基因工程與細(xì)胞工程課件

基因工程與細(xì)胞工程課件第1講基因工程和細(xì)胞工程第1講基因工程和細(xì)胞工程考綱要求三年考情命題趨勢1.基因工程的誕生Ⅰ2.基因工程的原理及技術(shù)Ⅱ3.基因工程的應(yīng)用Ⅱ4.蛋白質(zhì)工程Ⅰ2013全國大綱、廣東、江蘇、安徽、四川、福建、全國Ⅰ2012全國新課標(biāo)、山東、江蘇、福建、天津、浙江、安徽2011浙江、海南、山東、江蘇、安徽、福建、北京1.趨勢分析：(1)多以最新基因工程研究成果為載體，考查基因工程的工具與操作程序。(2)以工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、畜牧業(yè)生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的具體事例為命題背景，考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)。2.備考指南：(1)表解比較法理解限制酶、DNA連接酶和載體的作用。(2)實(shí)例分析法理解基因工程的原理與過程。(3)列表比較法理解兩個(gè)不同：植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的不同、植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的不同。(4)圖解法理解單克隆抗體的制備過程。植物的組織培養(yǎng)Ⅱ2013重慶、全國大綱、全國Ⅱ、天津2012浙江2011江蘇1.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆Ⅰ2.細(xì)胞融合與單克隆抗體Ⅱ2013重慶、全國大綱、山東2012山東、福建、安徽2011江蘇、安徽考綱要求三年考情命題趨勢1.基因工程的誕生Ⅰ2013全國大綱限制酶載體基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的基因的檢測和鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因治療基因可產(chǎn)生自然界沒有的蛋白質(zhì)細(xì)胞的全能性植物體細(xì)胞雜交作物新品種的培育細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞核的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性給小鼠注射特定抗原產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞限制酶載體基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的基因的檢測和鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基1．基因工程和克隆技術(shù)涉及哪些工具酶？基因工程的工具酶是限制酶和DNA連接酶，克隆技術(shù)的工具酶是纖維素酶、果膠酶和胰蛋白酶。2．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育涉及到哪些生物工程？基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎移植。1．基因工程和克隆技術(shù)涉及哪些工具酶？2．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育涉A．圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B．在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNAC．用PstⅠ和HindⅢ酶切，加入DNA連接酶后可得到1種符合要求的重組質(zhì)粒D．導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長考點(diǎn)一基因工程圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，ampr表示氨芐青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是(

)【答案】CA．圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)跟蹤訓(xùn)練某質(zhì)粒上有Sal

Ⅰ、Hind

Ⅲ、BamH

Ⅰ三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題。跟蹤訓(xùn)練某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來源屬于_________________。(2)如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會(huì)具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能________，也不能____________________________。(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用________和________兩種酶對________和_______________________進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性?；蛑亟M復(fù)制表達(dá)(合成抗鹽基因的mRNA)SalⅠHindⅢ質(zhì)粒含抗鹽基因的DNA(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種(4)基因工程中的檢測篩選是一個(gè)重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，下圖表示運(yùn)用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。(4)基因工程中的檢測篩選是一個(gè)重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外,培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有___________、_________________________。從檢測篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是________菌落中的細(xì)菌。為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的___________作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用____________________________________________________的方法從個(gè)體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。(5)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用_______________技術(shù)，愈傷組織經(jīng)__________________進(jìn)而形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加_______________________________。氨芐青霉素四環(huán)素(氨芐青霉素和四環(huán)素)

4和6抗鹽基因一定濃度的鹽水澆灌煙草植株(將煙草植株移栽到鹽堿地中)

植物組織培養(yǎng)細(xì)胞增殖和分化植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外,培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)

(2013·高考大綱全國卷)關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是(

)A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C．煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒【答案】B考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)【答案】B跟蹤訓(xùn)練植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用圖解簡單表示：(1)原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)包括________、________、__________________三部分。(2)培育胚狀體利用了_______________這一項(xiàng)生物技術(shù)，培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)物質(zhì)外,還必須含有細(xì)胞分裂素、生長素等植物激素，還需要對培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的________。(3)從葉片的葉肉細(xì)胞到愈傷組織再分化形成胚狀體，再繼續(xù)培養(yǎng)則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了______________。細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核(順序可顛倒)植物組織培養(yǎng)滅菌細(xì)胞的全能性跟蹤訓(xùn)練植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用圖解基因工程與細(xì)胞工程課件①無絲分裂②有絲分裂③減數(shù)分裂④原代培養(yǎng)⑤傳代培養(yǎng)⑥植物體細(xì)胞雜交⑦細(xì)胞融合⑧脫分化⑨再分化A．①④⑤⑦⑧

B．②④⑤⑥⑧⑨C．②⑧⑨D．③⑥⑧⑨(5)從圖解可知，需要在培養(yǎng)基中加入激素調(diào)整細(xì)胞分裂分化的是________________(用字母a～e回答)階段，若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物，則只需培養(yǎng)到________________。若為了獲得三七的人工種子，則需要培養(yǎng)到______________。c、d(或c、d、e)愈傷組織胚狀體(4)從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過程中，需要經(jīng)過________。C①無絲分裂②有絲分裂③減數(shù)分裂④原代培養(yǎng)c、d(或c、考點(diǎn)三植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合

(2013·高考重慶卷)下圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是(

)A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得

的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞

的形成C．③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群【答案】D考點(diǎn)三植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合A．①是從已免疫的小鼠脾跟蹤訓(xùn)練科學(xué)家從某無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回答：(1)利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、____________、電激等誘導(dǎo)因素誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合。經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行___________和__________，經(jīng)多次篩選以獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。滅活的病毒體外培養(yǎng)抗體檢測(2)有人提出用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來生產(chǎn)單克隆抗體，請完成設(shè)計(jì)方案：①取________________________細(xì)胞的細(xì)胞核，移植到去核的________________細(xì)胞中，構(gòu)成重組細(xì)胞。②將重組細(xì)胞在________條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠________內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體。特定抗原刺激的B淋巴無限增殖體外腹腔跟蹤訓(xùn)練科學(xué)家從某無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控(3)也有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，其思路如圖所示。①酶A是指__________________，酶B是指______________。②圖中Ⅰ表示_________________________________，對Ⅱ進(jìn)行檢測與鑒定的目的是________________________________,Ⅲ所指的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是______________________________________。限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶目的基因(無限增殖調(diào)控基因或prG)檢測目的基因是否導(dǎo)入和是否表達(dá)既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體(3)也有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單完成作業(yè)：專題九第1講完成作業(yè)：專題九第1講本部分內(nèi)容講解結(jié)束謝謝！本部分內(nèi)容講解結(jié)束總結(jié)：限制酶：2、原生質(zhì)層：DNA連接酶：原生質(zhì)體：Taq酶：1、DNA聚合酶：PCR:DNA解旋酶：PEG:DNA水解酶：T-DNA:RNA聚合酶：3、IAA:NAA:2，4-DATP：DNA：RNA:

總結(jié)：限制酶：基因工程與細(xì)胞工程課件(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法受體細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法顯微注射技術(shù)感受態(tài)細(xì)胞法(Ca2＋處理法)受精卵、體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方(4)目的基因的檢測與鑒定：(4)目的基因的檢測與鑒定：【鏈接提升】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)前處理培養(yǎng)基成分培養(yǎng)基狀態(tài)無菌；用胰蛋白酶處理，使組織細(xì)胞相互分散開無菌、離體葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、促生長因子、微量元素、動(dòng)物血清等礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、植物激素等液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基【鏈接提升】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)過程能否培養(yǎng)成個(gè)體應(yīng)用舉例動(dòng)物胚胎或出生不久的幼齡動(dòng)物的器官或組織→原代培養(yǎng)→傳代培養(yǎng)→細(xì)胞群不能能大規(guī)模生產(chǎn)有重要價(jià)值的生物制品，如病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體等；皮膚移植；檢測有毒物質(zhì)的毒性等快速繁殖、培育無病毒植株；生產(chǎn)藥物；制造人工種子；培育轉(zhuǎn)基因作物等特別提醒：(1)兩種技術(shù)手段培養(yǎng)過程中都進(jìn)行有絲分裂，都是無性繁殖，都可稱為克隆，都不涉及減數(shù)分裂；(2)均為無菌操作，都需要適宜的溫度、pH等條件。項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)過程能否培養(yǎng)成個(gè)體應(yīng)用舉例動(dòng)物胚【鏈接提升】植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合(單克隆抗體的制備)理論基礎(chǔ)(原理)融合前處理促融細(xì)胞膜的流動(dòng)性、植物細(xì)胞的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性、細(xì)胞增殖酶解法去除細(xì)胞壁(纖維素酶、果膠酶等)注射特定抗原的免疫小鼠，獲取B淋巴細(xì)胞①物理法：離心、振動(dòng)、電激等；②化學(xué)法：聚乙二醇(PEG)等①物化法、化學(xué)法：與促進(jìn)植物細(xì)胞融合的方法相同；②生物法：滅活的病毒【鏈接提升】植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合(單克隆抗體的制備)過程用途第一步：原生質(zhì)體的制備；第二步：原生質(zhì)體的融合；第三步：雜種細(xì)胞的篩選與培養(yǎng)；第四步：雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定第一步：細(xì)胞培養(yǎng)；第二步：誘導(dǎo)細(xì)胞融合；第三步：某種細(xì)胞選擇；第四步：雜種細(xì)胞克隆與純化克服遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙，大大擴(kuò)展了雜交親本的組合范圍①作為診斷試劑；②用于治療疾病和運(yùn)載藥物,如“生物導(dǎo)彈”項(xiàng)目植物體細(xì)胞雜交動(dòng)物細(xì)胞融合(單克隆抗體的制備)過程用途第蛋白質(zhì)工程過程蛋白質(zhì)工程過程(1)注意切割的序列是否會(huì)連接成環(huán)：切割圖1中的目的基因時(shí)，最好不要只用BamHⅠ，因?yàn)橹挥肂amHⅠ切割時(shí)，目的基因的兩端具有相同的黏性末端，易自行連接成環(huán)，因此最好同時(shí)用BamHⅠ和HindⅢ切割。(2)限制酶的切割序列具有包含關(guān)系：圖2中BamHⅠ和MboⅠ識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別是G↓GATCC、↓GATC,這兩個(gè)限制酶都可切割同一堿基序列GGATCC。(3)切割時(shí)注意是否破壞所有抗性基因,導(dǎo)致缺乏標(biāo)記基因?！炬溄犹嵘?．限制酶切割時(shí)的注意事項(xiàng)(1)注意切割的序列是否會(huì)連接成環(huán)：切割圖1中的目的基因時(shí)，免疫小鼠培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞融合骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射特定抗原蛋白選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)專一抗體檢驗(yàn)陽性專一抗體檢驗(yàn)陽性注射到小鼠體內(nèi)體外培養(yǎng)單克隆抗體克隆化雜交細(xì)胞分開不同雜交細(xì)胞，克隆專一抗體，檢驗(yàn)陽性細(xì)胞

單克隆抗體制備過程示意圖多種雜交細(xì)胞免疫小鼠培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞融合骨髓瘤細(xì)胞B淋巴細(xì)胞注射特定抗原蛋基因工程與細(xì)胞工程課件第1講基因工程和細(xì)胞工程第1講基因工程和細(xì)胞工程考綱要求三年考情命題趨勢1.基因工程的誕生Ⅰ2.基因工程的原理及技術(shù)Ⅱ3.基因工程的應(yīng)用Ⅱ4.蛋白質(zhì)工程Ⅰ2013全國大綱、廣東、江蘇、安徽、四川、福建、全國Ⅰ2012全國新課標(biāo)、山東、江蘇、福建、天津、浙江、安徽2011浙江、海南、山東、江蘇、安徽、福建、北京1.趨勢分析：(1)多以最新基因工程研究成果為載體，考查基因工程的工具與操作程序。(2)以工農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、畜牧業(yè)生產(chǎn)和醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的具體事例為命題背景，考查植物組織培養(yǎng)相關(guān)知識(shí)。2.備考指南：(1)表解比較法理解限制酶、DNA連接酶和載體的作用。(2)實(shí)例分析法理解基因工程的原理與過程。(3)列表比較法理解兩個(gè)不同：植物組織培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的不同、植物體細(xì)胞雜交與動(dòng)物細(xì)胞融合的不同。(4)圖解法理解單克隆抗體的制備過程。植物的組織培養(yǎng)Ⅱ2013重慶、全國大綱、全國Ⅱ、天津2012浙江2011江蘇1.動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克?、?.細(xì)胞融合與單克隆抗體Ⅱ2013重慶、全國大綱、山東2012山東、福建、安徽2011江蘇、安徽考綱要求三年考情命題趨勢1.基因工程的誕生Ⅰ2013全國大綱限制酶載體基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的基因的檢測和鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基因治療基因可產(chǎn)生自然界沒有的蛋白質(zhì)細(xì)胞的全能性植物體細(xì)胞雜交作物新品種的培育細(xì)胞增殖動(dòng)物細(xì)胞核的全能性細(xì)胞膜的流動(dòng)性給小鼠注射特定抗原產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細(xì)胞限制酶載體基因表達(dá)載體的構(gòu)建目的基因的檢測和鑒定轉(zhuǎn)基因動(dòng)物基1．基因工程和克隆技術(shù)涉及哪些工具酶？基因工程的工具酶是限制酶和DNA連接酶，克隆技術(shù)的工具酶是纖維素酶、果膠酶和胰蛋白酶。2．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育涉及到哪些生物工程？基因工程、動(dòng)物細(xì)胞工程和胚胎移植。1．基因工程和克隆技術(shù)涉及哪些工具酶？2．轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培育涉A．圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B．在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用PstⅠ和BamHⅠ切割質(zhì)粒和外源DNAC．用PstⅠ和HindⅢ酶切，加入DNA連接酶后可得到1種符合要求的重組質(zhì)粒D．導(dǎo)入目的基因的大腸桿菌可在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長考點(diǎn)一基因工程圖甲、乙中的箭頭表示三種限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)，ampr表示氨芐青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因。下列敘述正確的是(

)【答案】CA．圖甲中的質(zhì)粒用BamHⅠ切割后，含有4個(gè)游離的磷酸基團(tuán)跟蹤訓(xùn)練某質(zhì)粒上有Sal

Ⅰ、Hind

Ⅲ、BamH

Ⅰ三種限制酶切割位點(diǎn)，同時(shí)還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示，請回答下列問題。跟蹤訓(xùn)練某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamHⅠ三(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種新性狀(變異性狀)的來源屬于_________________。(2)如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞，一般情況下，煙草不會(huì)具有抗鹽特性，原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能________，也不能____________________________。(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，應(yīng)選用________和________兩種酶對________和_______________________進(jìn)行切割，以保證重組DNA序列的唯一性?；蛑亟M復(fù)制表達(dá)(合成抗鹽基因的mRNA)SalⅠHindⅢ質(zhì)粒含抗鹽基因的DNA(1)將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi)，使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀，這種(4)基因工程中的檢測篩選是一個(gè)重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌，下圖表示運(yùn)用影印培養(yǎng)法(使一系列培養(yǎng)皿的相同位置上能出現(xiàn)相同菌落的一種接種培養(yǎng)方法)檢測基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入了農(nóng)桿菌。(4)基因工程中的檢測篩選是一個(gè)重要的步驟。為篩選出導(dǎo)入了重培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外,培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分別還含有___________、_________________________。從檢測篩選的結(jié)果分析，含有目的基因的是________菌落中的細(xì)菌。為了確定抗鹽煙草是否培育成功，既要用放射性同位素標(biāo)記的___________作探針進(jìn)行分子雜交檢測，又要用____________________________________________________的方法從個(gè)體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。(5)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用_______________技術(shù)，愈傷組織經(jīng)__________________進(jìn)而形成完整植株，此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加_______________________________。氨芐青霉素四環(huán)素(氨芐青霉素和四環(huán)素)

4和6抗鹽基因一定濃度的鹽水澆灌煙草植株(將煙草植株移栽到鹽堿地中)

植物組織培養(yǎng)細(xì)胞增殖和分化植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)培養(yǎng)基除了含有細(xì)菌生長繁殖必需的成分外,培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B分考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)

(2013·高考大綱全國卷)關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)的敘述，錯(cuò)誤的是(

)A．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)所用培養(yǎng)基不同B．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)過程中都要用到胰蛋白酶C．煙草葉片離體培養(yǎng)能產(chǎn)生新個(gè)體，小鼠雜交瘤細(xì)胞可離體培養(yǎng)增殖D．動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)可用于檢測有毒物質(zhì)，莖尖培養(yǎng)可用于植物脫除病毒【答案】B考點(diǎn)二動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)【答案】B跟蹤訓(xùn)練植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用圖解簡單表示：(1)原生質(zhì)體的結(jié)構(gòu)包括________、________、__________________三部分。(2)培育胚狀體利用了_______________這一項(xiàng)生物技術(shù)，培養(yǎng)基中除了含有一定的營養(yǎng)物質(zhì)外,還必須含有細(xì)胞分裂素、生長素等植物激素，還需要對培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的________。(3)從葉片的葉肉細(xì)胞到愈傷組織再分化形成胚狀體，再繼續(xù)培養(yǎng)則可培育出完整的植株，這體現(xiàn)了______________。細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)細(xì)胞核(順序可顛倒)植物組織培養(yǎng)滅菌細(xì)胞的全能性跟蹤訓(xùn)練植物葉肉細(xì)胞原生質(zhì)體的分離和培養(yǎng)的主要過程可用圖解基因工程與細(xì)胞工程課件①無絲分裂②有絲分裂③減數(shù)分裂④原代培養(yǎng)⑤傳代培養(yǎng)⑥植物體細(xì)胞雜交⑦細(xì)胞融合⑧脫分化⑨再分化A．①④⑤⑦⑧

B．②④⑤⑥⑧⑨C．②⑧⑨D．③⑥⑧⑨(5)從圖解可知，需要在培養(yǎng)基中加入激素調(diào)整細(xì)胞分裂分化的是________________(用字母a～e回答)階段，若為了獲得三七的細(xì)胞產(chǎn)物，則只需培養(yǎng)到________________。若為了獲得三七的人工種子，則需要培養(yǎng)到______________。c、d(或c、d、e)愈傷組織胚狀體(4)從葉片的葉肉細(xì)胞到獲得胚狀體的過程中，需要經(jīng)過________。C①無絲分裂②有絲分裂③減數(shù)分裂④原代培養(yǎng)c、d(或c、考點(diǎn)三植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合

(2013·高考重慶卷)下圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述，正確的是(

)A．①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得

的效應(yīng)T淋巴細(xì)胞B．②中使用胰蛋白酶有利于雜交瘤細(xì)胞

的形成C．③同時(shí)具有脾臟細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D．④是經(jīng)篩選培養(yǎng)獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群【答案】D考點(diǎn)三植物體細(xì)胞雜交和動(dòng)物細(xì)胞融合A．①是從已免疫的小鼠脾跟蹤訓(xùn)練科學(xué)家從某無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控基因(prG)，該基因能激發(fā)細(xì)胞分裂，這為單克隆抗體的制備提供了更為廣闊的前景。請回答：(1)利用動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)制備單克隆抗體，常用聚乙二醇、____________、電激等誘導(dǎo)因素誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合。經(jīng)選擇性培養(yǎng)的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行___________和__________，經(jīng)多次篩選以獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細(xì)胞。滅活的病毒體外培養(yǎng)抗體檢測(2)有人提出用核移植技術(shù)構(gòu)建重組細(xì)胞來生產(chǎn)單克隆抗體，請完成設(shè)計(jì)方案：①取________________________細(xì)胞的細(xì)胞核，移植到去核的________________細(xì)胞中，構(gòu)成重組細(xì)胞。②將重組細(xì)胞在________條件下做大規(guī)模培養(yǎng)或注射到小鼠________內(nèi)增殖，以獲得大量單克隆抗體。特定抗原刺激的B淋巴無限增殖體外腹腔跟蹤訓(xùn)練科學(xué)家從某無限增殖細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中分離出無限增殖調(diào)控(3)也有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單克隆抗體，其思路如圖所示。①酶A是指__________________，酶B是指______________。②圖中Ⅰ表示_________________________________，對Ⅱ進(jìn)行檢測與鑒定的目的是________________________________,Ⅲ所指的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是______________________________________。限制性核酸內(nèi)切酶DNA連接酶目的基因(無限增殖調(diào)控基因或prG)檢測目的基因是否導(dǎo)入和是否表達(dá)既能無限增殖，又能產(chǎn)生特定抗體(3)也有人提出，可以直接通過基因工程導(dǎo)入該調(diào)控基因來制備單完成作業(yè)：專題九第1講完成作業(yè)：專題九第1講本部分內(nèi)容講解結(jié)束謝謝！本部分內(nèi)容講解結(jié)束總結(jié)：限制酶：2、原生質(zhì)層：DNA連接酶：原生質(zhì)體：Taq酶：1、DNA聚合酶：PCR:DNA解旋酶：PEG:DNA水解酶：T-DNA:RNA聚合酶：3、IAA:NAA:2，4-DATP：DNA：RNA:

總結(jié)：限制酶：基因工程與細(xì)胞工程課件(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法受體細(xì)胞農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法顯微注射技術(shù)感受態(tài)細(xì)胞法(Ca2＋處理法)受精卵、體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方(4)目的基因的檢測與鑒定：(4)目的基因的檢測與鑒定：【鏈接提升】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)比較項(xiàng)目動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)前處理