顆粒測(cè)定技術(shù)及其在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

顆粒測(cè)定技術(shù)及其在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用

Technologyforthemeasurementofparticlesizeandapplicationinpharmaceuticalanalysis上海市食品藥品檢驗(yàn)所聞宏亮粒度及粒度分布測(cè)定的意義藥品檢驗(yàn)中粒度測(cè)定的主要方法幾種藥物劑型的粒度控制粒度和粒度分布粒度是指粒子的大小，一般用粒徑來表示，粒徑指顆粒的直徑。粒度分布樣品中的各個(gè)顆粒大小不同，這時(shí)要用粒度分布才能較全面地描述樣品顆粒整體大小，粒度分布指各種大小的顆粒占顆?？倲?shù)的比例，可以用表格或曲線的形式來表示。藥品檢驗(yàn)中粒度控制的意義對(duì)制劑工藝的影響

對(duì)混合均勻性有影響對(duì)分劑量準(zhǔn)確性有影響對(duì)可壓性有影響

對(duì)制劑有效性的影響

對(duì)藥物溶解度的影響對(duì)藥物作用時(shí)間的影響對(duì)藥物作用部位的影響藥名粒徑及劑量療效灰黃霉素口服10μm，1g灰黃霉素口服2.6μm，0.5g與上面相當(dāng)螺內(nèi)酯粗晶，100mg螺內(nèi)酯5μm，20mg與上面相當(dāng)對(duì)制劑穩(wěn)定性有影響

混懸性制劑屬于動(dòng)力學(xué)不穩(wěn)定體系，在放置中顆粒易下沉，下沉速度與粒徑平方成正比，故控制合適的粒徑有利于維持穩(wěn)定的分散體系。對(duì)制劑安全性有影響

靜脈注射液中微粒的危害混懸型滴眼液、滴鼻液、吸入液中的粒子大小直接影響到人體安全治療指數(shù)低的藥物粒徑減小后，藥物的毒副作用將增大。

雖然藥物原料及制劑的粒度大小對(duì)于藥品的質(zhì)量與療效并非決定性因素，但是其質(zhì)量控制中必不可少的重要組成部分。藥品檢驗(yàn)中粒度測(cè)定的主要方法篩分法顯微鏡法電阻法光阻法光散射法篩分法中國藥典、美國藥典、英國藥典和日本藥局方中均有收載，是一種較古老的粒度測(cè)定方法，適合于測(cè)定大多數(shù)粒子大于75μm的樣品。主要工具為一系列藥篩，各國藥典的藥篩規(guī)格不一樣。篩號(hào)篩孔內(nèi)徑(平均值)目號(hào)一號(hào)篩2000μm±70μm10目二號(hào)篩850μm±29μm24目三號(hào)篩355μm±13μm50目四號(hào)篩250μm±9.9μm65目五號(hào)篩180μm±7.6μm80目六號(hào)篩150μm±6.6μm100目七號(hào)篩125μm±5.8μm120目八號(hào)篩90μm±4.6μm150目九號(hào)篩75μm±4.1μm200目

粉末分等如下：最粗粉指能全部通過一號(hào)篩，但混有能通過三號(hào)篩不超過20%的粉末；粗粉指能全部通過二號(hào)篩，但混有能通過四號(hào)篩不超過40%的粉末；中粉指能全部通過四號(hào)篩，但混有能通過五號(hào)篩不超過60%的粉末；細(xì)粉指能全部通過五號(hào)篩，并含能通過六號(hào)篩不少于95%的粉末；最細(xì)粉指能全部通過六號(hào)篩，并含能通過七號(hào)篩不少于95%的粉末；極細(xì)粉指能全部通過八號(hào)篩，并含能通過九號(hào)篩不少于95%的粉末。

測(cè)定方法是將準(zhǔn)確稱量的一定量樣品置于規(guī)定號(hào)藥篩的篩網(wǎng)上，通過水平方向旋轉(zhuǎn)振搖和垂直方向輕叩，使粒徑小于篩網(wǎng)孔徑的粒子通過，再次稱量未通過或通過藥篩的樣品重量，計(jì)算通過各級(jí)藥篩的樣品的重量百分比，從而得到有關(guān)樣品中粒度分布的信息。中國藥典中顆粒劑和散劑的粒度測(cè)定采用該方法篩分法簡單易行且廉價(jià)，但存在較多缺點(diǎn)：①對(duì)于油性樣品及粘性大、成團(tuán)的固體樣品不易采用該法；②測(cè)量時(shí)間越長，結(jié)果越小，因?yàn)轭w粒會(huì)由于定向而通過篩子落下，這意味著測(cè)量的時(shí)間和操作的方法應(yīng)該嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化。③對(duì)于桿狀顆粒（如：撲熱息痛）測(cè)定，會(huì)產(chǎn)生不真實(shí)的重量分布。顯微鏡法各國現(xiàn)行藥典的粒度測(cè)定中均收載有顯微鏡法用于檢測(cè)注射液中不溶性微粒時(shí)，采用濾過的方法，將一定體積的被測(cè)溶液濾在白色、孔徑為0.45μm、直徑為25mm并具有格柵的微孔濾膜上，將制備的濾膜放在載玻片上通過顯微鏡放大后計(jì)數(shù)留在濾膜上的粒子數(shù)目和大小用于檢測(cè)固體或半固體制劑，如軟膏劑、乳膏劑、眼膏劑及混懸性滴眼液、滴鼻液時(shí)，取樣品以合適的分散劑直接涂于載玻片上置顯微鏡下觀察此法的優(yōu)點(diǎn)是直觀，可觀察到顆粒的性質(zhì)和形狀，是表征顆粒特性非常有價(jià)值的手段；但是對(duì)顆粒粒徑小、數(shù)量多、檢測(cè)時(shí)間長的情況下容易造成檢測(cè)人員視覺疲勞，易受到主觀因素的影響電阻法又稱庫爾特計(jì)數(shù)法，有著非常悠久的歷史，最初用于細(xì)胞計(jì)數(shù)，后來發(fā)展應(yīng)用于制藥、化工等領(lǐng)域的微粒檢測(cè)和粒度分析。可用于檢測(cè)注射液中不溶性微粒，英國藥典1973年版就收載了電阻法；可用于檢測(cè)乳劑、各種混懸型制劑中的粒度分布。原理：采用負(fù)壓虹吸進(jìn)樣使懸浮在電解液中的微粒通過一個(gè)由紅寶石精密制成的小孔，鉑電極傳感器的正負(fù)兩極分別插浸在小孔的兩側(cè)，微粒通過小孔時(shí)，鉑電極間原有電阻改變而產(chǎn)生電壓幅值變化，電壓幅值與微粒體積成正比。電阻法傳感器的結(jié)構(gòu)簡單，價(jià)格便宜，在以前的制藥行業(yè)中應(yīng)用廣泛。采用電阻法被測(cè)物必須導(dǎo)電，否則必須引入電解質(zhì)溶液，所以容易造成污染。對(duì)于粒度分布較為廣泛的藥物，測(cè)定較麻煩，必須更換小孔管，并且有堵塞小孔管的危險(xiǎn)。光阻法用于測(cè)定注射液中不溶性微粒，現(xiàn)已被各國藥典列為首選。原理：當(dāng)液體流經(jīng)一束垂直方向的光時(shí)，在檢測(cè)區(qū)內(nèi)粒子對(duì)光的阻擋作用而使檢測(cè)器上產(chǎn)生電信號(hào)的變化，這種信號(hào)的變化與微粒的投影面積成正比。光阻法優(yōu)點(diǎn)可直接檢測(cè)無色和有色的澄明溶液，無須對(duì)檢品進(jìn)行電阻率調(diào)整。自動(dòng)化程度高，操作方便。缺點(diǎn)是不適于乳液型、混懸型等注射劑，不適于黏度過高和易析出結(jié)晶的制劑，也不適用于進(jìn)入傳感器時(shí)容易產(chǎn)生氣泡的注射劑。光散射法中國藥典2005年版附錄關(guān)于粒度測(cè)定法中已收載了該方法，而國外各現(xiàn)行藥典未有收載。原理：激光束照射到顆粒樣品后發(fā)生散射現(xiàn)象，散射光的角度與顆粒的直徑成反比關(guān)系，而散射光強(qiáng)隨角度的增加呈對(duì)數(shù)規(guī)律衰減，因而可通過接受散射光能量的分布得到顆粒粒徑的分布關(guān)系。根據(jù)供試品的性狀和溶解性能，通常分為濕法測(cè)定和干法測(cè)定；濕法測(cè)定用于測(cè)定混懸樣品或不溶于分散介質(zhì)的樣品，干法測(cè)定用于測(cè)定水溶性或無合適分散介質(zhì)的固態(tài)樣品。樣品的粒度分布結(jié)果與光學(xué)參數(shù)的設(shè)置有關(guān)，顆粒折光率和吸光度的改變對(duì)小粒子影響較大，對(duì)大粒子影響較小。采用濕法測(cè)定可以通過加入適當(dāng)?shù)奶砑觿┖头€(wěn)定劑使樣品很好的分散，進(jìn)行循環(huán)測(cè)定，重現(xiàn)性好；干法測(cè)定則需在一定的加料速度下選擇適宜的空氣分散壓力，保證樣品完全消耗方可得到好的重現(xiàn)性。阿奇霉素原料干法測(cè)定重復(fù)性試驗(yàn)小結(jié)不同原理的儀器，選擇顆粒不同的物理性質(zhì)來度量其大小，因此用它們測(cè)量同一不規(guī)則顆粒時(shí)，結(jié)果可能是不同的。有時(shí)甚至同一種原理的儀器，測(cè)試條件不同，結(jié)果也可能不同。實(shí)際應(yīng)用時(shí)根據(jù)樣品的特性和樣品中粒子大小及其分布情況選擇合適的測(cè)定方法。幾種藥物制劑的粒度測(cè)定方法和粒度標(biāo)準(zhǔn)注射液軟膏劑眼用制劑（混懸型滴眼劑、混懸型眼用半固體制劑）顆粒劑、散劑凝膠劑（中國藥典2005年版）粉霧劑脂質(zhì)體脂肪乳納米粒注射液不溶性微粒

指除氣泡外可流動(dòng)的，隨機(jī)存在于液體制劑，包括無菌固體制劑所配制的溶液中的異物。來源可能由配制的原、輔料帶入環(huán)境中粉塵、異物貯存容器、瓶塞中粒子的污染危害微粒進(jìn)入血管引起血栓、靜脈炎進(jìn)入肺內(nèi)產(chǎn)生肉牙腫分散在體內(nèi)各處引起栓塞，對(duì)心臟、肝、腎等都有損害測(cè)定方法光阻法、電阻法、顯微鏡法控制限度光阻法≥10μm≥25μm

大容量25個(gè)/ml3個(gè)/ml

小針劑6000個(gè)/瓶600個(gè)/瓶

顯微鏡法大容量12個(gè)/ml2個(gè)/ml

小針劑3000個(gè)/瓶300個(gè)/瓶各國藥典對(duì)注射液中不溶性微粒的控制指標(biāo)藥典最早制定年代與標(biāo)準(zhǔn)修訂最新制定的標(biāo)準(zhǔn)中國ChP1985年顯微鏡法2000年顯微鏡法和光阻法

≥10μm≥25μm≥10μm50個(gè)/ml2005年增加小針劑大容量25個(gè)/ml3個(gè)/ml≥25μm5個(gè)/ml

小針劑6000個(gè)/瓶600個(gè)/瓶美國USP1975年顯微鏡法1985年光阻法

≥10μm≥25μm≥10μm50個(gè)/ml大容量25個(gè)/ml3個(gè)/ml≥25μm5個(gè)/ml小針劑6000個(gè)/瓶600個(gè)/瓶顯微鏡法(仲裁)大容量12個(gè)/ml2個(gè)/ml

小針劑3000個(gè)/瓶300個(gè)/瓶英國BP1973年顯微鏡法1980年電阻法

≥10μm≥25μm500ml以上輸液1998年光阻法大容量25個(gè)/ml3個(gè)/ml≥2μm1000個(gè)/ml

小針劑6000個(gè)/瓶600個(gè)/瓶≥5μm100個(gè)/ml

日本JP1985年顯微鏡法1995年光阻法與美國藥典基本一致≥10μm50個(gè)/ml顯微鏡法(輔助)≥25μm5個(gè)/ml

軟膏劑測(cè)定粒度的目的粒度測(cè)定方法顯微鏡法控制限度混懸型軟膏劑不得檢出大于180μm的粒子

（中國藥典2000年版）鼻用混懸型軟膏劑檢出50μm的粒子不得多于2個(gè)，并不得檢出大于90μm的粒子

眼用制劑測(cè)定粒度的目的粒度測(cè)定方法顯微鏡法控制限度相當(dāng)于主藥10μg的樣品中大于50μm的粒子不得多于2個(gè)，并不得檢出大于90μm的粒子顆粒劑和散劑測(cè)定粒度的目的粒度測(cè)定方法篩分法控制限度顆粒劑（雙篩分法）不能通過一號(hào)篩（2000μm）與能通過五號(hào)篩（180

μm）的總和不得超過供試量的15％局部用散劑（單篩分法）通過七號(hào)篩的粉末重量應(yīng)不低于95％（中國藥典2000年版）細(xì)粒劑不能通過五號(hào)篩（180

μm）與能通過九號(hào)篩（75

μm）的總和不得超過供試量的10.0%

凝膠劑測(cè)定粒度的目的粒度測(cè)定方法顯微鏡法控制限度混懸型凝膠劑不得檢出大于180μm的粒子

氣霧劑粒度控制的意義評(píng)價(jià)氣霧劑霧粒大小、分布及其形態(tài)特征的方法

顯微鏡法激光全息照相法激光粒度分析儀測(cè)定法安迪松園盤沖撞器（Andersencascadeimpactor)及多級(jí)液體撞擊器（Multistageliquidimpinger)飛行時(shí)間霧粒測(cè)定法（time-of-flightaerosolbeamspectrometry,TOFABS)脂質(zhì)體按照其結(jié)構(gòu)和粒度大小可將脂質(zhì)體分為小單室脂質(zhì)體（粒徑在20nm～80nm）大單室脂質(zhì)體（粒徑在100nm～1000nm）多室脂質(zhì)體（粒徑在1μm至5μm之間）脂質(zhì)體粒徑大小和分布的測(cè)定方法顯微鏡法電子顯微鏡法庫爾特計(jì)數(shù)法激光散射法微孔濾膜－吸光度法

脂質(zhì)體的粒徑大小直接影響其體內(nèi)穩(wěn)定性鹽酸多柔比星脂質(zhì)體動(dòng)態(tài)光散射法：粒子懸浮在某一溶劑中作布朗運(yùn)動(dòng)，一定波長的激光光線照射到粒子上，發(fā)生雷利散射，粒子的運(yùn)動(dòng)產(chǎn)生多普勒振動(dòng)，根據(jù)振動(dòng)光的變化測(cè)定