微生物在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用技術(shù)課件

技術(shù)單元微生物肥料微生物農(nóng)藥微生物飼料技術(shù)單元微生物肥料1微生物肥料微生物肥料概述細(xì)菌肥料五四零六抗生菌肥復(fù)合微生物肥料菌根菌肥微生物肥料微生物肥料概述2微生物肥料概述

微生物肥料又稱生物肥料，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的肥料制品中的一種，與化學(xué)肥料、有機(jī)肥料、綠肥性質(zhì)不同，它是利用微生物的生命活動(dòng)及其代謝產(chǎn)物的作用，改善作物養(yǎng)分供應(yīng)，向農(nóng)作物提供營養(yǎng)元素、生長物質(zhì)，調(diào)控其生長，達(dá)到提高產(chǎn)量和品質(zhì)，減少化肥使用，提高土壤的肥力的目的。微生物肥料概述

微生物肥料又稱生物肥料3狹義微生物肥料的概念是指微生物接種劑，即由具有特殊效能的微生物經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)（根瘤菌用草炭或蛭石等載體組成，此類制品主要用于拌種。廣義的微生物肥料的概念是指一類含有微生物的特定制品，應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，能夠獲得特定的肥料效應(yīng)，在這種效應(yīng)的產(chǎn)生中，制品中的活微生物起關(guān)鍵作用，符合上述定義的制品均應(yīng)歸入微生物肥料。

狹義微生物肥料的概念是指微生物接種劑，即由具有特殊效能的微生4微生物肥料的種類按微生物肥料的功效劃分一類是通過其中所含微生物的生命活動(dòng)，增加植物營養(yǎng)元素的供應(yīng)量，包括土壤和生產(chǎn)環(huán)境中植物營養(yǎng)元素的供應(yīng)總量和植物營養(yǎng)元素的供應(yīng)量，通過植物營養(yǎng)狀況的改善，導(dǎo)致產(chǎn)量增加。eg:根瘤菌肥微生物肥料的種類5另一類雖然也是通過其中所含的特定的微生物生命活動(dòng)而導(dǎo)致作物增產(chǎn)，但是其中微生物生命活動(dòng)的關(guān)鍵作用不僅限于提高植物的營養(yǎng)元素供應(yīng)水平，還包括了它們所產(chǎn)生的植物生長刺激素對(duì)植物的刺激作用，促進(jìn)植物對(duì)營養(yǎng)元素的吸收作用，或者是桔抗某些病原微生物的致病作用，減輕作物病蟲害而導(dǎo)致產(chǎn)量的增加。eg:PGPR另一類雖然也是通過其中所含的特定的微生物生命活動(dòng)而導(dǎo)致作物增6按微生物種類劃分細(xì)菌肥料（如根瘤菌、固氮菌、磷細(xì)菌、鉀細(xì)菌、光合細(xì)菌）放線菌肥料（如抗生菌類）真菌類肥料（如菌根真菌類）

按微生物種類劃分7按作用機(jī)理劃分根瘤菌肥料固氮菌類肥料解磷菌類肥料解鉀菌肥料按作用機(jī)理劃分8按肥料組分劃分單一的微生物肥料復(fù)合(或復(fù)混)微生物肥料按肥料組分劃分9微生物肥料的主要功效提高土壤肥力，減少化肥用量制造和協(xié)助農(nóng)作物吸收營養(yǎng)分泌生長刺激素

增強(qiáng)植物抗病和抗旱能力微生物肥料的主要功效10微生物肥料的特點(diǎn)微生物肥料中有效活微生物起作用微生物肥料要求合適的環(huán)境微生物肥料有效期明確微生物肥料有一定的適用范圍施用與貯藏要求較嚴(yán)格微生物肥料的特點(diǎn)11微生物肥料的應(yīng)用前景適用廣泛，市場容量大

eg:我國日前微生物肥料年產(chǎn)量在10×104～40×104t，同期化肥(約1.2×108t)我國僅大豆種植面積每年約為1000×104hm2，花生約330×104hm2，而實(shí)際應(yīng)用微生物肥料接種的大豆面積僅1％左右微生物肥料的應(yīng)用前景12生產(chǎn)成本低、應(yīng)用效果好生產(chǎn)無公害綠色食品、減少環(huán)境污染的需求微生物肥料本身的發(fā)展為其擴(kuò)大應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)生產(chǎn)成本低、應(yīng)用效果好13微生物肥料施用的注意事項(xiàng)微生物肥料產(chǎn)品應(yīng)該有生產(chǎn)許可證號(hào)、產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)證，符合國家或行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)，包裝和標(biāo)簽應(yīng)完整，使用說明要清楚、明確。微生物肥料施用的注意事項(xiàng)14微生物肥料的產(chǎn)品種類與使用的農(nóng)作物應(yīng)相符

要在其產(chǎn)品有效期內(nèi)使用

貯存溫度要合適。通常要求微生物肥料產(chǎn)品的貯存溫度不超過20℃為宜，4～10℃最好，開袋后應(yīng)在短時(shí)期內(nèi)盡快用完。

微生物肥料的產(chǎn)品種類與使用的農(nóng)作物應(yīng)相符15應(yīng)嚴(yán)格按照使用說明書的要求使用。盡量避免陽光直射，拌種后也不宜存放較長時(shí)間，應(yīng)隨拌隨用。應(yīng)嚴(yán)格按照使用說明書的要求使用。盡量避免陽光直射，拌種后也不16微生物肥料的配制禁忌：微生物肥料的使用一般應(yīng)注意避免與造成其特定微生物死亡或降低作用的物質(zhì)合用、混用。使用效果與土壤肥力、土壤的pH值、作物的種類

有很大關(guān)系。微生物肥料的配制禁忌：微生物肥料的使用一般應(yīng)注意避免與造成其17生產(chǎn)設(shè)備與相關(guān)控制條件微生物肥料生產(chǎn)設(shè)備與條件主要包括菌種生產(chǎn)系統(tǒng)、質(zhì)量控制系統(tǒng)、滅菌系統(tǒng)、生產(chǎn)包裝系統(tǒng)及產(chǎn)品貯藏等五大系統(tǒng)。菌種生產(chǎn)系統(tǒng)菌種生產(chǎn)系統(tǒng)包括菌種的培養(yǎng)、提純、復(fù)壯、擴(kuò)大等部分，需要的基本設(shè)備和條件包括微生物實(shí)驗(yàn)室、菌種培養(yǎng)室、種子罐和發(fā)酵罐等。生產(chǎn)設(shè)備與相關(guān)控制條件18影響菌種質(zhì)量的因素：培養(yǎng)基種齡與接種量培養(yǎng)條件：溫度、pH、通氣、泡沫、染菌控制影響菌種質(zhì)量的因素：19質(zhì)量控制系統(tǒng)包括質(zhì)檢室及其所需設(shè)備，質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)滅菌系統(tǒng)

各類滅菌設(shè)備及化學(xué)滅菌劑等。（附）生產(chǎn)包裝系統(tǒng)主要包括固體或液體發(fā)酵設(shè)備、產(chǎn)品干燥、粉碎與包裝設(shè)備產(chǎn)品貯藏系統(tǒng)質(zhì)量控制系統(tǒng)20附：無菌操作技術(shù)

化學(xué)消毒滅菌劑

微孔濾膜過濾除菌附：無菌操作技術(shù)21類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍醇類70%—75%乙醇脫水、蛋白質(zhì)變性皮膚、器皿醛類0.5%—10%甲醛2%戊二醛（pH=8）蛋白質(zhì)變性房間、物品消毒（不適合食品廠）酚類3%—5%石炭酸2%來蘇兒3%—5%來蘇兒破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)變性地面、器具皮膚地面、器具氧化劑0.1%高錳酸鉀3%過氧化氫0.2%—0.5%過氧乙酸氧化蛋白質(zhì)活性基團(tuán)，酶失活皮膚、水果、蔬菜皮膚、物品表面水果、蔬菜、塑料等常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(一)

類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍22常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(二)類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍重金屬鹽類0.05%—0.1%升汞2%紅汞0.1%—1%硝酸銀0.1%—0.5%硫酸銅蛋白質(zhì)變性、酶失活變性、沉淀蛋白蛋白質(zhì)變性、酶失活非金屬器皿皮膚、粘膜、傷口皮膚、新生兒眼睛防治植物病害表面活性劑0.05%—0.1%新潔爾滅0.05%—0.1%杜滅芬蛋白變性、破壞細(xì)胞膜皮膚、粘膜、器械皮膚、金屬、棉織品、塑料常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(二)類型名稱及使用方法作用23常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(三)類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍鹵素及其化合物0.2—0.5mg/L氯氣10%—20%漂白粉0.5%—1%漂白粉2.5%碘酒破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)飲水、游泳池水地面水、空氣等皮膚染料2%—4%龍膽紫與蛋白質(zhì)的羧基結(jié)合皮膚、傷口酸類0.1%苯甲酸0.1%山梨酸食品防腐食品防腐常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(三)類型名稱及使用方法作用24微孔濾膜過濾除菌

微孔濾膜主要特點(diǎn)適用于PH3-10的液體過濾；

孔隙率高：70-80%，孔徑分布均勻；薄膜厚度：100-160μm；濾速快、吸附少、無介質(zhì)脫落；外觀呈白色，平整、光滑、無針孔。微孔濾膜過濾除菌微孔濾膜主要特點(diǎn)25不同材料微孔濾膜性能及應(yīng)用材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用混合纖維素CA-CN①孔隙率高，截留效果好②不耐有機(jī)溶液和強(qiáng)酸、強(qiáng)堿溶液③性價(jià)比高①實(shí)驗(yàn)室、小生產(chǎn)工藝中除菌、除微粒的過濾②水體中大腸肝菌群的測(cè)定；③2微米和5微米的濾膜還用于油料過濾。格柵膜G/CA-CN是在超凈混纖膜上印上網(wǎng)格，以方便對(duì)截留物計(jì)數(shù)，用于微粒、細(xì)菌的檢測(cè)，作為培養(yǎng)基組成份，均勻準(zhǔn)確，是實(shí)驗(yàn)室、質(zhì)檢部門進(jìn)行微生物檢測(cè)的理想產(chǎn)品。①水體中大腸肝菌群的測(cè)定；②醫(yī)用工業(yè)中微生物的檢測(cè)。硝酸纖維素CN對(duì)蛋白等生物大分子吸附力強(qiáng)①醫(yī)學(xué)研究及診斷的細(xì)菌培養(yǎng)和生物工程②DNA-RNA雜交實(shí)驗(yàn)和檢定；③做液閃測(cè)定、放射性示蹤物的超凈制備④電泳、微量元素分析等。不同材料微孔濾膜性能及應(yīng)用材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用混合纖26材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用醋酸纖維素CA對(duì)蛋白吸附比較低；①適用于低分子醇類、油脂類溶液的過濾②科研中特殊成分的分析測(cè)定尼龍6JN6耐堿性和有機(jī)溶液聚醚砜PES通量大、對(duì)蛋白吸附力較低聚偏二氟乙烯PVDF①是疏水性膜，不吸潮，易恒重②能反復(fù)熱壓消毒，性能不變

③質(zhì)地薄、流速快④耐化學(xué)腐蝕、耐氧化⑤酒精處理后變?yōu)橛H水膜

①醇、酸、烷烴、芳香烴、鹵代烴等溶劑除去微粒，提高試劑級(jí)別

②空氣中懸浮微粒的凈化和發(fā)酵工業(yè)中空氣除菌

③油類中不溶物的凈化和固體微粒的重量分析

④非特異性蛋白的分離和提純

⑤水溶液的濃縮，化學(xué)物質(zhì)的分離和回收。材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用醋酸纖維素CA對(duì)蛋白吸附比較低；27材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用聚四氟乙烯PTFE耐酸、堿性強(qiáng)聚丙烯PP深層過濾玻璃纖維膜BF流速快、耐高溫①空氣污染監(jiān)測(cè)；

②生物大分子沉淀物的過濾；

③濾膜前預(yù)過濾。材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用聚四氟乙烯PTFE耐酸、堿性強(qiáng)聚28微孔濾膜使用方法清洗：使用前用蒸餾水清洗濾膜，然后在70～80℃蒸餾水中浸泡4小時(shí)，或在常溫蒸餾水中浸泡12小時(shí)；消毒：將清洗后的濾膜放入濾器中一起進(jìn)行蒸汽熱壓滅菌處理121℃30分鐘，也可采用其它滅菌方法處理。過濾液體時(shí)濾膜必須處于濕潤狀態(tài)，否則將影響過濾速度。若因滅菌處理使濾膜呈干燥狀態(tài)，需用無菌水潤濕后使用。微孔濾膜使用方法29微孔濾膜運(yùn)輸與保存纖維素濾膜為易然品，在運(yùn)輸和貯存時(shí)要遠(yuǎn)離火源。微孔濾膜必須在常溫和相對(duì)濕度60%條件下避光保存，若因干燥導(dǎo)致濾膜失水卷曲，則只須浸泡處理后即可使用。微孔濾膜運(yùn)輸與保存30微生物肥料的生產(chǎn)流程微生物肥料的生產(chǎn)流程31空壓機(jī)壓縮空氣空氣過濾、滅菌鍋爐蒸汽滅菌斜面菌株振蕩培養(yǎng)種子罐發(fā)酵罐發(fā)酵菌液原料入廠干燥培養(yǎng)基原料配制培養(yǎng)基吸附攪拌原料滅菌粉碎包裝入庫質(zhì)量檢測(cè)空壓機(jī)壓縮空氣空氣過濾、滅菌鍋爐蒸汽滅菌斜面菌株振蕩培養(yǎng)種子32細(xì)菌肥料根瘤菌肥料根瘤菌肥料概述根瘤菌肥料是推廣最早，效果顯著的一種高效菌肥。根瘤菌的多樣性是目前生物固氮資源調(diào)查和利用的一個(gè)熱點(diǎn)。

細(xì)菌肥料根瘤菌肥料33我國目前生產(chǎn)的根瘤菌肥料使用的菌種有花生根瘤菌，大豆根瘤菌，苕子、蠶豆、豌豆根瘤菌，苜蓿根瘤菌，菜豆根瘤菌，沙打旺根瘤菌。此外，還有一些針對(duì)不同豆科作物生產(chǎn)的根瘤菌劑品種，如三葉草根瘤菌肥、百脈根根瘤菌肥、胡枝子根瘤菌肥、綠豆根瘤菌肥等。我國目前生產(chǎn)的根瘤菌肥料使用的菌種有花生根瘤菌，大豆根瘤菌，34根瘤菌劑型：根瘤菌劑主要有粉狀(系草炭、蛭石或其他載體)、液體、種衣劑3種劑型及少數(shù)凍干菌。復(fù)合菌種：用同一根瘤菌的不同菌株復(fù)合的，也有用根瘤菌與其他微生物，如假單胞菌、糞產(chǎn)堿菌等合用以增強(qiáng)其結(jié)瘤性能，國外有人將此種制劑稱為第二代接種劑。根瘤菌劑型：根瘤菌劑主要有粉狀(系草炭、蛭石或其他載體)、液35在我國的產(chǎn)量和質(zhì)量發(fā)展都不快的主要原因：根瘤菌接種劑對(duì)生產(chǎn)條件要求較嚴(yán)格根瘤菌的代時(shí)較長，快生菌為3～6h，慢生菌為8～10h應(yīng)用對(duì)象僅限于豆科植物結(jié)瘤競爭問題菌株選育應(yīng)用條件在我國的產(chǎn)量和質(zhì)量發(fā)展都不快的主要原因：36根瘤菌的生物學(xué)特性根瘤菌的形態(tài)特征根瘤菌是短桿狀細(xì)菌根瘤菌在固體培養(yǎng)基上和土壤中呈桿狀，不同的種大小略有差別，端生或周生鞭毛，能運(yùn)動(dòng)，革蘭氏染色陰性，無芽孢，培養(yǎng)較久，菌體粗大，染色不均。根瘤菌侵入豆科植物的根部繁殖后，為短小桿狀，無鞭毛。根瘤菌的生物學(xué)特性37隨著根瘤的增大，菌體停止分裂，逐漸延長變大，形成—端膨大的棒狀或分叉變形，這種變形的菌體稱為類菌體。

不同根瘤菌種的類菌體形狀不相同。eg:苜蓿根瘤菌的類菌體一端稍膨大呈棍棒狀大豆根瘤菌的類菌體呈細(xì)長稍彎的桿狀，偶爾一端膨大或分叉紫云英根瘤菌的類菌體則一端膨大呈茄子狀：豌豆根瘤菌的類菌體分叉呈Y、T、X等形狀根瘤菌腐敗后，類菌體散入土壤中，崩解成小球狀曲體，最后又發(fā)育成有鞭毛的短桿狀菌，進(jìn)行分裂繁殖。隨著根瘤的增大，菌體停止分裂，逐漸延長變大，形成—端膨大的棒38根瘤菌的培養(yǎng)性狀

在固體培養(yǎng)基表面，菌落呈圓形，邊緣整齊。有的菌落無色半透明(如豌豆、紫云英的根瘤菌)，有的乳白色、黏稠(如花生、大豆的根瘤菌)。菌體不易被剛果紅和結(jié)晶紫染色，在培養(yǎng)基上很容易與其他菌落區(qū)別開。在液體培養(yǎng)基中，菌液渾濁，菌體稍有沉淀，不形成菌膜。培養(yǎng)時(shí)間過久，則在液面四周有膠黏狀物質(zhì)。根瘤菌的培養(yǎng)性狀39生長速度快生菌(如苜蓿、三葉草等根瘤菌)代時(shí)為3～6h，接種后2天即可見菌落，4～5天內(nèi)菌落達(dá)到最大，菌落膠黏物質(zhì)多，較稀薄。

慢生菌(如大豆、花生、豌豆等根瘤菌)代時(shí)為8～10h接種3～4天才有菌落出現(xiàn)，7～10天菌落達(dá)到最大，菌落膠黏物質(zhì)少，較稠厚。

不論是快型或慢型根瘤菌，若生長速度變快，則菌株的結(jié)瘤性往往不好，是菌種退化的表現(xiàn)。生長速度40根瘤菌的生理習(xí)性

碳素營養(yǎng)快生型根瘤菌的碳素營養(yǎng)以單糖、雙糖和多元醇為宜，其中又以葡萄糖、蔗糖和甘露醇為最好。慢生型根瘤菌的碳素營養(yǎng)以乳糖、阿拉伯糖最好。氮素營養(yǎng)快生型和慢生型根瘤菌均以可溶性有機(jī)氮化合物(如多肽、氨基酸)為氮源，也能利用銨鹽和硝酸鹽。根瘤菌的生理習(xí)性41礦物元素快生型和慢生型根瘤菌均需要磷、硫、鉀、鈣、鎂等礦物元素，微量元素鐵、鉬、硼、鈷和錳有促進(jìn)根瘤菌生長的作用。維生素維生素對(duì)根瘤菌的發(fā)育影響較大，特別是B族維生素可使根瘤菌的生長速度加快幾倍到幾十倍。根瘤菌的培養(yǎng)特性根瘤菌為好氣菌，最適生長溫度為25～28℃，最適pH值為6.5～7.5。培養(yǎng)過程中產(chǎn)酸，因此培養(yǎng)基中需加入碳酸鈣中和。礦物元素快生型和慢生型根瘤菌均需要磷、硫、鉀、鈣、鎂等礦42根瘤菌的專一性各種根瘤菌都與各自相應(yīng)的豆科植物建立共生關(guān)系，形成根瘤，表現(xiàn)了根瘤菌的專一性。eg:豌豆根瘤菌只能在豌豆、蠶豆的根部形成根瘤大豆根瘤菌只能在黑豆、黃豆、青豆的根部形成根瘤豇豆根瘤菌只能在豇豆、花生、綠豆、赤豆、羽豆,利刀豆的根部形成根瘤。根瘤菌的專一性43根瘤菌肥料的生產(chǎn)斜面菌種培養(yǎng)擴(kuò)大培養(yǎng)固體擴(kuò)大培養(yǎng)液體擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵吸附成品質(zhì)量檢驗(yàn)成品根瘤菌肥料的生產(chǎn)斜面菌種培養(yǎng)擴(kuò)大培養(yǎng)固體擴(kuò)大培養(yǎng)液體擴(kuò)大培養(yǎng)44吸附劑吸附劑一般用草炭，因它含有豐富的有機(jī)質(zhì)，保水力強(qiáng)，疏松不黏結(jié)成塊，通氣良好，是一種理想的培養(yǎng)基(我們用草炭做吸附劑不再加進(jìn)其他營養(yǎng)成分)。沒有草炭就用疏松肥土代替。將草炭曬干、打碎、過篩，除去石頭、雜草等，調(diào)pH值至中性或微堿性(pH值6.8～7.6，用石灰或過磷酸鈣調(diào)節(jié))，裝瓶(裝量約2／3～3／4)消毒，126℃保壓2～3h，消毒后放接種室冷卻。吸附劑45成品質(zhì)量檢驗(yàn)外觀封口無縫、貼有標(biāo)簽(品種、出廠日期、有效期)、無霉。菌數(shù)測(cè)定每克菌肥含根瘤菌數(shù)不少于1×108個(gè)，雜菌含量應(yīng)控制在10％以下，無霉菌生長。合格的菌肥應(yīng)濕潤疏松，不結(jié)團(tuán)塊，含水量在30％左右。pH值6.8～7.6為宜結(jié)瘤試驗(yàn)要求第四個(gè)稀釋度(10-5菌懸液)浸種的種子，播種10～15天，結(jié)瘤率應(yīng)在95％以上成品質(zhì)量檢驗(yàn)46根瘤菌肥的應(yīng)用拌種將選好的種子倒入內(nèi)壁光潔的瓷盆或木盆內(nèi)，用涼水將菌劑(用量100～250g／666.7m2)用水250—500g調(diào)成漿糊狀，再把種子倒入拌勻，使每粒種子都沾上菌劑。晾干拌種后在陰涼處攤開，稍陰干，使根瘤菌劑牢固地吸附在種子上，播種時(shí)也易于撒開時(shí)，立即播種，隨即覆土。根瘤菌肥的應(yīng)用47注意事項(xiàng)一種根瘤菌劑只能用于相應(yīng)的豆科植物，用錯(cuò)無效。根瘤菌劑是用來拌種的，不能撒施做基肥或追肥。根瘤菌劑不能在太陽光直射或高溫條件存放，應(yīng)常溫保藏。根瘤菌劑拌種的種子不要在晴天中午播種，宜在傍晚和陰天撒播，拌種后稍陰干就應(yīng)播種。使用時(shí)即可打開密封的蓋子，最好一次用完，一次用不完應(yīng)馬上蓋好，最遲2～3天內(nèi)用完。注意事項(xiàng)48拌種時(shí)不要與農(nóng)藥、過磷酸鈣一起拌(會(huì)殺死根瘤菌)，可與鈣鎂磷肥一起拌，但應(yīng)先拌菌、后拌鈣鎂磷肥。稻田水要放干曬1～2天再播種，旱田要在下雨前后條播，蓋一薄層土。以磷增氮，在有效磷含量低的土壤中施用磷肥。使用適量磷肥可提高根瘤菌的結(jié)瘤率，對(duì)根瘤菌拌種的增產(chǎn)有良好的效果，增強(qiáng)固氮效能，從而也增加了土壤中的含氮量。應(yīng)注意土壤的pH值。拌種時(shí)不要與農(nóng)藥、過磷酸鈣一起拌(會(huì)殺死根瘤菌)，可與鈣鎂磷49磷細(xì)菌肥料磷細(xì)菌肥料是一類促使土壤中不能被作物利用的有機(jī)態(tài)或無機(jī)態(tài)磷化物轉(zhuǎn)化為有效磷，從而改善作物的磷素營養(yǎng)，促進(jìn)作物增產(chǎn)的菌肥。

磷細(xì)菌肥料50磷細(xì)菌的主要類群

磷細(xì)菌是可將不溶性磷化物轉(zhuǎn)化為有效磷的某些腐生性細(xì)菌的總稱。無機(jī)磷細(xì)菌（分解磷酸三鈣的細(xì)菌）是通過細(xì)菌產(chǎn)生的酸使不溶性磷礦物溶解為可溶性的磷酸鹽，如氧化硫硫桿菌。有機(jī)磷細(xì)菌是通過某些細(xì)菌，（如巨大芽孢桿菌和蠟狀芽孢桿菌）等產(chǎn)生的一些酸類物質(zhì)，如乳酸、檸檬酸和植物酶類物質(zhì)，使土壤中的難溶性磷素和磷酸鐵、磷酸鋁以及有機(jī)磷酸鹽礦化，形成作物能夠吸收利用的可溶性磷，供作物吸收利用。磷細(xì)菌的主要類群51磷細(xì)菌的生物學(xué)特性菌種的培養(yǎng)特征普通無機(jī)磷細(xì)菌菌落白色，生長旺盛，邊緣整齊，表面光滑。巨大芽孢桿菌(有機(jī)磷細(xì)菌)在馬鈴薯培養(yǎng)基上菌落顏色由灰白色變淺黃色，漸變褐色。磷細(xì)菌的生物學(xué)特性52培養(yǎng)特性磷細(xì)菌為好氧性，要求有機(jī)質(zhì)豐富、中性或微酸性、水分充足土壤條件。生長最適溫度為30～37℃。培養(yǎng)特性53磷細(xì)菌肥料的生產(chǎn)

磷細(xì)菌肥料的生產(chǎn)方法同根瘤菌肥料的生產(chǎn)。產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)

有效活菌數(shù)為2×109個(gè)/ml或5×107個(gè)/g，雜菌數(shù)15%以下。磷細(xì)菌肥料的生產(chǎn)54磷細(xì)菌肥料的使用使用方法磷細(xì)菌肥料可用于拌種、浸種、蘸根、基肥、追肥使用。提高磷細(xì)菌肥效的幾項(xiàng)措施無機(jī)磷細(xì)菌菌肥和有機(jī)磷細(xì)菌菌肥混合使用磷細(xì)菌肥和固氮菌肥混合使用早施磷細(xì)菌肥料土壤含水量在15％～23％時(shí)，有利于磷細(xì)菌的生長和活動(dòng)。磷細(xì)菌肥料的使用55固氮菌肥料固氮菌的主要類群及培養(yǎng)特性固氮菌肥料使用的菌種是除了根瘤菌以外的固氮菌，有自生固氮菌和聯(lián)合固氮菌兩類。固氮菌肥料56自生固氮菌主要有圓褐固氮菌、黃褐固氮菌、棕色固氮菌、貝氏固氮菌、巴斯德固氮梭菌。自生固氮菌的形態(tài)是粗短桿狀，兩端鈍圓，有莢膜,長4～6μm。這些桿菌，常常是2個(gè)聯(lián)結(jié)在一起，形成8字狀。自生固氮菌57聯(lián)合固氮菌聯(lián)合固氮菌指的是在特定的作物根際生長時(shí)固氮能力比其獨(dú)自存在時(shí)固氮能力強(qiáng)的固氮菌。主要有雀稗固氮菌、巴西固氮螺菌、產(chǎn)氣腸桿菌、糞產(chǎn)堿桿菌等。聯(lián)合固氮菌如玉米剛螺菌，在顯微鏡下菌體是革蘭氏染色陰性，趨向螺旋彎曲的桿菌，靠單根端生鞭毛運(yùn)動(dòng)。細(xì)胞內(nèi)含有較高光折射率的油滴。

聯(lián)合固氮菌58近年來的研究表明，固氮菌的純培養(yǎng)制品比當(dāng)?shù)赝辽灵L的固氮菌群效果差。所以固氮菌肥的生產(chǎn)以培養(yǎng)當(dāng)?shù)毓痰狠^實(shí)用。近年來的研究表明，固氮菌的純培養(yǎng)制品比當(dāng)?shù)赝辽灵L的固氮菌群59固氮菌肥料的質(zhì)量檢驗(yàn)有效活菌數(shù)為2×109個(gè)/ml或5×107個(gè)/g，雜菌數(shù)15%以下。固氮菌肥料的質(zhì)量檢驗(yàn)60固氮菌肥料的使用方法及注意事項(xiàng)使用方法拌種、追肥、蘸根、葉面噴施。注意事項(xiàng)自生固氮菌劑一般可用于各種作物，聯(lián)合固氮菌菌劑對(duì)作物有較強(qiáng)的選擇性。盡量避免與速效氮肥聯(lián)合施用。固氮菌肥料的使用方法及注意事項(xiàng)61鉀細(xì)菌肥料鉀細(xì)菌肥料又稱生物鉀肥、硅酸鹽菌劑，是由人工選育的高效硅酸鹽細(xì)菌經(jīng)過工業(yè)發(fā)酵而成的一種生物肥料。其主要有效成分是活的硅酸鹽細(xì)菌。

鉀細(xì)菌具有分解正長石、磷灰石，并釋放磷、鉀礦物中磷、鉀元素的作用。

鉀細(xì)菌肥料62鉀細(xì)菌肥料的質(zhì)量檢驗(yàn)有效活菌數(shù)為2×109個(gè)/ml或5×107個(gè)/g，雜菌數(shù)15%以下。鉀細(xì)菌肥料的質(zhì)量檢驗(yàn)63鉀細(xì)菌肥料的使用方法及注意事項(xiàng)使用方法基肥、拌種、追肥、蘸根、種肥。鉀細(xì)菌肥料的使用方法及注意事項(xiàng)64注意事項(xiàng)鉀細(xì)菌肥料（生物鉀肥）可與殺蟲、殺真菌病害農(nóng)藥同時(shí)配合施用（先拌農(nóng)藥、陰干后拌菌劑），然后播種。鉀細(xì)菌肥料一般不能與殺細(xì)菌農(nóng)藥接觸，因此不能同時(shí)配合施用。鉀細(xì)菌肥料一般不能與過酸或過堿物質(zhì)混用，過酸或過堿的土壤也會(huì)影響硅酸鹽細(xì)菌的生命活動(dòng)，pH值以5～8的范圍為宜。鉀細(xì)菌肥料要早施注意事項(xiàng)65光合細(xì)菌肥料光合細(xì)菌是一類能將光能轉(zhuǎn)化成微生物代謝活動(dòng)能量的原核微生物。光合細(xì)菌的種類較多，包括藍(lán)細(xì)菌、紫細(xì)菌、綠細(xì)菌和鹽細(xì)菌。光合細(xì)菌肥料66光合細(xì)菌肥料作用的機(jī)理固氮為植物根系分泌氨基酸和核酸消除有害物質(zhì)、提高作物抗病性改善土壤肥力，提高作物產(chǎn)量和品質(zhì)eg:施用光合細(xì)菌的土壤細(xì)菌(每克)總數(shù)比對(duì)照增加1.8×107個(gè)，放線菌增加1.1×106個(gè)，固氮菌增加1.9×105個(gè)。

光合細(xì)菌肥料作用的機(jī)理67光合細(xì)菌肥料的使用

浸種、葉面噴施光合細(xì)菌肥料的使用68五四零六抗生菌肥抗生菌肥料是一種能分泌抗菌物質(zhì)和刺激素的放線菌接種于餅粉和土（1：10）中發(fā)酵而成。它具有成本低，肥效高，抗病害，促生長，堆制方法簡易，用料就地取材，水田旱田都能用，對(duì)作物無害等優(yōu)點(diǎn)。使用菌種通常是放線菌中的細(xì)黃放線菌。五四零六抗生菌肥抗生菌肥料是一種能分泌抗菌物質(zhì)和刺激素的放線695406放線菌的生物學(xué)特性5406放線菌屬于弗蘭克氏放線菌屬的細(xì)黃放線菌。在固體培養(yǎng)基上，菌落呈圓形、隆起，初期表面光滑，淺黃稍帶綠色，成長后表面粉末狀，白色帶粉紅，背面黃褐色。具有清涼冰片香味。生長最適溫度為28～30℃，pH為7.5～8.5。生長最佳碳源為淀粉，氮源為氨態(tài)氮和硝態(tài)氮。5406放線菌的生物學(xué)特性705406抗生菌肥料的作用抗病驅(qū)蟲刺激作物生長增加土壤中有效養(yǎng)分的含量5406抗生菌肥料的作用715406抗生菌肥料的生產(chǎn)一級(jí)菌種培養(yǎng)擴(kuò)大培養(yǎng)固體擴(kuò)大培養(yǎng)液體擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵吸附成品質(zhì)量檢驗(yàn)成品斜面菌種餅土管菌種5406抗生菌肥料的生產(chǎn)一級(jí)菌種培養(yǎng)擴(kuò)大培養(yǎng)固體擴(kuò)大培養(yǎng)液72一級(jí)菌種制備餅土管菌種的制作餅土管的制作取黃豆餅粉5％，玉米粉5％，肥土90％，將料混合拌勻，用手提噴霧器加水，做成大小如小米粒的餅土丸，分裝試管1／4處，經(jīng)121℃高壓滅菌1h，取出晾干，于32℃培養(yǎng)2天，無雜菌生長的可使用。接種和培養(yǎng)在無菌室用無菌水稀釋斜面菌種，接種在餅土丸上，于32℃溫箱中培養(yǎng)4～5天，菌苔表面孢子生長豐滿，呈銀灰色，并有露珠，即可取出備用。一級(jí)菌種制備73斜面菌種制作斜面培養(yǎng)基制作馬鈴薯20％，葡萄糖5％，硫酸鎂0.04％，磷酸氫二鉀0.04％，蛋白陳0.1％，pH值7.2～7.4，分裝，塞上棉塞，包扎，121℃滅菌30min。取出后放成斜面，于32℃溫箱中培養(yǎng)2～4天，無雜菌及無冷凝水的方可使用。斜面試管接種與培養(yǎng)接種用經(jīng)121℃滅菌的毛筆。用筆蘸菌苔上的孢子涂抹斜面。在32℃溫箱中培養(yǎng)4～5天，孢子生長豐滿，呈粉紅色并有露珠時(shí)，取出放入冰箱保存?zhèn)溆茫４鏁r(shí)間以1個(gè)星期至半為宜。以上兩種培養(yǎng)基可以交替使用，以防上菌種退化。斜面菌種制作74固體吸附配方（l）稻谷皮90%，甘薯粉10%。（2）麩皮10%，爐灰30%，肥土60%。（3）黃豆餅粉10％，肥土60％，爐灰20％，麩皮10％。固體吸附75滅菌以上幾種吸附劑稻谷皮、甘薯粉、黃豆餅粉、麩皮經(jīng)121℃蒸汽滅菌1h，肥土、爐灰在烘箱內(nèi)經(jīng)160℃滅菌1h后取出，待料降溫到40℃左右接種。接種由于各吸附劑吸水量不同，故接種量第一種為的100％，第二種為的40％，第三種為的40%。滅菌76產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)有效活菌數(shù)為1.3～2.0×1010個(gè)/g產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)775406抗生菌肥料的使用使用基肥、追肥、浸種、接種、蘸根注意

5406菌肥不能與硫磺、硫酸銅、硫酸亞鐵等殺菌劑混合施用；不能與硫酸鉻、硝酸鋅等混合使用；不宜使用污染、變質(zhì)或存放過久（超過有效期半年）的菌劑。

5406抗生菌肥料的使用78復(fù)合微生物肥料復(fù)合微生物肥料是指在微生物肥料的生產(chǎn)應(yīng)用過程中，為了提高施用效果，從實(shí)用角度出發(fā)，將兩種或兩種以上的微生物（復(fù)合）或一種微生物與其他營養(yǎng)物質(zhì)復(fù)配（復(fù)混）而成。復(fù)合微生物肥料復(fù)合微生物肥料是指在微生物肥料的生產(chǎn)應(yīng)用過程中79復(fù)合微生物肥料集有機(jī)肥、化學(xué)肥料和微生物肥料的優(yōu)點(diǎn)于一體，具有許多不同于其他肥料的特點(diǎn)：克服了過去有機(jī)肥費(fèi)工費(fèi)時(shí)的缺點(diǎn)，施用十分方便；克服了單純化學(xué)肥料造成的土壤理化性狀退化和農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量下降的缺點(diǎn)，可以增加土壤有機(jī)質(zhì)，改良士壤結(jié)構(gòu)，提高土壤肥力，改進(jìn)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量；均衡地供應(yīng)作物生長所需的速效氮、磷、鉀及多種微量元素，強(qiáng)化土壤微生物區(qū)系，持久地發(fā)揮作用，具有顯著的增產(chǎn)效果，并能提高作物的抗逆性；價(jià)格合理，具有一定的市場競爭力。復(fù)合微生物肥料集有機(jī)肥、化學(xué)肥料和微生物肥料的80復(fù)合微生物菌肥的種類兩種以上生物菌復(fù)合可以是同一個(gè)微生物菌種也可以是不同的微生物菌種。應(yīng)用的前提是所采用的兩種或兩種以上的微生物之間無拮抗作用，而且必須分別發(fā)酵然后混合?？偟幕罹鷶?shù)和復(fù)合的微生物均應(yīng)保證一定的數(shù)量。復(fù)合微生物菌肥的種類81菌與各種營養(yǎng)元素或添加物、增效劑的復(fù)合菌加大量元素（一定量的氮、磷、鉀或其中的l～2種）；菌加一定量的微量元素；菌加一定量的植物生長激素；菌加大量元素、微量元素、其他營養(yǎng)、刺激物質(zhì)等。菌與各種營養(yǎng)元素或添加物、增效劑的復(fù)合82復(fù)合微生物菌肥的生產(chǎn)復(fù)合菌肥生產(chǎn)工藝流程單一菌種培養(yǎng)復(fù)合菌劑加有機(jī)物或無機(jī)肥復(fù)合菌肥復(fù)合微生物菌肥的生產(chǎn)單一菌種培養(yǎng)復(fù)合菌劑加有機(jī)物或無機(jī)肥復(fù)83菌種的生產(chǎn)5406、磷細(xì)菌培養(yǎng)基：馬鈴薯200g，KCL0.3g，NaCL0.3g，MgSO40.3g，CaCO35g，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000ml，pH值7.5。固氮菌、鉀細(xì)菌培養(yǎng)基：MgSO40.2g，NaCL0.2g，CaCO35g，過磷酸鈣1g，白陶土1g，葡萄糖10g，F(xiàn)eSO4微量，瓊脂20g，水1000ml，pH值7.5。上述培養(yǎng)基配制滅菌后，進(jìn)行單項(xiàng)菌種接種，在28～32℃溫度下培養(yǎng)2～7gd，即得菌種。菌種的生產(chǎn)84無機(jī)磷細(xì)菌經(jīng)培養(yǎng)24h，透明無色，逐漸長出乳白色油脂狀濃厚菌苔，培養(yǎng)基不變色。有機(jī)磷細(xì)菌培養(yǎng)24h，生成淺黃棕色菌苔，顏色鮮艷，以后逐漸變成暗黃棕色，分泌黃棕色素進(jìn)入培養(yǎng)基內(nèi)。棕色固氮菌（注意：不能用圓褐固氮菌，因5406對(duì)它稍有抑制作用），培養(yǎng)24h，菌苔開始乳白色，以后變棕褐色。鉀細(xì)菌培養(yǎng)24h，菌苔粘稠透明無色，以后菌苔加厚富有彈性，最后菌體自溶成水漬狀。無機(jī)磷細(xì)菌經(jīng)培養(yǎng)24h，透明無色，逐漸長出乳白色油脂狀濃厚菌85復(fù)合菌劑的生產(chǎn)培養(yǎng)基：米糠（或麥麩成豆餅粉）30％，肥土70％，再加上總量5％的草木灰和1％的過磷酸鈣，用石灰調(diào)pH值為7.5，混勻后調(diào)濕度為30％左右，即達(dá)到手握成團(tuán)，觸之不太易散，但又不粘手的程度。配料拌勻后裝料，121℃滅菌1.5h，置無菌室放冷至不燙手時(shí)進(jìn)行接種。一般制作2種復(fù)合菌劑。分別將兩種菌種用無菌水按1：10稀釋，同時(shí)接入，搖勻，28～32℃培養(yǎng)2～5天，即得復(fù)合菌劑復(fù)合菌劑的生產(chǎn)86磷細(xì)菌（看當(dāng)?shù)匦枰x擇有機(jī)磷細(xì)菌或無機(jī)磷細(xì)菌，或者兩者都用）十固氮菌劑培養(yǎng)24h后搖動(dòng)1次，繼續(xù)培養(yǎng)1天，瓶壁分泌大量水珠，瓶壁土粒周圍長出乳白色或淺綠色菌苔，料疏松，無味或微酸味，絕無霉味、臭味和腥味。平皿法計(jì)數(shù)，磷細(xì)菌3×1010個(gè)／g以上，固氮菌5×1010個(gè)／g左右。

磷細(xì)菌（看當(dāng)?shù)匦枰x擇有機(jī)磷細(xì)菌或無機(jī)磷細(xì)菌，或者兩者都用）875406十鉀細(xì)菌劑接種后24h，瓶壁分泌大量水珠，此時(shí)鉀細(xì)菌發(fā)育旺盛。幾天后，5406粉紅色孢子蓋滿土粒，全瓶粉粒呈橙紅色。這時(shí)觀察玻璃瓶壁上的土粒，可見土粒被5406粉紅色孢子布滿，而土粒周圍卻可看到透明粘稠的鉀細(xì)菌菌苔。這時(shí)若取一點(diǎn)樣品接入鉀細(xì)菌的斜面培養(yǎng)基，通過培養(yǎng)可看到顆粒周圍生成大量鉀細(xì)菌彈性菌苔，同時(shí)5406菌也旺盛生長。通過平皿活菌計(jì)數(shù)，含5406菌1011個(gè)/g以上，鉀細(xì)菌5×109個(gè)/g以上。5406十鉀細(xì)菌劑88復(fù)合菌劑的生產(chǎn)復(fù)合菌肥的制作，可分為拌種劑生產(chǎn)和菌肥生產(chǎn)兩種。拌種劑配方米糠10％，肥土90％，再加總量1％的過磷酸鈣和5％的草木灰，pH值7.5。也可將菌液：泥炭按1：4吸附。復(fù)合菌劑的生產(chǎn)89復(fù)合菌肥配方（1）綠肥粉10kg，肥土39kg，米糠1kg。（2）豆秸（豆莢）粉10kg，肥土40kg。（3）玉米芯粉（高粱殼粉）7.5kg，肥土42kg，米糠0.5kg。（4）米糠5kg，肥土45kg。以上各配方都要加上總量1％的過磷酸鈣和5％的草木灰，同時(shí)用石灰調(diào)酸堿度，pH值7.5～8，米糠可用豆餅粉或麥麩代替。

復(fù)合菌肥配方90配料混勻后噴入1／1000的高錳酸鉀水，將濕度調(diào)到30％左右，然后常壓滅菌4h或121℃高壓滅菌1.5h。制作菌肥時(shí)，把拌勻的配料攤在撒上一層石灰粉的水泥地板上，料厚20～35cm，上覆消毒草木灰或剛從爐中掏出的草木灰3cm，控制料溫不要高于34℃，培養(yǎng)3～5天，不要翻動(dòng)。即得優(yōu)質(zhì)菌肥。配料混勻后噴入1／1000的高錳酸鉀水，將濕度調(diào)到30％左右91復(fù)合菌肥的分級(jí)復(fù)合菌肥的檢驗(yàn)，可用平皿計(jì)數(shù)法。無條件時(shí)，可用肉眼觀察，通過看、聞分為上、中、下三等。上等品：產(chǎn)品疏松，有濃郁藥香味，像優(yōu)質(zhì)過磷酸鈣一樣的顏色，放進(jìn)水中先浮后沉。中等品：疏松，用棍棒插入通暢無阻，有香味，但有少量霉菌污染，色粉白。下等品：大量霉菌或細(xì)菌污染，惡臭，霉臭或酒酸味，有少量白點(diǎn)，結(jié)塊。一般下等品要立即處理，不能當(dāng)菌肥施用，但可作普通廄肥使用。

復(fù)合菌肥的分級(jí)92復(fù)合菌肥的施用施用方法種肥、基肥、追肥施用條件復(fù)合菌肥只有在良好的耕作水肥條件下，才能有效地發(fā)揮它的作用。所以施用后一定要搞好排灌、曬田、中耕等工作，為細(xì)菌大量繁殖創(chuàng)造適宜的條件。復(fù)合菌肥的施用93施用注意事項(xiàng)復(fù)合菌肥中的5406菌雖然可以提取激素作液體噴施，但其他幾種菌都不能這樣做。所以不要用復(fù)合菌肥做根外追肥，以免造成浪費(fèi)。復(fù)合菌肥可與殺蟲劑農(nóng)藥、廄肥、草木灰、磷肥、腐植酸銨合用，也可與激素合用，在水田中可與化肥合用，但在旱地卻不能和化肥合用。由復(fù)合菌肥制成的生物有機(jī)復(fù)合肥在做基肥時(shí)，應(yīng)增加其使用量達(dá)到1500～2000kg／hm2。施用注意事項(xiàng)94菌根菌肥菌根菌種類菌根是土壤中某些真菌侵染植物根部與其形成的菌根共生體。由于形成菌根的植物種類繁多，形成菌根的真菌種類也很多，包括擔(dān)子菌、子囊菌、藻狀菌中的真菌。

菌根菌肥菌根菌種類95菌根菌與高等植物所形成的菌根有三類：內(nèi)生菌根外生菌根內(nèi)外生菌根菌根菌與高等植物所形成的菌根有三類：96以內(nèi)外生菌根中的泡囊叢枝狀菌根簡稱VA菌根最為常見。泡囊叢枝菌根的特征是：菌根菌是無隔膜的藻狀菌；在皮層細(xì)胞內(nèi)形成叢枝或二分叉的菌絲體；在皮層細(xì)胞內(nèi)或皮層細(xì)胞間形成橢圓形泡囊；菌絲除在植物根細(xì)胞內(nèi)形成上述構(gòu)造外，還伸延到土壤中去，有時(shí)很旺盛，從而擴(kuò)大了吸收面，但并不形成外生菌根那樣的菌套（菌絲形成的，包在根外面的假薄皮組織）。以內(nèi)外生菌根中的泡囊叢枝狀菌根簡稱VA菌根最為常見。97人們將有益的菌根菌與其寄主植物共同進(jìn)行擴(kuò)大繁殖，然后將有菌根真菌的土壤（菌根土）作為接種劑用于農(nóng)、林業(yè)生產(chǎn)中，提高農(nóng)作物產(chǎn)量和改善農(nóng)作物品質(zhì)以及提高樹木的成活率等。這種含有人工擴(kuò)大繁殖有益菌根菌的菌土就稱之為菌根菌肥料。人們將有益的菌根菌與其寄主植物共同進(jìn)行擴(kuò)大98菌根菌肥料的作用機(jī)理內(nèi)、外生菌根真菌的外伸菌絲在土壤中延伸，擴(kuò)大了植物根系的吸收面積，菌根真菌的菌絲分泌多種胞外酶，加強(qiáng)了根系周圍土壤有機(jī)質(zhì)的分解，豐富了植物根系對(duì)礦質(zhì)元素營養(yǎng)的吸收，分泌的生長刺激物刺激根系生長。菌根表面存在磷酸酯酶，水解有機(jī)磷化物，可增強(qiáng)菌根周圍的有效磷量，供根吸收。菌根菌肥料的作用機(jī)理99

菌根菌肥料應(yīng)用問題及展望到目前為止，VA菌根的人工純培養(yǎng)問題尚未突破，VA菌根的菌根菌都不能在人工培養(yǎng)基上生長，只能發(fā)芽，形成一根短菌絲然后死去。因此，只能在寄主根上形成菌根，并生長，繁殖。菌根菌肥料應(yīng)用問題及展望100在純培養(yǎng)未能突破的情況下，國內(nèi)外的研究者利用各種方法人為培養(yǎng)大量的接種VA菌根的植物根，然后以這些侵染了VA菌根的植物根段和有大量活孢子的根際土為接種劑（菌根菌肥料）去接種作物，可以獲得較好的增產(chǎn)效果。在純培養(yǎng)未能突破的情況下，國內(nèi)外的研究者利用各種方法人為培養(yǎng)101微生物農(nóng)藥

細(xì)菌殺蟲殺菌劑真菌殺蟲劑病毒殺蟲劑農(nóng)用抗生素微生物農(nóng)藥細(xì)菌殺蟲殺菌劑102微生物農(nóng)藥就是利用微生物或其產(chǎn)物來防治植物病蟲害的一種農(nóng)藥，它是通過篩選的昆蟲病原體或病菌拮抗微生物，用人工培植、收集、提取而制成的對(duì)人畜安全無毒，選擇性強(qiáng)，不傷害天敵，害蟲不產(chǎn)生抗藥性，不污染環(huán)境的微生物制劑。微生物農(nóng)藥就是利用微生物或其產(chǎn)物來防治植物病蟲害的103細(xì)菌殺蟲殺菌劑目前國內(nèi)外使用的細(xì)菌殺蟲劑不多，己分離到的昆蟲病原菌的菌種和變種約有100種，生產(chǎn)的商品僅有十幾種，其中研究最多、效果最好的是芽孢桿菌屬的蘇云金桿菌類和日本金龜子芽孢桿菌。細(xì)菌殺蟲殺菌劑目前國內(nèi)外使用的細(xì)菌殺蟲劑不多，104

蘇云金桿菌蘇云金桿菌的形態(tài)蘇云金桿菌是G＋的好氣性芽孢桿菌，大小為1.0～1.2×3.0～5.0um，兩端鈍圓，周生鞭毛，少數(shù)無鞭毛，它們單生，或2～5個(gè)成鏈狀。芽孢橢圓形或圓形，在形成芽孢的同時(shí)，會(huì)形成伴孢晶體。蘇云金桿菌105蘇云金桿菌殺蟲機(jī)理蘇云金桿菌的殺蟲作用主要是由于它能產(chǎn)生毒素。目前已知的毒素有四種：晶體毒素、熱穩(wěn)定外毒素、葉蜂毒素和γ—外毒素,其中晶體毒素是一切蘇云金桿菌所共有的，研究較詳細(xì)，也最有應(yīng)用價(jià)值。蘇云金桿菌殺蟲機(jī)理106晶體毒素：亦稱δ-內(nèi)毒素，由許多蛋白質(zhì)單位組成，是一種堿性蛋白質(zhì)；存在于蛋白質(zhì)晶體中。伴孢晶體不溶于水及有機(jī)溶劑，但溶于堿性溶液。處在pH3.3以下或用使蛋白質(zhì)變性的物質(zhì)處理，則失去毒性．有一定的耐熱能力在65℃下可保持1小時(shí)，80℃下20分鐘也不致破壞。伴孢晶體蛋白質(zhì)由18種氨基酸組成。它是一種原毒素，要在特定條件下，經(jīng)蛋白酶類水解成較小的亞單位(毒性肽)才產(chǎn)生毒性。晶體毒素：亦稱δ-內(nèi)毒素，由許多蛋白質(zhì)單位組成，是一種堿性蛋107熱穩(wěn)定外毒素：又叫β—外毒素，屬于核酸的衍生物，能溶于水，對(duì)熱穩(wěn)定，由腺嘌呤、核糖和磷酸鹽組成。這種毒素為水溶性，對(duì)熱穩(wěn)定，含有兩種核苷酸的衍生物，經(jīng)高壓滅菌仍具有毒效。熱穩(wěn)定外毒素：又叫β—外毒素，屬于核酸的衍生物，能溶于水，對(duì)108

葉蜂毒素：又叫α—外毒素，是一種卵磷脂酶，可溶于水，含有游離的氨基酸和多肽。γ—外毒素，是一種未確定的酶，毒力尚未證實(shí)，葉蜂毒素：又叫α—外毒素，是一種卵磷脂酶，可溶于水，含有109蘇云金桿菌就是靠以上4種毒素引起昆蟲發(fā)病死亡，特別是對(duì)于鱗翅目昆蟲的幼蟲毒殺能力更強(qiáng)。當(dāng)敏感幼蟲吞食含有芽孢和伴孢晶體的混合制劑后，在腸道中被水解成毒性肽，很快發(fā)生毒性，幼蟲停止取食，麻痹，進(jìn)一步作用使中腸的上皮細(xì)胞遭受破壞，隨著病情發(fā)展，腸道壁細(xì)胞的膠粘物質(zhì)被破壞，上皮細(xì)胞剝離，散落在腸內(nèi)，使中腸的透性失去控制，腸壁穿孔，腸道內(nèi)含物、芽孢和細(xì)菌大量侵入血腔。中腸pH下降；血液pH上升，幼蟲全身癱瘓，蟲體軟化，腐爛，發(fā)黑，最終死亡。蘇云金桿菌就是靠以上4種毒素引起昆蟲發(fā)病死亡，110蘇云金桿菌特點(diǎn)高效，對(duì)人畜無毒，不污染環(huán)境不殺傷害蟲天致，能保持生態(tài)平衡對(duì)植物無毒害，不影響作物的色、香、味特定環(huán)境下的應(yīng)用利用生物工程技術(shù)，選育新菌株抗性產(chǎn)生緩慢蘇云金桿菌特點(diǎn)111不足之處選擇性強(qiáng)，殺蟲譜較窄達(dá)到死亡高峰期較慢受氣溫影響，由于毒素需要在一定的溫度條件下發(fā)揮殺蟲效力對(duì)蠶有毒性，在養(yǎng)蠶區(qū)的應(yīng)用要特別注意不易受專利保護(hù)不足之處112蘇云金桿菌的生產(chǎn)固體生產(chǎn)菌種斜面菌種培養(yǎng)種子擴(kuò)大培養(yǎng)固體發(fā)酵培養(yǎng)干燥儲(chǔ)存使用蘇云金桿菌的生產(chǎn)菌種斜面菌種培養(yǎng)種子擴(kuò)大培養(yǎng)固體發(fā)酵培養(yǎng)干燥113液體生產(chǎn)沙土管菌種斜面菌種沙土管菌種克氏瓶菌種種子罐發(fā)酵罐發(fā)酵液充填罐板框壓濾濾餅調(diào)漿罐菌漿噴霧、干燥菌粉包裝輕質(zhì)碳酸鈣、硫酸鋁濾液肥料或滅蛆液體生產(chǎn)沙土管菌種斜面菌種沙土管菌種克氏瓶菌種種子罐發(fā)酵罐發(fā)114產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)先將菌懸液移入水浴鍋80℃×15min，再計(jì)數(shù)我國合格產(chǎn)品是1×109個(gè)/g，2×109個(gè)/ml產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)115蘇云金桿菌的應(yīng)用品種的選擇要依目標(biāo)害蟲的種類來選擇eg：蘇云金桿菌以色列亞種對(duì)雙翅目的蚊、蚋有劇毒，對(duì)鱗翅目的害蟲無毒。擬步甲變種對(duì)鞘翅目的害蟲有毒，對(duì)鱗翅目的害蟲無毒。而一些對(duì)鱗翅目害蟲高毒效的蘇云金亞種、庫斯塔克亞種和蠟螟亞種等，對(duì)鞘翅目昆蟲卻無殺傷作用蘇云金桿菌的應(yīng)用116應(yīng)用濃度的確定依產(chǎn)品的毒力效價(jià)和防治對(duì)象的種類以及氣候因素等而定害蟲發(fā)生程度和幼蟲發(fā)育時(shí)期溫度

應(yīng)用濃度的確定117隨配隨用蘇云金桿菌從稀釋到使用，一般不要超過1～2h混合應(yīng)用可無條件地與其他微生物殺蟲劑，如昆蟲病毒制劑、白僵菌制劑等混合應(yīng)用與化學(xué)農(nóng)藥混用也可以增效隨配隨用118防止抗性產(chǎn)生不同制劑交替使用適量的殺蟲劑用來控制對(duì)蘇云金桿菌不敏感的昆蟲。在害蟲最敏感的時(shí)期使用，如初孵或低齡幼蟲期。如發(fā)現(xiàn)抗性產(chǎn)生，可加大田間使用劑量防止抗性產(chǎn)生119制劑保藏應(yīng)貯存在陰涼干燥的倉庫中，注意防潮，防高溫，避免陽光照射。不可與堿性物質(zhì)混放于一個(gè)倉庫。施用技術(shù)噴施、撒毒土或顆粒劑

制劑保藏120

金龜子乳狀桿菌金龜子乳狀桿菌包括日本金龜子芽孢桿菌和緩死芽孢桿菌兩種。是一群對(duì)鞘翅目害蟲金龜子的幼蟲――蠐螬有高度致病力的專性病源芽孢桿菌。是G+，大小為0.5～0.8μm×l.3～5.2μm，單生或成對(duì)，不運(yùn)動(dòng)，形成芽孢時(shí)芽孢位于菌體的一端，隨著芽孢的膨大，菌體變成梨形。金龜子乳狀桿菌121只能在寄主——金龜子幼蟲(蠐螬)體內(nèi)生長發(fā)育，形成營養(yǎng)體和芽孢(每頭幼蟲可產(chǎn)生2～5×109個(gè)芽孢)，離開寄主后，營養(yǎng)體迅速死亡，芽孢則能在土壤中存活多年。只能在寄主——金龜子幼蟲(蠐螬)體內(nèi)生長發(fā)育，形成營養(yǎng)體和芽122

球形芽孢桿菌

一種在自然界廣泛分布的芽孢桿菌，有少數(shù)菌株對(duì)蚊幼蟲有高毒力，其毒效成分在細(xì)胞內(nèi)。球形芽孢桿菌123真菌殺蟲劑現(xiàn)已知有500多種真菌能寄生于昆蟲和螨類，導(dǎo)致寄主發(fā)病和死亡。殺蟲真菌分屬于卵菌、接合菌、子囊菌、擔(dān)子菌和半知菌。接合菌中的蟲霉目是一群十分重要的殺蟲真菌，它產(chǎn)生分生孢子易于傳播，抗逆能力強(qiáng)，侵染快，在適合條件下能引起寄主害蟲的大規(guī)模流行病。蟲草菌屬有100多種，寄生于多種昆蟲幼蟲。真菌殺蟲劑現(xiàn)已知有500多種真菌能寄生于昆蟲和螨類，導(dǎo)致寄主124

白僵菌白僵菌屬半知菌類的絲孢霉目，絲孢霉科。白僵菌的形態(tài)、培養(yǎng)特性白僵菌屬有球孢白僵菌、卵孢白僵菌和小球孢白僵菌三個(gè)種。最常用的是球孢白僵菌。白僵菌125形態(tài)特征球孢白僵菌菌絲細(xì)長，無色透明，直徑1.5～2.0um，有隔膜，菌落平坦呈絨毛狀，后期呈粉狀，表面白色至淡黃色。分生孢子梗多次分叉，聚集成團(tuán)，呈花瓶狀，分生孢子著生于小梗的頂端，孢子呈球形。形態(tài)特征126培養(yǎng)特性白僵菌的生長溫度5～35℃，菌絲生長最適溫度為22～26℃；好氧性；30℃和25～50%的空氣相對(duì)濕度有利于孢子的形成，孢子萌發(fā)要求相對(duì)濕度95%以上。培養(yǎng)特性127白僵菌防治害蟲的原理白僵菌感染昆蟲的途徑是通過皮膚，其次通過口腔(消化管)及氣孔。白僵菌的致病作用靠分生孢子發(fā)芽時(shí)的機(jī)械力，以及分泌的一種幾丁質(zhì)酶和蛋白質(zhì)毒素(接觸毒素)破壞和溶解昆蟲的表皮，使芽管侵入體腔，而且對(duì)昆蟲還有毒殺作用。白僵菌防治害蟲的原理128由芽管伸長的菌絲能直接吸收昆蟲體液作為養(yǎng)料，在菌絲分支頂端形成筒形孢子(短菌絲細(xì)胞)。筒形孢子和菌絲彌漫在血液里，可妨礙昆蟲的血液循環(huán)。隨著白僵菌在昆蟲體液中的大量繁殖，體液的理化性質(zhì)發(fā)生變化，導(dǎo)致昆蟲因新陳代謝機(jī)能紊亂而死亡。最后，因全部筒形孢子發(fā)芽伸長形成的菌絲大量吸收水分，使昆蟲尸體硬化，故又有“硬化病”之稱。菌絲從氣門和節(jié)間伸出體外形成氣生菌絲和分生孢子梗，頂端形成分生孢子。由芽管伸長的菌絲能直接吸收昆蟲體液作為養(yǎng)料，在菌絲分支頂端形129白僵菌制劑的質(zhì)量檢驗(yàn)有效活菌數(shù)為5×109個(gè)/g

白僵菌制劑的質(zhì)量檢驗(yàn)130白僵菌的使用方法噴粉、灌心、放活蟲法、死蟲擴(kuò)散法白僵菌可導(dǎo)致家蠶產(chǎn)生一種毀滅性疾病，在蠶區(qū)切勿使用。白僵菌的使用方法131病毒殺蟲劑

病毒殺蟲劑的種類核型多角體病毒(NPV)dsDNA病毒，呈棍棒狀，包在包涵體即多角體內(nèi)(每個(gè)多角體含10個(gè)以上的病毒粒子)，在被感染昆蟲的細(xì)胞核內(nèi)發(fā)育。是已發(fā)現(xiàn)種類最多的昆蟲病毒，主要通過口器傳染。病死的幼蟲倒吊在植物枝條上，由于組織液化下墜，使下端膨大，這是尋找感染蟲體的特征。病毒殺蟲劑病毒殺蟲劑的種類132質(zhì)型多角體病毒(CPV)dsRNA病毒，病毒粒子不是桿狀而近于球形，一個(gè)多角體包含體內(nèi)含有2～10個(gè)病毒粒子，多角體在昆蟲細(xì)胞質(zhì)內(nèi)發(fā)育。死蟲軀體萎縮，無倒掛特征。質(zhì)型多角體病毒(CPV)133顆粒體病毒(GV)dsDNA病毒，桿狀，包涵體呈圓形、橢圓形顆粒狀，每個(gè)包含體只有一個(gè)病毒粒子。當(dāng)寄主吞入GV后，在腸道中將包含體消化，釋放出病毒粒子，侵入真皮、脂肪組織、氣管和中腸上皮，先進(jìn)入細(xì)胞核，在核內(nèi)繁殖，隨后釋放到細(xì)胞質(zhì)中，形成只含一個(gè)病毒粒子的包含體。顆粒體病毒(GV)134無包含體病毒

病毒粒子球狀，不形成包涵體。侵染的宿主范圍廣泛，除昆蟲綱外，還可侵染蜘蛛綱、甲殼綱等動(dòng)物，無包含體病毒135農(nóng)用抗生素

農(nóng)用抗生素是由微生物產(chǎn)生的對(duì)微生物、昆蟲、植物等其他生物，顯示特異性藥理作用的物質(zhì)。這是一種具有活性的，微生物新陳代謝產(chǎn)物。農(nóng)用抗生素易被微生物分解，殘留量低，對(duì)人畜安全，不污染環(huán)境，用藥量小，便于運(yùn)輸。農(nóng)用抗生素

農(nóng)用抗生素是由微生物產(chǎn)生的對(duì)微生136

抗生素的特性內(nèi)吸和運(yùn)轉(zhuǎn)穩(wěn)定性和有效性藥害問題有效濃度比藥害濃度低三倍以上，才比較安全。抗生素的特性137對(duì)人畜的毒性和殘毒問題選用的抗生素應(yīng)對(duì)人畜和各種水生生物安全無毒。一般要求在常用濃度20倍以上對(duì)人畜無毒害，200倍以上對(duì)魚、蝦、貝等也無毒害。易被微生物分解而失去活性，不致在環(huán)境中積累，殘留毒性不大，屬于無公害農(nóng)藥。對(duì)人畜的毒性和殘毒問題選用的抗生素應(yīng)對(duì)人畜138

抗生素的抗菌機(jī)理阻礙菌體細(xì)胞壁的合成影響菌體細(xì)胞膜的通透性抑制核酸的復(fù)制抑制菌體蛋白質(zhì)的合成抗生素的抗菌機(jī)理139微生物飼料單細(xì)胞蛋白和菌體蛋白飼料秸稈發(fā)酵飼料其它微生物飼料微生物飼料單細(xì)胞蛋白和菌體蛋白飼料140單細(xì)胞蛋白和菌體蛋白飼料(SCP)

利用微生物提高粗飼料的營養(yǎng)價(jià)值，其主要途徑在于利用微生物對(duì)秸稈類物質(zhì)進(jìn)行分解與轉(zhuǎn)化改造，使牲畜對(duì)秸稈中纖維素類物質(zhì)更易于消化，通過微生物的蛋白質(zhì)提高飼料蛋白質(zhì)的含量，從而起到以粗代精、節(jié)糧抵糧的作用。單細(xì)胞蛋白和菌體蛋白飼料(SCP)

利用微生物141

概述SCP它是指用于食品和飼料添加劑的微生物菌體。單細(xì)胞蛋白和菌體蛋白都是指大量生長的微生物菌體或其蛋白提取物。但前者多指用酵母或細(xì)菌等單細(xì)胞菌類生產(chǎn)的產(chǎn)品，后者則包括多細(xì)胞的絲狀真菌類菌體產(chǎn)品，兩者都可作為人或動(dòng)物的蛋白補(bǔ)充劑。不論是分離出的細(xì)胞蛋白還是全部細(xì)胞物質(zhì)都稱之為SCP。概述142單細(xì)胞蛋白和菌體蛋白飼料的特點(diǎn)生長速度快，蛋白含量高。原料來源豐富生產(chǎn)可因地制宜，生產(chǎn)過程易控制營養(yǎng)成分多單細(xì)胞蛋白和菌體蛋白飼料的特點(diǎn)143

生產(chǎn)菌株的選擇標(biāo)準(zhǔn)能夠很好地同化基質(zhì)碳源和無機(jī)氮源繁殖速度快，菌體蛋白含量高無毒性和致病性菌種性能穩(wěn)定最好能搞混菌培養(yǎng)生產(chǎn)菌株的選擇標(biāo)準(zhǔn)144

生產(chǎn)工藝斜面菌種培養(yǎng)菌種擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵離心或干燥菌體處理干燥

產(chǎn)品原料預(yù)處理生產(chǎn)工藝斜面菌種培養(yǎng)菌種擴(kuò)大培養(yǎng)發(fā)酵離心或干燥菌體處理干燥145秸稈發(fā)酵飼料發(fā)酵飼料有兩種，一種是通過接種進(jìn)行發(fā)酵的飼料，如秸稈微貯(處)飼料；另一種是不接種的發(fā)酵飼料，如青貯飼料。秸稈發(fā)酵飼料發(fā)酵飼料有兩種，一種是通過接種進(jìn)行146

秸稈微貯(處)飼料原理農(nóng)作物秸稈經(jīng)過微生物發(fā)酵處理后提高飼料轉(zhuǎn)化效率并將其貯存在一定設(shè)施內(nèi)的技術(shù)，稱秸稈微生物發(fā)酵貯存技術(shù)，簡稱微貯或微處技術(shù)。

微處（貯）飼料主要用來飼喂牛、羊等反芻家畜。秸稈微貯(處)飼料147微處飼料的發(fā)酵過程是利用各種高活性微生物復(fù)合菌劑，在厭氧和一定溫濕度及營養(yǎng)水平的條件下，進(jìn)行秸稈難利用成分的降解和物質(zhì)轉(zhuǎn)化，從而提高農(nóng)作物秸稈的營養(yǎng)價(jià)值，把粗飼料加工成養(yǎng)分較高、適口性較好的飼料，以增加禽畜的采食量和營養(yǎng)吸收。微處飼料的發(fā)酵過程是利用各種高活性微生物復(fù)合菌148發(fā)酵過程：首先是曲霉將一部分木質(zhì)素、纖維素等物質(zhì)降解為各種易發(fā)酵的糖類。其次是酵母和乳酸類細(xì)菌將糖類經(jīng)有機(jī)酸發(fā)酵轉(zhuǎn)化為乳酸和揮發(fā)性脂肪酸，使貯料pH值降到4.5～5.0，抑制了丁酸菌、腐敗菌等有害微生物的繁殖，并將飼料中的某些成分進(jìn)一步合成營養(yǎng)價(jià)值較高的物質(zhì)。發(fā)酵過程：149秸稈微貯(處)飼料的特點(diǎn)成本低、效益高提高消化率適口性好、采食量高無毒無害、飼料保存期長、制作方便秸稈微貯(處)飼料的特點(diǎn)150秸稈微貯(處)飼料的生產(chǎn)工藝及技術(shù)要點(diǎn)生產(chǎn)工藝菌劑復(fù)活配制菌液切碎作物秸稈裝窖壓緊封窖發(fā)酵出窖飼喂秸稈微貯(處)飼料的生產(chǎn)工藝及技術(shù)要點(diǎn)菌劑復(fù)活配制菌液切碎作151技術(shù)要點(diǎn)復(fù)活菌種將菌劑溶于水或1％蔗糖水，常溫下放置2h左右，使菌種復(fù)活。配制菌液將復(fù)活好的菌劑按比例加入稀釋的食鹽水中（濃度0.77％～l％），攪拌均勻備用。秸稈鍘切或揉碎選干凈無霉變的秸稈鍘切（養(yǎng)牛用長度5～8cm，養(yǎng)羊用3～5cm）或揉碎，可利用高效鍘草機(jī)和揉碎機(jī)。技術(shù)要點(diǎn)152裝窖將鍘切或揉碎的秸稈每20～30cm一層，均勻噴灑菌液。調(diào)節(jié)秸稈含水量至60％～70％，并將料壓實(shí)。在鋪放秸稈時(shí)撒入少量玉米面或麩皮（秸稈重量的0.5％）。封窖秸稈分層壓實(shí)到高出窖口30～40cm時(shí)，充分壓實(shí)，并補(bǔ)噴菌液，表面均勻撒食鹽粉，用量為250g／m2，以確保貯料表層不霉?fàn)€變質(zhì)。最后蓋上塑料薄膜，上面鋪20～30cm厚的稻、麥草，以后覆土15～20cm密封。封窖約20天后（夏季10天左右）即完成發(fā)酵過程。裝窖將鍘切或揉碎的秸稈每20～30cm一層，均勻噴153

秸稈青貯飼料秸稈青貯是把新鮮的農(nóng)作物秸稈切碎后填入和壓緊在青貯窖或青貯塔中密封，經(jīng)微生物的發(fā)酵作用而調(diào)制成多汁、耐貯藏青綠飼料的方法。秸稈青貯飼料154原理秸稈的青貯主要是利用青貯原料上所附著或人工添加的乳酸菌等微生物的生命活動(dòng)，通過厭氧發(fā)酵過程，將青貯原料中的碳水化合物變成有機(jī)酸（主要為乳酸），對(duì)植物酶、酵母菌和其他有害細(xì)菌產(chǎn)生了抑制作用，并且由于酸性環(huán)境和厭氧條件也抑制了霉菌的活動(dòng)，從而使青貯料得以長期保存。原理155發(fā)酵過程：根據(jù)微生物的活動(dòng)特點(diǎn)把青貯過程分為預(yù)備發(fā)酵期、酸化成熟期和完成保存期。

預(yù)備發(fā)酵期通常為青貯后2天左右，由于秸稈組織本身的呼吸作用及附在其上的需氧微生物和兼性厭氧微生物如腐敗菌、酵母菌、霉菌等旺盛繁殖，使封閉環(huán)境中的氧氣很快被耗盡，形成了厭氧環(huán)境，加之微生物代謝活動(dòng)產(chǎn)生了糖和有機(jī)酸，有利于乳酸菌生長繁殖，先是乳酸鏈球菌占優(yōu)勢(shì)，其后是更耐酸的乳酸桿菌占優(yōu)勢(shì)，青貯料中有機(jī)酸積累至濕重的0.65％～1.3％、pH值低于5發(fā)酵過程：156酸化成熟期主要是乳酸桿菌的活動(dòng)，此時(shí)乳酸進(jìn)一步積累，pH值不斷下降，使飼料進(jìn)一步酸化成熟，其余細(xì)菌全部被抑制或死亡完成保存期指乳酸積累至青貯料濕重的1.5％～2.0％，pH值約4.0～4.2，此時(shí)乳酸菌本身受抑制，并逐漸死亡，這樣青貯料在厭氧和酸性的環(huán)境中成熟，并能長期保存下來。酸化成熟期主要是乳酸桿菌的活動(dòng)，此時(shí)乳酸進(jìn)一步157秸稈青貯飼料的生產(chǎn)工藝及技術(shù)要點(diǎn)生產(chǎn)工藝青貯秸稈切碎裝填、壓實(shí)、密封發(fā)酵開窖飼喂青貯添加劑秸稈青貯飼料的生產(chǎn)工藝及技術(shù)要點(diǎn)青貯秸稈切碎裝填、壓實(shí)、密封158技術(shù)要點(diǎn)制作青貯飼料的關(guān)鍵是創(chuàng)造有利于乳酸菌大量繁殖的條件。主要包括以下幾個(gè)方面：秸稈破碎及壓實(shí)程度喂牛、羊的秸稈青貯料一般切成3cm左右，喂豬、禽的秸稈青貯料切得越短越碎越好。秸稈含糖量青貯原料含糖量至少應(yīng)為鮮重的1％～1.5％，含糖量較低的原料可加入蔗糖、葡萄糖（添加量1％～2％）或廢糖蜜（添加量4％～5％）。技術(shù)要點(diǎn)159秸稈含水量青貯秸稈的適宜含水量為65%～75%。溫度秸稈青貯的適宜溫度為19～37℃。使用秸稈青貯添加劑可在青貯時(shí)接種乳酸菌、鏈球菌或球菌，進(jìn)行單菌或混菌接種都可獲得滿意的結(jié)果。也可添加提高青貯飼料營養(yǎng)價(jià)值的物質(zhì)，如尿素、按鹽、硫、鈣、磷類無機(jī)鹽等。秸稈含水量160其它微生物飼料

菌糠飼料菌糠指收獲了食用菌子實(shí)體后的發(fā)酵培養(yǎng)料，食用菌是一種可以食用的大型真菌，具有分解木質(zhì)素的能力，而木質(zhì)素的存在正是秸稈類草料中纖維素和半纖維素消化率低的主要原因。其它微生物飼料

菌糠飼料161

菌糠中粗纖維和木質(zhì)素含量比原料有較大幅度降低，而且由于菌體蛋白的殘留，菌糠中粗蛋白含量有較大程度提高。菌糠原料在纖維素酶的作用下，秸稈表面的角質(zhì)層和硅細(xì)胞層以及纖維的結(jié)晶結(jié)構(gòu)被破壞，呈疏松多孔狀，降低了機(jī)械強(qiáng)度，易于粉碎，并且氣味芬芳，適口性好。因此菌糠可作為飼料飼喂畜禽。菌糠中粗纖維和木質(zhì)素含量比原料有較大幅度降低162

秸稈生物飼料秸稈生物飼料是利用酶制劑和微生物活菌劑等以農(nóng)作物秸稈粉為主要原料進(jìn)行活化發(fā)酵成的飼料，其與秸稈微貯飼料的不同之處在于不但可飼喂牛、羊，而且可以替代部分精飼料飼喂豬、雞等家畜家禽。秸稈生物飼料163

秸稈生物飼料的制備與發(fā)酵過程與秸稈微貯相似，也需要在密封條件下進(jìn)行。該技術(shù)要求將秸稈粉碎至一定細(xì)度（0.6～2mm粒度），與添加劑溶液混勻，裝入池、缸或塑料袋密封，在10℃以上發(fā)酵活化即可。其發(fā)酵時(shí)間，當(dāng)溫度在10～20℃需10～15天，25～35℃需8～10天。利用秸稈生物飼料飼喂豬、雞等，應(yīng)根據(jù)不同生長時(shí)期改變添加比例。秸稈生物飼料的制備與發(fā)酵過程與秸稈微貯相似，164技術(shù)單元微生物肥料微生物農(nóng)藥微生物飼料技術(shù)單元微生物肥料165微生物肥料微生物肥料概述細(xì)菌肥料五四零六抗生菌肥復(fù)合微生物肥料菌根菌肥微生物肥料微生物肥料概述166微生物肥料概述

微生物肥料又稱生物肥料，是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中使用的肥料制品中的一種，與化學(xué)肥料、有機(jī)肥料、綠肥性質(zhì)不同，它是利用微生物的生命活動(dòng)及其代謝產(chǎn)物的作用，改善作物養(yǎng)分供應(yīng)，向農(nóng)作物提供營養(yǎng)元素、生長物質(zhì)，調(diào)控其生長，達(dá)到提高產(chǎn)量和品質(zhì)，減少化肥使用，提高土壤的肥力的目的。微生物肥料概述

微生物肥料又稱生物肥料167狹義微生物肥料的概念是指微生物接種劑，即由具有特殊效能的微生物經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)（根瘤菌用草炭或蛭石等載體組成，此類制品主要用于拌種。廣義的微生物肥料的概念是指一類含有微生物的特定制品，應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，能夠獲得特定的肥料效應(yīng)，在這種效應(yīng)的產(chǎn)生中，制品中的活微生物起關(guān)鍵作用，符合上述定義的制品均應(yīng)歸入微生物肥料。

狹義微生物肥料的概念是指微生物接種劑，即由具有特殊效能的微生168微生物肥料的種類按微生物肥料的功效劃分一類是通過其中所含微生物的生命活動(dòng)，增加植物營養(yǎng)元素的供應(yīng)量，包括土壤和生產(chǎn)環(huán)境中植物營養(yǎng)元素的供應(yīng)總量和植物營養(yǎng)元素的供應(yīng)量，通過植物營養(yǎng)狀況的改善，導(dǎo)致產(chǎn)量增加。eg:根瘤菌肥微生物肥料的種類169另一類雖然也是通過其中所含的特定的微生物生命活動(dòng)而導(dǎo)致作物增產(chǎn)，但是其中微生物生命活動(dòng)的關(guān)鍵作用不僅限于提高植物的營養(yǎng)元素供應(yīng)水平，還包括了它們所產(chǎn)生的植物生長刺激素對(duì)植物的刺激作用，促進(jìn)植物對(duì)營養(yǎng)元素的吸收作用，或者是桔抗某些病原微生物的致病作用，減輕作物病蟲害而導(dǎo)致產(chǎn)量的增加。eg:PGPR另一類雖然也是通過其中所含的特定的微生物生命活動(dòng)而導(dǎo)致作物增170按微生物種類劃分細(xì)菌肥料（如根瘤菌、固氮菌、磷細(xì)菌、鉀細(xì)菌、光合細(xì)菌）放線菌肥料（如抗生菌類）真菌類肥料（如菌根真菌類）

按微生物種類劃分171按作用機(jī)理劃分根瘤菌肥料固氮菌類肥料解磷菌類肥料解鉀菌肥料按作用機(jī)理劃分172按肥料組分劃分單一的微生物肥料復(fù)合(或復(fù)混)微生物肥料按肥料組分劃分173微生物肥料的主要功效提高土壤肥力，減少化肥用量制造和協(xié)助農(nóng)作物吸收營養(yǎng)分泌生長刺激素

增強(qiáng)植物抗病和抗旱能力微生物肥料的主要功效174微生物肥料的特點(diǎn)微生物肥料中有效活微生物起作用微生物肥料要求合適的環(huán)境微生物肥料有效期明確微生物肥料有一定的適用范圍施用與貯藏要求較嚴(yán)格微生物肥料的特點(diǎn)175微生物肥料的應(yīng)用前景適用廣泛，市場容量大

eg:我國日前微生物肥料年產(chǎn)量在10×104～40×104t，同期化肥(約1.2×108t)我國僅大豆種植面積每年約為1000×104hm2，花生約330×104hm2，而實(shí)際應(yīng)用微生物肥料接種的大豆面積僅1％左右微生物肥料的應(yīng)用前景176生產(chǎn)成本低、應(yīng)用效果好生產(chǎn)無公害綠色食品、減少環(huán)境污染的需求微生物肥料本身的發(fā)展為其擴(kuò)大應(yīng)用奠定了基礎(chǔ)生產(chǎn)成本低、應(yīng)用效果好177微生物肥料施用的注意事項(xiàng)微生物肥料產(chǎn)品應(yīng)該有生產(chǎn)許可證號(hào)、產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn)證，符合國家或行業(yè)的標(biāo)準(zhǔn)，包裝和標(biāo)簽應(yīng)完整，使用說明要清楚、明確。微生物肥料施用的注意事項(xiàng)178微生物肥料的產(chǎn)品種類與使用的農(nóng)作物應(yīng)相符

要在其產(chǎn)品有效期內(nèi)使用

貯存溫度要合適。通常要求微生物肥料產(chǎn)品的貯存溫度不超過20℃為宜，4～10℃最好，開袋后應(yīng)在短時(shí)期內(nèi)盡快用完。

微生物肥料的產(chǎn)品種類與使用的農(nóng)作物應(yīng)相符179應(yīng)嚴(yán)格按照使用說明書的要求使用。盡量避免陽光直射，拌種后也不宜存放較長時(shí)間，應(yīng)隨拌隨用。應(yīng)嚴(yán)格按照使用說明書的要求使用。盡量避免陽光直射，拌種后也不180微生物肥料的配制禁忌：微生物肥料的使用一般應(yīng)注意避免與造成其特定微生物死亡或降低作用的物質(zhì)合用、混用。使用效果與土壤肥力、土壤的pH值、作物的種類

有很大關(guān)系。微生物肥料的配制禁忌：微生物肥料的使用一般應(yīng)注意避免與造成其181生產(chǎn)設(shè)備與相關(guān)控制條件微生物肥料生產(chǎn)設(shè)備與條件主要包括菌種生產(chǎn)系統(tǒng)、質(zhì)量控制系統(tǒng)、滅菌系統(tǒng)、生產(chǎn)包裝系統(tǒng)及產(chǎn)品貯藏等五大系統(tǒng)。菌種生產(chǎn)系統(tǒng)菌種生產(chǎn)系統(tǒng)包括菌種的培養(yǎng)、提純、復(fù)壯、擴(kuò)大等部分，需要的基本設(shè)備和條件包括微生物實(shí)驗(yàn)室、菌種培養(yǎng)室、種子罐和發(fā)酵罐等。生產(chǎn)設(shè)備與相關(guān)控制條件182影響菌種質(zhì)量的因素：培養(yǎng)基種齡與接種量培養(yǎng)條件：溫度、pH、通氣、泡沫、染菌控制影響菌種質(zhì)量的因素：183質(zhì)量控制系統(tǒng)包括質(zhì)檢室及其所需設(shè)備，質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)滅菌系統(tǒng)

各類滅菌設(shè)備及化學(xué)滅菌劑等。（附）生產(chǎn)包裝系統(tǒng)主要包括固體或液體發(fā)酵設(shè)備、產(chǎn)品干燥、粉碎與包裝設(shè)備產(chǎn)品貯藏系統(tǒng)質(zhì)量控制系統(tǒng)184附：無菌操作技術(shù)

化學(xué)消毒滅菌劑

微孔濾膜過濾除菌附：無菌操作技術(shù)185類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍醇類70%—75%乙醇脫水、蛋白質(zhì)變性皮膚、器皿醛類0.5%—10%甲醛2%戊二醛（pH=8）蛋白質(zhì)變性房間、物品消毒（不適合食品廠）酚類3%—5%石炭酸2%來蘇兒3%—5%來蘇兒破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)變性地面、器具皮膚地面、器具氧化劑0.1%高錳酸鉀3%過氧化氫0.2%—0.5%過氧乙酸氧化蛋白質(zhì)活性基團(tuán)，酶失活皮膚、水果、蔬菜皮膚、物品表面水果、蔬菜、塑料等常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(一)

類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍186常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(二)類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍重金屬鹽類0.05%—0.1%升汞2%紅汞0.1%—1%硝酸銀0.1%—0.5%硫酸銅蛋白質(zhì)變性、酶失活變性、沉淀蛋白蛋白質(zhì)變性、酶失活非金屬器皿皮膚、粘膜、傷口皮膚、新生兒眼睛防治植物病害表面活性劑0.05%—0.1%新潔爾滅0.05%—0.1%杜滅芬蛋白變性、破壞細(xì)胞膜皮膚、粘膜、器械皮膚、金屬、棉織品、塑料常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(二)類型名稱及使用方法作用187常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(三)類型名稱及使用方法作用原理應(yīng)用范圍鹵素及其化合物0.2—0.5mg/L氯氣10%—20%漂白粉0.5%—1%漂白粉2.5%碘酒破壞細(xì)胞膜、蛋白質(zhì)飲水、游泳池水地面水、空氣等皮膚染料2%—4%龍膽紫與蛋白質(zhì)的羧基結(jié)合皮膚、傷口酸類0.1%苯甲酸0.1%山梨酸食品防腐食品防腐常用的消毒防腐劑及其應(yīng)用(三)類型名稱及使用方法作用188微孔濾膜過濾除菌

微孔濾膜主要特點(diǎn)適用于PH3-10的液體過濾；

孔隙率高：70-80%，孔徑分布均勻；薄膜厚度：100-160μm；濾速快、吸附少、無介質(zhì)脫落；外觀呈白色，平整、光滑、無針孔。微孔濾膜過濾除菌微孔濾膜主要特點(diǎn)189不同材料微孔濾膜性能及應(yīng)用材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用混合纖維素CA-CN①孔隙率高，截留效果好②不耐有機(jī)溶液和強(qiáng)酸、強(qiáng)堿溶液③性價(jià)比高①實(shí)驗(yàn)室、小生產(chǎn)工藝中除菌、除微粒的過濾②水體中大腸肝菌群的測(cè)定；③2微米和5微米的濾膜還用于油料過濾。格柵膜G/CA-CN是在超凈混纖膜上印上網(wǎng)格，以方便對(duì)截留物計(jì)數(shù)，用于微粒、細(xì)菌的檢測(cè)，作為培養(yǎng)基組成份，均勻準(zhǔn)確，是實(shí)驗(yàn)室、質(zhì)檢部門進(jìn)行微生物檢測(cè)的理想產(chǎn)品。①水體中大腸肝菌群的測(cè)定；②醫(yī)用工業(yè)中微生物的檢測(cè)。硝酸纖維素CN對(duì)蛋白等生物大分子吸附力強(qiáng)①醫(yī)學(xué)研究及診斷的細(xì)菌培養(yǎng)和生物工程②DNA-RNA雜交實(shí)驗(yàn)和檢定；③做液閃測(cè)定、放射性示蹤物的超凈制備④電泳、微量元素分析等。不同材料微孔濾膜性能及應(yīng)用材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用混合纖190材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用醋酸纖維素CA對(duì)蛋白吸附比較低；①適用于低分子醇類、油脂類溶液的過濾②科研中特殊成分的分析測(cè)定尼龍6JN6耐堿性和有機(jī)溶液聚醚砜PES通量大、對(duì)蛋白吸附力較低聚偏二氟乙烯PVDF①是疏水性膜，不吸潮，易恒重②能反復(fù)熱壓消毒，性能不變

③質(zhì)地薄、流速快④耐化學(xué)腐蝕、耐氧化⑤酒精處理后變?yōu)橛H水膜

①醇、酸、烷烴、芳香烴、鹵代烴等溶劑除去微粒，提高試劑級(jí)別

②空氣中懸浮微粒的凈化和發(fā)酵工業(yè)中空氣除菌

③油類中不溶物的凈化和固體微粒的重量分析

④非特異性蛋白的分離和提純

⑤水溶液的濃縮，化學(xué)物質(zhì)的分離和回收。材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用醋酸纖維素CA對(duì)蛋白吸附比較低；191材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用聚四氟乙烯PTFE耐酸、堿性強(qiáng)聚丙烯PP深層過濾玻璃纖維膜BF流速快、耐高溫①空氣污染監(jiān)測(cè)；

②生物大分子沉淀物的過濾；

③濾膜前預(yù)過濾。材質(zhì)名稱性

能應(yīng)

用聚四氟乙烯PTFE耐酸、堿性強(qiáng)聚192微孔濾膜使用方法清洗：使用前用蒸餾水清洗濾膜，然后在70～80℃蒸餾水中浸泡4小時(shí)，或在常溫蒸餾水中浸泡12小時(shí)；消毒：將清洗后的濾膜放入濾器中一起進(jìn)行蒸汽熱壓滅菌處理121℃30分鐘，也可采用其它滅菌方法處理。過濾液體時(shí)濾膜必須處于濕潤狀態(tài)，否則將影響過濾速度。若因滅菌處理使濾膜呈干燥狀態(tài)，需用無菌水潤濕后使用。微孔濾膜使用方法193微孔濾膜運(yùn)輸與保存纖維素濾膜為易然品，在運(yùn)輸和貯存時(shí)要遠(yuǎn)離火源。微孔濾膜必須在常溫和相對(duì)濕度60%條件下避光保存，若因干燥導(dǎo)致濾膜失水卷曲，則只須浸泡處理后即可使用。微孔濾膜運(yùn)輸與保存194微生物肥料的生產(chǎn)流程微生物肥料的生產(chǎn)流程195空壓機(jī)壓縮空氣空氣過濾、滅菌鍋爐蒸汽滅菌斜面菌株振蕩培養(yǎng)種子罐發(fā)酵罐發(fā)酵菌液原料入廠干燥培養(yǎng)基原料配制培養(yǎng)基吸附攪拌原料滅菌粉碎包裝入庫質(zhì)量檢測(cè)