紫外可見分光光度計的介紹及使用

紫外可見分光光度計紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第1頁!主要內(nèi)容1儀器構(gòu)成及原理2分光光度計的使用

波長掃描

定量測定3注意事項紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第2頁!紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第3頁!物質(zhì)對光的選擇性吸收－溶液對光的作用

溶液對光的作用示意圖紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第4頁!溶液對光吸收示意圖溶液對光吸收過程紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第5頁!組成：光源、單色器，狹縫、樣品池、檢測器1．光源：①能提供連續(xù)的輻射；②光強(qiáng)度足夠大；③在整個光譜區(qū)內(nèi)光譜強(qiáng)度不隨波長有明顯變化；④光譜范圍寬；⑤使用壽命長，價格低。

鎢燈——可見光區(qū)320～2500nm氫燈或氘燈——紫外光區(qū)195－375nm

組成紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第6頁!3.吸收池玻璃——由于吸收紫外UV光，僅適用于可見光區(qū)；石英——適用于紫外和可見光區(qū)4．檢測器：將光信號轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘柕难b置光電管光電倍增管二極管陣列檢測器5．記錄裝置：訊號處理和顯示系統(tǒng)紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第7頁!紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第8頁!啟動UVSolution軟件

打開儀器主機(jī)電源。用鼠標(biāo)點擊Windows開始菜單中的[HitachiApplications]選項中的[UVSolutions2.0]選項。或者直接在桌面上雙擊UVSolution圖標(biāo)。紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第9頁!儀器在初始化過程中進(jìn)行如下自檢工作：ROM檢測RAM檢測波長步進(jìn)電機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)檢測氘燈點亮檢測鎢燈點亮檢測儀器波長校正紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第10頁!儀器主機(jī)初始化完畢，進(jìn)入工作狀態(tài)。紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第11頁!General:總體設(shè)置頁面Measurement測量:

Wavelengthscan波長掃描Timescan時間掃描

Photometry定波長測量Operator操作者:輸入操作者的姓名Instrument儀器:儀器型號由軟件自動從儀器主機(jī)獲得。UseSampleTable使用樣品表:選擇是否使用樣品表。Comments備注:填寫一些備注信息。[Load]按鈕:用于裝載原來保存的方法文件。[Save]按鈕:保存當(dāng)前的設(shè)置參數(shù)。[SaveAs]按鈕:將當(dāng)前設(shè)置參數(shù)另存為一個方法文件。紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第12頁!Datamode讀數(shù)顯示方式，選擇Abs吸光度，波長掃描的起止范圍一般為190-800，狹縫值一般為2Light一般選擇“Auto”紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第13頁!Processing數(shù)據(jù)處理頁面

紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第14頁!樣品名設(shè)置，備注信息及文件名輸入紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第15頁!測量有兩種方法可以開始測量：使用菜單方式選擇[Spectrophotometer]菜單下Start]選項開始測量使用按鈕方式：按按鈕開始測量如果要終止掃描按按鈕。紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第16頁!測量參數(shù)設(shè)置在[Edit]菜單中選擇[Method…]選項。出現(xiàn)下列設(shè)置窗口.紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第17頁!在measure中選擇波長wavelength，在Calibration中選擇“1storder”，“2storder”，“3storder”，也可以不校準(zhǔn)。在concertration中鍵入標(biāo)準(zhǔn)濃度單位。3.Instrument紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第18頁!5吸光度自動校零在開始測試前，需要進(jìn)行吸光度校零。在樣品室參比和樣品光路中分別放入空白樣品。按按鈕進(jìn)行吸光度校零。6在wavelength中設(shè)定掃描的最大吸收波長，7放入標(biāo)樣，選中個標(biāo)樣，點measure依次測定完成后自動給出標(biāo)準(zhǔn)曲線。8選擇SAMPLE進(jìn)行樣品測定，全部測定完后點擊END，此時自動生成一個文件，打開此文件，另存為所需的文件名。9關(guān)機(jī)時，先退出UVsolution，再關(guān)電腦，最后關(guān)光度計上的power。紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第19頁!3.測量條件的選擇：選擇適宜波長的入射光:由于有色物質(zhì)對光有選擇性吸收,為了使測定結(jié)果有較高的靈敏度,必須選擇溶液最大吸收波長的入射光?？刂莆舛華的準(zhǔn)確的讀數(shù)范圍:由朗伯-比耳定律可知,吸光度只有控制在0.2~0.7讀數(shù)范圍內(nèi)時,測量的準(zhǔn)確度較高.選擇參比溶液：參比溶液是用來調(diào)節(jié)儀器工作零點的。若樣品溶液，試劑，顯色劑無色可用蒸餾水作參比溶液；反之應(yīng)采用不加顯色劑的樣品液作參比溶液。4.用完后先關(guān)程序，再關(guān)儀器開關(guān)，關(guān)電源，關(guān)閉計算機(jī)。

5.正確登記，將儀器及實驗臺擦干凈。紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第20頁!測試題分光光度計由哪幾部分組成？設(shè)計其光路圖。紫外可見分光光度計對光源的要求是什么？一般采用哪幾種光源，各光源的波長范圍是什么？比色皿一般由什么材料制成？有哪幾種規(guī)格？做實驗時，你是如何選擇比色杯的規(guī)格及材料的？紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第21頁!一儀器原理紫外可見吸收光譜主要產(chǎn)生于分子價電子在能級間的躍遷。利用一定頻率的紫外--可見光照射被分析的物質(zhì)，引起分子中價電子的躍遷，它將有選擇地被吸收。吸收光譜可以反映出物質(zhì)的特征。

紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第22頁!I0入射光輻射強(qiáng)度I透射光輻射強(qiáng)度T透射比a吸光系數(shù)ε摩爾吸光系數(shù)光吸收遵循朗伯-比爾定律：紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第23頁!偏離朗伯比爾定律的原因-化學(xué)因素

朗伯-比爾定律的假設(shè)條件一：

入射光為單色光。朗伯-比爾定律的假設(shè)條件之二：

吸收粒子是獨立的，彼此之間無相互作用。比爾定律適用于稀溶液。吸光組分的化學(xué)變化：

吸光組分的締合、離解，互變異構(gòu)，絡(luò)合物的逐級形成，以及與溶劑的相互作用等，都將導(dǎo)致偏離比耳定律。紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第24頁!2．單色器：包括狹縫、準(zhǔn)直鏡、色散元件單色器是分光光度計的心臟部分，它的作用是把來自光源的混合光分解為單色光并能隨意改變波長。它的主要組成部件和作用是：①入射狹縫——限制雜散光進(jìn)入。②色散元件——即棱鏡或光柵，是核心部件，可將混合光分解為單色光。

③準(zhǔn)直鏡——把來自入射狹縫的光束轉(zhuǎn)化為平等光，并把來自色散元件的平等光聚焦于出射狹縫上。④出射狹縫——只讓特定波長的光射出單色器。

紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第25頁!紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第26頁!開始程序啟動按方法設(shè)定按鈕掃描范圍讀數(shù)方式掃描速度按樣品名輸入按鈕或?qū)⒖瞻讟悠贩謩e放入?yún)⒈瘸睾蜆悠烦剡M(jìn)行用戶基線校正按按鈕將樣品放入樣品池開始測量按按鈕開始測量打印數(shù)據(jù)按按鈕打開數(shù)據(jù)處理界面數(shù)據(jù)檢索峰值檢出圖譜平滑、求導(dǎo)二波長掃描紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第27頁!2運(yùn)行UVSolution軟件。軟件將自動配置計算機(jī)的串行口（RS232Port）見圖紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第28頁!3儀器主機(jī)開始初始化。見圖紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第29頁!測量參數(shù)設(shè)置1在[Edit]菜單中選擇[Method…]選項，或按按鈕。出現(xiàn)下列窗口。

紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第30頁!Instrument儀器參數(shù)設(shè)置頁面紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第31頁!Monitor顯示頁面

紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第32頁!Report報告結(jié)果頁面

紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第33頁!基線校正用戶基線校正方法：可將scanspeed設(shè)小一些；進(jìn)行樣品掃描時，可設(shè)大一些。將空白樣品分別放入樣品室的參比光路和樣品光路。按按鈕系統(tǒng)基線校正方法。使用空氣作為參比和樣品。按按鈕出對話框見圖，選擇System后按[OK]按鈕，進(jìn)行系統(tǒng)基線校正。紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第34頁!二光度掃描開始程序啟動按方法設(shè)定按鈕按樣品名輸入按鈕或?qū)⒖瞻讟悠贩謩e放入?yún)⒈瘸睾蜆悠烦貙悠贩湃霕悠烦亻_始測量按按鈕開始測量打印數(shù)據(jù)按按鈕打開數(shù)據(jù)處理界面進(jìn)行用戶基線校正按按鈕定量測量設(shè)置波長輸入標(biāo)樣紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第35頁!具體操作程序Method:general:Measurement測量方式選擇Photometry（光度計測量）

Quantitation定量參數(shù)設(shè)置頁面：紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第36頁!4

standards標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)設(shè)置

鍵入標(biāo)系的樣品濃度及名稱紫外可見分光光度計的介紹及使用共40頁，您現(xiàn)在瀏覽的是第37頁!三注意事項1.開機(jī)預(yù)熱15分鐘左右。2.測定時應(yīng)注意：參照池和吸收池應(yīng)是一對