最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件

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注意點：必須充分混勻至看不見沉淀，可用移液器吹打或者用混勻器振蕩。2. 加100μl的溶液I，使菌體充分懸浮，室溫靜置3mi10最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件11最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件12最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件133. 加入200μl溶液II，溫和上下顛倒2-3次，溶液轉(zhuǎn)變?yōu)槌吻逋该鳌?/p>

注意點：不可劇烈振蕩。3. 加入200μl溶液II，溫和上下顛倒2-3次，溶液轉(zhuǎn)變14最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件15最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件164. 加入150μl溶液III，上下顛倒混勻數(shù)次，靜置2-3min。

注意點：不可劇烈振蕩，此時應(yīng)出現(xiàn)白色沉淀。5. 12000rpm離心5min。4. 加入150μl溶液III，上下顛倒混勻數(shù)次，靜置2-317最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件18最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件19最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件20最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件216. 取上清，加等體積（400μl）的酚/氯仿/異戊醇，充分混勻，室溫，12000rpm離心5min。

注意點：酚氯仿有腐蝕性，蓋嚴離心管蓋，避免接觸酚氯仿，如接觸立即用水沖洗。6. 取上清，加等體積（400μl）的酚/氯仿/異戊醇，充分22最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件23最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件24最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件257. 吸上層水相，再加1ml(約2.5倍體積）預冷的無水乙醇，混勻。

注意點：一定避免吸到中間沉淀及下層酚氯仿。寧可損失一定上清。7. 吸上層水相，再加1ml(約2.5倍體積）預冷的無水乙醇26最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件27最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件28最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件298. 4℃，12000rpm離心10min。

9. 棄上清，加入0.5ml70％乙醇，4℃，12000rpm離心5min。10. 棄上清，沉淀自然干燥10min后，加20μl無菌水溶解。

注意點：棄上清時盡量將酒精傾倒干凈，但注意不要將沉淀棄去。8. 4℃，12000rpm離心10min。30最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件31最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件32最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件33最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件34最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件35最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件3601堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒371、實驗目的：學習與掌握堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒DNA的原理與方法1、實驗目的：38最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件39最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件40最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件41最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件42最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件43最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件44最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件452. 加100μl的溶液I，使菌體充分懸浮，室溫靜置3min。

注意點：必須充分混勻至看不見沉淀，可用移液器吹打或者用混勻器振蕩。2. 加100μl的溶液I，使菌體充分懸浮，室溫靜置3mi46最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件47最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件48最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件493. 加入200μl溶液II，溫和上下顛倒2-3次，溶液轉(zhuǎn)變?yōu)槌吻逋该鳌?/p>

注意點：不可劇烈振蕩。3. 加入200μl溶液II，溫和上下顛倒2-3次，溶液轉(zhuǎn)變50最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件51最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件524. 加入150μl溶液III，上下顛倒混勻數(shù)次，靜置2-3min。

注意點：不可劇烈振蕩，此時應(yīng)出現(xiàn)白色沉淀。5. 12000rpm離心5min。4. 加入150μl溶液III，上下顛倒混勻數(shù)次，靜置2-353最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件54最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件55最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件56最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件576. 取上清，加等體積（400μl）的酚/氯仿/異戊醇，充分混勻，室溫，12000rpm離心5min。

注意點：酚氯仿有腐蝕性，蓋嚴離心管蓋，避免接觸酚氯仿，如接觸立即用水沖洗。6. 取上清，加等體積（400μl）的酚/氯仿/異戊醇，充分58最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件59最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件60最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件617. 吸上層水相，再加1ml(約2.5倍體積）預冷的無水乙醇，混勻。

注意點：一定避免吸到中間沉淀及下層酚氯仿。寧可損失一定上清。7. 吸上層水相，再加1ml(約2.5倍體積）預冷的無水乙醇62最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件63最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件64最新01堿裂解法抽提大腸桿菌質(zhì)粒課件658. 4℃，12000rpm離心10min。

9. 棄上清，加入0.5ml70％乙醇，4℃，12000rpm離心5min。10. 棄上清，沉淀自然干燥10min后，加20μl無菌水溶解。

注意點：棄上清時盡量將酒精傾倒干凈，但注意不要將沉淀棄去。8. 4℃，12000rpm離心1