-宮頸癌基因E6、E7mRNA檢測講解課件

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各位婦產科專家科蒂亞生物孫寶珍科蒂亞生物HPVE6、E7mRNA檢測

--新一代宮頸癌風險評估方法科蒂亞生物HPVE6、E7mRNA檢測

主題一、宮頸癌簡介→二、宮頸癌-E6、E7mRNA→三、宮頸癌篩查指南及臨床

問題→四、癌基因E6、E7mRNA檢測臨床應用→主題一、宮頸癌簡介哈拉爾德·楚爾·豪森哈拉爾德·楚爾·豪森（德國）：確定：“人乳頭瘤病毒（HumanPapillomavirus，簡稱HPV）感染導致宮頸癌”獲得2008年諾貝爾醫(yī)學和生理學獎。一、宮頸癌簡介哈拉爾德·楚爾·豪森哈拉爾德·楚爾·豪森（德國）：一、宮頸癌HPV16L1:主要衣殼蛋白，是疫苗的主要成分L2:次要衣殼蛋白，是市售抗體的主要識別位點E4：結合并破壞細胞角蛋白網，形成挖空細胞的外觀E2：負性調節(jié)E6和E7，維持凋亡和細胞周期的調控。通常在病毒發(fā)生整合（病毒整合時會破壞E2基因的結構）時失活HPV的主要致癌基因

E6通過抑制p53而阻斷凋亡E7通過抑制pRB使細胞周期失控XHPV的基因片段及功能HPV16L1:主要衣殼蛋白，是疫苗的主要成分L2:高危亞型HPV感染宮頸上皮細胞，將產生兩種癌蛋白：E6和E7蛋白。癌蛋白可與宿主細胞的細胞周期調節(jié)蛋白（抑癌蛋白如P53、RB等）相結合，導致細胞周期控制失常，發(fā)生癌變。

（人民衛(wèi)生出版社、婦產科學、2004年1月第6版）E6、E7癌蛋白→→E6、E7癌基因DNAE6、E7mRNA癌細胞→結合抑癌蛋白P53、RB等細胞周期失控→→

致癌機理高危亞型HPV感染宮頸上皮細胞，將產生兩種癌蛋白：E6和E7

感染發(fā)病情況感染發(fā)病情況2003-2008年，在我國大型宮頸癌篩查中，我國城市、農村婦女高危型HPV感染率分別為15.2%和14.6%，但宮頸癌的發(fā)病率為50/10萬（0.05%）99.7%的宮頸癌和HPV感染有關，但80%HPV感染者2年內會自行消退，最后不到1％的進展為CIN3+。

感染發(fā)病情況感染發(fā)病情況正常宮頸感染HPV宮頸上皮內輕度癌前病變(CINⅠ)宮頸上皮內中度癌前病變(CINⅡ)宮頸上皮內高度癌前病變(CINⅢ)原位癌浸潤癌依靠免疫力80%自行消退06-18個月至少2年后5-10年后一過性感染持續(xù)性感染62%轉為正常16%進一步進展22%維持原狀54%轉為正常30%進一步進展16%維持原狀100%20%3.2%1%0.35%二、HPV——宮頸癌二、HPV——宮頸癌

HPV感染致宮頸癌模式圖正常宮頸感染HPV宮頸上皮內輕度癌前病變(CINⅠ)宮頸上

宮頸癌的真正病因是高危HPV的持續(xù)性/整合感染。

HPV感染是宮頸癌的必要條件，但非充分條件。如果沒有mRNA,即使有高危HPV，仍不會有宮頸癌。正確看待HPV感染的危害性，不可輕視,亦不可過度夸大。

小結

返回宮頸癌的真正病因是高危HPV的持續(xù)性/整合感染。高危HPV感染宮頸上皮細胞HPVL1L2DNAHPVL1L2mRNAHPVL1L2蛋白HPV復制繁殖HPV癌基因E6/E7

DNAE6/E7癌蛋白與抑癌蛋白P53、RB等結合E6/E7

mRNA宮頸細胞CIN或癌變HPV病毒學檢測細胞形態(tài)或組織學檢測癌基因學檢測E6/E7癌蛋白E6/E7

mRNA二、宮頸癌-E6、E7mRNA高危HPV感染宮頸上皮細胞HPVL1L2DNAH二、宮頸癌-E6、E7mRNAHPV病毒學檢測癌基因學檢測二、宮頸癌-E6、E7mRNAHPV病毒學檢測癌基因檢測方法意義特點巴氏染色法直接看到病變的程度五級分類液基細胞學TBS分類；基本的篩查方法HPV病毒檢測是否有病毒感染（潛在風險）1、ASCUS分流2、分型，16、183、持續(xù)感染4、病毒載量E6/E7mRNA檢測E6/E7癌基因表達情況檢測致癌活動產物，預測病變趨勢！陰道鏡檢宮頸表面病變程度直觀、清晰宮頸活檢宮頸上皮剖面病變程度病變分級；確診的金標準

宮頸病變檢測方法檢測方法意義特點巴氏染色法直接看到病變的程度五級分類液基細胞

E6/E7mRNA檢測結果：

不僅觀察是否感染了HPV病毒；

而且觀察病毒致癌基因E6、E7是否在活動及活動程度。

E6/E7mRNA檢測E6/E7mRNA檢測結果：

不僅觀察是否感染了H

2006年歐洲生殖器感染及腫瘤研究組織(theEuropeanResearchOrganizationonGenitalInfectionandNeoplasia)已取得共識，認為今后HPVE6/E7mRNA檢測應作為一個重點研究對象。E6/E7mRNA檢測——共識2006年歐洲生殖器感染及腫瘤研究組織(th數量越來越多；應用范圍越來越廣，涉及到到篩查、診治、隨后隨訪、特殊人群的使用等E6/E7mRNA檢測—文章數量越來越多；E6/E7公共衛(wèi)生研究結果證實可靠性以上三個大樣本的對比實驗采的結果顯示，以HC2和羅氏公司的DNA檢測為對比對象，分析結果顯示效果良好。通過對多個文獻中數據的比對分析，公共衛(wèi)生研究結果顯示E6、E7mRNA與DNA檢測一樣可靠，并和宮頸病變有著良好的相關性。公共衛(wèi)生研究結果證實可靠性以上三個作者年代國別DNA敏感性mRNA敏感性DNA特異性mRNA特異性DNA陽性預測值mRNA陽性預測值DNA陰性預測值mRNA陰性預測值[1]Molden2005挪威90%86%53%85%35%62%95%96%[2]Lie2005挪威95%77%36%78%82%92%67%52%[3]Andersson2006瑞典70%61%39%66%55%59%56%48%[4]Castle2007美國92%90%47%61%30%36%96%96%[5]Szarewski2008英國100%74%28%73%36%52%96%87%[6]Dockter2009法國95%91%47%56%29%32%98%96%[7]Cattani2009意大利86%81%56%73%49%59%89%89%[8]Halfon2010法國95%76%49%63%48%50%95%84%[9]Hovland2010剛果100%81%86%97%28%57%100%99%[10]Ratnam2010加拿大96%78%40%76%36%53%96%76%[11]王華2011中國79%63%61%78%

總計（平均值）

90.7%76.2%49.2%73.3%42.8%55.2%88.8%82.3%陽性判定對照標準為：活檢標本組織病理CIN2+E6/E7mRNA檢測與HPVDNA檢測比較作者年代國別DNA敏感性mRNA敏感性DNA特異性mRNA特如何解決宮頸癌風險評估既敏感又特異？

-是臨床診斷難點、也是發(fā)展方向。

E6、E7

mRNA檢測特異性和陽性預測值高HPVDNA檢測敏感性和陰性預測值高。E6/E7mRNA檢測與HPVDNA檢測比較如何解決宮頸癌風險評估既敏感又特異？E6、E7mRNA檢

E6、E7mRNA與液基細胞學聯合檢測共用一份標本，達到高敏感性的臨床要求。E6、E7mRNA與液基細胞學聯合E6、E7mRNA與液基細胞學聯合檢測共用三、宮頸篩查指南及臨床問題不建議此年齡階段人，單獨用HPV檢測作為篩查方法。不用HPV檢測，作為此年齡階段ASC-US的篩查管理。不用HPV檢測，作為此年齡階段人群的篩查。三、宮頸篩查指南及臨床問題不建議此年齡階段人，單獨用HPV中國宮頸癌篩查指南（2011版）：ASCUS

ASCUS普通人群HPV檢測與分流（AI）間隔6個月連續(xù)2次重復細胞學檢查（AI）單獨使用陰道鏡（AI）

對ASCUS常規(guī)使用LEEP是不可接受的（EIII）

特殊人群青春期女性每年細胞學隨訪（BII），連續(xù)2年，12個月隨訪出現≥HSIL考慮陰道鏡檢查，24月隨訪出現≥ASCUS考慮陰道鏡檢查（AII），隨后常規(guī)篩查

妊娠婦女不主張陰道鏡常規(guī)檢查Q:HPV（+）（-）后的處理？特殊人群：青春期女性和妊娠婦女的評估？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：ASCUS

ASCUSLSILLSIL通常表明是HPV感染，其高危HPVDNA陽性率為76.8%，在LSIL人群中，初次陰道鏡檢查發(fā)現的CIN2及更高級的宮頸病變的發(fā)生率為12%-16%。美國ALTS的數據表明，在高危HPVDNA陽性的LSIL和ASCUS的女性中，CIN2、3的患病風險是相同的。這些證據支持對上述兩個人群采用相同的管理方式，除了特殊人群如絕經后女性。

普通人群推薦使用陰道鏡檢測與多點活檢（AII）對于沒有發(fā)現病變（BII）和不滿意陰道鏡檢查（AII）的女性，采集宮頸管樣本是更好的辦法對于滿意的陰道鏡檢查且轉化區(qū)發(fā)現病變的女性采集宮頸管樣本也是可接受的（AII）對于陰道鏡檢查和活檢均未發(fā)現CIN2、3的LSIL女性，可接受的陰道鏡后管理方案是，12個月時HPVDNA檢測或6個月和12個月時充分細胞學檢查（AII）如果HPVDNA檢測陽性或重復細胞學報告≥ASCUS，推薦使用陰道鏡（AI），發(fā)現CIN，應根據CIN指南處理。對于LSIL患者的治療，缺少組織學證據的診斷學切除或者消融治療都是不可接受的（EII）中國宮頸癌篩查指南（2011版）：LSIL

Q：LSIL的病人要不要做HPV檢測？風險如何評估？LSIL中國宮頸癌篩查指南（2011版）：LSIL

Q：LS中國宮頸癌篩查指南（2011版）：LSIL

青春期女性推薦每年細胞學隨訪（AII）在12個月隨訪時，重復細胞學結果≥LSIL，應考慮陰道鏡檢查。在24個月隨訪時，細胞學出現≥ASCUS結果，應考慮陰道鏡檢查（AII）對LSIL青春期女性，HPVDNA檢測是不可接受的（EII），如果已做了HPVDNA檢查，其結果不影響管理。絕經期女性應較少采用侵入性的管理方法，采用HPV檢測和分流可能更為合理?？山邮芊桨赴ǎ骸胺答佇浴盚PVDNA檢測，6個月到12個月重復細胞學、和陰道鏡（CIII）如果HPVDNA檢測陰性或陰道鏡檢查未發(fā)現CIN，12個月時重復細胞學是推薦的方法。如果HPVDNA檢測陽性或重復細胞學≥ASCUS，推薦使用陰道鏡（AII）如果HPVDNA檢測陰性或重復細胞學結果為“無CIN或惡性病變”，推薦患者返回常規(guī)宮頸細胞學篩查。妊娠期婦女LSIL非青春期婦女，陰道鏡檢查是推薦的管理辦法（BII）患者推遲至產后6周行陰道鏡檢查也是可接受的辦法（BIII）對于細胞學、組織學或陰道鏡檢查未發(fā)現可疑的CIN2、3及癌癥的妊娠期女性，產后隨訪時推薦的方法（BIII）盡量避免宮頸管搔刮（EIII），不應進行額外的陰道鏡和細胞學檢查（DIII）Q：青春期感染HPV女性的罹患宮頸癌風險如何評估？Q：絕經和妊娠期婦女的罹患宮頸癌風險如何評估？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：LSIL

青春期女性Q：中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HSIL

20-29歲女性HSIL發(fā)生率為0.6%，40-49歲發(fā)生率為0.2%，50-59歲發(fā)生率為0.1%HSIL單次陰道鏡檢查發(fā)現≥CIN2病變占53%-56%，LEEP術后的HSIL女性中，≥CIN2的病變約占53%-56%，大約2%的HSIL女性是浸潤宮頸癌HSIL女性具有相當高的CIN2及以上病變風險及HPV感染率，用HPV檢測作為細胞學分流工具是不合適的陰道鏡檢查也會漏檢相當數量的CIN2、3病變，HSIL女性陰道鏡檢查和活檢沒有檢出CIN2、3并不意味著不存在CIN2、3許多人提議采用即診斷即治療的方案管理HSIL女性，LEEP作為初始手段，由于許多青春期和年輕女性CIN2/3可以自發(fā)消退，該方案可能治療過度或治療不足。Q：細胞學HSIL以上，病理學≤CIN2患者如何進行風險評估？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HSIL

20-29歲女性中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HSIL

普通人群即診即治的LEEP或陰道鏡檢查加宮頸管評估都是可接受的管理辦法（BII）組織學未發(fā)現CIN2、3,陰道鏡檢查滿意且宮頸管樣本陰性的病例進行診斷性切除或在1年內以6個月為間隔進行陰道鏡和細胞學檢查是可接受的（BIII）第二條下，重新復習細胞學、組織學和陰道鏡也是可接受的管理方案；如果復習的結果有修訂，根據修訂結果處理（BII）如果選擇細胞學和陰道鏡觀察，對6個月或12個月就診時細胞學結果為HSIL的女性行診斷性切除是推薦的（CIII）觀察一年后，連續(xù)2次細胞學結果為“無CIN或惡性病變”的女性，可以返回常規(guī)篩查診斷為CIN2、3的女性，應根據CIN指南進行處理，下列情況下，消融術是不可接受的（EII）未進行陰道鏡檢查未經組織學證明為CIN2、3宮頸管評估出任何級別的CIN對于HSIL女性采用重復細胞學檢查或者HPVDNA檢測分流都是不可接受的管理方式（BII）Q：這部分病人如何評估她們的風險性？Q：術后如何評估切緣細胞內的癌基因表達風險？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HSIL

普通人群Q：這部中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HPVDNA返回

Q：上述問題怎么解決？絕大多數HPV感染可以自行清除30歲以前的女性是HPV感染的感染高峰期，此后隨著年齡增長，HPV感染逐漸下降，因此，HPV檢測多用于30歲以上女性的常規(guī)篩查。

存在2個爭議：細胞學和HPV檢測均為陰性的女性何時進行再次篩查？如何管理HPV陽性而細胞學陰性的人群？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HPVDNA返回Q

主要問題返回

30歲以下婦女，感染率高，清除率高，HPV（+）率高，該如何評估風險？HPVDNA（+）患者，直接鏡檢、活檢？如何評估？TCT結果：ASCUS-HSIL，如何評估風險？未生育的婦女？直接鏡檢&活檢：過度檢查加大隨訪：可能會漏診病檢為CIN1-3的患者，判斷是否需要做預防性治療？治療過度？VS風險評估特殊病例：未生育女性如何評估下一階段的治療措施？宮頸癌&CINII-III切除術后患者，如何評估手術及術后預估？主要問題四、E6、E7mRNA臨床應用E6E7和液基細胞內E6/E7mRNA量化，與巴氏細胞學相比，可以更好的預測CIN2+病變結論指出E6/E7mRNA定量，可以有效地對ASC-US/LSIL進行分流，包括30歲以下女性。四、E6、E7mRNA臨床應用E6E7和液基細胞內E6E6E7和液基在LSIL人群，mRNA比重復細胞學具有更好的分類效果。E6E7和液基在LSIL人群，

跟蹤隨訪CIN1在組織學鑒定結果為CIN1或陰道鏡檢查為陰性的婦女中，HPVmRNA檢測的預后價值：隨訪研究結論：在管理那些陰道鏡或組織學檢測為陰性，高危型-HPVDNA檢測為陽性婦女時，尤其是為了降低那些陰性婦女的后續(xù)隨訪強度，作為一種預后的生物標記物，E6/E7mRNA的過量表達檢測看起來是一個很好的候選物。跟蹤隨訪CIN1在組織學鑒定結果跟蹤隨訪CIN2本文顯示HPV

RNA檢測與DNA檢測（PCR）相比，敏感度相當，特異性較高。為ASCUS或LSIL的分流提供一種改進方法。用HPVRNA和DNA檢測預測CIN2+:對巴氏篩查為ASCUS或LSIL的那行進行2年跟蹤隨訪跟蹤隨訪CIN2本文顯示HP陰道鏡和活檢結果差異后的復查

E6E7mRNA檢測在活檢陰性女性陰道鏡后隨訪中，具有更高的特異性比細胞學。

結論：活檢陰性女性在進入常規(guī)篩查前需要隨訪，陰道鏡后E6E7mRNA檢測，與陰道鏡后細胞學檢測相比，不僅敏感，更特異?？傊珽6E7mRNA檢測具有較高的陽性預測值，陰道鏡后E6E7mRNA（+），對40歲以上女性可以直接治療。陰道鏡和活檢結果差異后的復查E6E7輔助制定治療方案女性輕度宮頸病變分流：數據表明E6E7mRNA檢測是一種“檢測和治療”方法。結論：40歲以上女性，若E6/E7mRNA陽性結果或有相應的病變直接治療的好處：減少隨訪次數、成本，和不必要的心里負擔等。輔助制定治療方案女性輕度宮頸病變分流

E6/E7mRNA檢測與活檢聯合活檢結果E6/E7mRNA檢測結果解讀臨床處理建議CINⅠ-未發(fā)現癌基因轉錄翻譯立即用病理標本的石蠟切片做E6/E7mRNA檢測。E6/E7mRNA（-），6個月細胞學及E6/E7mRNA檢測；即時E6/E7mRNA（+）、6個月復查細胞學≥ASCUS或E6/E7mRNA(+)建議積極處理,如冷凍、電灼或LEEP。

+癌基因處于活躍狀態(tài)，進展風險較大1、建議用病理標本的石蠟切片做E6/E7mRNA檢測，作為治療的輔助指標。2、進行積極處理（如冷凍、電灼的病灶處理）或嚴格隨訪。CINⅡ、CINIII-癌基因處于不活躍狀態(tài)，1、立即用病理標本的石蠟切片做E6/E7mRNA檢測，作為治療的輔助指標。2、臨床處理請參照指南。3、建議術后6個月進行細胞學及E6/E7mRNA檢測。+癌基因處于活躍狀態(tài)，進展風險較大1、建議用病理標本的石蠟切片做E6/E7mRNA檢測，作為治療的輔助指標。2、臨床處理請參照指南，建議積極處理及嚴格隨訪。3、建議術后6個月進行細胞學及E6/E7mRNA檢測。E6/E7mRNA檢測與活檢聯合活檢結果E6

E6/E7mRNA檢測與細胞學聯合細胞學E6/E7mRNA結果解讀臨床處理建議正常-沒有HPV感染或癌基因沒有進行轉錄翻譯。1年后復查細胞學和E6/E7mRNA。+HPV感染存在，癌基因已經開始轉錄翻譯，未觀察到細胞形態(tài)的改變。可抗病毒治療，6個月后復查細胞學和E6/E7mRNA。ASC-US-未發(fā)現癌基因轉錄翻譯6-12個月復查細胞學和E6/E7mRNA。+HPV感染存在，癌基因已經開始轉錄翻譯，細胞形態(tài)處于轉變期。陰道鏡/活檢。如無病變，進行抗病毒治療，半年后復查E6/E7mRNA。如果E6/E7mRNA（+），查細胞學，細胞學>ASCUS，陰道鏡檢；如果E6/E7mRNA（-），半年后查E6/E7mRNA+細胞學。異常-癌基因此時處于不活躍狀態(tài)。陰道鏡/活檢。如無病變，進行抗病毒治療，半年后復查E6/E7mRNA。如果E6/E7mRNA（+），查細胞學，細胞學>ASCUS陰道鏡；如果E6/E7mRNA（-），半年后查E6/E7mRNA+細胞學。+HPV感染存在，癌基因已經開始轉錄翻譯，細胞形態(tài)已經明顯改變。處于細胞形態(tài)改變狀態(tài)陰道鏡/活檢。無病變：抗病毒治療，嚴密隨訪；CIN2+：相應手術治療。l

液基細胞學異常包括結果為LSIL，ASC-H，HSIL。l

此方案同樣適用于術后隨訪患者。l

活檢后的臨床處理參考《2012年NCCN宮頸癌篩查指南》或《2011中國版宮頸癌篩查指南》。E6/E7mRNA檢測與細胞學聯合細胞學E6/

總結

高危HPV的持續(xù)性/整合感染，且表達E6、E7mRNA是致癌的關鍵，如果沒有E6、E7mRNA,即使有高危HPV，仍不會有宮頸癌。

不僅提示是否感染了HPV病毒；而且提示病毒致癌基因E6、E7是否在活動及活動程度。1、宮頸癌的真正病因：2、E6/E7mRNA檢測：

是繼HPVDNA檢測的、最新一代宮頸癌風險評估方法！與宮頸癌的相關性更強，是判斷罹患宮頸癌發(fā)生的高特異性風險指標?？偨Y高危HPV的持續(xù)性/整合感染，且表達E6、組織病理學

CINⅠ/CINⅡ/CINⅢ→HPVE6/E7mRNA，輔助確定篩查間隔、否受手術及手術類型流行病學

30歲以下高感染、高轉歸女性，不適合做HPVDNA,HPVE6/E7mRNA可選出致癌風險較大者，規(guī)避過度診斷治療病毒學

HPVDNA（+）→HPVE6/E7mRNA，選出有致癌活動的HPV感染者細胞學

ASC-US以上→HPVE6/E7mRNA，降低細胞學的漏診率治療學手術后→HPVE6/E7mRNA，評估治療效果并指導術后隨訪?？偨Y3、E6、E7mRNA檢測臨床應用：組織病理學CINⅠ/CINⅡ/CINⅢ→HPVE6/E衷心感謝您的傾聽，歡迎溝通交流指正！衷心感謝您的傾聽，Amplificationcalculation:amplifierno.(6,20)xlabelprobeno.(4;20)xtreeno.(3;6-8)b-DNA返回Amplificationcalculation:b-D歡迎

各位婦產科專家

科蒂亞生物孫寶珍歡迎

各位婦產科專家科蒂亞生物孫寶珍科蒂亞生物HPVE6、E7mRNA檢測

--新一代宮頸癌風險評估方法科蒂亞生物HPVE6、E7mRNA檢測

主題一、宮頸癌簡介→二、宮頸癌-E6、E7mRNA→三、宮頸癌篩查指南及臨床

問題→四、癌基因E6、E7mRNA檢測臨床應用→主題一、宮頸癌簡介哈拉爾德·楚爾·豪森哈拉爾德·楚爾·豪森（德國）：確定：“人乳頭瘤病毒（HumanPapillomavirus，簡稱HPV）感染導致宮頸癌”獲得2008年諾貝爾醫(yī)學和生理學獎。一、宮頸癌簡介哈拉爾德·楚爾·豪森哈拉爾德·楚爾·豪森（德國）：一、宮頸癌HPV16L1:主要衣殼蛋白，是疫苗的主要成分L2:次要衣殼蛋白，是市售抗體的主要識別位點E4：結合并破壞細胞角蛋白網，形成挖空細胞的外觀E2：負性調節(jié)E6和E7，維持凋亡和細胞周期的調控。通常在病毒發(fā)生整合（病毒整合時會破壞E2基因的結構）時失活HPV的主要致癌基因

E6通過抑制p53而阻斷凋亡E7通過抑制pRB使細胞周期失控XHPV的基因片段及功能HPV16L1:主要衣殼蛋白，是疫苗的主要成分L2:高危亞型HPV感染宮頸上皮細胞，將產生兩種癌蛋白：E6和E7蛋白。癌蛋白可與宿主細胞的細胞周期調節(jié)蛋白（抑癌蛋白如P53、RB等）相結合，導致細胞周期控制失常，發(fā)生癌變。

（人民衛(wèi)生出版社、婦產科學、2004年1月第6版）E6、E7癌蛋白→→E6、E7癌基因DNAE6、E7mRNA癌細胞→結合抑癌蛋白P53、RB等細胞周期失控→→

致癌機理高危亞型HPV感染宮頸上皮細胞，將產生兩種癌蛋白：E6和E7

感染發(fā)病情況感染發(fā)病情況2003-2008年，在我國大型宮頸癌篩查中，我國城市、農村婦女高危型HPV感染率分別為15.2%和14.6%，但宮頸癌的發(fā)病率為50/10萬（0.05%）99.7%的宮頸癌和HPV感染有關，但80%HPV感染者2年內會自行消退，最后不到1％的進展為CIN3+。

感染發(fā)病情況感染發(fā)病情況正常宮頸感染HPV宮頸上皮內輕度癌前病變(CINⅠ)宮頸上皮內中度癌前病變(CINⅡ)宮頸上皮內高度癌前病變(CINⅢ)原位癌浸潤癌依靠免疫力80%自行消退06-18個月至少2年后5-10年后一過性感染持續(xù)性感染62%轉為正常16%進一步進展22%維持原狀54%轉為正常30%進一步進展16%維持原狀100%20%3.2%1%0.35%二、HPV——宮頸癌二、HPV——宮頸癌

HPV感染致宮頸癌模式圖正常宮頸感染HPV宮頸上皮內輕度癌前病變(CINⅠ)宮頸上

宮頸癌的真正病因是高危HPV的持續(xù)性/整合感染。

HPV感染是宮頸癌的必要條件，但非充分條件。如果沒有mRNA,即使有高危HPV，仍不會有宮頸癌。正確看待HPV感染的危害性，不可輕視,亦不可過度夸大。

小結

返回宮頸癌的真正病因是高危HPV的持續(xù)性/整合感染。高危HPV感染宮頸上皮細胞HPVL1L2DNAHPVL1L2mRNAHPVL1L2蛋白HPV復制繁殖HPV癌基因E6/E7

DNAE6/E7癌蛋白與抑癌蛋白P53、RB等結合E6/E7

mRNA宮頸細胞CIN或癌變HPV病毒學檢測細胞形態(tài)或組織學檢測癌基因學檢測E6/E7癌蛋白E6/E7

mRNA二、宮頸癌-E6、E7mRNA高危HPV感染宮頸上皮細胞HPVL1L2DNAH二、宮頸癌-E6、E7mRNAHPV病毒學檢測癌基因學檢測二、宮頸癌-E6、E7mRNAHPV病毒學檢測癌基因檢測方法意義特點巴氏染色法直接看到病變的程度五級分類液基細胞學TBS分類；基本的篩查方法HPV病毒檢測是否有病毒感染（潛在風險）1、ASCUS分流2、分型，16、183、持續(xù)感染4、病毒載量E6/E7mRNA檢測E6/E7癌基因表達情況檢測致癌活動產物，預測病變趨勢！陰道鏡檢宮頸表面病變程度直觀、清晰宮頸活檢宮頸上皮剖面病變程度病變分級；確診的金標準

宮頸病變檢測方法檢測方法意義特點巴氏染色法直接看到病變的程度五級分類液基細胞

E6/E7mRNA檢測結果：

不僅觀察是否感染了HPV病毒；

而且觀察病毒致癌基因E6、E7是否在活動及活動程度。

E6/E7mRNA檢測E6/E7mRNA檢測結果：

不僅觀察是否感染了H

2006年歐洲生殖器感染及腫瘤研究組織(theEuropeanResearchOrganizationonGenitalInfectionandNeoplasia)已取得共識，認為今后HPVE6/E7mRNA檢測應作為一個重點研究對象。E6/E7mRNA檢測——共識2006年歐洲生殖器感染及腫瘤研究組織(th數量越來越多；應用范圍越來越廣，涉及到到篩查、診治、隨后隨訪、特殊人群的使用等E6/E7mRNA檢測—文章數量越來越多；E6/E7公共衛(wèi)生研究結果證實可靠性以上三個大樣本的對比實驗采的結果顯示，以HC2和羅氏公司的DNA檢測為對比對象，分析結果顯示效果良好。通過對多個文獻中數據的比對分析，公共衛(wèi)生研究結果顯示E6、E7mRNA與DNA檢測一樣可靠，并和宮頸病變有著良好的相關性。公共衛(wèi)生研究結果證實可靠性以上三個作者年代國別DNA敏感性mRNA敏感性DNA特異性mRNA特異性DNA陽性預測值mRNA陽性預測值DNA陰性預測值mRNA陰性預測值[1]Molden2005挪威90%86%53%85%35%62%95%96%[2]Lie2005挪威95%77%36%78%82%92%67%52%[3]Andersson2006瑞典70%61%39%66%55%59%56%48%[4]Castle2007美國92%90%47%61%30%36%96%96%[5]Szarewski2008英國100%74%28%73%36%52%96%87%[6]Dockter2009法國95%91%47%56%29%32%98%96%[7]Cattani2009意大利86%81%56%73%49%59%89%89%[8]Halfon2010法國95%76%49%63%48%50%95%84%[9]Hovland2010剛果100%81%86%97%28%57%100%99%[10]Ratnam2010加拿大96%78%40%76%36%53%96%76%[11]王華2011中國79%63%61%78%

總計（平均值）

90.7%76.2%49.2%73.3%42.8%55.2%88.8%82.3%陽性判定對照標準為：活檢標本組織病理CIN2+E6/E7mRNA檢測與HPVDNA檢測比較作者年代國別DNA敏感性mRNA敏感性DNA特異性mRNA特如何解決宮頸癌風險評估既敏感又特異？

-是臨床診斷難點、也是發(fā)展方向。

E6、E7

mRNA檢測特異性和陽性預測值高HPVDNA檢測敏感性和陰性預測值高。E6/E7mRNA檢測與HPVDNA檢測比較如何解決宮頸癌風險評估既敏感又特異？E6、E7mRNA檢

E6、E7mRNA與液基細胞學聯合檢測共用一份標本，達到高敏感性的臨床要求。E6、E7mRNA與液基細胞學聯合E6、E7mRNA與液基細胞學聯合檢測共用三、宮頸篩查指南及臨床問題不建議此年齡階段人，單獨用HPV檢測作為篩查方法。不用HPV檢測，作為此年齡階段ASC-US的篩查管理。不用HPV檢測，作為此年齡階段人群的篩查。三、宮頸篩查指南及臨床問題不建議此年齡階段人，單獨用HPV中國宮頸癌篩查指南（2011版）：ASCUS

ASCUS普通人群HPV檢測與分流（AI）間隔6個月連續(xù)2次重復細胞學檢查（AI）單獨使用陰道鏡（AI）

對ASCUS常規(guī)使用LEEP是不可接受的（EIII）

特殊人群青春期女性每年細胞學隨訪（BII），連續(xù)2年，12個月隨訪出現≥HSIL考慮陰道鏡檢查，24月隨訪出現≥ASCUS考慮陰道鏡檢查（AII），隨后常規(guī)篩查

妊娠婦女不主張陰道鏡常規(guī)檢查Q:HPV（+）（-）后的處理？特殊人群：青春期女性和妊娠婦女的評估？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：ASCUS

ASCUSLSILLSIL通常表明是HPV感染，其高危HPVDNA陽性率為76.8%，在LSIL人群中，初次陰道鏡檢查發(fā)現的CIN2及更高級的宮頸病變的發(fā)生率為12%-16%。美國ALTS的數據表明，在高危HPVDNA陽性的LSIL和ASCUS的女性中，CIN2、3的患病風險是相同的。這些證據支持對上述兩個人群采用相同的管理方式，除了特殊人群如絕經后女性。

普通人群推薦使用陰道鏡檢測與多點活檢（AII）對于沒有發(fā)現病變（BII）和不滿意陰道鏡檢查（AII）的女性，采集宮頸管樣本是更好的辦法對于滿意的陰道鏡檢查且轉化區(qū)發(fā)現病變的女性采集宮頸管樣本也是可接受的（AII）對于陰道鏡檢查和活檢均未發(fā)現CIN2、3的LSIL女性，可接受的陰道鏡后管理方案是，12個月時HPVDNA檢測或6個月和12個月時充分細胞學檢查（AII）如果HPVDNA檢測陽性或重復細胞學報告≥ASCUS，推薦使用陰道鏡（AI），發(fā)現CIN，應根據CIN指南處理。對于LSIL患者的治療，缺少組織學證據的診斷學切除或者消融治療都是不可接受的（EII）中國宮頸癌篩查指南（2011版）：LSIL

Q：LSIL的病人要不要做HPV檢測？風險如何評估？LSIL中國宮頸癌篩查指南（2011版）：LSIL

Q：LS中國宮頸癌篩查指南（2011版）：LSIL

青春期女性推薦每年細胞學隨訪（AII）在12個月隨訪時，重復細胞學結果≥LSIL，應考慮陰道鏡檢查。在24個月隨訪時，細胞學出現≥ASCUS結果，應考慮陰道鏡檢查（AII）對LSIL青春期女性，HPVDNA檢測是不可接受的（EII），如果已做了HPVDNA檢查，其結果不影響管理。絕經期女性應較少采用侵入性的管理方法，采用HPV檢測和分流可能更為合理?？山邮芊桨赴ǎ骸胺答佇浴盚PVDNA檢測，6個月到12個月重復細胞學、和陰道鏡（CIII）如果HPVDNA檢測陰性或陰道鏡檢查未發(fā)現CIN，12個月時重復細胞學是推薦的方法。如果HPVDNA檢測陽性或重復細胞學≥ASCUS，推薦使用陰道鏡（AII）如果HPVDNA檢測陰性或重復細胞學結果為“無CIN或惡性病變”，推薦患者返回常規(guī)宮頸細胞學篩查。妊娠期婦女LSIL非青春期婦女，陰道鏡檢查是推薦的管理辦法（BII）患者推遲至產后6周行陰道鏡檢查也是可接受的辦法（BIII）對于細胞學、組織學或陰道鏡檢查未發(fā)現可疑的CIN2、3及癌癥的妊娠期女性，產后隨訪時推薦的方法（BIII）盡量避免宮頸管搔刮（EIII），不應進行額外的陰道鏡和細胞學檢查（DIII）Q：青春期感染HPV女性的罹患宮頸癌風險如何評估？Q：絕經和妊娠期婦女的罹患宮頸癌風險如何評估？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：LSIL

青春期女性Q：中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HSIL

20-29歲女性HSIL發(fā)生率為0.6%，40-49歲發(fā)生率為0.2%，50-59歲發(fā)生率為0.1%HSIL單次陰道鏡檢查發(fā)現≥CIN2病變占53%-56%，LEEP術后的HSIL女性中，≥CIN2的病變約占53%-56%，大約2%的HSIL女性是浸潤宮頸癌HSIL女性具有相當高的CIN2及以上病變風險及HPV感染率，用HPV檢測作為細胞學分流工具是不合適的陰道鏡檢查也會漏檢相當數量的CIN2、3病變，HSIL女性陰道鏡檢查和活檢沒有檢出CIN2、3并不意味著不存在CIN2、3許多人提議采用即診斷即治療的方案管理HSIL女性，LEEP作為初始手段，由于許多青春期和年輕女性CIN2/3可以自發(fā)消退，該方案可能治療過度或治療不足。Q：細胞學HSIL以上，病理學≤CIN2患者如何進行風險評估？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HSIL

20-29歲女性中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HSIL

普通人群即診即治的LEEP或陰道鏡檢查加宮頸管評估都是可接受的管理辦法（BII）組織學未發(fā)現CIN2、3,陰道鏡檢查滿意且宮頸管樣本陰性的病例進行診斷性切除或在1年內以6個月為間隔進行陰道鏡和細胞學檢查是可接受的（BIII）第二條下，重新復習細胞學、組織學和陰道鏡也是可接受的管理方案；如果復習的結果有修訂，根據修訂結果處理（BII）如果選擇細胞學和陰道鏡觀察，對6個月或12個月就診時細胞學結果為HSIL的女性行診斷性切除是推薦的（CIII）觀察一年后，連續(xù)2次細胞學結果為“無CIN或惡性病變”的女性，可以返回常規(guī)篩查診斷為CIN2、3的女性，應根據CIN指南進行處理，下列情況下，消融術是不可接受的（EII）未進行陰道鏡檢查未經組織學證明為CIN2、3宮頸管評估出任何級別的CIN對于HSIL女性采用重復細胞學檢查或者HPVDNA檢測分流都是不可接受的管理方式（BII）Q：這部分病人如何評估她們的風險性？Q：術后如何評估切緣細胞內的癌基因表達風險？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HSIL

普通人群Q：這部中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HPVDNA返回

Q：上述問題怎么解決？絕大多數HPV感染可以自行清除30歲以前的女性是HPV感染的感染高峰期，此后隨著年齡增長，HPV感染逐漸下降，因此，HPV檢測多用于30歲以上女性的常規(guī)篩查。

存在2個爭議：細胞學和HPV檢測均為陰性的女性何時進行再次篩查？如何管理HPV陽性而細胞學陰性的人群？中國宮頸癌篩查指南（2011版）：HPVDNA返回Q

主要問題返回

30歲以下婦女，感染率高，清除率高，HPV（+）率高，該如何評估風險？HPVDNA（+）患者，直接鏡檢、活檢？如何評估？TCT結果：ASCUS-HSIL，如何評估風險？未生育的婦女？直接鏡檢&活檢：過度檢查加大隨訪：可能會漏診病檢為CIN1-3的患者，判斷是否需要做預防性治療？治療過度？VS風險評估特殊病例：未生育女性如何評估下一階段的治療措施？宮頸癌&CINII-III切除術后患者，如何評估手術及術后預估？主要問題四、E6、E7mRNA臨床應用E6E7和液基細胞內E6/E7mRNA量化，與巴氏細胞學相比，可以更好的預測CIN2+病變結論指出E6/E7mRNA定量，可以有效地對ASC-US/LSIL進行分流，包括30歲以下女性。四、E6、E7mRNA臨床應用E6E7和液基細胞內E6E6E7和液基在LSIL人群，mRNA比重復細胞學具有更好的分類效果。E6E7和液基在LSIL人群，

跟蹤隨訪CIN1在組織學鑒定結果為CIN1或陰道鏡檢查為陰性的婦女中，HPVmRNA檢測的預后價值：隨訪研究結論：在管理那些陰道鏡或組織學檢測為陰性，高危型-HPVDNA檢測為陽性婦女時，尤其是為了降低那些陰性婦女的后續(xù)隨訪強度，作為一種預后的生物標記物，E6/E7mRNA的過量表達檢測看起來是一個很好的候選物。跟蹤隨訪CIN1在組織學鑒定結果跟蹤隨訪CIN2本文顯示HPV

RNA檢測與DNA檢測（PCR）相比，敏感度相當，特異性較高。為ASCUS或LSIL的分流提供一種改進方法。用HPVRNA和DNA檢測預測CIN2+:對巴氏篩查為ASCUS或LSIL的那行進行2年跟蹤隨訪跟蹤隨訪CIN2本文顯示HP陰道鏡和活檢結果差異后的復查

E6E7mRNA檢測在活檢陰性女性陰道鏡后隨訪中，具有更高的特異性比細胞學。

結論：活檢陰性女性在進入常規(guī)篩查前需要隨訪，陰道鏡后E6E7mRNA檢測，與陰道鏡后細胞學檢測相比，不僅敏感，更特異。總之，E6E7mRNA檢測具有較高的陽性預測值，陰道鏡后E6E7mRNA（+），對40歲以上女性可以直接治療。陰道鏡和活檢結果差異后的復查E6E7輔助制定治療方案女性輕度宮頸病變分流：數據表明E6E7mRNA檢測是一種“檢測和治療”方法。結論：40歲以上女性，若E6/E7mRNA陽性結果或有相應的病變直接治療的好處：減少隨訪次數、成本，和不必要的心里負擔等。輔助制定治療方案女性輕度宮頸病變分流

E6/E7mRNA檢測與活檢聯合活檢結果E6/E7mRNA檢測結果解讀臨床處理建議CINⅠ-未