視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞研究進(jìn)展

前言視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞（retinapigmentepitheliumRPE)

★起源于神經(jīng)外胚層

★位于視網(wǎng)膜感覺細(xì)胞層和Bruch膜之間

★由一層排列整齊的六面柱狀單層細(xì)胞組成

★因其在視覺功能及視網(wǎng)膜疾病中的重要作用而倍受重視第一頁，共二十七頁。RPE的組織結(jié)構(gòu)★形態(tài)、大小因時(shí)因地而異，★后極板部、黃斑區(qū)的RPE細(xì)胞細(xì)而高，色素含量多，單核★周邊部、鋸齒緣部大而不規(guī)則，核多，排列紊亂，色素少★胞漿內(nèi)有色素，即脂褐質(zhì)，多集中于細(xì)胞內(nèi)側(cè)，為棕色，易為光所漂白第二頁，共二十七頁。第三頁，共二十七頁。第四頁，共二十七頁。RPE亞細(xì)微結(jié)構(gòu)★頂部微絨毛與感光細(xì)胞外節(jié)★底部緊鄰Bruch’s膜，其基底膜構(gòu)成Bruch’s膜內(nèi)層，寬廣而多皺折★細(xì)胞體兩側(cè)壁平直，由封閉小帶與相鄰細(xì)胞緊密連接，胞漿內(nèi)除細(xì)胞核、脂褐質(zhì)外尚有溶酶體、吞噬體第五頁，共二十七頁。RPE的重要功能

★血-眼屏障的主要組成之一

相鄰細(xì)胞之間有緊密聯(lián)接復(fù)合體將細(xì)胞鎖定，與Bruch膜緊密相貼★兼具

吞噬細(xì)胞上皮細(xì)胞三種細(xì)胞之功能色素細(xì)胞第六頁，共二十七頁。RPE的屏障功能

組成RPE-Bruch’s-脈絡(luò)膜毛細(xì)血管復(fù)合體（血-視網(wǎng)膜外屏障）阻斷CNV形成的生化屏障：產(chǎn)生抑制尿激酶活性的物質(zhì)，尿激酶在Bruch’s膜侵蝕過程中有重大作用分泌能抑制新生血管的物質(zhì)，可使新生血管退縮，抑制內(nèi)皮細(xì)胞的生長第七頁，共二十七頁。

RPE的主要功能⒈吞噬功能吞噬脫落的視網(wǎng)膜光感受器外節(jié)盤膜每個(gè)RPE細(xì)胞吞噬約3000個(gè)/天吞噬作用是視色素降解和再生周期中的一環(huán)第八頁，共二十七頁。⒉保護(hù)功能吸收光線，減少光散射保護(hù)眼內(nèi)組織免受氧化損傷第九頁，共二十七頁。⒊轉(zhuǎn)運(yùn)功能RPE內(nèi)的碳酸酐酶離子載體和離子通道有助于維持神經(jīng)網(wǎng)膜層的酸堿平衡和電解質(zhì)平衡泵細(xì)作用RPE的抽吸功能促進(jìn)網(wǎng)膜下積液的吸收第十頁，共二十七頁。⒋參與維生素A的代謝過程儲集、轉(zhuǎn)運(yùn)視黃醇（即維生素A）以利視紫紅質(zhì)合成，提供視網(wǎng)膜感光細(xì)胞必要的物質(zhì)基礎(chǔ)視黃醇RPE感光細(xì)胞外節(jié)視黃醛還原酶視黃醛

氧化＋視蛋白視紫質(zhì)（感光細(xì)胞的色素）第十一頁，共二十七頁。⒌制造多種神經(jīng)營養(yǎng)因子

堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF）肝細(xì)胞生長因子（HGF）血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（VEGF）轉(zhuǎn)移生長因子（TGF-?）色素上皮生長因子（PEDF）腦源性生長因子（BDNF）等保護(hù)神經(jīng)細(xì)胞、促進(jìn)眼球生長發(fā)育、維持眼內(nèi)免疫狀態(tài)第十二頁，共二十七頁。RPE細(xì)胞的凋亡凋亡受基因調(diào)控的程序性細(xì)胞死亡是維持多細(xì)胞生物體內(nèi)平衡的關(guān)鍵機(jī)制凋亡不引起炎癥反應(yīng)的單個(gè)細(xì)胞的消亡過程細(xì)胞膜始終完整，防止細(xì)胞內(nèi)毒性成分進(jìn)入組織引起炎癥反應(yīng)凋亡細(xì)胞最終被臨近細(xì)胞吞噬第十三頁，共二十七頁。RPE細(xì)胞凋亡的機(jī)制⒈光損傷誘導(dǎo)的RPE細(xì)胞凋亡

可見光引起視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮層和色素上皮層的損傷RPE對蘭光波段（480nm)的光刺激特別敏感RPE細(xì)胞形態(tài)損傷蘭色光的作用血-視網(wǎng)膜屏障功能障礙亮氨酸、氯化物等物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)障礙第十四頁，共二十七頁。光損傷誘導(dǎo)的RPE細(xì)胞凋亡

★“蘭光損害”可能通過RPE細(xì)胞中的脂褐質(zhì)執(zhí)行

☆脂褐質(zhì)多種熒光色團(tuán)的混合體其中主要疏水性基團(tuán)是A2-E—四價(jià)吡啶鹽（N-retinylidene-N-retinylethanol-amine)A2-E對人RPE細(xì)胞有光毒性作用A2-E是脂褐質(zhì)中的感光促發(fā)劑第十五頁，共二十七頁。

★蘭色區(qū)（480nm)波段的光可導(dǎo)致含有A2-E的RPE死亡

★RPE細(xì)胞中A2-E的含量是決定RPE細(xì)胞死亡的方式★A2-E引起RPE細(xì)胞功能障礙的機(jī)制：

損傷溶酶體的功能光毒性反應(yīng)第十六頁，共二十七頁。RPE細(xì)胞凋亡的機(jī)制⒉氧自由基的產(chǎn)生導(dǎo)致RPE細(xì)胞凋亡氧自由基（ROS）是一類不穩(wěn)定的小分子氧片段，可由呼吸細(xì)胞持續(xù)產(chǎn)生ROS可通過引起DNA裂解、脂質(zhì)過氧化和蛋白變性導(dǎo)致細(xì)胞死亡ROS存在自身的抗氧化防御機(jī)制，清除過多的ROS第十七頁，共二十七頁。氧自由基的產(chǎn)生導(dǎo)致RPE細(xì)胞凋亡體內(nèi)主要的抗氧化酶有：錳超氧化物歧化酶銅-鋅超氧化物歧化酶過氧化氫酶谷胱甘肽過氧化物酶第十八頁，共二十七頁。氧自由基的產(chǎn)生導(dǎo)致RPE細(xì)胞凋亡ROS可能通過以下途徑導(dǎo)致RPE細(xì)胞的凋亡：★抑制體內(nèi)多種組織細(xì)胞的離子通道的活性，導(dǎo)致細(xì)胞極化狀態(tài)的紊亂★

ROS的形成將影響某些致凋亡基因在RPE細(xì)胞膜上的表達(dá)★

神經(jīng)鞘磷脂途徑：由于細(xì)胞膜上的神經(jīng)鞘磷脂產(chǎn)生了第二信使神經(jīng)鞘氨醇，后者可調(diào)節(jié)凋亡細(xì)胞對腫瘤壞死因子、Fasligand、H2O2的反應(yīng)第十九頁，共二十七頁。RPE細(xì)胞凋亡的機(jī)制⒊鋅與RPE細(xì)胞的凋亡

★鋅是神經(jīng)組織中含量最豐富的微量元素之一

★人眼視網(wǎng)膜神經(jīng)上皮乘和色素上皮層中含有豐富的鋅

★鋅離子和體內(nèi)400多中金屬蛋白相結(jié)合，在核酸、蛋白質(zhì)合成，能量代謝和細(xì)胞間的信號傳遞中發(fā)揮作用

★鋅在細(xì)胞凋亡的誘發(fā)、維持和抑制中扮演一矛盾角色第二十頁，共二十七頁。鋅與RPE細(xì)胞的凋亡★鋅通過作用于過氧化氫，銅-鋅過氧化物歧化酶、輔酶Ⅰ和輔酶Ⅱ參與細(xì)胞抗氧化狀態(tài)的維持★缺鋅可引起夜盲，暗適應(yīng)能力下降，視力下降，補(bǔ)鋅可得到緩解★鋅可作為核內(nèi)切酶的抑制劑，防止凋亡細(xì)胞的DNA降解★鋅是蛋白激酶Caspase-3的強(qiáng)抑制劑，蛋白激酶在哺乳動物細(xì)胞凋亡過程中被激活后，可引起細(xì)胞蛋白分解，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡第二十一頁，共二十七頁。鋅與RPE細(xì)胞的凋亡★鋅對RPE細(xì)胞的作用依賴于鋅離子濃度，在一定濃度下鋅可誘發(fā)RPE細(xì)胞的凋亡★鋅誘導(dǎo)RPE細(xì)胞凋亡的途徑，可能有：⑴鋅可調(diào)控細(xì)胞內(nèi)早期基因產(chǎn)物如c-fas,c-jun的表達(dá)和活動，此等基因和細(xì)胞凋亡有關(guān)第二十二頁，共二十七頁。⑵蛋白激酶C具有鋅的高親和力結(jié)合位點(diǎn)，結(jié)合的鋅離子對蛋白激酶C有雙面影響：當(dāng)濃度高于10mol/L起促進(jìn)作用，當(dāng)濃度低于此時(shí)起抑制作用蛋白激酶C的抑制可導(dǎo)致人RPE細(xì)胞凋亡⑶鋅離子濃度過低，可引起RPE細(xì)胞內(nèi)DNA分子結(jié)構(gòu)改變，在光線照射下更易造成DNA損傷，導(dǎo)致RPE凋亡第二十三頁，共二十七頁。

RPE細(xì)胞凋亡的拮抗劑⒈神經(jīng)營養(yǎng)因子多種神經(jīng)營養(yǎng)因子具有延長視網(wǎng)膜細(xì)胞凋亡能力：

腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子（BDNF）堿性成纖維細(xì)胞生長因子（bFGF）神經(jīng)營養(yǎng)因子-3（NTF-3）睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子（CNTF）第二十四頁，共二十七頁。神經(jīng)營養(yǎng)因子

RPE細(xì)胞能表達(dá)bFGF,具有bFGF相應(yīng)受體bFGF能促進(jìn)離體的RPE細(xì)胞分化其它神經(jīng)營養(yǎng)因子是通過bFGF起作用第二十五頁，共二十七頁。⒉抗氧化劑抗氧化劑能防止RPE細(xì)胞凋亡：消除氧自由基減少氧自由基生成褪黑激素（melatonin)可影響RPE中原瘤基因蛋白Bcl-2,ICH-1L和TLAR的量