廣東2014屆高考生物二輪復(fù)習(xí)：第7單元 選考模塊

專題十五生物技術(shù)實(shí)踐專題十六現(xiàn)代生物科技專題目錄第七單元選考模塊返回目錄知識網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建返回目錄知識網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建專題十五生物技術(shù)實(shí)踐返回目錄高考真題聚焦核心考點(diǎn)整合易錯易混歸納返回目錄考情縱覽專題十五生物技術(shù)實(shí)踐1．[2011?廣東卷]以下關(guān)于豬血紅蛋白提純的描述，不正確的是(

)A．洗滌紅細(xì)胞時，使用生理鹽水可防止紅細(xì)胞破裂B．豬成熟紅細(xì)胞中缺少細(xì)胞器和細(xì)胞核，提純時雜蛋白較少C．血紅蛋白的顏色可用于凝膠色譜法分離過程的監(jiān)測D．在凝膠色譜法分離過程中，血紅蛋白比分子量較小的雜蛋白移動慢返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[答案]D

[解析]D項(xiàng)考查凝膠色譜法分離蛋白質(zhì)的原理，相對分子質(zhì)量越大的通過凝膠色譜柱的速度越快，故D錯誤；A正確，洗滌的目的是去除雜蛋白以利于后續(xù)步驟的分離純化，加入的是生理鹽水，緩慢攪拌10min，低速短時間離心，重復(fù)洗滌三次，直至上清液不再呈現(xiàn)黃色，表明紅細(xì)胞已洗滌干凈；B正確，哺乳動物成熟的紅細(xì)胞沒有細(xì)胞核與眾多的細(xì)胞器，提純時雜蛋白較少；C正確，血紅蛋白是有色蛋白，因此在凝膠色譜分離時可以通過觀察顏色來判斷什么時候應(yīng)該收集洗脫液(如果操作都正確，返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐能清楚地看到血紅蛋白的紅色區(qū)帶均勻、狹窄、平整，隨著洗脫液緩慢流出)，這使得血紅蛋白的分離過程非常直觀，簡化了操作。返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐2．[2013?課標(biāo)全國卷Ⅰ]回答下列有關(guān)泡菜制作的問題：(1)制作泡菜時，所用鹽水需煮沸，其目的是__________________。為了縮短制作時間，有人還會在冷卻后的鹽水中加入少量陳泡菜液，加入陳泡菜液的作用是______________。(2)泡菜制作過程中，乳酸發(fā)酵的過程即為乳酸菌進(jìn)行________的過程。該過程發(fā)生在乳酸菌細(xì)胞的________中。(3)泡菜制作過程中影響亞硝酸鹽含量的因素有___________、________和________等。返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(4)從開始制作到泡菜品質(zhì)最佳這段時間內(nèi)，泡菜液逐漸變酸。這段時間內(nèi)泡菜壇中乳酸菌和其他雜菌的消長規(guī)律是______________________，原因是________________。返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)殺滅雜菌增加乳酸菌數(shù)量(2)無氧呼吸細(xì)胞質(zhì)(3)溫度腌制時間食鹽用量(4)乳酸菌數(shù)量增多，雜菌數(shù)量減少乳酸菌比雜菌更為耐酸[解析]制作泡菜時，所用鹽水需煮沸，其目的是殺滅雜菌。陳泡菜液中含有乳酸菌，相當(dāng)于加入菌種。乳酸菌進(jìn)行無氧呼吸產(chǎn)生乳酸。制作過程中溫度、腌制時間和食鹽用量等都會影響亞硝酸鹽的含量。泡菜制作過程中乳酸菌產(chǎn)生乳酸，使pH降低，從而抑制其他雜菌生長，而乳酸菌可大量繁殖。返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐3[2013?課標(biāo)全國卷Ⅱ]臨床使用抗生素前，有時需要做細(xì)菌耐藥實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)時，首先要從病人身上獲取少量樣本，然后按照一定的實(shí)驗(yàn)步驟操作，以確定某致病菌對不同抗生素的敏感性。回答下列問題：(1)為了從樣本中獲取致病菌單菌落，可用________法或__________法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。(2)取該單菌落適當(dāng)稀釋，用________法接種于固體培養(yǎng)基表面，在37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使其均勻生長，布滿平板。返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(3)為了檢測該致病菌對于抗生素的敏感性，將分別含有A、B、C、D四種抗生素的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置，培養(yǎng)一段時間后，含A的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素A________；含B的濾紙片周圍沒有出現(xiàn)透明圈，說明該致病菌對抗生素B________；含C的濾紙片周圍的透明圈比含A的小，說明________________________；含D的濾紙片周圍的透明圈也比含A的小，且透明圈中出現(xiàn)了一個菌落，在排除雜菌污染的情況下，此菌落很可能是抗生素D的________。(4)根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，為達(dá)到抗菌目的，最好應(yīng)選用抗生素________。返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)劃線稀釋涂布(或涂布)(2)涂布(3)敏感不敏感該致病菌對C的敏感性比對A的弱耐藥菌(4)A返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[解析](1)將微生物接種到固體培養(yǎng)基的最常用方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法，二者都可以從樣本中純化細(xì)菌，從而獲得致病菌的單菌落。(2)如果要繼續(xù)培養(yǎng)該細(xì)菌，那么可將已稀釋的菌液涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度較低的情況下，可將細(xì)菌布滿平板，在稀釋度足夠高時，則可形成單個菌落。(3)將含有不同抗生素的濾紙片置于平板的不同位置，如果細(xì)菌對該抗生素敏感，那么濾紙片周圍的細(xì)菌將被殺死從而在濾紙片周圍形成透明圈，透明圈越大，說明細(xì)菌對抗生素越敏感，因此，該致病菌對抗生素A敏感，對抗生素B不敏感，對抗生素C的敏感性比對抗生素A的弱。在排返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐除雜菌污染的情況下，如果在透明圈中出現(xiàn)一個菌落，那么說明出現(xiàn)了耐藥菌，該耐藥菌不斷繁殖形成了菌落。(4)由于含抗生素C、D的濾紙片周圍的透明圈均比含抗生素A的小，而含抗生素B的濾紙片周圍沒有透明圈，故判斷抗生素A的抗菌效果最好。返回目錄高考真題聚焦專題十五生物技術(shù)實(shí)踐返回目錄高考真題聚焦

考點(diǎn)一微生物的培養(yǎng)、分離和計數(shù)1．培養(yǎng)基的種類、特點(diǎn)和用途返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐2.方法與原理返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐例1

微生物的分離、培養(yǎng)和計數(shù)是現(xiàn)代生物工程應(yīng)用中的重要環(huán)節(jié)。如圖7－15－1為大腸桿菌分離和培養(yǎng)過程中部分操作示意圖。請分析回答下列問題：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)實(shí)驗(yàn)過程中對培養(yǎng)基、培養(yǎng)皿、實(shí)驗(yàn)操作者的雙手所采用的滅菌或消毒方法依次是________、________、________。(2)培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是________________________________________________________________________。(3)圖示是利用________法進(jìn)行微生物接種，把聚集的菌種逐步________分散到培養(yǎng)基的表面。在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進(jìn)行劃線的原因是________________________________________________________________________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(4)關(guān)于圖示的操作方法和結(jié)果，敘述正確的是()A．操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌B．劃線操作須在火焰上進(jìn)行C．在5區(qū)域中才可以找到所需菌落D．在1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌(5)若要培養(yǎng)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌，制備選擇培養(yǎng)基時在基本培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，注意________________和________________，其目的是________________________________________________________________________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)高壓蒸汽滅菌干熱滅菌化學(xué)消毒(2)將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生(3)平板劃線稀釋以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種(4)D(5)添加高濃度蔗糖(葡萄糖)調(diào)低pH提供高糖和酸性的篩選環(huán)境[解析](1)實(shí)驗(yàn)過程中對培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌；培養(yǎng)皿進(jìn)行干熱滅菌，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手進(jìn)行化學(xué)消毒。(2)在培養(yǎng)微生物時，接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置一段時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐落產(chǎn)生。(3)題圖所示的接種方法為平板劃線法，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面；在灼燒接種環(huán)之后要等其冷卻后再進(jìn)行劃線，以避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。(4)在利用平板劃線接種微生物的實(shí)驗(yàn)中，在圖示的1、2、3、4、5區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌。(5)在基本培養(yǎng)基上添加高濃度蔗糖(葡萄糖)和調(diào)低pH，可培養(yǎng)出具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[點(diǎn)評]①間接計數(shù)法中最常用的是稀釋涂布平板計數(shù)法，它應(yīng)用于統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目，采用的原理是當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落來源于樣品稀釋液中的一個活菌，通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。②操作方法需要設(shè)置重復(fù)組，以增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力和準(zhǔn)確性。將待測樣品經(jīng)過一系列的稀釋，選擇三個稀釋度的菌液均勻涂布在平板上，然后培養(yǎng)。需要注意的是為了實(shí)驗(yàn)結(jié)果接近真實(shí)值，可將同一稀釋度的菌液涂布到3個或3個以上的平板上，經(jīng)培養(yǎng)，計算出菌落的平均數(shù)。③實(shí)驗(yàn)要遵循對照原則。判斷培養(yǎng)基中是否有雜菌污染，將未接種的培養(yǎng)基同時進(jìn)行培養(yǎng)。判斷選擇培養(yǎng)基是否具有篩選作用，對照培養(yǎng)基返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐接種后培養(yǎng)并觀察菌落數(shù)目。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐變式1

尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，某同學(xué)試圖從土壤中篩選出能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)，下表是該同學(xué)配制的培養(yǎng)基成分：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)該培養(yǎng)基中主要營養(yǎng)物質(zhì)包括________________________________________________________________________。從功能上看，該培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。(2)在生物的培養(yǎng)中，一般要對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌，其中“高壓”是為了________________________________________________________________________。(3)若培養(yǎng)從土壤中分離出來的目的菌，該培養(yǎng)基成分應(yīng)如何調(diào)整？____________________，依據(jù)是____________________________。該目的菌同化作用類型是________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(4)該同學(xué)在純化土壤中的目的菌時，最常用的接種方法是______________________________________。在純化土壤中該目的菌時，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，最可能的原因是________________________________________________________________________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)氮源、碳源、無機(jī)鹽和水選擇(2)殺死培養(yǎng)基中的細(xì)菌芽孢(3)將(NH4)2SO4換成尿素要篩選出降解尿素的細(xì)菌，只能是尿素作為唯一的氮源異養(yǎng)型(4)稀釋涂布平板法和平板劃線法菌液濃度過高(或培養(yǎng)過程被雜菌污染或用接種針劃下一區(qū)域前接種針沒有滅菌導(dǎo)致菌液沒有稀釋開，言之有理即可)[解析](1)微生物培養(yǎng)基的配方中一般包括碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等。從培養(yǎng)目的看，本培養(yǎng)基要促進(jìn)能分解尿素的微生物生長，抑制其他微生物生長，屬于選擇培養(yǎng)基。(2)對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌的方法是“高壓蒸汽滅菌”，“高返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐壓”是為了殺死培養(yǎng)基中所有的微生物，包括細(xì)菌的芽孢，達(dá)到徹底滅菌的目的。(3)此培養(yǎng)基應(yīng)以尿素為唯一氮源，可以達(dá)到抑制或阻止不能利用此氮源的微生物生長的目的。該目的菌使用的碳源是葡萄糖，其同化作用的類型是異養(yǎng)型。(4)純化目的菌常用的方法是稀釋涂布平板法和平板劃線法。稀釋涂布平板法的稀釋倍數(shù)一般以平板上菌落數(shù)在30～300個為宜。平板劃線時，每次劃線前均要灼燒接種環(huán)，除第一次灼燒是為了滅菌外，以后每次劃線前的灼燒均是為了達(dá)到不斷稀釋菌液的目的。如果發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片，可能的原因是菌液稀釋倍數(shù)不夠或培養(yǎng)過程被雜菌污染。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[教師備用習(xí)題]第1題主要考查土壤微生物的分解作用，作為考點(diǎn)的補(bǔ)充。1．下表是探究落葉在土壤微生物的作用下是否發(fā)生腐爛(分解)的設(shè)計思路：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐請回答下列問題：(1)對實(shí)驗(yàn)組土壤應(yīng)該進(jìn)行________處理，盡可能排除________的作用。(2)探究土壤微生物中是否含有分解纖維素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)過程中，應(yīng)將土壤浸出液接種在以________為唯一碳源的培養(yǎng)基上，這樣的培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基。(3)純化菌種時，為了得到單菌落，常采用的接種方式有兩種，即____________和______________。并用________(試劑)加以鑒別。當(dāng)形成菌落以后可以根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生________來篩選纖維素分解菌。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[答案](1)滅菌土壤微生物(2)纖維素選擇(3)平板劃線法稀釋涂布平板法剛果紅透明圈[解析](1)土壤需進(jìn)行滅菌，排除土壤微生物對實(shí)驗(yàn)的干擾。(2)分解纖維素的細(xì)菌能夠利用纖維素作為碳源生長，而其他微生物則不能，應(yīng)將土壤浸出液接種在以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基上，該培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。(3)純化菌種常用的接種方式是平板劃線法和稀釋涂布平板法?？梢杂脛偣t鑒別分解纖維素的細(xì)菌，根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生透明圈判斷。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐考點(diǎn)二微生物的發(fā)酵及應(yīng)用1．方法與原理返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐2.果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌種及控制條件的比較返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐例2

圖7－15－2是制作果酒和果醋的流程和某同學(xué)設(shè)計的相關(guān)發(fā)酵裝置。請據(jù)圖回答下列問題：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)為提高葡萄出汁率并使果汁澄清，可以加入果膠酶，使用酶時為節(jié)省成本，除控制好pH、溫度等環(huán)境條件外，還應(yīng)掌握好________。(2)沖洗后榨汁前還要__________。(3)利用圖乙所示裝置發(fā)酵，將葡萄汁加入發(fā)酵瓶內(nèi)要注意________________，目的是________________，生產(chǎn)果酒的整個過程中如何控制充氣口？________________。為提高酒精產(chǎn)量，可在葡萄汁中加入葡萄糖，但濃度不宜過高，原因是________________________________________________________________________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(4)制好的果酒一段時間后變酸了，原因可能是____________將酒精氧化為乙醛后再轉(zhuǎn)化成了醋酸，醋酸發(fā)酵的適宜溫度為________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)酶用量(2)除去枝梗(3)留約1/3空間防止發(fā)酵液溢出先打開一段時間后關(guān)閉濃度過高會導(dǎo)致酵母菌失水死亡(4)醋酸菌30～35℃[解析](1)影響酶活性的因素主要是pH、溫度，為節(jié)省成本，還應(yīng)掌握好酶用量。(2)沖洗時為防止葡萄破損后微生物從破口處進(jìn)去，應(yīng)連同枝梗一起沖洗，榨汁前再除去枝梗。(3)將葡萄汁加入發(fā)酵瓶內(nèi)要注意留約1/3空間，以防止發(fā)酵液溢出。生產(chǎn)果酒時先通入一段時間空氣讓酵母菌有氧呼吸用于自身繁殖，而后關(guān)閉讓其無氧呼吸進(jìn)行酒精發(fā)酵。因細(xì)胞呼吸的底物是葡萄糖，但葡萄糖濃度過高時會返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐導(dǎo)致酵母菌失水死亡。(4)果酒變酸是醋酸菌活動的結(jié)果，醋酸菌活動的最適溫度是30～35℃。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[點(diǎn)評]設(shè)計發(fā)酵裝置需要注意的問題：(1)在酒精發(fā)酵過程中，每隔一段時間擰松瓶蓋或打開排氣口，其原因是在發(fā)酵過程中會產(chǎn)生CO2，防止瓶內(nèi)氣壓過高引起爆裂。(2)在醋酸發(fā)酵過程中，需要注意的是要持續(xù)向發(fā)酵液中補(bǔ)充氧氣。(3)在裝置中，①充氣口的作用是在醋酸發(fā)酵中補(bǔ)充氧氣；②排氣口的作用是在發(fā)酵中排出CO2或殘余氣體；③出料口的作用是便于取樣檢查和放出發(fā)酵液；④排氣口膠管長而彎曲的作用是防止空氣中雜菌感染。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐變式2

利用不同微生物的發(fā)酵作用來制作果酒、果醋、腐乳和酸奶等食品的歷史悠久，遍布民間，一般稱作傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)。根據(jù)傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的相關(guān)知識，回答以下問題：(1)果酒和果醋的制作：①酵母菌是釀制葡萄酒不可缺少的微生物，如果要獲得優(yōu)質(zhì)野生酵母菌最好在葡萄園的土壤中采樣，利用酵母菌發(fā)酵制作葡萄酒要控制的溫度為________。果醋發(fā)酵利用的微生物是________。接種時升高溫度到________，且需要通氣。②果酒發(fā)酵裝置內(nèi)要留1/3空間，在發(fā)酵期的用途是初期提供有氧條件促進(jìn)酵母菌的大量繁殖時返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐________________________________________________________________________。③喝剩的葡萄酒放置一段時間后變酸的原因是(用化學(xué)反應(yīng)式表示)________________________________________________________________________。(2)腐乳的制作：①腐乳制作有多種微生物參與，其中起主要作用的是______________。②豆腐發(fā)酵主要利用微生物產(chǎn)生的蛋白酶和脂肪酶等，通過發(fā)酵，豆腐中營養(yǎng)物質(zhì)的種類________(填“減少”或返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐“增多”)，且更易于消化和吸收。(3)乳酸發(fā)酵：①含有抗生素的牛奶不能發(fā)酵成酸奶，原因是________________________________________________________________________________________________________________________________________________。②測定泡菜中亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生________反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成________染料。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)①18～25℃醋酸菌30～35℃②防止發(fā)酵液溢出③C2H5OH＋O2―→CH3COOH＋H2O＋能量(2)①毛霉②增多(3)①抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長②重氮化玫瑰紅色[解析](1)①酵母菌生活最佳溫度為18～25℃，果醋發(fā)酵利用的是醋酸菌，其生長較適溫度為30～35℃。②果酒發(fā)酵裝置內(nèi)要留1/3空間，是為防止初期酵母菌大量繁殖時發(fā)酵液溢出。③喝剩的葡萄酒放置一段時間后變酸的原因是產(chǎn)生了醋酸。(2)腐乳的制作有多種微生物參與，其中起主要作用的是毛霉，通過發(fā)酵，豆腐中蛋白質(zhì)等大分子營養(yǎng)物質(zhì)分解為返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐各種小分子有機(jī)物，故種類增多。(3)①牛奶能發(fā)酵成酸奶，但含有抗生素的不能，原因是抗生素能夠殺死或抑制乳酸菌的生長。②測定泡菜中亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色染料。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐考點(diǎn)三植物組織培養(yǎng)技術(shù)1．菊花的組織培養(yǎng)與月季的花藥培養(yǎng)的比較返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐2.植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐3．無土栽培技術(shù)、植物組織培養(yǎng)技術(shù)和微生物的培養(yǎng)技術(shù)的區(qū)別上述無土栽培技術(shù)的操作并不需要保證無菌的條件，而其他兩種技術(shù)都要求嚴(yán)格的無菌條件。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐例3

如圖7－15－3是花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑，回答下列相關(guān)問題：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩種途徑，一種是花粉通過A________階段發(fā)育成植株，另一種是花粉在誘導(dǎo)培養(yǎng)基上先形成B愈傷組織，再將其誘導(dǎo)分化成植株。這兩種途徑并沒有絕對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中________________________。(2)選擇花藥時應(yīng)選擇______________________________________________期的花藥，一般要通過________來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時期的方法有焙花青—鉻礬法和________。(3)材料消毒過程中用到的試劑有70%的酒精、___________________________、無菌水。

返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(4)滅菌后的花蕾要在________條件下接種到培養(yǎng)基上。培養(yǎng)過程中不需要光照，同時要控制好溫度。

(5)在花藥培養(yǎng)中，常常會出現(xiàn)__________的變化，因此需要對培養(yǎng)出來的植株做進(jìn)一步的鑒定和篩選。

(6)誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低，受多種因素影響，其中主要的影響因素是______________________與________________________。提高誘導(dǎo)成功率的另一個重要因素是________________________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)胚狀體激素的種類及其濃度配比(2)初花鏡檢醋酸洋紅法(3)0.1%的氯化汞溶液(4)無菌(5)染色體倍性(6)材料的選擇培養(yǎng)基的組成選擇合適的花粉發(fā)育時期[解析](1)通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株有兩種途徑，一種是花粉通過胚狀體發(fā)育成植株；另一種是形成愈傷組織，二者沒有絕對的界限，取決于激素的種類及其濃度配比。(2)選擇花藥的時期為初花期；通過鏡檢來確定花藥。確定花粉發(fā)育時期的方法有焙花青—鉻礬法和醋酸洋紅法。(3)消毒用0.1%的氯化汞溶液和70%的酒精。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(4)接種及培養(yǎng)條件要求無菌。(5)花藥培養(yǎng)可能會出現(xiàn)染色體倍性的變化，所以要鑒定。(6)誘導(dǎo)花粉植株能否成功及誘導(dǎo)成功率的高低，受多種因素影響，主要有材料的選擇和培養(yǎng)基的組成，提高成功的另一個因素是選擇合適的花粉發(fā)育時期。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[點(diǎn)評]花藥離體培養(yǎng)與花粉離體培養(yǎng)的差異：(1)培養(yǎng)概念的差異：花藥離體培養(yǎng)是把花粉發(fā)育到一定階段的花藥接種到培養(yǎng)基上，從而改變花藥內(nèi)花粉粒的發(fā)育程序，使其分裂形成細(xì)胞團(tuán)，進(jìn)而分化成胚狀體，形成愈傷組織，由愈傷組織再分化成植株?；ǚ垭x體培養(yǎng)是指把花粉從花藥中分離出來，以單個花粉粒作為外植體進(jìn)行離體培養(yǎng)的技術(shù)，由于花粉已是單倍體細(xì)胞，誘發(fā)它經(jīng)愈傷組織或胚狀體發(fā)育而成的植株都是單倍體，且不受花藥的藥隔、藥壁、花絲等體細(xì)胞的干擾。(2)培養(yǎng)層次的差異：花藥離體培養(yǎng)屬器官培養(yǎng)，花粉離體培養(yǎng)屬細(xì)胞培養(yǎng)，但花藥離體培養(yǎng)和花粉離體培養(yǎng)的目的一樣，都是要誘導(dǎo)花粉細(xì)胞發(fā)育成單倍體細(xì)胞，最后發(fā)返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐育成單倍體植株。(3)培養(yǎng)過程的差異：花藥離體培養(yǎng)相對較容易，技術(shù)比較成熟，但最后需要對培養(yǎng)成的植株進(jìn)行染色體倍數(shù)檢測；花粉離體培養(yǎng)盡管不受花藥壁、藥隔等體細(xì)胞的干擾，但這種特殊單倍體細(xì)胞的培養(yǎng)技術(shù)難度較大，目前只在少數(shù)植物上獲得成功。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐變式3

如圖7－15－4表示菊花的嫩枝和月季的花藥的離體培養(yǎng)過程，請據(jù)圖回答下面的問題：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)對菊花來說，要選取生長旺盛的嫩枝來進(jìn)行組織培養(yǎng)，其原因是________________________________________________________________________；對月季來說，適宜花粉培養(yǎng)的時期是花粉處于________期。為確定該花粉是否處于該時期，最常用的方法是________________。(2)在培養(yǎng)嫩枝組織和花粉的培養(yǎng)基中都要加入一定的植物激素，常用的植物激素有________________________________________________________________________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(3)兩種植物組織培養(yǎng)都需要接種，在進(jìn)行接種時應(yīng)注意________。①接種室要消毒②只要戴口罩，操作時便可說話③外植體可預(yù)先用體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精浸泡，取出用無菌水沖洗后，再用0.1%的氯化汞溶液消毒，并用無菌水沖洗干凈④接種操作要在酒精燈火焰旁進(jìn)行⑤接種完畢應(yīng)立即蓋好瓶蓋A．①②③④⑤B．①②③④C．①③④⑤D．②③④⑤(4)月季的花藥培養(yǎng)與菊花的嫩枝組織培養(yǎng)不同，從植物返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐產(chǎn)生的途徑來說，花粉植株產(chǎn)生的途徑除了圖中所示外，還可以通過________階段發(fā)育而來，這兩種發(fā)育途徑的差別主要取決于________________________________________________________________________。(5)圖中的B過程都需要________，因?yàn)橛鷤M織形成幼小植物后，植物需要葉綠素進(jìn)行光合作用。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化單核醋酸洋紅法(2)生長素和細(xì)胞分裂素(3)C

(4)胚狀體培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比(5)光照[解析](1)生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化，故進(jìn)行組織培養(yǎng)一般選用生長旺盛的嫩枝；單核期花粉適宜進(jìn)行培養(yǎng)，該時期可用醋酸洋紅法檢驗(yàn)其核內(nèi)染色體來判斷。

(2)細(xì)胞分裂素和生長素可誘導(dǎo)脫分化和再分化，故植物組織培養(yǎng)時常用。(3)兩種植物組織培養(yǎng)都需要接種，在進(jìn)行接種時要特別注意防止污染，應(yīng)做到：接種室要消毒，外植體消毒，實(shí)返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐驗(yàn)過程中防止污染，完成后防污。(4)花粉植株產(chǎn)生的途徑可通過胚狀體分化得到，也可通過愈傷組織再分化得到，這取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。(5)愈傷組織之后的發(fā)育均需光照。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[教師備用習(xí)題]第2題考查植物組織培養(yǎng)技術(shù)，作為考點(diǎn)的補(bǔ)充。2．辣椒素廣泛用于食品保健、醫(yī)藥工業(yè)等領(lǐng)域。下圖表示辣椒試管苗及辣椒素的獲得途徑，請回答：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)圖中A表示________________，②過程叫________。(2)對培養(yǎng)基徹底滅菌時，應(yīng)采取的滅菌方法是____________。(3)若通過途徑④提取辣椒素，培養(yǎng)基中生長素與細(xì)胞分裂素用量比值及使用順序是_______________________________________________。(4)若通過途徑③用萃取法提取辣椒素，主要步驟是：粉碎、干燥、萃取、________和________。(5)萃取加熱過程中，要求溫度高、時間長，原因是________________________；且需安裝冷凝回流裝置，其目的是_______________________________________________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[答案](1)外植體(或離體的植物組織或細(xì)胞)再分化(2)高壓蒸汽滅菌(3)比例適中，先使用生長素，后使用細(xì)胞分裂素(4)過濾濃縮(5)可使辣椒素充分溶解，萃取效果好防止有機(jī)溶劑的揮發(fā)[解析](1)應(yīng)用外植體或離體的植物組織或細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)；其過程為離體的組織或細(xì)胞脫分化成愈傷組織后再分化成胚狀體。(2)操作時要對培養(yǎng)基進(jìn)行高溫蒸汽滅菌，對所用的各種器具都要進(jìn)行嚴(yán)格滅菌消毒。(3)要獲得更多辣椒素，即要讓細(xì)胞大量增殖而不分化，返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐故應(yīng)先加生長素后加細(xì)胞分裂素，且兩種激素比例要適中。(4)從植物體中提取各種植物有效成分要根據(jù)提取物質(zhì)的成分確定其提取方法，辣椒素提取的方法類似胡蘿卜素，主要步驟有粉碎、干燥、萃取、過濾、濃縮五個步驟。(5)萃取時要長時間高溫加熱，能使提取物充分溶解，萃取效果好，同時為了避免萃取劑(主要是有機(jī)溶劑)揮發(fā)，應(yīng)安裝冷凝回流裝置。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐考點(diǎn)四酶的應(yīng)用1．方法與原理返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐

2.直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞的比較返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐3.影響酶活性的因素、酶的用量及應(yīng)用實(shí)驗(yàn)探究時注意的問題(1)實(shí)驗(yàn)設(shè)計時要遵循單一變量和對照兩大原則，嚴(yán)格控制無關(guān)變量。(2)探究不同溫度(或pH)對酶活性的影響時，以溫度(或pH)作為自變量，通常通過設(shè)置合理的梯度來確定最適值。最適值是通過比較相同時間內(nèi)獲得的產(chǎn)物量或反應(yīng)效果來確定的。(3)探究最適溫度時，pH為無關(guān)變量；探究最適pH時，溫度最好為最適溫度。(4)探究果膠酶的最適用量時，所測出的最適用量是指在本實(shí)驗(yàn)的溫度、pH等條件下測出的果膠酶用量，因而果膠返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐酶的最適用量應(yīng)標(biāo)明溫度和pH。(5)探討加酶洗衣粉的最適溫度要根據(jù)生活中的實(shí)際情況，合理設(shè)置溫度梯度。(6)在使用加酶洗衣粉時不但要考慮最佳洗滌效果條件，還要考慮到酶的專一性和洗滌成本的問題。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐例4

低溫蛋白酶是海洋嗜冷細(xì)菌分泌的酶類，最適溫度在20℃左右，作為洗衣粉添加劑可在較低的溫度下達(dá)到理想的洗滌效果。圖7－15－5為分離可分泌低溫蛋白酶的某種嗜冷菌的操作步驟，據(jù)圖回答問題：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐

(1)分裝前，對培養(yǎng)基要進(jìn)行________操作。為避免雜菌污染，要及時進(jìn)行____________操作。(2)將擴(kuò)大培養(yǎng)后的深海微生物用____________法接種到含酪蛋白的固體培養(yǎng)基表面，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間，挑出形成透明圈的單一菌落，即為初選出的嗜冷菌。從嗜冷菌分泌的蛋白質(zhì)中分離出低溫蛋白酶的最常用的方法是________________。(3)為進(jìn)一步檢測分離出的嗜冷蛋白酶的最適溫度，將該菌按如圖所示分5組分別置于________中進(jìn)行培養(yǎng)，________________________組所對應(yīng)的溫度為最適溫度。(4)為提高酶的利用率，可以采用________技術(shù)，常用的方法有________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)調(diào)pH高壓蒸汽滅菌(2)稀釋涂布平板(或平板劃線)電泳法(3)恒溫箱透明圈與菌落直徑比值最大(4)固定化包埋法(或物理吸附法等)[解析](1)分裝前，對培養(yǎng)基要進(jìn)行調(diào)pH操作。為避免雜菌污染，要及時進(jìn)行高壓蒸汽滅菌操作。(2)可用稀釋涂布平板或平板劃線法將待選微生物接種到固體培養(yǎng)基表面。分離出酶的最常用的方法是電泳法。(3)為進(jìn)一步檢測分離出的嗜冷蛋白酶的最適溫度，應(yīng)將該菌分5組，分別置于恒溫箱中進(jìn)行培養(yǎng)，透明圈與菌落直徑比值最大組所對應(yīng)的溫度為最適溫度。(4)固定化技術(shù)可提高酶的利用率，常用的固定化方法有返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐包埋法或物理吸附法。[點(diǎn)評]固定化酶和固定化細(xì)胞的原理是利用物理、化學(xué)方法，將酶或微生物細(xì)胞與固體的水不溶性支持物(或稱載體)相結(jié)合，使其既不溶于水，又能保持酶和微生物的活性。它們在固定狀態(tài)下既可作用于底物，又具有與離子交換樹脂相似的特點(diǎn)，而且還具有一定的機(jī)械強(qiáng)度，便于操作。由于酶和微生物細(xì)胞被固定在載體上，因而它們在反應(yīng)結(jié)束后，還能夠再次使用，并在儲存較長時間后依然保持酶和微生物的活性不變。微生物細(xì)胞固定化常用的方法有三大類：①物理吸附法；②包埋法；③化學(xué)結(jié)合法。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐變式4

有研究者從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，其篩選過程如圖7－15－6所示。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)從用途上來說，Ⅰ號培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基，僅以淀粉作為________源；從物理狀態(tài)上來說，Ⅱ號培養(yǎng)基屬于固體培養(yǎng)基，配制時一般加入________作為凝固劑。(2)Ⅰ、Ⅱ號培養(yǎng)基配制和滅菌時，滅菌與調(diào)節(jié)pH的先后順序是____________________；一般對配制的培養(yǎng)基采用________法滅菌。(3)部分嗜熱菌在Ⅰ號培養(yǎng)基上生長時可釋放________分解培養(yǎng)基中的淀粉，在菌落周圍形成透明圈；應(yīng)挑出透明圈________(填“大”或“小”)的菌落，接種到Ⅱ號培養(yǎng)基。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(4)若對樣品中的嗜熱菌進(jìn)行計數(shù)，采用的接種方法是________，若要長期保存嗜熱菌，應(yīng)采用__________的方法。[答案](1)選擇碳瓊脂(2)先調(diào)節(jié)pH，后滅菌高壓蒸汽滅菌(3)淀粉酶大(4)稀釋涂布平板法甘油管藏[解析](1)從熱泉中篩選了高效產(chǎn)生高溫淀粉酶的嗜熱菌，且僅以淀粉作為碳源，故Ⅰ號培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基一般選瓊脂為凝固劑。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(2)配制培養(yǎng)基時先調(diào)節(jié)pH，再滅菌，培養(yǎng)基的滅菌方法為高壓蒸汽滅菌法。(3)能分解淀粉的生物催化劑是淀粉酶，透明圈大的菌落分解淀粉能力強(qiáng)。(4)微生物計數(shù)一般選擇稀釋涂布平板法接種，長期保存應(yīng)采用甘油管藏法。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐考點(diǎn)五不同物質(zhì)的提取分離方法和原理1．方法與原理返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐2.方法與原理返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐3.DNA和血紅蛋白的提取和分離的實(shí)驗(yàn)流程比較返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐例5

橘皮中提取的橘皮油是食品、化妝品和香水配料的優(yōu)質(zhì)原料，具有很高的經(jīng)濟(jì)價值。請回答下列有關(guān)橘皮精油提取的問題：(1)為了提高出油率，需要將柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡。用石灰水浸泡的目的是________________________________________________________________________。(2)壓榨液中含有橘皮精油和大量的水分，還有一些糊狀殘渣等雜質(zhì)?？梢韵扔胈_______過濾除去固體物和殘渣，然后______進(jìn)一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物，再用________將上層的橘皮精油分離出來。此時的橘皮精油還含有少量的水和果蠟，需要在較低溫度下靜置5～7天，使返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐雜質(zhì)沉淀，用吸管吸出上層澄清橘皮精油，其余部分通過________過濾，濾液與吸出的上層橘油合并，成為最終的橘皮精油。(3)請描述提取出的橘皮精油的特點(diǎn)：______________、____________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[答案](1)防止橘皮壓榨時滑脫，提高出油率(2)普通布袋離心分液漏斗(或吸管)濾紙(3)無色透明有誘人的橘香味[解析](1)石灰水浸泡的目的是防止橘皮壓榨時滑脫，提高出油率。(2)壓榨液中含有橘皮精油和大量的水分，還有一些糊狀殘渣等雜質(zhì)?？梢韵扔闷胀ú即^濾除去固體物和殘渣，然后離心進(jìn)一步除去質(zhì)量較小的殘留固體物，再用分液漏斗或吸管將上層的橘皮精油分離出來。此時的橘皮精油還含有少量的水和果蠟，需要在較低溫度下靜置5～7天，使返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐雜質(zhì)沉淀，用吸管吸出上層澄清橘皮精油，其余部分通過濾紙過濾，濾液與吸出的上層橘油合并，成為最終的橘皮精油。(3)橘皮精油的特點(diǎn)是無色透明、有誘人的橘香味。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[點(diǎn)評]提取橘皮精油實(shí)驗(yàn)需要注意的事項(xiàng)：(1)實(shí)驗(yàn)中要注意避免石灰水與皮膚接觸。(2)為了能將橘皮均勻地浸泡在水中，橘皮可以放入家用榨汁機(jī)粉碎，但要注意安全。(3)可以將未經(jīng)浸泡的樣品作為對照，探究浸泡時間對出油率的影響。(4)兩次過濾：第一次用布袋，第二次用濾紙。(5)要處理好溫度(5～10℃)和時間(5～7d)。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐變式5

請回答下列與植物有效成分的提取相關(guān)的問題：(1)適合玫瑰精油提取的常用方法為____________法；當(dāng)原料量等其他條件一定時，提取量隨蒸餾時間的變化趨勢是______________________。(2)提取玫瑰精油的過程中進(jìn)行冷卻的原因是________________________。(3)橘皮精油的提取原料是橘皮，但橘皮易焦糊，宜采用________法提取橘皮精油，其中將柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡的目的是________________________________________________________________________。

返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(4)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用的是________法；一般情況下，提取胡蘿卜素時，提取效率與原料顆粒的含水量成________比。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(5)將提取的胡蘿卜素粗品通過紙層析進(jìn)行鑒定，如圖7－15－7為鑒定結(jié)果示意圖，則甲、乙中屬于胡蘿卜素層析帶的是________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)水蒸氣蒸餾隨蒸餾時間的延長而增加，一定時間后不再增加(2)防止玫瑰精油隨水蒸氣揮發(fā)而流失(3)壓榨防止橘皮壓榨時滑脫，提高出油率(4)萃取反(5)甲[解析](1)提取玫瑰精油常用水蒸氣蒸餾法，當(dāng)原料量等其他條件一定時，提取量隨蒸餾時間的延長而增加，一定時間后不再增加。(2)提取玫瑰精油的過程中冷卻是防止玫瑰精油隨水蒸氣揮發(fā)而流失。(3)提取橘皮精油時因原料易焦糊，通常采用壓榨法。將柑橘皮干燥去水，并用石灰水浸泡的目的是防止橘皮壓榨返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐時滑脫，提高出油率。(4)從胡蘿卜中提取胡蘿卜素常用萃取法，一般情況下，提取效率與原料顆粒的含水量成反比。(5)胡蘿卜素粗品中含雜質(zhì)色素，題圖中屬于胡蘿卜素層析帶的是甲。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[教師備用習(xí)題]第3題考查與PCR擴(kuò)增有關(guān)的問題，作為考點(diǎn)的補(bǔ)充。3．在進(jìn)行DNA親子鑒定時需大量的DNA。PCR技術(shù)(多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))可以使樣品DNA擴(kuò)增，獲得大量DNA克隆分子。該技術(shù)的原理是利用DNA的半保留復(fù)制，在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制(如圖，圖中黑色長方形是引物)?？稍诤芏痰臅r間內(nèi)將DNA擴(kuò)增幾百萬倍甚至幾十億倍，使實(shí)驗(yàn)室所需的遺傳物質(zhì)不再受限于活的生物體。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)圖中的變性、延伸分別是指________________、________________________________________。(2)假設(shè)PCR反應(yīng)中的DNA模板為P，第一輪循環(huán)的產(chǎn)物2個子代DNA為N1，第二輪的產(chǎn)物4個子代DNA為N2，N1、N2中分別含有模板DNA單鏈的DNA分別有________個、________個。若繼續(xù)循環(huán)，該DNA片段經(jīng)過50次循環(huán)后能形成________個DNA片段。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(3)某樣品DNA分子中共含3000個堿基對，堿基數(shù)量滿足：若經(jīng)5次循環(huán)，至少需要向試管中加入________個腺嘌呤脫氧核苷酸。(不考慮引物所對應(yīng)的片段)(4)若下圖為第一輪循環(huán)產(chǎn)生的產(chǎn)物。請繪出以a鏈和b鏈為模板經(jīng)PCR擴(kuò)增的產(chǎn)物。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[答案](1)模板DNA雙鏈解旋形成單鏈在DNA聚合(Taq)酶的作用下，原料脫氧核苷酸聚合形成新的DNA鏈(2)22250(3)62000(4)如圖(a、b鏈標(biāo)注正確，每個引物的位置正確)返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[解析](1)PCR技術(shù)中的變性是指模板DNA雙鏈解旋形成單鏈；延伸是指在DNA聚合(Taq)酶的作用下，原料脫氧核苷酸聚合形成新的DNA鏈。(2)DNA具有半保留復(fù)制的特點(diǎn)，在PCR擴(kuò)增過程中，自始至終每代都有原來的2個模板單鏈存在。經(jīng)過50次循環(huán)后能形成250個DNA片段。(3)一個DNA分子中含有3000×2×1/3＝2000個A，經(jīng)5次循環(huán)，至少需要向試管中加入腺嘌呤脫氧核苷酸：2000×(25－1)＝62000個。(4)a、b鏈為模板擴(kuò)增出的DNA分子與題干圖形相同。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[點(diǎn)評]PCR技術(shù)的兩點(diǎn)注意事項(xiàng)：(1)PCR在開始時會進(jìn)行一次預(yù)變性，時間比一般的變性長，加熱時間大約是5分鐘，一般的變性時間則只需要半分鐘(30秒)，預(yù)變性的主要目的是增加大分子模板DNA徹底變性的機(jī)會。(2)測定擴(kuò)增后的DNA含量可以選擇的方法有二苯胺法、紫外燈照射法、電泳法等。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十五生物技術(shù)實(shí)踐易錯點(diǎn)對一些生物技術(shù)中名詞術(shù)語混淆不清例圖7－15－8中甲表示酵母菌、醋酸菌和乳酸菌在培養(yǎng)基中的生長情況，圖乙表示這三種菌的增殖速度與氧濃度之間的關(guān)系，圖丙是果酒制果醋的發(fā)酵裝置，請據(jù)圖作答：返回目錄易錯易混歸納專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)乙中a、b、c三條曲線依次表示甲中________號試管中微生物在不同氧氣濃度中的增殖速度。(2)從含有酵母菌、醋酸菌、藍(lán)藻的培養(yǎng)液中分離出酵母菌，最簡單的培養(yǎng)方法是在__________條件下進(jìn)行培養(yǎng)。若想對初步篩選得到的目的菌進(jìn)行純化并計數(shù)，可采用的接種方法是______________。分離得到酵母菌后，如果要擴(kuò)大培養(yǎng)，一般應(yīng)選擇在________培養(yǎng)基(從培養(yǎng)基物理狀態(tài))中進(jìn)行培養(yǎng)。(3)丙中醋酸發(fā)酵在________瓶中進(jìn)行，若B瓶中流出液明顯呈酸性，則說明流出液中有________生成。(4)如果將該裝置改為酒精的發(fā)酵裝置，需要修改的地方是________________________。請寫出果酒制作的原理返回目錄易錯易混歸納專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(用反應(yīng)式表示)：________________________________________________________________________。[嘗試解答](1)________(2)________________________________(3)________________(4)__________________________________________________________________返回目錄易錯易混歸納專題十五生物技術(shù)實(shí)踐(1)3、2、1(2)無光、無氧稀釋涂布平板法液體(3)B醋酸(4)不需要通入空氣C6H12O6―→2C2H5OH＋2CO2(＋能量)[解析](1)1、2、3號試管中的微生物分別為好氧微生物、兼性厭氧微生物和厭氧微生物，因此題圖乙中a、b、c三條曲線依次表示題圖甲中3、2、1號試管中微生物在不同氧氣濃度中的增殖速度。(2)由于酵母菌是兼性厭氧異養(yǎng)型生物，醋酸菌為好氧異養(yǎng)型生物，藍(lán)藻為自養(yǎng)好氧型生物，因此要從含有酵母菌、醋酸菌、藍(lán)藻的培養(yǎng)液中分離出酵母菌，最簡單的培養(yǎng)方法是在無光、無氧條件下進(jìn)行培養(yǎng)。如要使分離出的返回目錄易錯易混歸納專題十五生物技術(shù)實(shí)踐酵母菌得到擴(kuò)大培養(yǎng)，一般應(yīng)選擇在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。(3)由于進(jìn)行醋酸發(fā)酵的醋酸桿菌屬于好氧細(xì)菌，因此培養(yǎng)瓶要能確保氧氣得到不斷供應(yīng)，因此其發(fā)酵必須在B瓶中完成。醋酸桿菌的發(fā)酵產(chǎn)物是醋酸，呈酸性。(4)用于進(jìn)行酒精發(fā)酵的微生物是酵母菌，酵母菌是兼性厭氧型微生物，酵母菌只有在無氧的條件下才能進(jìn)行酒精發(fā)酵，因此，進(jìn)行酒精發(fā)酵時，不要通入空氣，在通入空氣的條件下酒精發(fā)酵會受到抑制。酒精制作的原理(或反應(yīng)式)是C6H12O6―→2C2H5OH＋2CO2(＋能量)。返回目錄易錯易混歸納專題十五生物技術(shù)實(shí)踐[易錯提示]明確氧氣影響微生物的增殖；弄清純化方法；發(fā)酵是否需要氧氣；能正確書寫反應(yīng)式。糾錯筆記生物技術(shù)中名詞術(shù)語的易混淆情況舉例返回目錄易錯易混歸納專題十五生物技術(shù)實(shí)踐返回目錄教師備用習(xí)題[備選理由][備選理由]第4題考查血紅蛋白的提取和分離方法，作為考點(diǎn)的補(bǔ)充。4．血紅蛋白是人和其他脊椎動物紅細(xì)胞的主要組成成分。某研究小組的同學(xué)選用了豬的血液作為實(shí)驗(yàn)材料來學(xué)習(xí)血紅蛋白的提取和分離方法。(1)血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：________、______、________和________。(2)實(shí)驗(yàn)前取新鮮的血液時，要切記在采血容器中預(yù)先加入檸檬酸鈉，加入檸檬酸鈉的目的是__________________。(3)收集的血紅蛋白溶液要裝入透析袋透析12h，透析的返回目錄教師備用習(xí)題目的是________________________，原理是________________________。(4)實(shí)驗(yàn)中可以采用凝膠色譜法將樣品進(jìn)一步純化，最后經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行純度鑒定。樣品純化的目的是__________________________________。返回目錄教師備用習(xí)題[答案](1)樣品處理粗分離純化純度鑒定(2)防止血液凝固(3)將樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)、蛋白質(zhì)除去透析袋能使小分子物質(zhì)自由進(jìn)出，而將大分子物質(zhì)保留在袋內(nèi)(4)通過凝膠色譜法將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)和蛋白質(zhì)除去[解析](1)血紅蛋白的提取和分離一般可分為四步：樣品處理、粗分離、純化、純度鑒定。(2)檸檬酸鈉能與鈣離子結(jié)合，防止血液凝固。(3)透析的目的是將樣品中相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)和蛋返回目錄教師備用習(xí)題白質(zhì)除去，其原理是透析袋能使小分子物質(zhì)自由進(jìn)出，而將大分子物質(zhì)保留在袋內(nèi)，從而除去相對分子質(zhì)量較小的雜質(zhì)。(4)與透析不同，通過凝膠色譜法可將相對分子質(zhì)量大的雜質(zhì)和蛋白質(zhì)除去。專題十六現(xiàn)代生物科技專題返回目錄高考真題聚焦核心考點(diǎn)整合易錯易混歸納返回目錄考情縱覽專題十六現(xiàn)代生物科技專題1．[2013?廣東卷]從某海洋動物中獲得一基因，其表達(dá)產(chǎn)物為一種抗菌性和溶血性均較強(qiáng)的多肽P1。目前在P1的基礎(chǔ)上研發(fā)抗菌性強(qiáng)但溶血性弱的多肽藥物，首先要做的是()A．合成編碼目的肽的DNA片段B．構(gòu)建含目的肽DNA片段的表達(dá)載體C．依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽D．篩選出具有優(yōu)良活性的模擬肽作為目的肽返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題[答案]C

[解析]蛋白質(zhì)工程的基本途徑是從預(yù)期蛋白質(zhì)(目的肽多肽藥物)的功能(抗菌性強(qiáng)但溶血性弱)出發(fā)→設(shè)計預(yù)期蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有的氨基酸序列(即C項(xiàng)表述)→合成相應(yīng)的基因(即A項(xiàng)表述)→構(gòu)建相應(yīng)的基因表達(dá)載體(即B項(xiàng)表述)→導(dǎo)入受體細(xì)胞，相應(yīng)基因的表達(dá)與鑒定(即D項(xiàng)表述)。從中可看出，首先要做的是依據(jù)P1氨基酸序列設(shè)計多條模擬肽，故選C。返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題2[2011?廣東卷]華南虎是國家一級保護(hù)動物，可采用試管動物技術(shù)進(jìn)行人工繁殖，該技術(shù)包括的環(huán)節(jié)有()①轉(zhuǎn)基因②核移植③體外受精④體細(xì)胞克?、菖咛ヒ浦睞．①③B．①④C．②⑤D．③⑤返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題[答案]D

[解析]試管動物技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。其核心環(huán)節(jié)就是體外受精、早期胚胎培養(yǎng)及胚胎移植，故選D。返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題3[2013?天津卷]花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定劑量的紫外線處理黑芥原生質(zhì)體可使其染色體片段化，并喪失再生能力。再利用此原生質(zhì)體作為部分遺傳物質(zhì)的供體與完整的花椰菜原生質(zhì)體融合，以獲得抗黑腐病雜種植株。流程如圖7－16－1：返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題據(jù)圖回答下列問題：(1)過程①所需的酶是__________________________。(2)過程②后，在顯微鏡下觀察融合的活細(xì)胞中有供體的________存在，這一特征可作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體培養(yǎng)液中需要加入適宜濃度的甘露醇以保持一定的滲透壓，其作用是______________________。原生質(zhì)體經(jīng)過__________再生，進(jìn)而分裂和脫分化形成愈傷組織。(4)若分析再生植株的染色體變異類型，應(yīng)剪取再生植株和________________植株的根尖，通過________、________、染色和制片等過程制成裝片，然后在顯微鏡下返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題觀察比較染色體的形態(tài)和數(shù)目。(5)采用特異性引物對花椰菜和黑芥基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到兩親本的差異性條帶，可用于雜種植株的鑒定。下圖是用該引物對雙親及再生植株1～4進(jìn)行PCR擴(kuò)增的結(jié)果。據(jù)圖7－16－2判斷，再生植株1～4中一定是雜種植株的有________。返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題(6)對雜種植株進(jìn)行________接種實(shí)驗(yàn)，可篩選出具有高抗性的雜種植株。返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題[答案](1)纖維素酶和果膠酶(2)葉綠體(3)保持原生質(zhì)體完整性細(xì)胞壁(4)雙親(或花椰菜和黑芥)解離漂洗(5)1、2、4(6)黑腐病菌[解析](1)過程①表示原生質(zhì)體的制備，要用纖維素酶和果膠酶去掉植物細(xì)胞的細(xì)胞壁。(2)用于融合的兩個細(xì)胞，一個是黑芥苗的葉肉細(xì)胞，一個是花椰菜的根部細(xì)胞，其中根部細(xì)胞無葉綠體，葉肉細(xì)胞有葉綠體，可通過觀察融合的活細(xì)胞中供體細(xì)胞葉綠體的有無作為初步篩選雜種細(xì)胞的標(biāo)志。(3)原生質(zhì)體沒有細(xì)胞壁的保護(hù)，需要加入適宜濃度的甘露醇以保證滲透壓的穩(wěn)定，以避免原生質(zhì)體因吸水或失水返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題使其完整性遭到破壞；原生質(zhì)體通過細(xì)胞壁再生形成雜種細(xì)胞，進(jìn)而形成愈傷組織。(4)分析再生植株的染色體變異類型，需要將再生植株的細(xì)胞染色體和黑芥苗與花椰菜細(xì)胞中的染色體制片觀察進(jìn)行比較，制片的基本程序是解離、漂洗、染色和制片。(5)根據(jù)圖譜，花椰菜含有堿基對為300和600的DNA片段，黑芥含有堿基對為1000、1300和1500的片段，而再生植株3，只含有長度為300和600的片段，與花椰菜一致，1、2、4既含有花椰菜的DNA片段，又含有黑芥的DNA片段，均為雜種植株。(6)對雜種植株接種黑腐病菌，能正常生長的即為具有高抗性的雜種植株。返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題4.[2013?山東卷]科學(xué)家通過誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞去分化獲得誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPS)，繼而利用iPS細(xì)胞培育出與黑鼠遺傳特性相同的克隆鼠。流程如圖7－16－3所示：返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題(1)從黑鼠體內(nèi)獲得體細(xì)胞后，對其進(jìn)行的初次培養(yǎng)稱為________，培養(yǎng)的細(xì)胞在貼壁生長至鋪滿培養(yǎng)皿底時停止分裂，這種現(xiàn)象稱為________。(2)圖中2-細(xì)胞胚胎可用人工方法從灰鼠輸卵管內(nèi)獲得，該過程稱為__________；也可從灰鼠體內(nèi)取出卵子，通過________后進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)獲得。(3)圖中重組囊胚通過________技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，暫不移入的胚胎可使用________方法保存。(4)小鼠胚胎干細(xì)胞(ES)可由囊胚的__________分離培養(yǎng)獲得。iPS與ES細(xì)胞同樣具有發(fā)育全能性，有望在對人類iPS細(xì)胞進(jìn)行定向__________后用于疾病的細(xì)胞治療。返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題[答案](1)原代培養(yǎng)接觸抑制(2)沖卵(或沖胚)體外受精(或核移植)(3)胚胎移植冷凍(或低溫)(4)內(nèi)細(xì)胞團(tuán)誘導(dǎo)分化[解析](1)將動物組織處理成單個細(xì)胞，在培養(yǎng)液中進(jìn)行的初次培養(yǎng)是原代培養(yǎng)，接觸抑制指貼壁生長的細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時，細(xì)胞就會停止分裂增殖的現(xiàn)象。(2)將早期胚胎從母體輸卵管或子宮中沖洗出來的方法叫沖卵。(3)暫不進(jìn)行胚胎移植的胚胎可放入－196℃的液氮中冷凍保存。返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題(4)胚胎干細(xì)胞(ES或EK)是由早期胚胎或原始性腺分離出來的一類細(xì)胞；iPS與ES細(xì)胞一樣，可通過誘導(dǎo)定向分化修補(bǔ)某些功能異常的細(xì)胞來治療疾病。返回目錄高考真題聚焦專題十六現(xiàn)代生物科技專題返回目錄高考真題聚焦?考點(diǎn)一基因工程與生物技術(shù)安全性1．與基因工程相關(guān)的幾種酶返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題[特別提醒]限制性核酸內(nèi)切酶：能識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并在特定位點(diǎn)上斷開磷酸二酯鍵(特異性識別、切斷DNA)。DNA連接酶：連接被限制酶切開的磷酸二酯鍵。2．基因工程的基本操作程序(1)獲取目的基因：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題①基因文庫：是將含有某種生物不同基因的許多DNA片段導(dǎo)入受體菌的群體中通過克隆而儲存，各個受體菌分別含有這種生物的不同基因。②基因組文庫：含有一種生物所有的基因。③部分基因文庫：含有一種生物的部分基因，如cDNA文庫。④DNA復(fù)制與PCR技術(shù)的比較：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題(2)基因表達(dá)載體的構(gòu)建：①一個基因表達(dá)載體的組成：目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等。②構(gòu)建方法：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題(3)將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題(4)目的基因的檢測與鑒定：①導(dǎo)入檢測：DNA分子雜交技術(shù)，即使用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段作為探針檢測。③個體生物學(xué)水平鑒定：轉(zhuǎn)基因生物是否具有抗性或轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的功能活性。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題3.蛋白質(zhì)工程與基因工程返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題4.DNA粗提取與鑒定返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題5．生物技術(shù)的安全性問題(1)食物安全問題：①出現(xiàn)滯后效應(yīng)；②出現(xiàn)新的過敏原；③營養(yǎng)成分改變；④侵犯宗教信仰者或素食者的權(quán)益。(2)生物安全問題：人工組合的基因通過轉(zhuǎn)基因作物或家養(yǎng)動物擴(kuò)散到其他栽培作物或自然野生物種并成為后者基因的一部分，在環(huán)境生物學(xué)上則稱為“基因污染”。如：①成為新雜草；②成為“入侵的外來物種”，威脅其他生物生存；③通過基因重組產(chǎn)生“超級雜草”。(3)環(huán)境安全問題：①打破自然界物種的原有界限，破壞生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性；返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題②重組微生物降解某些化合物的過程中產(chǎn)生污染環(huán)境的中間產(chǎn)物；③重組DNA與微生物雜交，產(chǎn)生有害病原微生物；④轉(zhuǎn)基因植物的花粉中含有的毒蛋白或過敏蛋白通過蜜蜂進(jìn)入蜂蜜中，再經(jīng)過食物鏈的傳遞，最后進(jìn)入其他動物和人體。(4)基因武器：如果將生物技術(shù)應(yīng)用于武器制造和戰(zhàn)爭，對人類可能將是一場比原子彈爆炸更為可怕和持久的災(zāi)難。(5)基因檢測引起的倫理問題：①對個人隱私提出挑戰(zhàn)；②制造基因歧視。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題例1

在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里，一種被稱為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲。這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補(bǔ)充每天必需的維生素A。由于含有可以生成維生素A的β-胡蘿卜素，它呈現(xiàn)金黃色澤，故稱“金色大米”?！敖鹕竺住钡呐嘤鞒倘鐖D7－16－4所示。請回答下列問題：(已知酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是—G↓GATCC—，酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是—↓GATC—)返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題(1)培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是____________，通過該操作形成了圖中的________(填字母)，它的構(gòu)成至少包括________________________________等。(2)在研究過程中獲取了目的基因后采用________技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。在構(gòu)建c的過程中目的基因用________(填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”)進(jìn)行了切割。檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用________作為標(biāo)記基因。(3)過程d通常采用____________法，過程e運(yùn)用了__________技術(shù)，在該技術(shù)應(yīng)用的過程中，關(guān)鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行________和________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題(4)若希望該轉(zhuǎn)基因水稻生產(chǎn)的“金色大米”中維生素A含量更高、效果更好，則需要通過________工程手段對合成維生素A的相關(guān)目的基因進(jìn)行設(shè)計。該工程是一項(xiàng)難度很大的工程，目前成功的例子不多，主要原因是________________________________________________________________________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題(1)基因表達(dá)載體的構(gòu)建c目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因(2)PCR限制酶Ⅱ基因Ⅰ(3)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化植物組織培養(yǎng)脫分化再分化(4)蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，目前對很多蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)還不了解[解析](1)基因工程操作的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建，該過程需要限制酶和DNA連接酶處理，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因等。(2)獲得目的基因后擴(kuò)增采用PCR技術(shù)，也就是DNA分子體外復(fù)制的過程；由題圖可知，目的基因兩端序列分別為—GGATCC—和—GATC—，所以應(yīng)該用能同時切割兩種序列的返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題限制酶Ⅱ切割目的基因，目的基因插入位點(diǎn)在基因Ⅱ處，因此檢驗(yàn)基因表達(dá)載體是否導(dǎo)入只能檢測標(biāo)記基因Ⅰ。(3)目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法、花粉管通道法，最常用的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。過程e是將水稻細(xì)胞培育成符合要求的植株過程，運(yùn)用了植物組織培養(yǎng)技術(shù)，包括脫分化和再分化過程。(4)對基因進(jìn)行改造，從而改造蛋白質(zhì)，獲得相應(yīng)性狀的個體或產(chǎn)品，屬于蛋白質(zhì)工程；蛋白質(zhì)工程存在的最大難題在于蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)十分復(fù)雜，目前對很多蛋白質(zhì)的高級結(jié)構(gòu)還不了解。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題[點(diǎn)評]構(gòu)建基因文庫是獲取目的基因的方法之一，但并不是唯一的方式。如果所需要的目的基因序列已知，就可以通過PCR方式從含有該基因的生物的DNA中直接獲得，也可以通過反轉(zhuǎn)錄(本題就是用這種方法)獲取。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題變式1

如圖7－16－5甲表示含有目的基因D的DNA片段長度(bp即堿基對)和部分堿基序列，圖乙表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列。現(xiàn)有MspⅠ、BamHⅠ、MboⅠ、SmaⅠ4種限制性核酸內(nèi)切酶切割的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為C↓CGG、G↓GATCC、↓GATC、CCC↓GGG。請回答下列問題：返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題(1)圖甲的一條脫氧核苷酸鏈中，相鄰兩個脫氧核苷酸之間由________鍵連接。(2)若用限制酶SmaⅠ完全切割圖甲中DNA片段，產(chǎn)生的末端是______末端，其產(chǎn)物長度分別為________________________________________________________________________。(3)若圖甲中虛線方框內(nèi)的堿基對被T-A堿基對替換，那么基因D就突變?yōu)榛騞。從雜合子體細(xì)胞內(nèi)分離出圖甲所示的DNA片段及其同源片段，用限制酶SmaⅠ完全切割，產(chǎn)物中共有________種不同DNA片段。(4)若將圖乙中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后形成重組質(zhì)粒，那么應(yīng)選用的限制酶是________。在導(dǎo)入重返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題組質(zhì)粒后，為了篩選出含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，一般需要用添加________的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。經(jīng)檢測，部分含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌菌株中目的基因D不能正確表達(dá)，其最可能的原因是_________________________________________。返回目錄核心考點(diǎn)整合專題十六現(xiàn)代生物科技專題(1)磷酸二酯(2)平537bp、790bp、661bp

(3)4(4)BamHⅠ抗生素B同種限制酶切割形成的末端相同，部分目的基因D與質(zhì)粒反向連接[解析](1)脫氧核苷酸鏈中相鄰兩個脫氧核苷酸之間的化學(xué)鍵為磷酸二酯鍵。(2)SmaⅠ的識別序列為GGG↓CCC，切割后不會產(chǎn)生黏性末端，所以應(yīng)是平末端。在題圖甲的DNA序列中有兩個SmaⅠ的識別序列，可形成537bp、790bp、661bp三個片段。(3)雜合子(Dd)中既含有D基因，又含有d基因，D含