻有4×或10×為低倍鏡;40×或45×為高倍鏡;90×或100×油鏡。各物鏡的長短不同,一般是越短的放大率越低,越長的放大率越高。顯微鏡放大倍數(shù)=目鏡放大率×物鏡放大率。例如:所使用的目鏡是10×,物鏡是40×,則放大倍數(shù)為400倍。第七頁,共十八頁,2022年,8月28日(二)顯微鏡的使用方法右手握住鏡臂,左手托鏡座,從鏡箱內(nèi)取出顯微鏡,放在身前稍左側(cè)的實(shí)驗(yàn)桌上,鏡臂對著胸前,使鏡筒向前方,鏡座與桌邊距離約6.6cm,坐于適當(dāng)高度的凳上操作。第八頁,共十八頁,2022年,8月28日1.低倍鏡的使用(1)先向上轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器,使載物臺下降,再轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)盤,使低倍鏡對準(zhǔn)通光孔,即能聽到“咔”的固定響聲,同時(shí)手也感到有阻力,說明物鏡與鏡筒已成一直線。(2)對光:打開光圈,旋轉(zhuǎn)聚光器升降螺旋,使聚光器升到與鏡臺平齊。用左眼在目鏡上觀察(兩眼齊睜),同時(shí)調(diào)節(jié)光源亮度,使視野內(nèi)的光線適中。(3)玻片標(biāo)本:將標(biāo)本片有蓋玻片的一面向上,置于載物臺上,用彈簧夾固定住,然后移動玻片,使標(biāo)本對準(zhǔn)通光孔。(4)調(diào)焦:從側(cè)面觀察低倍鏡,轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器,使載物臺上升,當(dāng)?shù)捅剁R距標(biāo)本約0.5cm時(shí),從目鏡上觀察,慢慢向上轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器,直至視野出現(xiàn)清晰物象為止。如物象不在視野中央,可稍移動玻片標(biāo)本的位置,注意玻片移動方向與物象移動方向恰好相反。第九頁,共十八頁,2022年,8月28日2.高倍鏡的使用:使用高倍鏡必須按照上述步驟,先在低倍鏡下找到物象后,再把放大的部分移到視野的中央,調(diào)節(jié)到最清晰的程度后,進(jìn)行以下操作:(1)轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器,使高倍鏡與鏡筒成一直線,轉(zhuǎn)換高倍鏡時(shí)速度要慢,特別當(dāng)心高倍鏡是否觸碰到玻片,如觸碰到玻片證明低倍鏡的焦距沒有調(diào)好,應(yīng)重新調(diào)節(jié)。(2)調(diào)焦:從目鏡觀察,這時(shí)物象往往不甚清楚,可用細(xì)調(diào)節(jié)器慢慢向上或向下轉(zhuǎn)動(切勿用粗調(diào)節(jié)器),轉(zhuǎn)動范圍不宜過大,一般只需向上或向下轉(zhuǎn)動一圈,就能清晰地看到物象。
需要更換玻片標(biāo)本時(shí),應(yīng)先轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使鏡筒上升之后,才能取下玻片標(biāo)本。
第十頁,共十八頁,2022年,8月28日3.油鏡的使用(1)使用油鏡時(shí)必須先在低倍鏡下看到一清晰物象后再換高倍鏡觀察,并使觀察的物象位于高倍鏡的視野中央。(2)轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)盤,使高倍鏡移向一側(cè),在所要觀察的蓋玻片上,滴上一滴香柏油,從側(cè)面觀察,轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換盤將油鏡鏡筒移至鏡筒下方,與鏡筒成一直線,使油鏡鏡頭與香柏油接觸,用眼觀察目鏡,慢慢上下轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)器,直至視野中央出現(xiàn)清晰的物象為止。油鏡用完后須用擦鏡紙沾少許二甲苯將玻片標(biāo)本及油鏡上的香柏油擦干凈。
第十一頁,共十八頁,2022年,8月28日4.低倍鏡和高倍鏡使用練習(xí)(1)依照上述低倍鏡使用方法,觀察文字或字母裝片,反復(fù)練習(xí)對光、調(diào)光、標(biāo)本放置、調(diào)焦和玻片移動等。注意將玻片前后左右移動時(shí),物象與玻片移動方向是否一致,玻片上的字母是正象還是反象?為什么?(2)觀察頭發(fā)交叉裝片,先用低倍鏡觀察,找到兩根毛發(fā)后,將毛發(fā)交叉點(diǎn)移到視野中央,然后換高倍鏡觀察,轉(zhuǎn)動細(xì)調(diào)節(jié)器觀察,判斷哪條毛發(fā)在上方,哪條在下方。第十二頁,共十八頁,2022年,8月28日5.油鏡的使用練習(xí)(1)取一張血涂片,先用低倍鏡再用高倍鏡觀察。(2)用油鏡觀察,并分辨紅細(xì)胞、白細(xì)胞和淋巴細(xì)胞。比較三種物鏡的放大倍數(shù)和分辨力。(3)觀察完畢,務(wù)必將油鏡按上述方法擦凈。第十三頁,共十八頁,2022年,8月28日繪圖生物實(shí)驗(yàn)圖不同于一般美術(shù)圖,也不同于機(jī)械制圖。生物繪圖要求將標(biāo)本的外形和內(nèi)部結(jié)構(gòu)準(zhǔn)確地描述下來,然后詳加說明,要求形象自然,比例適當(dāng),線條清晰。
生物繪圖一般用點(diǎn)、線表示,輪廓用線條描繪,明暗程度、物質(zhì)含量多少等則用細(xì)點(diǎn)的疏密表示之,圖紙應(yīng)選擇能夠用橡皮拭擦的上好白紙,繪圖時(shí)先用中軟鉛筆繪出輪廓,然后用較硬的鉛筆繪出全圖,圖中各部分應(yīng)注字說明,圖與字之間用水平細(xì)線連接,圖的標(biāo)題填在圖的下方,同時(shí)標(biāo)明放大倍數(shù)。
第十四頁,共十八頁,2022年,8月28日(三)使用顯微鏡的注意事項(xiàng)
1.拿顯微鏡應(yīng)右手緊握鏡臂,左手托住鏡座,不能用一手隨便斜提,以防止目鏡從鏡筒滑出和反光鏡脫落。2.顯微鏡用完后,必須將目鏡、物鏡等用清潔的擦鏡紙或綢布輕輕揩擦,切勿口吹、手摸或用粗布揩擦,勿用乙醇及其他藥物,以免侵蝕鏡臺或鏡頭。3.使用顯微鏡應(yīng)先用低倍鏡調(diào)節(jié)光源,如觀察組織細(xì)胞或染色較淺的標(biāo)本時(shí),要適當(dāng)關(guān)小光圈,使物象清晰。4.放置玻片標(biāo)本時(shí),應(yīng)將有蓋玻片的一面向上,用標(biāo)本夾輕輕固定住玻片,再把要觀察的部分對準(zhǔn)通光孔的正中央。如果玻片標(biāo)本放反了,不僅不易找到物象,并且容易壓碎玻片,損傷物鏡。第十五頁,共十八頁,2022年,8月28日(三)使用顯微鏡的注意事項(xiàng)5.用雙筒微鏡觀察時(shí),調(diào)整兩目鏡的距離以適合本人的瞳孔距離;用單筒微鏡觀察時(shí)要兩眼齊睜,用左眼從目鏡中尋找物象,仔細(xì)觀察,用右眼看紙繪圖。6.使用低倍鏡用粗調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)物距,使用高倍鏡必須用細(xì)調(diào)節(jié)器調(diào)節(jié)物距。粗、細(xì)調(diào)節(jié)器都不能做單方向的旋轉(zhuǎn),防止壓碎玻片。7.不要隨意取出物鏡,以防灰塵落入。禁止任意拆卸任何零件,以防意外損失。8.顯微鏡用完后,應(yīng)轉(zhuǎn)動粗調(diào)節(jié)器使載物臺徐徐下降,取下玻片,并轉(zhuǎn)動旋轉(zhuǎn)盤,使物鏡離開聚光鏡,調(diào)暗光線,關(guān)閉電源。再裝入箱內(nèi)。第十六頁,共十八頁,2022年,8月28日四、作業(yè)與思考
1.作業(yè)(1)畫圖注明光學(xué)顯微鏡各部件的結(jié)構(gòu)名稱。(2)簡述使用低倍鏡、高倍鏡和油鏡的
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