釔離子對氟喹諾酮藥物熒光增強效應(yīng)的研究及應(yīng)用課件

釔離子對氟喹諾酮藥物熒光增強效應(yīng)的研究及應(yīng)用

答辯人：趙昕昕專業(yè)：食品質(zhì)量與安全指導(dǎo)教師：孫春燕釔離子對氟喹諾酮藥物熒光增強效應(yīng)的研究及應(yīng)用答辯人：趙昕昕1主要內(nèi)容緒論實驗部分

釔離子對氟喹諾酮類藥物的熒光增強效應(yīng)

釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物熒光性初探結(jié)論致謝主要內(nèi)容緒論2FluoroquinolonesFQs氟喹諾酮類藥物是指人工合成的具有4-喹諾酮環(huán)基苯結(jié)構(gòu)的新型抗菌藥，種類繁多，廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)。依諾沙星(ENX)環(huán)丙沙星(CPFX)諾氟沙星(NFLX)洛美沙星(LMFX)氟羅沙星(FLRX)氧氟沙星（OFL）培氟沙星（PEF）氟甲喹（FLU）蘆氟沙星(RFX)斯帕沙星(SPFX)加替沙星(GFLX)格帕沙星（GPFX）帕珠沙星（PZFX）沙拉沙星（SAR）緒論獸藥殘留問題Fluoroquinolones氟喹諾酮類藥物緒論獸藥殘留3檢驗方法微生物法免疫分析法高效液相法熒光光度法檢驗方法微生物法4熒光增強機理不同稀土離子+氟喹諾酮類藥物（Eu3+,Tb3+等）——稀土離子特征熒光稀土離子+氟喹諾酮類藥物（La3+，Y3+等）——增強氟喹諾酮的熒光稀土離子共發(fā)光效應(yīng)表面活性劑增敏稀土離子與氟喹諾酮類藥物配合物的熒光性質(zhì)熒光增強機理不同稀土離子+氟喹諾酮類藥物稀土離子與氟喹諾酮類5立題思想稀土離子Y增強氟喹諾酮類藥物的熒光性檢測氟喹諾酮類藥物以下分別為環(huán)丙沙星，培氟沙星，依諾沙星的結(jié)構(gòu)圖立題思想稀土離子Y增強氟喹諾酮類藥物的熒光性檢測氟喹諾酮類藥6

儀器與設(shè)備熒光分光光度計（上海三科儀器有限公司970CRT型）Cary100紫外-可見分光光度計（美國瓦里安公司）920穩(wěn)態(tài)熒光分光光度計（英國Edinburgh公司）pH計(PHS-3C,上海康儀有限責(zé)任公司)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品三氧化二銪標(biāo)準(zhǔn)品環(huán)丙沙星培氟沙星依諾沙星實驗部分釔離子對氟喹諾酮類藥物的熒光增強效應(yīng)材料與試劑

儀器與設(shè)備熒光分光光度計三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品實驗部分釔離7熒光光譜檢測5ml1.0×10-4mol/L釔離子溶液1ml1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星/培氟沙星/依諾沙星2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液++加二次蒸餾水定容至10ml，放置15分鐘，用熒光分光光度計測定熒光強度

實驗方法熒光光譜檢測5ml1.0×10-4mol/L釔8

結(jié)果與討論

———紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星的紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L培氟沙星的紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L依諾沙星的紫外可見吸收光譜270nm319nm274nm313nm266nm338nm結(jié)果與討論

———紫外可見吸收光譜1.09熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

培氟沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

依諾沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

實驗條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥物，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖培氟沙星加入釔離10緩沖溶液對體系的影響

不同緩沖溶液對Y3+-培氟沙星體系熒光強度的影響實驗條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥，2ml緩沖溶液NH4Ac-HAcTris-HCLHAc-NaAcNH4CL-NH3NaH2PO4-NaOHNaB4O7-HCL緩沖溶液對體系的影響

不同緩沖溶液對Y3+-培氟沙星體系熒11pH值對體系的影響

pH值對Y3+-環(huán)丙沙星體系熒光強度的影響

pH=5.0pH=5.0pH=5.5pH值對Y3+-培氟沙星體系熒光強度的影響

pH值對Y3+-依諾沙星體系熒光強度的影響

實驗條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥物，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液pH值對體系的影響

pH值對Y3+-環(huán)丙沙星pH=5.0pH12

Y3+濃度對體系的影響（以培氟沙星為例）

釔離子對培氟沙星熒光強度的影響實驗條件：1ml1.0×10-6mol/L培氟沙星溶液，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液Y3+濃度對體系的影響（以培氟沙星為例）13干擾離子的影響

與體系穩(wěn)定性試驗以釔-培氟沙星為例，加入的干擾物質(zhì)的相對熒光強度在±5%范圍內(nèi)進行實驗，結(jié)果表明實驗結(jié)果表明100倍的K+、Na+、Mg2+、Ca2+;100倍的Zn2+、Fe3+;10倍的Ni2+、Mn2+、Pb2+對體系均無干擾。體系在配位后即刻產(chǎn)生熒光，隨著時間的增加熒光強度有微弱的增強，在15分鐘后熒光強度達(dá)到最大值，之后保持穩(wěn)定，同時可在2天內(nèi)保持穩(wěn)定。干擾離子的影響

與體系穩(wěn)定14

分析應(yīng)用

培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/L-20.0×10-6mol/L時，呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系檢出限為8.5×10-8mol/L

樣品測定

線性方程為y=20.285x-23.152，測定結(jié)果準(zhǔn)確度高且靈敏度高。

工作曲線及檢出限

分析應(yīng)用

培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/15機理的初步探討

La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等離子在與氟喹諾酮類藥物藥物結(jié)合后，由于其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，不能產(chǎn)生能量轉(zhuǎn)移而增強稀土離子的特征峰。而當(dāng)其m1電子能級在配合物的S1能級之上時，這些稀土離子相當(dāng)于一個惰性原子，與氟喹諾酮類藥物形成一個螯合物，并使配位體轉(zhuǎn)變?yōu)閯傂云矫娼Y(jié)構(gòu)或加強了其剛性，使原來不發(fā)熒光或弱熒光的配位體轉(zhuǎn)變?yōu)榘l(fā)強熒光的物質(zhì)。機理的初步探討La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等離子16討論本文對稀土離子釔對氟喹諾酮類藥物的熒光增強效應(yīng)進行了研究，對各種影響因素進行了條件優(yōu)化，并對機理進行了初步探討，建立了利用釔增強氟喹諾酮藥物熒光檢測該類藥物的新方法。該方法具有操作簡單，檢測快速且靈敏度高的特點，干擾少，穩(wěn)定性好，若與分離技術(shù)相結(jié)合，在食品中氟喹諾酮類藥物殘留的檢測方面具有良好的應(yīng)用前景。討論本文對稀土離子釔對氟喹諾酮類藥物的熒光增強效應(yīng)進行17釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物

熒光性初探

實驗材料，儀器及溶液：實驗方法：優(yōu)化實驗條件：pH值及緩沖溶液的影響釔離子的影響表面活性劑的影響釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物

熒光性初探

實驗材料，儀器及溶18實驗結(jié)果與討論依諾沙星，銪-依諾沙星的熒光發(fā)射光譜圖

依諾沙星，銪-依諾沙星，銪-釔-依諾沙星的熒光發(fā)射光譜圖

實驗結(jié)果表明當(dāng)銪離子與依諾沙星形成配合物時發(fā)生能量轉(zhuǎn)移，依諾沙星的熒光強度減弱，同時銪的熒光強度增強。但加入釔之后，銪的特征峰沒有熒光增強效應(yīng)，只是增強了依諾沙星的熒光強度綠線：依諾沙星黃線：銪-依諾沙星紅線：依諾沙星黃線：銪-依諾沙星綠線：銪-釔-依諾沙星實驗結(jié)果與討論依諾沙星，銪-依諾沙星依諾沙星，銪-依諾沙星，19實驗結(jié)果與討論在表面活性劑的影響試驗中，TritonX-100對體系無增敏作用，CTMA，SDBS和SDS則有不同程度的增敏作用，其中以SDS效果最好。說明在實驗條件下，釔離子只能微弱的增強銪-依諾沙星的敏化熒光特性，對銪-依諾沙星體系的能量轉(zhuǎn)移并無太大影響。銪-釔-依諾沙星，銪-釔-依諾沙星-SDS的熒光發(fā)射光譜圖

黃線：銪-釔-依諾沙星綠線：銪-釔-依諾沙星-SDS實驗結(jié)果與討論在表面活性劑的影響試驗中，TritonX-20討論本文在文獻報道的基礎(chǔ)上對釔-銪-氟喹諾酮類藥物的熒光增敏作用進行了初步探索，但結(jié)果并不理想，分析可能是由于產(chǎn)生共發(fā)光效應(yīng)的稀土離子的選擇及實驗條件有所誤差，反應(yīng)的實驗條件有待進一步優(yōu)化。討論本文在文獻報道的基礎(chǔ)上對釔-銪-氟喹諾酮類藥物的熒光增敏21在此對孫春燕老師辛勤的教育和指導(dǎo)表示衷心的感謝。同時，在論文實驗過程給予支持和建議的盧靜老師，王海波老師，卜秀娟老師以及食品質(zhì)量與安全的全體指導(dǎo)老師表示誠摯的謝意。感謝在論文工作中給予我?guī)椭椭С值暮|(zhì)云同學(xué)，趙磊同學(xué)，劉立國同學(xué)，周立灶同學(xué)，我的室友以及05級食品質(zhì)量與安全的所有同學(xué)。在此表示由衷的感謝。致謝在此對孫春燕老師辛勤的教育和指導(dǎo)表示衷心的感謝。同時，在論文22謝謝大家！請領(lǐng)導(dǎo)老師批評指正！謝謝大家！請領(lǐng)導(dǎo)老師批評指正！23釔離子對氟喹諾酮藥物熒光增強效應(yīng)的研究及應(yīng)用

答辯人：趙昕昕專業(yè)：食品質(zhì)量與安全指導(dǎo)教師：孫春燕釔離子對氟喹諾酮藥物熒光增強效應(yīng)的研究及應(yīng)用答辯人：趙昕昕24主要內(nèi)容緒論實驗部分

釔離子對氟喹諾酮類藥物的熒光增強效應(yīng)

釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物熒光性初探結(jié)論致謝主要內(nèi)容緒論25FluoroquinolonesFQs氟喹諾酮類藥物是指人工合成的具有4-喹諾酮環(huán)基苯結(jié)構(gòu)的新型抗菌藥，種類繁多，廣泛應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)。依諾沙星(ENX)環(huán)丙沙星(CPFX)諾氟沙星(NFLX)洛美沙星(LMFX)氟羅沙星(FLRX)氧氟沙星（OFL）培氟沙星（PEF）氟甲喹（FLU）蘆氟沙星(RFX)斯帕沙星(SPFX)加替沙星(GFLX)格帕沙星（GPFX）帕珠沙星（PZFX）沙拉沙星（SAR）緒論獸藥殘留問題Fluoroquinolones氟喹諾酮類藥物緒論獸藥殘留26檢驗方法微生物法免疫分析法高效液相法熒光光度法檢驗方法微生物法27熒光增強機理不同稀土離子+氟喹諾酮類藥物（Eu3+,Tb3+等）——稀土離子特征熒光稀土離子+氟喹諾酮類藥物（La3+，Y3+等）——增強氟喹諾酮的熒光稀土離子共發(fā)光效應(yīng)表面活性劑增敏稀土離子與氟喹諾酮類藥物配合物的熒光性質(zhì)熒光增強機理不同稀土離子+氟喹諾酮類藥物稀土離子與氟喹諾酮類28立題思想稀土離子Y增強氟喹諾酮類藥物的熒光性檢測氟喹諾酮類藥物以下分別為環(huán)丙沙星，培氟沙星，依諾沙星的結(jié)構(gòu)圖立題思想稀土離子Y增強氟喹諾酮類藥物的熒光性檢測氟喹諾酮類藥29

儀器與設(shè)備熒光分光光度計（上海三科儀器有限公司970CRT型）Cary100紫外-可見分光光度計（美國瓦里安公司）920穩(wěn)態(tài)熒光分光光度計（英國Edinburgh公司）pH計(PHS-3C,上?？祪x有限責(zé)任公司)三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品三氧化二銪標(biāo)準(zhǔn)品環(huán)丙沙星培氟沙星依諾沙星實驗部分釔離子對氟喹諾酮類藥物的熒光增強效應(yīng)材料與試劑

儀器與設(shè)備熒光分光光度計三氧化二釔標(biāo)準(zhǔn)品實驗部分釔離30熒光光譜檢測5ml1.0×10-4mol/L釔離子溶液1ml1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星/培氟沙星/依諾沙星2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液++加二次蒸餾水定容至10ml，放置15分鐘，用熒光分光光度計測定熒光強度

實驗方法熒光光譜檢測5ml1.0×10-4mol/L釔31

結(jié)果與討論

———紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L環(huán)丙沙星的紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L培氟沙星的紫外可見吸收光譜1.0×10-5mol/L依諾沙星的紫外可見吸收光譜270nm319nm274nm313nm266nm338nm結(jié)果與討論

———紫外可見吸收光譜1.032熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

培氟沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

依諾沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖

實驗條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥物，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液熒光光譜環(huán)丙沙星加入釔離子前后的熒光光譜圖培氟沙星加入釔離33緩沖溶液對體系的影響

不同緩沖溶液對Y3+-培氟沙星體系熒光強度的影響實驗條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥，2ml緩沖溶液NH4Ac-HAcTris-HCLHAc-NaAcNH4CL-NH3NaH2PO4-NaOHNaB4O7-HCL緩沖溶液對體系的影響

不同緩沖溶液對Y3+-培氟沙星體系熒34pH值對體系的影響

pH值對Y3+-環(huán)丙沙星體系熒光強度的影響

pH=5.0pH=5.0pH=5.5pH值對Y3+-培氟沙星體系熒光強度的影響

pH值對Y3+-依諾沙星體系熒光強度的影響

實驗條件：5.0×10-5mol/L釔離子溶液，1ml1.0×10-6mol/L氟喹諾酮類藥物，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液pH值對體系的影響

pH值對Y3+-環(huán)丙沙星pH=5.0pH35

Y3+濃度對體系的影響（以培氟沙星為例）

釔離子對培氟沙星熒光強度的影響實驗條件：1ml1.0×10-6mol/L培氟沙星溶液，2ml0.2mol/LTris-HC1緩沖溶液Y3+濃度對體系的影響（以培氟沙星為例）36干擾離子的影響

與體系穩(wěn)定性試驗以釔-培氟沙星為例，加入的干擾物質(zhì)的相對熒光強度在±5%范圍內(nèi)進行實驗，結(jié)果表明實驗結(jié)果表明100倍的K+、Na+、Mg2+、Ca2+;100倍的Zn2+、Fe3+;10倍的Ni2+、Mn2+、Pb2+對體系均無干擾。體系在配位后即刻產(chǎn)生熒光，隨著時間的增加熒光強度有微弱的增強，在15分鐘后熒光強度達(dá)到最大值，之后保持穩(wěn)定，同時可在2天內(nèi)保持穩(wěn)定。干擾離子的影響

與體系穩(wěn)定37

分析應(yīng)用

培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/L-20.0×10-6mol/L時，呈現(xiàn)很好的線性關(guān)系檢出限為8.5×10-8mol/L

樣品測定

線性方程為y=20.285x-23.152，測定結(jié)果準(zhǔn)確度高且靈敏度高。

工作曲線及檢出限

分析應(yīng)用

培氟沙星在濃度范圍為1.0×10-6mol/38機理的初步探討

La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等離子在與氟喹諾酮類藥物藥物結(jié)合后，由于其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，不能產(chǎn)生能量轉(zhuǎn)移而增強稀土離子的特征峰。而當(dāng)其m1電子能級在配合物的S1能級之上時，這些稀土離子相當(dāng)于一個惰性原子，與氟喹諾酮類藥物形成一個螯合物，并使配位體轉(zhuǎn)變?yōu)閯傂云矫娼Y(jié)構(gòu)或加強了其剛性，使原來不發(fā)熒光或弱熒光的配位體轉(zhuǎn)變?yōu)榘l(fā)強熒光的物質(zhì)。機理的初步探討La3+，Lu3+，Y3+，Sc3+等離子39討論本文對稀土離子釔對氟喹諾酮類藥物的熒光增強效應(yīng)進行了研究，對各種影響因素進行了條件優(yōu)化，并對機理進行了初步探討，建立了利用釔增強氟喹諾酮藥物熒光檢測該類藥物的新方法。該方法具有操作簡單，檢測快速且靈敏度高的特點，干擾少，穩(wěn)定性好，若與分離技術(shù)相結(jié)合，在食品中氟喹諾酮類藥物殘留的檢測方面具有良好的應(yīng)用前景。討論本文對稀土離子釔對氟喹諾酮類藥物的熒光增強效應(yīng)進行40釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物

熒光性初探

實驗材料，儀器及溶液：實驗方法：優(yōu)化實驗條件：pH值及緩沖溶液的影響釔離子的影響表面活性劑的影響釔-銪-氟喹諾酮類藥物配合物

熒光性初探

實驗材料，儀器及溶41實驗結(jié)果與討論依諾沙星，銪-依諾沙星的熒光發(fā)