臨床試驗設計實例

A藥與B藥治療支氣管哮喘有效性和安全性的隨機、

雙盲、多中心平行對照臨床研究設計案例和分析簡介

第一節(jié)研究方案一、背景資料A藥與B藥均是治療成人和兒童哮喘的主要藥物之一，并對運動性哮喘具有預防作用。文獻報道三12歲362例重度哮喘病人應用A藥與B藥隨機雙盲對照試驗顯示：藥吸入用藥與含相當劑量的B藥相比具有更好的療效和更少的不良反應，在兒童哮喘的研究中也獲得同樣結果?？赡馨l(fā)生的不良反應有流感綜合癥、疼痛、心率加快、神經緊張、顫抖、病毒感染、鼻炎、鼻竇炎、鼻塞、惡心等。實驗室異常有血糖輕度增高、血鉀輕度降低。二、試驗目的1）比較A藥和B藥治療成人哮喘的臨床療效。2）比較上述兩種藥物的安全性。三、試驗設計采用多中心、平行、完全隨機、雙盲對照試驗。共有三個研究中心，200例哮喘患者參加。比較A藥和B藥治療成人哮喘的療效和安全性。以18歲至60歲哮喘病人為受試對象，試驗組（服用A藥）和對照組（服用B藥）各100例。研究分為兩個階段：1周的篩選期和4周的治療期，有些病人在必要時有2周治療后隨訪期。四、隨機分組由生物統(tǒng)計學專業(yè)人員制定隨機分組方案，按此將試驗藥和對照藥進行分配與包裝，并備相應編碼應急信件，以備在遇到嚴重不良反應緊急情況時可以破盲。將隨機數(shù)字表和藥品按3個中心配置和分發(fā)。一旦病人符合入組條件，各中心研究者將按時間順序從最小數(shù)字開始給病人編號，病人將會被隨機地分到兩組中。研究開始前將提供每個研究中心密封的隨機分組信封以備緊急揭盲之用。五、受試對象（一）入選標準年齡18—60歲，性別不限。根據(jù)病史、癥狀、體征和肺功能測定確診非急性發(fā)作期，輕度和中度哮喘，其診斷和分度根據(jù)中華醫(yī)學會呼吸病學1997年《支氣哮喘防治指南》規(guī)定診斷標準和非急性發(fā)作期病情評價的界定。愿意參加本臨床試驗，并簽署知情同意書。能夠正確使用峰速儀，并能按時正確記錄日記卡。（二）排除標準喘息型慢性支氣管炎慢性阻塞性肺?。–OPD）和中度以上急性發(fā)作期哮喘患者。已知對試驗藥和對照藥過敏者。孕婦和哺乳和未采取避孕措施的育齡婦女。冠心病、高血壓和高血壓心臟病、心律紊亂，以及其他各種心血管疾病患者。糖尿病患者。近2周內或目前有上呼吸道病毒感染，以及鼻炎、鼻竇炎患者。嚴重肝腎功能不全患者，和全身性疾病、精神異?；蚩赡苡绊懡Y果判斷的疾病1月內或目前接受其他藥物臨床試驗者。非常住人口和容易失訪以及依從性差的患者。（三）治療期入組標準經1周的篩選期后，符合下列條件的患者將進入治療期，開始給藥：本次隨訪中測得FEV1〈1OO%的預計值。天PEF支氣管舒張試驗＞15%，且絕對值增加200ml以上或在篩選觀察期一周內至少有日內變異率三20%天PEF病人正確的完成了日記卡。4?患者能夠正確使用蜂流速儀和記錄PEF?；颊吣壳盁o呼吸道感染。原B2-激動劑已停用。（四）治療期排除標準在1周的篩選期中如果出現(xiàn)以下任何一種情況，患者將退出研究1．患者合并呼吸道感染。原B2-激動劑仍在使用。3．哮喘癥狀加重，不能參加試驗。（五）病人退出在研究過程中如出現(xiàn)有下述情況，患者將退出研究：按入組標準或排除標準需排除的患者（包括篩選期和進入治療期的標準）。在篩選期或治療期改變哮喘合并用藥。發(fā)生嚴重不良事件或藥物不良反應，根據(jù)醫(yī)生判斷，如果繼續(xù)治療對病人有害患者依從性差。急性支氣管炎發(fā)作合并哮喘加重，需要改變哮喘用藥。患者要求退出。六、研究藥物和治療（一）研究藥物用藥方法試驗組：A藥口服1.15mg/次，每日3次，療程4周。對照組：B藥口服2.4mg/次，每日3次，療程4周。（二）哮喘合并用藥原吸入和口服b2-受體激動劑一律停用。2．原吸入表面激素原則上按原來方案應用。原口服茶堿類藥物按原來劑型應用。療程中若病情改善明顯PEF晝夜波動率每降低10%,減少茶堿1次劑量。（三）哮喘加重的處理如果患者哮喘癥狀加重，患者將：增加喘樂寧氣霧劑的使用次數(shù)以緩解哮喘癥狀（根據(jù)喘樂寧氣霧使用說明不要超過最大推薦使用劑量）盡快與醫(yī)生取得聯(lián)系在日記卡上記錄癥狀，PEF和喘樂寧氣霧劑的使用在研究期間，如果患者哮喘加重需要干預治療，那么患者將退出本研究。如果患者需要住院治療完成不良事件表，對其不良事件必須進行隨訪，并記錄詳細情況。七、研究步驟病人隨訪程序：隨訪1：進入篩選期隨訪2：1周篩選期結束后，進入治療期隨訪2A*:重復1周篩選期后，進入治療期隨訪3：進入治療期后1周隨訪4：進入治療期后4周（治療結束）隨訪5：治療結束后1-2周*如果病人經過1周篩選期的評價不符合進入治療期標準，患者將繼續(xù)篩選觀察一周。一周后如果符合入組標準，患者仍可以進入本研究。一）隨訪1（進入篩選觀察期）向病人解釋臨床試驗的詳細情況,獲取書面知情同意書。根據(jù)篩選期入選及排除標準評估病人是否進入篩選期。采集病史及人口統(tǒng)計學資料，并進行體格檢查。測量身高和體重。記錄合并用藥。肺功能檢查和支氣管舒張試驗。分發(fā)峰速儀和日記卡，指導病人正確使用峰速儀，記錄最大呼氣流量（PEF）和日記卡。約定患者下次隨訪的時間（1－2周后），囑患者下次隨訪時帶回日記卡，且隨訪前4小時停用喘樂寧氣霧劑和口服短效支氣管擴張劑。囑患者下次隨訪當日空腹，準備進行血、尿化驗檢查。（二）隨訪2/2A（進入治療期）開始試驗藥物治療。收集并核對日記卡,評價病人記錄日記卡的能力。肺功能的測定或支氣管舒張試驗。如果患者在篩選期隨訪時，支氣管舒張試驗陽性，那么本次隨訪僅做肺功能檢查，即FEV1的測定。根據(jù)下列要求評價患者是否符合入組標準：?在隨訪1或隨訪2/2A時，患者吸入全寧喋400yg后，F(xiàn)EV］增加＞15%，且絕對值增加200ml以上或在篩選期一周內PEF日內變異率有一天＞20%?患者按照要求完成了日記卡如果患者滿足上述所有條件，并且患者符合入組標準。如果不能滿足上述所有標準，患者繼續(xù)記錄一周日記卡，重復一周篩選期，即為2A，但在CRF上僅記錄2A的結果。符合入組條件的患者繼續(xù)進行以下步驟：1）進行口咽部檢查，如有指征做咽拭子真菌檢查。2）實驗室檢查:留取血、尿標本做血、尿常規(guī)和血生化檢查。3）根據(jù)隨機分組程序分發(fā)研究藥物和新的日記卡。4）約定患者治療1周±1天復診，囑患者下次隨訪前4小時盡可能停用喘樂寧氣霧劑和口服短效支氣管擴張劑。5）囑患者下次隨訪時帶回研究藥物、日記卡。（三）隨訪3（研究藥物治療1周±1天）核對血生化和血、尿常規(guī)檢查結果。如有明顯異常根據(jù)研究者的臨床判斷決定患者是否退出研究。收集并核對日記卡。記錄不良事件。詢問患者是否改變目前用藥，如有改變，記錄在合并用藥表中，如果患者改變了哮喘用藥，患者將退出本研究。進行口咽部檢查，如有指征做咽拭子真菌檢查。測定FEV1與患者確認其用藥依從性約定下次隨訪時間（治療4周±3天后），囑患者下次隨訪時帶回日記卡、研究用藥。囑患者下次隨訪前4小時盡可能停用喘樂寧氣霧劑和口服短效支氣管擴張劑。四）隨訪4（研究藥物治療4周±3天）收集并核對日記卡。記錄不良事件。詢問患者是否改變目前用藥，如有改變，記錄在合并用藥表中。進行體格檢查。進行口咽部檢查，如有指征行咽拭子真菌檢查。測定FEVI。留取血、尿標本做血、尿常規(guī)檢查和血生化檢查。收回研究藥物，與患者確認其用藥依從性。用其他適當?shù)南幬锾娲芯坑盟幬铩τ谟胁涣际录l(fā)生者安排下次隨訪時間（7-14天后）。（五）隨訪5（治療結束后1-2周）僅對有不良事件者1.不良事件和合并用藥：記錄使用藥物的改變、伴隨疾病和不良事件。如果上次隨訪有不良事件發(fā)生，應對其結果作出判斷、分析和評價;血、尿常規(guī)和血生化檢查：如果患者在上次隨訪時檢查結果異常，此次隨訪應重復該項檢查直至結果正?；蛞衙鞔_該項檢查異常的原因。八、療效及安全性評價指標（一）療效評價指標及其測定1．主要療效指標日記卡資料-早晨PEF值的變化2．次要療效指標日記卡資料夜間PEF值的變化-PEF晝夜波動率臨床隨訪資料-FEV］和FEV］占預測值的百分數(shù)病人對療效的自我評價3．指標測定1）日記卡的記錄病人進入篩選期開始記錄日記卡，直至研究結束。研究者必須指導患者正確記錄日記卡，每次隨訪時要求病人帶回記錄完成的日記卡。研究者將向病人解釋：?如何測量和記錄PEF?病人在完成隨訪1的當日晚上開始記錄日記卡2）功能放大呼氣流量（PEF）測定：每例配備峰速儀。要求病人在每日早晨6：30-7：30和夜間（21：00-22：00）固定時間各測定1次，每次測3遍，取均值，計錄在病情日記中。PEF日間變異率的技術方法如下：PEF晝夜波動率日最高卩已尸―日最低REF%100%3）FEV1的測定患者每次隨訪時，都要測定FEV。FEV每次至少測量三遍，最佳兩者誤差小于5%，記11錄最大值。操作者應在打印出來的檢測報告上簽署姓名和日期，記錄病人編號。盡可能保證在研究過程中使用同一臺肺功能儀，而且對于同一個病人而言，每次隨訪時FEV］的測定最好保證在一天的同一時間（±1小時）進行。應根據(jù)廠家要求定期校準肺功能儀，保留肺功能校準記錄表。注：打印出來的FEV］檢測報告必須和患者的病例保存在一起。鼓勵患者在每次隨訪前4小時內停用喘樂寧氣霧劑和口服短效支氣管擴張劑。4）支氣管舒張試驗在隨訪1或隨訪2/2A，患者將進行支氣管舒張試驗檢查。鼓勵患者在隨訪前4小時停用喘樂寧氣霧劑。在吸入全寧喋400pg前和吸入后15分鐘分別測量FEV］，每次測量三遍，記錄最大值。并計算FEV］的改善率和增加的絕對值。如果FEV］的改善率＞15%，且絕對值增加200ml以上，則該患者支氣管舒張試驗陽性。氣道阻塞可逆性測定:FEU改善率=吸藥后吸藥前吸藥前呷*100%二）安全性評價1．不良事件試驗期間發(fā)生的所有不良事件（包括嚴重不良事件）。2．試驗室檢查治療前和治療結束時留取血、尿樣本進行血常規(guī)、血生化和尿常規(guī)檢查，分析治療前后的變化。

1）血液學指標：血紅蛋白、紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)、血小板計數(shù)2）血生化指標：ALT、AST、BUN、血糖、血鉀3）尿液分析：尿糖、尿蛋白、紅細胞和白細胞鏡檢心電圖：治療前后心電圖的變化3．體格檢查治療前和治療結束時進行。4．病人退出如果停止治療對病人有利，醫(yī)生可以隨時終止病人參加研究。病人可以隨時退出研究，并不影響他（她）以后的治療。必須在CRF上注明退出研究的具體原因（如不良反應，未就診，違背方案）。未就診的病人應該電話或通信確定原因。應盡量使退出的病人完成臨床和實驗室檢查。因不良事件退出的患者兩周后安排一次隨訪，并進行追蹤隨訪。如果病人沒有按照預約時間隨訪，研究者應盡量通過電話與病人取得聯(lián)系，讓病人盡可能回訪。如果病人不能回訪，請完成病例記錄表的研究總結。5．合并用藥記錄試驗過程中所有的合并用藥,并且在CRF上評注該合并用藥對該臨床試驗的有效性結果是否有影響，對安全性是否有影響。九、統(tǒng)計學處理（一）樣本量估計根據(jù)以往研究資料估計，B藥治療后的晨間PEF值增加25L/min,A藥的晨間PEF值增加30L/min，兩種藥的PEF增加量差異為5L/min，因此統(tǒng)計檢驗可分辨的差異A應小于5L/min，故取可分辨的差異A=（30-25）x0.9=4.51，標準差為12L/min。按照a=0.05的檢驗水準和80％的把握度，每組需要樣本量為+Z02+Z02)2°2(1.96+0.84)2122二1124.52A4.52兩組各需要112人。考慮率到可能有脫落，兩組各入組120例，即一共240例病人入選。（二）分析人群全分析集（FullAnalysisSet,簡稱FAS）：指盡可能接近按意向性分析原則的理想的受試者集。包括所有進入研究并被隨機化，接受過最少一次研究藥物治療并可提供一天日記1可分辨的差異A是指如果兩個總體均數(shù)的差異大于A時，該統(tǒng)計檢驗的P值〈a的概率大于等于所設定的Power=1-卩。對于本例而言，如果兩種藥的晨間PEF值的人群平均增加量的差異大于或等于5L/min，則每組完成該研究的人數(shù)為112人，則統(tǒng)計檢驗的結果為P<0-05的概率為80%。卡資料的患者。符合方案集（PerProtocolSet簡稱PP集）：此組人群為從意向性評估人群中剔除嚴重違反方案和依從性差的病例。包括所有符合試驗方案、依從性好（實際服用藥量占應用藥量80%以上）、試驗期間未服禁止用藥、完成CRF規(guī)定填寫內容的病例。安全分析集（SafetySet）：用于進行安全性評價，包括所有進入研究并被隨機接受過最少一次研究藥物治療，有治療后安全性評價的患者，不論其有無療效記錄。對主要變量的統(tǒng)計分析，分別選用全分析集和符合方案集的數(shù)據(jù)進行分析；基線評價和其他療效指標比較采用全分析集分析；安全分析集僅用于安全性評價。使用全分析集進行主要變量分析時，主要變量的缺失值，可以采用最接近一次觀察的結轉（lastobservationcarryforward,簡記LOCF）估計。（三）統(tǒng)計分析方法1．均衡性檢驗對于基線資料，進行兩組病人均衡性分析，比較兩組的可比性。均衡性分析中，定量資料的統(tǒng)計描述包括均數(shù)、標準差、標準誤、中位數(shù)、正態(tài)分布性W檢驗及p值；假設檢驗采用試驗藥組和安慰劑組數(shù)據(jù)比較的t檢驗或Wilcoxon檢驗（當數(shù)據(jù)不服從正態(tài)分布時）。定性資料的統(tǒng)計描述包括構成比；假設檢驗采用X2檢驗或精確概率檢驗，比較兩組構成。2．療效分析：分試驗組和對照組按隨訪階段分別進行統(tǒng)計描述，連續(xù)性資料采用均數(shù)、標準差、中位數(shù)及可信區(qū)間等統(tǒng)計量。分類資料（如病人的自我療效評價）以率或構成比進行描述。采用方差分析方法評估有效性指標，由于本研究是一個多中心臨床試驗，在作此分析時，將考慮中心效應對主要療效指標的影響。以發(fā)藥前3天的日記卡記錄資料作為數(shù)據(jù)分析基線值，進行各隨訪階段的組內和組間假設檢驗：組內比較：采用配對t檢驗或符號等級和Sign-ranktest（非正態(tài)分布用）分別比較試驗組和對照組治療前后各療效指標有無變化變。組間比較：根據(jù)正態(tài)性檢驗的結果，采用不同的假設檢驗方法檢驗各隨訪階段試驗組和對照組的差異，以及兩組改變量間的差異。對主要療效指標采用廣義線性模型（GLM過程），以中心、基線值為協(xié)變量，比較兩組的差別。對按癥狀自我評價的臨床療效（無效好轉顯效痊愈）采用CMHX2卡方檢驗。3．安全性分析對每個階段的心電圖、血尿常規(guī)、血生化等進行分析，計算異常率（異常且經醫(yī)生判斷有臨床意義）并用X2檢驗進行試驗組和對照組的比較。對不良事件按試驗組和對照組分組列表，并分析試驗組和對照組不良事件與藥物的關系的構成有無差異，采用X2檢驗或精確概率檢驗。對不良反應按試驗組和對照組分組列表。十數(shù)據(jù)管理和揭盲（一）數(shù)據(jù)管理數(shù)據(jù)的正確性對保證臨床試驗的質量極為重要,數(shù)據(jù)管理按照SFDA的GCP要求進行。?研究者應根據(jù)受試者的原始觀察記錄，保證將數(shù)據(jù)正確、完整、清晰、及時地載入病例報告表。研究過程中,監(jiān)查員負責監(jiān)查試驗的進行是否遵循試驗方案,確認所有病例報告表填寫正確完整,與原始資料一致,如有錯誤和遺漏,及時要求研究者改正。修改時需保持原有記錄清晰可見,改正處需經研究者簽名并注明日期。數(shù)據(jù)管理員負責數(shù)據(jù)的錄入和整理；事先建立數(shù)據(jù)庫,并保證其完整、正確和安全。每一份病例報告表應由兩個錄入員獨立地輸入數(shù)據(jù)庫中,并進行比較,直至完全一致。數(shù)據(jù)管理員將根據(jù)研究方案和病例報告表,建立相應的邏輯檢查文件,對錄入數(shù)據(jù)進行檢查。數(shù)據(jù)管理員發(fā)現(xiàn)任何問題,應及時以疑問表的形式通知監(jiān)查員,并要求研究者做出回答,疑問表將保存?zhèn)洳椤ＹY料完全錄入并經過審核認為所建立的數(shù)據(jù)庫正確后,將由主要研究者、申辦者、生物統(tǒng)計學專業(yè)人員和保存盲底的有關人員對數(shù)據(jù)庫進行鎖定。鎖定后的數(shù)據(jù)文件不允許再做變動。（二）揭盲在臨床研究完成,數(shù)據(jù)管理結束并且數(shù)據(jù)庫鎖定以后進行揭盲。揭盲后的數(shù)據(jù)庫交生物統(tǒng)計學專業(yè)人員進行統(tǒng)計分析,并將數(shù)據(jù)保存在磁盤中備查。揭盲程序將以文件形式記錄并存檔。（三）緊急揭盲每個病人都有相應的應急信封供緊急揭盲用。當發(fā)生緊急醫(yī)療情況時,在中心負責的研究者同意的情況下可以進行緊急揭盲,同時要通知主要研究者和申辦方。只有當必須了解受試藥物,否則會影響病人治療時才允許緊急揭盲。緊急揭盲需記錄原因并由研究者簽名存檔。十一、不良事件（一）不良事件不良事件是藥物應用以后發(fā)生在病人身上的任何異常醫(yī)學表現(xiàn)。它可以是一種疾病或以前疾病的加重、復發(fā),單個或一系列有關的癥狀和體征。不一定與研究藥物有因果關系。在給藥前就存在,并在研究過程中一直持續(xù)的異常醫(yī)學表現(xiàn)不記為不良事件。但如果該異常表現(xiàn)在用藥后其發(fā)生頻率增加、程度加重或性質改變，應作為不良事件記錄。對異常的實驗室檢查指標，如經醫(yī)生判定有臨床意義，也應記錄為不良事件。研究人員將對所有的不良事件進行評估，并記錄在相應的CRF頁上，包括開始和消除的時間、嚴重程度、采取的治療措施、疾病轉歸并判斷該癥狀與藥物的相關性。與研究藥物的關系按有關、很可能有關、可能有關、可能無關、無關5級評定。由主管醫(yī)師和負責醫(yī)師共同評判，并寫明理由。與藥物有關、很可能有關和可能有關的不良事件即定義為不良反應。研究者負責作出與臨床試驗相關的醫(yī)療決定，保證受試者在試驗期間出現(xiàn)不良事件時得到適當?shù)闹委?。（二）嚴重不良事件致命、致殘、需經搶救、導致患者住院治療、延長住院時間、發(fā)生惡性腫瘤、造成先天性畸形的不良事件為嚴重不良事件。臨床研究期間若發(fā)生嚴重不良事件，臨床研究單位應立即采取必要保護措施保護受試者安全，并通知主要研究者和申辦方。首次報告可通過電話或傳真，但仍需提供更為詳盡的書面報告。第二節(jié)主要療效指標的統(tǒng)計分析主要有效性指標“晨間PEF”的統(tǒng)計描述均數(shù)標準差中位數(shù)P25P75最小值最大值基線試驗組202.4699.57176.67133.33240.0063.33533.33基線對照組181.8376.25176.67120.00230.0052.67446.67治療后試驗組240.0479.53219.93184.53269.31127.79505.04治療后對照組207.0360.98203.32157.05245.96102.16418.25治療后改變量試驗組37.5720.0643.2629.3351.20-28.9567.04治療后改變量對照組25.2015.3126.2514.4036.90-28.4249.63注：主要療效指標“晨間PEF”值的改變量=治療后“晨間PEF”值一基線“晨間PEF”值對上述研究中的主要療效指標“晨間PEF”值的改變進行分析。以治療前后PEF改變量來說明兩組療效的差別，考慮到打可能與治療前PEF（稱為基線PEF,記為mpefO）大小有關，需要對此校正后再比較兩組的差別，采用協(xié)方差分析，校正基線對有效性評價的影響。p=p+Pxgroup+Pxmpef0dd012根據(jù)上述“晨間PEF”值的改變量的總體均數(shù)可知：試驗藥（group=l）的“晨間PEF”值的改變量的總體均數(shù)為p=p+P+PxmPef0dd012對照藥(group=2)的“晨間PEF”值的改變量的總體均數(shù)為卩二卩+2卩+卩xmpef0dd012在同樣的基線“晨間PEF水平mpef0情況下，對照藥的“晨間PEF”改變量總體均數(shù)一試驗藥的“晨間PEF”改變量總體均數(shù)=0。如1果0>0，說明對照藥的“晨間PEF”改變量總體均數(shù)大于試驗藥的“晨間PEF”改變量總1體均數(shù)，因此根據(jù)“晨間PEF”意義可知：對照藥的療效好；反之，如果0<0，說明試驗1藥的“晨間PEF”改變量總體均數(shù)大于對照藥的“晨間PEF”改變量總體均數(shù)，因此說明試驗藥的療效好。Stata中數(shù)據(jù)及其結果如下：groupmpefv0mpefv9d11260285.4925.4921533.33505.04-28.2931156.67203.8547.1841141.67191.0449.3751236.67265.428.7361206.67242.9736.37186.67147.260.5381243.33273.0529.7291263.33288.4325.110131032717111283.33306.1522.82121163.33209.5646.23131166.67211.1444.47141163.33210.6947.36151533.33504.38-28.95161393.33393.90.57171220253.0533.05181145193.0148.01191281.67302.9721.3201240269.3129.31211103.33160.5257.19221110166.1556.15231196.67236.4239.75241180221.8541.85251186.67228.4441.77261176.67219.9343.26271116.67170.5853.91

281103.33160.9657.6329183.33143.0259.69301140188.8948.89311230262.9132.91321200238.9938.99331236.6726629.33341126.67179.5652.8935193.33153.2759.94361200237.437.437166.67133.7167.04381226.67260.0533.38391410406.1-3.9401186.67227.1540.48411120174.5854.58421280301.4921.49431353.33359.155.82441143.33192.8249.49451280301.5521.55461203.33240.7137.38471240271.131.1481236.67266.3529.68491156.67203.5746.9501323.33335.6112.28511386.67388.331.66521216.67252.6736531175218.6743.67541111.67168.1656.49551516.67492.33-24.34561226.67258.6832.01571201.67239.5737.9581143.33193.1549.82591175219.1444.14601117.33172.1954.86611310324.5714.57621306.67324.0917.42631230263.1233.12641223.33257.1633.83651476.67455.94-20.73661200237.3337.33671106.67164.0157.34681120173.553.5691168.33212.4444.11701166.67210.7344.06711143.33191.3748.04721263.33288.4325.1731183.33225.9242.59741123.33177.9654.63751123.33176.5653.23761123.33178.254.87771146.67195.4848.8178183.33144.761.37791143.33192.3349801146.67195.1148.44811143.33192.8549.52821193.33233.1539.82831133.33184.5351.284163.33127.7964.46851126.67179.5652.89861120173.2953.29871156.67204.2447.57881116.67170.5553.88891153.33200.8347.5901106.67164.1157.44911103.33162.4259.09921303.33321.8318.5931296.67314.517.83941323.33335.7512.42951136.67186.8350.16961163.33208.2444.91971201.67238.8637.1998286.67131.7645.09992185210.6225.621002186.67210.1723.51012156.67187.1430.471022203.33224.8921.561032413.33390.99-22.341042106.67146.7840.111052183.33208.4925.161062206.67226.8420.171072173.33199.3626.031082340333.36-6.641092291.67294.843.17

1102100140.8340.831112260269.029.021122133.33167.6434.311132256.67266.8110.141142193.33215.4822.151152250261.7511.751162103.33144.1840.851172333.33328.34-4.991182120157.0537.051192230245.6415.641202230245.9615.961212200222.7322.731222190213.5823.581232116.67152.6736124280124.6444.641252120156.8236.821262143.33176.2332.9127283.33129.5946.26128266.67114.8448.171292110151.2741.271302236.67248.511.831312100140.1240.121322113.33153.2939.961332250263.3913.391342123.33162.2638.93135266.67113.246.531362163.33191.4728.141372323.33320.28-3.051382283.33287.814.481392203.33223.2219.891402183.33208.3825.051412163.33191.2427.911422156.67187.5830.911432183.33209.5826.251442236.67251.0714.41452233.33247.514.171462243.33255.9912.661472246.67258.9312.261482230244.1514.151492210228.6518.651502115152.7737.77

1512336.67331.93-4.74152296.67138.8442.171532253.33266.4813.151542280286.666.661552150181.0131.011562253.33263.7210.391572256.67267.3310.661582166.67193.1326.461592446.67418.25-28.421602186.67213.226.531612176.67203.3226.65162252.67102.1649.491632173.33200.3527.021642186.67211.5424.871652176.67203.2826.611662140172.9532.951672263.33272.278.941682190214.2124.211692203.33224.2220.891702213.33231.8918.56171260109.6349.631722123.33159.4936.161732110150.5840.581742123.33160.2336.91752193.33217.0923.761762146.67180.1633.491772236.67250.8414.171782206.67228.5721.9179283.33129.6546.32180276.67124.9148.241812133.33168.8135.481822126.67163.4636.79183276.67123.7347.061842223.33238.815.471852216.67235.9719.31862220237.5317.531872110149.8639.861882100142.8742.871892173.33200.1826.851902146.67178.1131.441912136.67170.9634.291922283.33288.284.951932165192.9127.911942166.67191.9525.281952131.67165.433.731962110149.6839.68group是分組變量，1為A藥，2為B藥。mpefvO是基線峰流量也就是協(xié)變量，mpefv9是治療后的峰流量，d是治療后與基線的差值。用Stata軟件對上述資料進行協(xié)方差分析，主要命令和結果如下：regdgroupmpefv0reg因變量分組變量協(xié)變量d|1+-Coef.Std.Err.tP>|t|[95%Conf.Interval]group|-16.51718.1398451-118.110.000-16.793-16.24135mpefv0|-.2009387.0007882-254.940.000-.2024933-.1993842_cons|94.77352.2818624336.240.00094.217695.32945協(xié)方差分析要求資料殘差正態(tài)，兩組殘差的方差齊，治療分組(group)與協(xié)變量(mpefvO)無交互作用，因此對上述分析結果進一步考察：predicte,residual計算殘差swilke進行正態(tài)性檢驗殘差的正態(tài)性檢驗結果p=0.29784,按照=0.05的檢驗水準可以認為殘差近似服從正態(tài)分布。Shapiro-WilkWtestfornormaldataVariable|ObsWVzProb>z+e|1960.991411.2600.5310.29784sdteste,by(group)對兩組的殘差進行方差齊性檢驗VarianceratiotestGroup|1+---ObsMeanStd.Err.Std.Dev.[95%Conf.Interval]1|974.99e-09.0936965.9228037-.1859861.18598612|1+---992.89e-10.10186681.013562-.2021513.2021513combined|1962.61e-09.0690874.9672232-.1362544.1362544

Ho:sd(1)=sd(2)TOC\o"1-5"\h\zF(96,98)observed=F_obs=0.829F(96,98)lowertail=F_L=F_obs=0.829F(96,98)uppertail=F_U=1/F_obs=1.206Ha:sd(1)<sd(2)PHa:sd(1)<sd(2)P<Fobs=0.1788Ha:sd(1)!=sd(2)P<FL+P>FU=0.3571Ha:sd(1)>sd(2)P>Fobs=0.8212殘差方差齊性檢驗結果p=0.3571，按照a=0.10的檢驗水準可以認為殘差的方差齊。gengmpef=group*mpefv0生成分組變量和協(xié)變量的交互作用項regdgroupmpefv0gmpef加入交互作用項再進行回歸分析gengmpef=group*mpefv0生成分組變量和協(xié)變量的交互作用項regdgroupmpefv0gmpef加入交互作用項再進行回歸分析d|1+-Coef.Std.Err.tP>|t|[95%Conf.Interval]group|-16.68925.3394998-49.160.000-17.35888-16.01962mpefv0|-.2021865.0023773-85.050.000-.2068755-.1974974gmpef|.0009078.00163140.560.579-.00231.0041256_cons|95.01443.516887183.820.00093.9949296.03393加入治療分組（group）與協(xié)變量（mpefvO）的交互作用項分析，結果交互作用的p=0.579,遠遠大于a=0.05的檢驗水準，表明二者之間不存在交互作用。以上分析表明，該資料符合協(xié)方差分析的要求，因此協(xié)方差分析的結果是有效的。結論是校正基線影響后，不同分組的總體療效有差別，且group的回歸系數(shù)01<0并且P<0.001，說明：在同樣基線的情況下，A藥的療效優(yōu)于B藥附錄隨機分組方案根據(jù)樣本量估計，每組需要120對。本研究采用隨機區(qū)組的方式隨機分組（RandomisedBlock）,BlockSize為4,每個Block中2名受試者為試驗組和2名受試者為對照組。對于每個適應癥的受試者按就診的先后編號，連續(xù)4個受試者為一個Block，共有60個Block，每個編號對應產生一個隨機數(shù)，在每個Block中，最小的2個隨機數(shù)對應編號的受試者為試驗組，最大的2個隨機數(shù)對應編號的受試者為對照組。隨機數(shù)由Stata7.0軟件產生，種子數(shù)為3176，結果如下：隨機分組（分藥編盲版）藥物編號Block隨機數(shù)用藥110.365064A藥210.636736A藥

藥物編號Block隨機數(shù)用藥620.334253A藥720.540661A藥1030.309937A藥1130.200412A藥1440.133041A藥1540.371488A藥1850.368592A藥2050.323056A藥2260.36477A藥2360.739154A藥2770.294115A藥2870.416021A藥2980.420215A藥3080.189262A藥3490.128179A藥3690.371477A藥38100.158064A藥40100.131228A藥41110.547104A藥44110.325209A藥45120.533688A藥46120.104271A藥50130.539171A藥51130.011595A藥54140.6491A藥55140.307486A藥57150.370967A藥59150.337711A藥63160.22872A藥64160.069209A藥65170.097671A藥66170.243851A藥69180.073738A藥72180.335231A藥74190.05849A藥76190.123655A藥78200.321107A藥79200.563435A藥82210.404149A藥83210.184641A藥藥物編號Block隨機數(shù)用藥85220.29625A藥88220.428985A藥91230.344823A藥92230.476935A藥95240.033653A藥96240.641774A藥97250.576885A藥98250.347163A藥101260.013109A藥104260.218672A藥106270.482318A藥107270.007564A藥109280.044567A藥112280.349653A藥113290.14565A藥116290.457331A藥118300.02528A藥119300.144596A藥122310.022772A藥124310.43941A藥125320.606854A藥128320.386352A藥131330.536955A藥132330.115021A藥134340.087139A藥136340.152259A藥139350.34534A藥140350.423287A藥141360.58744A藥143360.490712A藥146370.330456A藥148370.726387A藥149380.616856A藥150380.19934A藥153390.308319A藥155390.084485A藥158400.062989A藥160400.111335A藥163410.441626A藥164410.412599A藥

藥物編號Block隨機數(shù)用藥167420.434392A藥168420.551687A藥169430.220682A藥172430.051313A藥173440.064747A藥176440.193183A藥177450.279572A藥180450.058196A藥181460.316501A藥182460.600875A藥185470.146827A藥188470.054352A藥190480.277705A藥192480.328539A藥195490.33929A藥196490.170893A藥197500.773683A藥198500.477147A藥201510.215429A藥203510.479518A藥207520.333455A藥208520.048027A藥210530.674649A藥211530.560835A藥213540.221014A藥216540.116899A藥218550.233601A藥220550.478624A藥222560.377899A藥223560.224878A藥225570.265521A藥228570.8442A藥229580.244424A藥231580.583133A藥233590.575301A藥236590.043879A藥239600.245033A藥240600.206999A藥310.843243B藥410.771987B藥

藥物編號Block隨機數(shù)用藥520.922709B藥820.643657B藥930.579863B藥1230.544146B藥1340.733686B藥1640.698287B藥1750.773458B藥1950.750712B藥2160.842415B藥2460.85914B藥2570.623501B藥2670.813532B藥3180.691556B藥3280.785287B藥3390.918376B藥3590.525362B藥37100.850248B藥39100.349112B藥42110.889305B藥43110.893145B藥47120.753505B藥48120.804178B藥49130.802591B藥52130.598643B藥53140.80456B藥56140.886093B藥58150.649753B藥60150.622014B藥61160.487682B藥62160.523537B藥67170.971631B藥68170.731075B藥70180.762767B藥71180.793892B藥73190.690763B藥75190.715534B藥77200.577799B藥80200.698196B藥81210.633548B藥84210.910839B藥

藥物編號Block隨機數(shù)用藥86220.52686B藥87220.806574B藥89230.536872B藥90230.853005B藥93240.779976B藥94240.899675B藥99250.82785B藥100250.756887B藥102260.475108B藥103260.872345B藥105270.779198B藥108270.849254B藥110280.42703B藥111280.365618B藥114290.876072B藥115290.457432B藥117300.945917B藥120300.218919B藥121310.536904B藥123310.475518B藥126320.961904B藥127320.838242B藥129330.540068B藥130330.988763B藥133340.612573B藥135340.877497B藥137350.657147B藥138350.63169B藥142360.806697B藥144360.945B藥145370.955382B藥147370.979689B藥151380.733722B藥152380.644554B藥154390.357174B藥156390.649394B藥157400.611101B藥159400.741367B藥161410.867349B藥162410.665927B藥

藥物編號Block隨機數(shù)用藥165420.772215B藥166420.643999B藥170430.957509B藥171430.966306B藥174440.829388B藥175440.718641B藥178450.601323B藥179450.764186B藥183460.728125B藥184460.830425B藥186470.179033B藥187470.595188B藥189480.869071B藥191480.468946B藥193490.920094B藥194490.433421B藥199500.881272B藥200500.845424B藥202510.846429B藥204510.49129B藥205520.996845B藥206520.515008B藥209530.968113B藥212530.793921B藥214540.345678B藥215540.245969B藥217550.857045B藥219550.962268B藥221560.411937B藥224560.852117B藥226570.952996B藥227570.917948B藥230580.899433B藥232580.740378B藥234590.913436B藥235590.882997B藥237600.839123B藥238600.505099B藥隨機分組（揭盲版）藥物編號Block隨機數(shù)分組110.365064A藥210.636736A藥310.843243B藥410.771987B藥520.922709B藥620.334253A藥720.540661A藥820.643657B藥930.579863B藥1030.309937A藥1130.200412A藥1230.544146B藥1340.733686B藥1440.133041A藥1540.371488A藥1640.698287B藥1750.773458B藥1850.368592A藥1950.750712B藥2050.323056A藥2160.842415B藥2260.36477A藥2360.739154A藥2460.85914B藥2570.623501B藥2670.813532B藥2770.294115A藥2870.416021A藥2980.420215A藥3080.189262A藥3180.691556B藥3280.785287B藥3390.918376B藥3490.128179A藥

藥物編號Block隨機數(shù)分組3590.525362B藥3690.371477A藥37100.850248B藥38100.158064A藥39100.349112B藥40100.131228A藥41110.547104A藥42110.889305B藥43110.893145B藥44110.325209A藥45120.533688A藥46120.104271A藥47120.753505B藥48120.804178B藥49130.802591B藥50130.539171A藥51130.011595A藥52130.598643B藥53140.80456B藥54140.6491A藥55140.307486A藥56140.886093B藥57150.370967A藥58150.649753B藥59150.337711A藥60150.622014B藥61160.487682B藥62160.523537B藥63160.22872A藥64160.069209A藥65170.097671A藥66170.243851A藥67170.971631B藥68170.731075B藥69180.073738A藥

藥物編號Block隨機數(shù)分組70180.762767B藥71180.793892B藥72180.335231A藥73190.690763B藥74190.05849A藥75190.715534B藥76190.123655A藥77200.577799B藥78200.321107A藥79200.563435A藥80200.698196B藥81210.633548B藥82210.404149A藥83210.184641A藥84210.910839B藥85220.29625A藥86220.52686B藥87220.806574B藥88220.428985A藥89230.536872B藥90230.853005B藥91230.344823A藥92230.476935A藥93240.779976B藥94240.899675B藥95240.033653A藥96240.641774A藥97250.576885A藥98250.347163A藥99250.82785B藥100250.756887B藥101260.013109A藥102260.475108B藥103260.872345B藥104260.218672A藥

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