臨檢易錯(cuò)題-臨床免疫學(xué)

臨床免疫學(xué)概論主要的分泌型抗體是IgA，存在于胃腸道和支氣管分泌液、初乳、唾液和淚液中，是參與黏膜免疫的主要抗體。補(bǔ)體系統(tǒng)C3含量最高，C2含量最低。豚鼠血清中補(bǔ)體含量豐富。淋巴結(jié)皮質(zhì)區(qū)：B淋巴細(xì)胞副皮質(zhì)區(qū)：T淋巴細(xì)胞T細(xì)胞表面CD3是組成TCR-CD8復(fù)合物的重要組成部分。外周免疫器官是免疫應(yīng)答發(fā)生的場所CD2是T細(xì)胞的綿羊紅細(xì)胞受體成熟B細(xì)胞的mIg主要是mIgM、mIgD目前不能利用抗原抗體檢測核酸免疫防御是指機(jī)體排斥微生物的侵襲及其他外源性抗原異物的能力免疫自穩(wěn)是機(jī)體阻止外來異物入侵、清除自身衰老和損傷細(xì)胞、對自身成分產(chǎn)生免疫耐受，并通過免疫調(diào)節(jié)達(dá)到維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的功能?？乖贵w反應(yīng)抗原抗體反應(yīng)的pH6.0~9.0抗原抗體結(jié)合的作用力：靜電引力，范德華力，氫鍵結(jié)合力，疏水作用范德華力最小，疏水作用最大人血清中的抗原抗體不發(fā)生自然沉淀是由于帶有大量的氨基和羧基殘基形成水化層。免疫原和抗血清的制備鑒定抗血清的特異性：雙向免疫擴(kuò)散抗體效價(jià)的測定：雙向免疫擴(kuò)散待測抗原定量測定：單向免疫擴(kuò)散半抗原：只有反應(yīng)原性，沒有免疫原性R型抗血清—來源于家兔—反應(yīng)范圍寬，適于做診斷試劑H型抗血清—來源于馬—適合范圍窄，適于做免疫治療第1次與第2次免疫間隔時(shí)間以10~20天為好，第3次及以后間隔一般為7~10天。單克隆抗體制備人-鼠嵌合抗體是將人IgC區(qū)和鼠IgV區(qū)連接雜交瘤細(xì)胞得到的是鼠源性抗體噬菌體抗體庫技術(shù)可以得到完全人源化抗體次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶是HGPRT凝集反應(yīng)參與直接凝集反應(yīng)的抗體主要是IgM抗體；IgG分子量小，難以發(fā)生凝集。臨床診斷中的外斐試驗(yàn)、肥達(dá)試驗(yàn)、交叉配血試驗(yàn)常用試管凝集法SPA協(xié)同凝集試驗(yàn)是一種間接凝集試驗(yàn)，能夠檢測IgG抗體ABO血型鑒定常用玻片凝集法用紅細(xì)胞包被抗原檢測抗體——正向間接凝集試驗(yàn)；特異性抗體致敏載體檢測抗原——反向間接血凝試驗(yàn)；沉淀反應(yīng)免疫固定電泳=區(qū)帶電泳+免疫沉淀反應(yīng)；免疫電泳實(shí)質(zhì)上是在直流電場作用下的凝膠擴(kuò)散試驗(yàn)；火箭免疫電泳實(shí)質(zhì)上是將單向免疫擴(kuò)散與電泳相結(jié)合，在直流電場中加速定向擴(kuò)散的單向免疫擴(kuò)散技術(shù)。沉淀反應(yīng)中，沉淀線靠近抗原孔，提示抗體含量大；靠近抗體孔，提示抗原含量大。沉淀線彎向分子量大的一方。免疫沉淀反應(yīng)目前應(yīng)用最廣，定量比較準(zhǔn)確的是免疫比濁法。參加沉淀反應(yīng)的抗原物理性質(zhì)必須是可溶的。放射免疫分析RIA（放射免疫分析）：以放射性核素標(biāo)記的抗原與反應(yīng)系統(tǒng)中未標(biāo)記抗原競爭結(jié)合為原理來測定待檢樣品中抗原量的一種分析法。放射強(qiáng)度與抗原量成反比。IRMA（免疫放射分析）：用放射性核素標(biāo)記的過量抗體與待檢抗原直接結(jié)合的非競爭性放射免疫分析法。放射強(qiáng)度與抗原量成正比。靈敏度較高。熒光免疫技術(shù)熒光免疫技術(shù)中，間接法所用的第二抗體可以是IgA、IgG、IgM。免疫熒光細(xì)胞化學(xué)分為直接法、夾心法、間接法和補(bǔ)體法。常設(shè)陽性對照、陰性對照、替代對照和吸收試驗(yàn)。時(shí)間分辨熒光免疫測定利用鑭系元素?zé)晒鈮勖L的特點(diǎn)，待壽命短的自然熒光完全衰退后再測定，從而有效地消除非特異性熒光。組成熒光顯微鏡的結(jié)構(gòu)中，只有目鏡與普通顯微鏡相同。熒光素與蛋白質(zhì)形成的是共價(jià)鍵?；瘜W(xué)發(fā)光法靈敏度最高。熒光效率是指熒光色素將吸收的光能轉(zhuǎn)變?yōu)闊晒獾陌俜致省ｉg接免疫熒光法是目前公認(rèn)最有效檢測抗核抗體的方法。前臨床治療藥物檢測最常用的檢測方法是：熒光偏振免疫分析法（FPIA）適宜檢測小分子物質(zhì)，常用于藥物、激素的測定。酶免疫技術(shù)酶免疫技術(shù)中最佳工作濃度的選定常用棋盤滴定法。HRP最常用的底物—四甲基聯(lián)苯胺TMB待測抗原濃度過高會(huì)出現(xiàn)鉤狀效應(yīng)。ELISA最常用的包被載體是聚苯乙烯。常用的封閉物質(zhì)是牛血清白蛋白?；瘜W(xué)放光免疫分析技術(shù)電化學(xué)發(fā)光法檢測靈敏度可達(dá)pg/mL直接化學(xué)發(fā)光劑：吖啶酯、三聯(lián)吡啶釕酶促反應(yīng)發(fā)光劑：HRP-魯米諾，堿性磷酸酶AP-AMPPO電化學(xué)發(fā)光免疫分析（ECUA）常用的標(biāo)記物是三聯(lián)吡啶釕吖啶酯作用需要在堿性條件下。第十一章生物素-親和素放大技術(shù)1、1個(gè)親和素分子可結(jié)合4個(gè)生物素2、BAB：以游離的親和素為橋聯(lián)劑，將檢測反應(yīng)體系中抗原-生物素化抗體復(fù)合物與標(biāo)記生物素連接起來。ABC：制備親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物，與反應(yīng)體系中生物素化抗體或生物素化第二抗體相遇時(shí)，ABC中未飽和的親和素結(jié)合部位可以和抗體上的生物素結(jié)合。BA（LBA）：以標(biāo)記親和素直接與生物素化抗體連接進(jìn)行檢測。BAB、ABC將酶標(biāo)記在生物素上；LBA將酶標(biāo)記在親和素上。親和素與生物素結(jié)合的特點(diǎn)：不屬于免疫反應(yīng)，但特異性強(qiáng)，親和力大，結(jié)合后很穩(wěn)定。免疫組化前對標(biāo)本進(jìn)行固定主要的目的是保存組織細(xì)胞抗原特異性的穩(wěn)定。直接法BAS為生物素化第一抗體，間接法BAS為生物素化第二抗體。第十二章固相膜免疫測定免疫電鏡技術(shù)中應(yīng)用最廣的標(biāo)記物是膠體金。斑點(diǎn)酶免疫吸附試驗(yàn)的檢測靈敏度較一般ELISA高6~8倍，常用載體為NC膜。膠體金制備的一般方法是還原法。固相膜免疫測定中最常用硝酸纖維素膜（NC膜）常用于檢測hCG的是免疫層析試驗(yàn)檢測結(jié)核感染常用ELISPOTHIV確認(rèn)試驗(yàn)采用IBT（免疫印跡法）放射免疫沉淀實(shí)驗(yàn)（RIPA）是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法，同時(shí)彌補(bǔ)了免疫印跡法的不足。第十四章免疫細(xì)胞的分離及其表面標(biāo)志檢測技術(shù)Percoll分離液常用來分離單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞溶菌酶主要由巨噬細(xì)胞分泌檢測中性粒細(xì)胞功能：NBT試驗(yàn)（硝酸四氮唑藍(lán)還原試驗(yàn)）、細(xì)胞內(nèi)殺菌功能試驗(yàn)第十五章免疫細(xì)胞功能檢測技術(shù)檢測T細(xì)胞功能的方法：T細(xì)胞增殖試驗(yàn)、分泌功能測定、T細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒試驗(yàn)、體內(nèi)試驗(yàn)等。檢測巨噬細(xì)胞的方法：炭粒廓清試驗(yàn)、吞噬功能檢測、巨噬細(xì)胞溶酶體酶的測定、巨噬細(xì)胞促凝血活性測定。檢測巨噬細(xì)胞的功能對了解機(jī)體特異性和非特異性免疫狀態(tài)有重要作用。常用雞紅細(xì)胞、白色念珠菌、酵母細(xì)胞等做吞噬顆粒。抵御化膿性細(xì)菌感染的非特異性免疫細(xì)胞是中性粒細(xì)胞。淋巴因子在IV型變態(tài)反應(yīng)的發(fā)生機(jī)制中起重要作用。活化NK細(xì)胞可分泌INF-γ和TNF-αIL-6可誘導(dǎo)肝細(xì)胞合成α1-抗糜蛋白酶。IL-6可刺激漿細(xì)胞生長，用漿細(xì)胞增殖法檢測IL-6。由活化的T細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生。INF-γ由T細(xì)胞和NK細(xì)胞合成所有有核細(xì)胞均可產(chǎn)生IL-1，主要是巨噬細(xì)胞10、IL-2可刺激T細(xì)胞生長，介導(dǎo)細(xì)胞毒作用，促進(jìn)B細(xì)胞生長分化，增強(qiáng)巨噬細(xì)胞抗原遞呈能力、殺菌力及細(xì)胞毒性主要由T細(xì)胞產(chǎn)生，用T淋巴細(xì)胞增殖法檢測IL-2。11、檢測干擾素：抗病毒活性法干擾素的生物活性：抗腫瘤、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)12、細(xì)胞因子檢測最簡單的方法是免疫學(xué)檢測，最可靠的是生物學(xué)檢測。13、活化的T細(xì)胞能產(chǎn)生multi-CSF14、CD3-CD16+CD56+為NK細(xì)胞15、流式細(xì)胞儀采用的發(fā)光源系統(tǒng)為激光第十八章體液免疫球蛋白檢測及應(yīng)用定量檢測病人外周血免疫球蛋白IgG、IgA、IgE常用的方法是單向瓊脂擴(kuò)散法。母乳中的IgA分泌型提高了嬰兒出生后4~6個(gè)月內(nèi)的局部免疫屏障，常稱為局部抗體?？贵w分子中與抗原結(jié)合的部位是VH與VLSLE患者以IgG、IgA升高多見類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎患者IgM升高為主IgE能與肥大細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞結(jié)合中性粒細(xì)胞不具有Fc受體血清中含量最多的抗體是IgG含量最少的是IgE第十九章補(bǔ)體檢測及應(yīng)用能夠激活補(bǔ)體替代途徑的免疫球蛋白是IgA聚合物補(bǔ)體活化順序是C142356789HLA-III類基因區(qū)包括C2、C4、B因子等C1抑制物缺陷會(huì)導(dǎo)致遺傳性血管性水腫具有過敏毒素作用的補(bǔ)體成分是C3a、C5a，在變態(tài)反應(yīng)中導(dǎo)致組織損傷。補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)陽性—不溶血陰性—溶血第二十二章感染性疾病與感染免疫檢測HBeAg是乙肝傳染性的標(biāo)志，在急性乙肝早期常有檢出肥達(dá)反應(yīng)，抗體效價(jià)≥1:80或雙份血清效價(jià)呈4倍以上增長具有診斷價(jià)值。中和作用是機(jī)體滅活游離病毒的主要方式抗鏈球菌溶血素O（ASO）常用檢測方法是乳膠凝集試驗(yàn)和免疫散射比濁法。循環(huán)抗原檢測用于診斷念珠菌病。結(jié)核桿菌檢測：結(jié)核菌素試驗(yàn)、分枝桿菌抗體檢測、全血干擾素測定法。第二十三章超敏反應(yīng)性疾病及其免疫檢測I型超敏反應(yīng)：①藥物過敏性休克；②血清過敏性休克；③呼吸道過敏反應(yīng)，如過敏性鼻炎和過敏性哮喘；④消化道過敏反應(yīng)；⑤皮膚過敏反應(yīng)，如蕁麻疹、濕疹和血管神經(jīng)性水腫。介導(dǎo)II型超敏反應(yīng)的主要是IgG和IgM，少數(shù)IgA。II型超敏反應(yīng)：①輸血反應(yīng)；②新生兒溶血癥；③自身免疫性溶血性貧血；④藥物過敏性血細(xì)胞減少癥；⑤肺出血腎炎綜合癥；⑥甲狀腺功能亢進(jìn)（Graves?。?。III型超敏反應(yīng)：①Arthus反應(yīng)和類Arthus反應(yīng)；②血清??；③鏈球菌感染后腎小球腎炎；④類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎；⑤系統(tǒng)性紅斑狼瘡。IV型超敏反應(yīng)：①感染性遲發(fā)型超敏反應(yīng)；②接觸性皮炎；③移植排斥反應(yīng)。接觸性皮炎由效應(yīng)T細(xì)胞作用，無抗體參與。與血管炎性超敏反應(yīng)有關(guān)的細(xì)胞主要是中性粒細(xì)胞。IV型超敏反應(yīng)的機(jī)制：①T細(xì)胞致敏；②致敏T細(xì)胞產(chǎn)生效應(yīng)。第二十四章自身免疫性疾病及其免疫檢測I型自身免疫性肝炎的標(biāo)志抗體是：抗平滑肌抗體常用來檢測免疫復(fù)合物（CIC）的方法是聚乙二醇（PEG）沉淀法。抗核抗體（ANA）無器官特異性，無種屬特異性ANA的主要性質(zhì)是IgG，也有IgM、IgA、IgD目前最常用的抗ENA抗體譜的檢測方法是免疫印跡法。自身免疫性溶血多見于中年女性。第二十五章免疫增殖性疾病及其免疫檢測常用鑒定M蛋白的方法是免疫固定電泳。巨球蛋白血癥是以分泌IgM的漿細(xì)胞惡性增殖為病理基礎(chǔ)的疾病，好發(fā)于老年男性，骨痛、骨折較少，主要表現(xiàn)為骨髓外浸潤、肝、脾、淋巴結(jié)腫大，血粘滯