檢驗科生物安全手冊11-消毒和滅菌處理程序

消毒、滅菌和廢棄物的處理過程消毒、滅菌和廢棄物的處理過程1111－PAGE8定義關于消毒和滅菌有許多不同的術語，下面是生物安全中較常用的：抗菌劑（antimicrobial）能夠殺死微生物或抑制它們生長和繁殖的制劑。防腐劑（antiseptic） 能夠抑制微生物生長和繁殖但不足將其殺滅的物質。防腐常應用于體表。生物殺滅劑（biocide） 所有能夠殺死生物體的制劑的統(tǒng)稱?；瘜W殺菌劑（chemicalgermcide）用于殺死微生物的化學品或化學混合物。清除污染去除和／或殺死微生物的任何過程。該詞也用于去除或中和有（decontamination）危害的化學品和放射性物質。消毒劑（disinfectant）用于殺死微生物的化學品或化學混合物，但不一定殺死其孢子。消毒劑常用于非生命物體或其表面。消毒（disinfection） 殺死微生物的物理或化學手段，但不一定殺死其孢子。滅菌劑（microbicide） 能夠殺死微生物的化學品或化學混合物。該詞常?？梢源吧餁鐒?、“化學殺菌劑”或“抗菌劑”。殺孢子劑（sporocide） 用于殺死微生物和孢子的化學品或化學混合物滅菌（sterilization） 殺死和／或去除所有微生物及其孢子的過程。實驗室材料的清潔清潔是指去除污垢、有機物和污漬。清潔方法包括刷、吸、干擦、洗滌或用浸泡肥皂水或清潔劑的濕布拖擦。塵土、污物以及有機物是微生物的棲身之所，并可能影響除污染劑（抗菌劑、化學殺菌劑以及消毒劑）的作用。必須通過預清潔才能實現(xiàn)洗滌和滅菌的目的。許多殺菌劑只對經過預清潔的物品才具有殺菌活性。預清潔時必須小心，以避免暴露于感染性物質中。的化學殺菌劑進行預清潔和消毒。消除局部環(huán)境的污染可以聯(lián)合使用液體和氣體消毒劑來清除實驗室空間、用具和設備的污染。清除表面污0.1％而當處理高危環(huán)境時，建議使用高難度（5g/L）的溶液。在清除環(huán)境污染時，含有3％過氧化氫的溶液也可以作為漂白劑的代用品。（如門窗等21℃且70％的條件下進行。8能允許人員進入。在通風之前需要進入房間時，必須帶適當?shù)姆蓝久婢??？梢圆捎脷鈶B(tài)的碳酸氫銨來中和甲醛。采用過氧化氫溶液對小空間進行氣霧熏蒸同樣有效，但需要專門的蒸汽發(fā)生設備。清除生物安全柜的污染III設備。應當將適量的多聚甲醛（空氣中的終濃度達到0.8％）放在電熱板上的長柄平鍋中（在生物安全柜外進行控制。然后將含有比多聚甲醛多10％的碳酸氫銨臵于另一個長柄（在生物安全柜外進行控制70％，在使用強力膠帶（如管道膠帶）臵一個開口的盛有熱水的容器。如果前部沒有封密板，則可以用大塊塑料布粘帖覆蓋在前部開口和排氣口以保證氣體不會泄漏進入房間。同時供電線穿過前封密板的穿透孔時須用管道膠帶密封。將放有多聚甲醛平鍋的加熱板插上插頭接通電源。在多聚甲醛完全蒸發(fā)時拔掉插頭以6230分鐘。使用前應擦掉生物安全柜表面上的殘渣。洗手/清除手部污染處理生物危害性材料時，只要可能均應戴合適的手套。同時，實驗室人員仍然需要經常地、徹底地洗手。處理完生物危害性材料和動物后以及離開實驗室前必須洗手。10。應使用肘控的水龍頭洗手。如沒有安裝，應使用紙巾或毛巾來關上水龍頭，以防止再度污染干凈的手。如果沒有以上推薦的洗手方法或洗手不方便，應該用酒精擦手來清除雙手的輕度污染。消毒和滅菌方法物理和化學的去污染方法包含三個方面：加熱、液體去污劑、水蒸氣和空氣。加熱加熱的應用,濕熱和干熱被推薦為殺菌最有效的方法.在一般環(huán)境下，高壓滅菌器1600C-1700C，2-4非有機體的物質（如玻璃）是可行的凈化方法,但是甚至在有機體或非有機體的淺層也實驗人員應對熱的固體和液體有害物的處理相當熟悉，并要注意如果濫用設備那在高壓下水蒸氣將會噴射出來，因此只能在允許范圍內使用。在高壓蒸汽下被處理過的液體是非常熱的，如果要從滅菌器中取出必須等處理后過段時間再取出；如果立即取出，會引起容器內的液體產生暴沸，并飛濺到處理容器的人員身上。液體去污劑在通常情況下,足夠濃度的液體去污劑常用于表面去污染，而液體廢物的去污劑最終的處理是進入污水管道系統(tǒng)。液體去污劑的去污效果不佳，常常是因為有些因素（如應用場所的溫度、接觸時間、pH、當時情況、播散狀況、穿透能力、有機物的反應）因此甚至在很有利的情況下，當最終要求必須無菌時，液體去污劑也不是完全可信賴的去污方法。有許多可用的液體去污劑在商商品名上有很大的變化。在通常情況下,這些去污劑但是去污劑的作用越大，它的危害性可能也越大（如腐蝕性）。對于所有傳染性的情況沒有一種（去污劑）是具有同等作用和效力的。使用普通原料的消毒劑處理中必須特別小心。從原料到制成可用的溶液對工作人員的安排必須考慮到有潛在的危險，要進行安全培訓以及合適的個人防護設備保證毒性不接觸眼睛，皮膚和呼吸部位。蒸氣和氣體蒸汽和氣體的種類決定了去污劑的性質，其中最常用的是甲醛和乙烯氧化物。當在一個密閉的系統(tǒng)中，在一定的溫度、濕度控制下，它們能發(fā)揮很好的去污作用。蒸汽和氣體去污劑最初被用于生物安全柜和與之相關的空氣處理系統(tǒng)和空氣過濾系統(tǒng)、和光學（設備）和門、建筑物和與之相關的空氣處理系統(tǒng)等。為了避免甲醛和乙烯氧化物蒸汽的吸入，（貯存）這些化學品的容器的材料應盡可能地限制這些蒸汽（的溢出）和應放臵在適當通風的化學品貯存區(qū)。當準備進行稀釋和（這些化學品）時應穿戴呼吸防護裝臵。乙烯氧化物已歸入（對人體具有）潛在危害的誘變劑；甲醛也（對人體）具有毒性和超敏性反應。乙烯氧化物的用途非常有限，通常用于外科和臨床領域。高壓滅菌器程序濕熱引起蛋白質的變性比干熱所需要的溫度低且時間短。最主要的物理去污控制作用之一是在一個密閉的小室（空間）里高壓滅菌器產生濕熱和高壓。大多數(shù)情況，下列組合可以確保高壓滅菌器的滅菌效果。a.134℃、3分鐘b.126℃、10分鐘c.121℃、15分鐘d.115℃、25分鐘應使用生物指示劑驗證高壓滅菌操作是否達到效果。當操作高壓滅菌器時必須穿戴個人防護設備（簡稱PPE）如橡膠圍裙和抗熱防水的手套。高壓滅菌器里物品的放臵應保證蒸汽能穿透至需消毒的所有部分，所以物品間不能靠得太緊或互相阻塞，否則不能保證滅菌效果，而且當從滅菌器中移出物品時由于受壓嚴重可能引起（人身）傷害的危險。含有如酚類和氯仿等化學品的消毒物品不允許放入高壓滅菌器內滅菌。化學去污劑的特征（特性）具有去污特性的最主要的化學品有粉劑、晶體或濃縮液體。這些化學品可以加水作態(tài)的化學去污劑可以作為空氣去污劑，另一些在溫度升高時變成氣體的（化學品）能作為水表面或空氣去污劑?；瘜W去污劑在滅活微生物時可能會產生一種或多種副作用，如：蛋白凝固和變性、溶血、酶的粘合或酶實質被酶底物氧化、或毀壞而滅活?；瘜W去污劑的作用可能會因下列因素而改變：主要成分的濃度、接觸時間、pH、溫度、濕度和外界有機物的存在。這些因素對化學去污劑如何成功去污的處理依賴于化學去污劑對靶微生物的最小滅活和分析系統(tǒng)敏感度限定范圍的殺菌顯示效果。去污劑使用無效的主要原因是對微生物的最初接觸后作用無效。液體去污劑對某一成分去污時，如果這一成分表面有一些微小的氣泡，因氣泡下的區(qū)域是干燥的，其中的微生物就不能被殺滅。如果在這一成分上有油脂斑點，鐵銹或污垢樣，那么去污劑將不能接觸到這些保護層下的微生物。將這一成分浸入去污劑進行凈化是有效果的。去污劑應對物體整體表面主要成分去污。一些常用去污劑的性質乙醇乙醇的水溶液最有效的使用濃度約為50%和＞90%則無效。乙醇在殺菌作用的同時對蛋白質有緩慢輕微的變性作用。然而，乙醇對含脂類病毒是有去污劑的接觸時間為十分鐘是必須的。因為這個原因，血液耐受病原體標準（文件）不認為乙醇對表面具有有效的去污作用。一般來說異丙醇對植物細菌更有效；乙醇對病毒性成分的殺傷更有效。甲醛甲醛作為市售去污劑通常是濃度為375%時是有效的液體去污劑。甲醛在冷藏溫度下的大量失活，其刺激性的氣味和味道，使甲醛溶液在實驗室使用難于進行。從甲醛溶液中產生的苯酚效。四銨化合物或四銨（物）試驗和應用了四十多年后，至今對于四銨物作為去污劑的功效還有很多的爭論。這些陽離子去污劑是很強的表面作用劑和對含脂病毒較有效。四銨物將黏附蛋白質以使溶液稀釋并在蛋白質存在時迅速釋放效力。四銨物趨向成叢微生物時能被諸如肥皂類的陰離子去污劑抑制。它們的優(yōu)點是無毒，無嗅，穩(wěn)定，無色，對金屬無腐蝕，和價格不貴。氯鹵素對許多微生物有廣泛的去污作用，包括細菌孢子。氯和蛋白質結合能快速降低溶液中現(xiàn)存的蛋白質濃度。自由的有效氯是作用的因素。它是一個強氧化劑且對金屬有腐蝕性。氯溶液必須被經常更新（現(xiàn)配現(xiàn)用）。氯去污劑中次氯酸鈉是常用的基本物質。碘酒碘酒和氯的性質是相同的。用于實驗室的最常用的去污劑組合之一是碘結合物，與WescodyneWescodyne稀釋范圍是1.5克/升水－4.5克/升水（即有效碘為25～75ppm）。在這個范圍內的少量自由有效碘能被存在著的無關75ppm有效碘的（化合物）對表面和水的清潔處理是有效的，但是假Wescodyne,危急的。碘結合物的濃度越高則實際作用越低，正如結合了分子后碘就被束縛了一樣。用于洗手和殺孢子劑時，被推薦稀釋成Wescodyne1～10于50%乙醇中（一種相當好的自身去污劑）。有效碘為1,600ppm，在這個濃度下所有微生物中與之相關的部分會快速滅活?？蛇x擇的化學消毒劑沒有一個單一的化學消毒劑或方法對所有的情況都是有效和實用的。在選擇化學消毒劑和消毒程序之前必須考慮消毒的目的和（消毒劑）間的互相影響因素及最終要達到的目的。消毒程序的選擇將從以下問題的答案中得到信息：?靶有機體是什么？? 用什么消毒劑，什么形式能滅活靶有機體？? 要求滅活到什么程度？? 將靶有機體懸浮在什么溶劑中？（如：單一或混合液，固體多孔滲水的表面，和/空氣介質）？? 什么是有機體預期的最高濃度？? 作為液體，蒸汽，或氣體的消毒劑接觸有機體時發(fā)生作用的持續(xù)時間？? 要考慮物質的兼容性受什么限制？? 間來進行可用工作濃度即刻制備的消毒劑的穩(wěn)定性？實驗室的去污劑的最初目標是在研究狀態(tài)下的有機體。實驗準備或培養(yǎng)通常有超過在自同樣,接觸時間的主要部分要求達到滅活的水平也許要消耗大量抵抗部分中的小部分相對滅活的部分?，F(xiàn)在的技術狀態(tài)幾乎不能提供信息來預測對更多抵抗細胞可能的毒性。然而，這些一般是針對所有潛在的致病因素和必須通常在選擇消毒劑和消毒過程時被考慮的問題。（對去污劑）抵抗力最強。選擇消毒劑基于它對生物體在低抵抗范圍內的效力。因此，如果為了實驗室常規(guī)去污而選擇對孢子形式有效的消毒劑，它能假定在實驗室操作中產生其他的生物體，甚至在高濃度時也能被滅活。對幾種化學消毒劑的相關特性和潛在應用大多數(shù)是被用于生物實驗室的概述是在以下幾頁的表格中。實際使用濃度和接觸時間也許與產品制造商說明書上推薦的有相當大的不同。它被假定微生物將被有機溶劑提供一個高度的潛在保護。它不被假定一個消過毒的情況將來源于說明書上顯示的使用濃度和接觸時間。必須強調的是這些數(shù)據(jù)僅僅是在人工實驗的情況下的效力顯示。最終將有個體調查者的實驗來確定一同樣顯然是為了作為一種維持消毒劑“藥庫”選擇的折衷需要。消毒、滅菌和廢棄物的處理過程滅活重要特性滅活重要特性a–可利用的鹵素 四銨化合物.Cpds0.1-2.0%＋四銨化合物.Cpds0.1-2.0%＋＋＋＋＋＋＋＋酚Cpds1.0-5.0%＋＋b＋＋＋＋＋＋氯Cpds500ppma＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋碘伏25-1600ppma＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋乙醇70-85%＋＋b＋＋＋＋異丙醇70-85%＋＋b＋＋＋＋甲醛0.2-8.0%＋＋＋＋＋＋＋＋＋戊二醛2%＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋b–依賴病毒變異的結果c–從光和空氣中的防護d–通常相配，但考慮在聯(lián)結物質上從殘余物和效應的干擾如載片的膠粘劑。e–在制造商的文獻中認為被皮膚或口腔或兩者都請注意在消毒劑的功效試驗中接觸時間為10分鐘是一般常用的。11－9消毒、滅菌和廢棄物的處理過程消毒、滅菌和廢棄物的處理過程廢棄物處理廢棄物是指將要丟棄的所有物品。實驗用一次性個人防護用品和實驗器材、棄臵的菌（毒）考慮的主要問題有：1．是否已采取規(guī)定程序對這些物品進行了有效的清除污染或焚燒？設施的地方進行處理？觸到丟棄物的人員造成任何潛在的生物學或其他方面的危害？清除污染器中（如根據(jù)內容物是否需要進行高壓滅菌和/或焚燒而采用不同顏色標記的可高壓滅菌的塑料袋。也可采用其他可以除去和/或殺滅微生物的替代方法。污染性材料和廢棄物的處理和丟棄程序相關規(guī)定。廢棄物可以分成以下幾類：1．可重復或再使用，或按普通“家庭”廢棄物丟棄的非污染（非感染性）廢棄物。消毒、滅菌和廢棄物的處理過程消毒、滅菌和廢棄物的處理過程污染（感染性）銳皮下注射用針頭、手術刀、刀子及破碎玻璃；這些廢棄物應收集在帶蓋的不易刺破的容器內，并按感染性物質處理。通過高壓滅菌和清洗來清除污染后重復或再使用的污染材料。高壓滅菌后丟棄的污染材料。直